顶空程序升温法测定硫酸头孢匹罗的残留溶剂

顶空程序升温法测定硫酸头孢匹罗的残留溶剂
董嘉君;林锦生
【摘要】目的建立测定硫酸头孢匹罗中的残留溶剂含量的方法.方法采用毛细管柱顶空进样系统程序升温气相色谱法,DB-WAX毛细管柱;柱温40℃保持8 min,再以20℃·min-1升至180℃;以N2为戢气,分流比1:10;以二甲基亚砜为溶剂;顶空平衡温度为80℃,平衡时间为30～60 min;进样口温度200℃;FID检测器,检测器温度250℃.结果丙酮、乙酸乙酯、乙醇进样质量浓度分别在100～750 mg·L-1、二氯甲烷进样质量浓度在12～90 g·L-1范围内,与相应溶剂峰的峰面积呈良好的线性关系(r分别为0.999 9,0.999 8,0.998 2和0.999 6),加样回收实验丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷和乙醇的平均回收率和RSD值分别为103.1%和3.60%;108.8%和
4.41%;109.1%和7.57%;9
5.3%和3.17%.结论所建立的方法专属性好,简便准确,可用于检测硫酸头孢匹罗中的残留溶剂.
【期刊名称】《西北药学杂志》
【年(卷),期】2010(025)001
【总页数】2页(P10-11)
【关键词】气相色谱法;硫酸头孢匹罗;残留溶剂;程序升温
【作者】董嘉君;林锦生
【作者单位】浙江东盈药业有限公司,浙江上虞,312369;浙江东盈药业有限公司,浙江上虞,312369
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
硫酸头孢匹罗(cefpirome sulfate)是超广谱第4代头孢菌素，对绝大部分革兰阴
性和革兰阳性细菌具有活性。

对β-内酰胺酶稳定性好，有良好的临床价值。

由于
各厂生产的硫酸头孢匹罗采用工艺和使用的溶剂不同，因而残留溶剂的种类也不同，需分别研究出适合的方法进行准确测定。

本研究基于我厂生产的硫酸头孢匹罗试样，在研制过程中使用到国际协调组织(ICH)规定的二类溶剂二氯甲烷以及三类溶剂丙酮、乙醇和乙酸乙酯，应在质量标准中加以监控[1]。

已有文献报道类似品种硫酸
头孢匹罗中残留溶剂的测定方法[2]，但由于被测残留溶剂种类不同而不可直接引用。

我们根据中国药典附录对残留溶剂测定法的要求[3]，建立了我厂硫酸头孢匹
罗残留溶剂的检测方法，并对生产过程的残留溶剂进行监控。

1.1 仪器岛津GC-2014A气相色谱仪；北京中兴汇利顶空进样器(型号DK-3001)；色谱柱为DB-WAX毛细管柱，柱长30 m，内径0.53 mm，膜厚1 μm。

1.2 试药硫酸头孢匹罗原料由我厂试产，批号071201，071202，071203；丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、无水乙醇、二甲基亚砜均为分析纯。

2.1 色谱条件与测定法采用毛细管柱顶空进样系统程序升温气相色谱法，DB-WAX毛细管柱；柱温40 ℃保持8 min，再以20 ℃·min-1升至180 ℃，维持2 min；以N2为载气，柱前压38.1 kPa，分流比1∶10；以二甲基亚砜为溶剂；顶空平衡温度为80 ℃，平衡时间为30～60 min；进样口温度200 ℃；FID检测器，检测器温度250 ℃，进样量1 mL。

混合对照溶液：精密称取无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮和二氯甲烷适量，用二甲基亚砜为溶剂制成含无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮各约500 mg·L-1、二氯甲烷60 mg·L-1的混合对照溶液。

精密量取该溶液5 mL置于20 mL顶空瓶中，密封瓶口。

供试品溶液：精密称取硫酸头孢匹罗样品约0.5 g置于20 mL顶空瓶中，精密加
入5 mL二甲基亚砜密封瓶口，溶解并摇匀。

将上述顶空瓶置顶空进样装置，加热，进样，按外标法以峰面积计算样品中相应残留溶剂的含量。

2.2 系统适用性实验混合对照品溶液的色谱图见图1。

如图所示，丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷和乙醇峰的保留时间分别为2.767,
3.828,
4.782和
5.321 min，柱效分别为6 851,5 107,5 440和4 887,分离度分别为1.920,1.457和1.785。

