疑难配血处理
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免疫性溶血
1、同种异体免疫溶血:同种异体抗体 ⑴、妊娠(新生儿溶血) ⑵、输血(溶血性输血反应) 2、自身免疫性溶血:自身抗体(温自身抗体) 3、其他原因引起的溶血:药物
新生儿溶血症
(一)致病机制:
胎儿血 →母体血循环→母体产生同种异体抗体(IgG) →通过胎盘进入胎儿血内→与胎儿红细胞结合→网 状内皮系统清除与之结合的胎儿或新生儿红细胞→ 新生儿表现为出现贫血、水肿、黄疸等临床症状。
被检者血清中存在ABO系统以外的同种抗 体,反定型时出现假阳性反应;
非抗-A及抗-B的抗体与相应抗原形成复 合体吸附在红细胞表面,引起正定型非特 异性凝集,如抗-B的染料吖啶黄。
2. Rh(D)血型鉴定:
Rh(D)抗原检测原则: ① 对受血者常规一般只测Rh(D)抗原,而对献血 员不仅要检查Rh(D)抗原,并在其为阴性的前提 下必须进一步确定是否为弱Rh(D)(即D U)。
⑵ 抗体筛选用试剂红细胞: ① 试剂红细胞必须含有下列抗原: D,C,E,c,e,M,N,S,s,P1,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka, 和Jkb ② 目前已商品化的试剂红细胞有两种,分别为双人 份细胞和三人份细胞组。 ③ 试剂红细胞是保存在保存液中,