样品溶液的色谱图见图2，峰1、峰2为样品的挥发性热降解产物峰，峰3丙酮峰2.767 min 和峰4乙醇峰5.315 min，乙酸乙酯和二氯甲烷未检出。

2.3 检测限和定量限丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷和乙醇的检测限(信噪比3∶1)分别为0.2,0.1,0.2和1.0 mg·L-1,定量限(信噪比10∶1)分别为 0.5,0.35,0.5和2.5 mg·L-1 。

2.4 精密度实验取对照品溶液重复进样5次，测得丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷和
乙醇峰面积的RSD分别为1.15%,0.81%,2.28%和0.78%。

2.5 线性关系与范围分别精密称取丙酮、乙酸乙酯、无水乙醇和二氯甲烷对照品
适量, 用二甲基亚砜定量配制并稀释成分别含丙酮、乙酸乙酯、无水乙醇100，250，500，600和750 mg·L-1，二氯甲烷12，30，60，72和90 mg·L-1的一系列溶液，质量浓度范围均为限度范围的20%～150%。

按确定的实验方法各准确进样1 mL测定，结果各溶剂进样质量浓度对其峰面积拟合的线性回归方程分别为：丙酮Y1=1 032 659X1-1 589.87(r1=0.999 9);
乙酸乙酯 Y2=719 725X2-5 184(r2=0.999 8);
二氯甲烷Y3=173 838X3-42.918(r3=0.999 6);
乙醇Y4=158 583.3X4-409.961(r4=0.998 2)。

2.6 回收率实验分别制备一系列对照溶液，分别为4种残留溶剂的限度的
50%,100%和120%，即质量浓度分别为：对照(1)丙酮、乙酸乙酯、无水乙醇各250 mg·L-1，二氯甲烷30 mg·L-1；对照(2)丙酮、乙酸乙酯、无水乙醇各500
mg·L-1，二氯甲烷60 mg·L-1；对照(3)丙酮、乙酸乙酯、无水乙醇各600 mg·L-1，二氯甲烷70 mg·L-1。

分别精密量取5 mL对照(1)、(2)和(3)置于已精密称量0.5 g供试品的顶空瓶中，每个浓度做3个试样。

按本文确定的实验方法测定丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷和乙醇的加样回收率。

测定结果见表1。

2.7 样品测定按 2.1 项下方法分别测定硫酸头孢匹罗小试样品3批，测得其丙酮
含量分别为0.11%，0.12%和0.09%；乙醇含量分别为0.041%，0.044%和
0.037%；乙酸乙酯和二氯甲烷未检出。

均符合ICH建议的限度(丙酮、乙酸乙酯
和乙醇0.5%，二氯甲烷0.06%)。

①因残留溶剂二氯甲烷要求的限度较低，为0.06%，为保证测定的灵敏度、准确度，样品取用量选择为0.5 g。

硫酸头孢匹罗的溶解实验，当0.5 g样品用5 mL
的水或N,N-二甲基甲酰胺做溶剂时，样品溶液呈浑浊状，不能保证残留溶剂的有效溶出；用二甲基亚砜做溶剂时样品易溶且澄清，故选用二甲基亚砜作为溶剂。

②二甲基亚砜为较高沸点的溶剂，所以采用程序升温法在柱温40 ℃样品中的残留溶剂峰出来后升温到180 ℃赶出溶剂峰。

③随着顶空瓶在顶空装置里放置的时间越长，样品图谱中1.365及2.155 min出
现的色谱峰的峰面积越大，判断这2个峰均为样品的挥发性热降解产物峰，这2
个峰与目标峰有良好的分离度，不对残留溶剂的检出造成干扰。

④以上实验表明，本气相色谱法专属性强，能在程序升温条件下同时测定4种残
留溶剂的含量，方法快捷准确，可用于硫酸头孢匹罗残留溶剂的监控。

【相关文献】
[1] 周海钧.药品注册的国际技术要求[M].北京:人民卫生出版社,2000:9.
[2] 赖文豪.毛细管气相色谱法测定头孢匹罗中有机溶剂残留量[J].海峡药学,2005,17(5):55-58.
[3] 中国药典2005年版[S].二部.2005：附录54-57．。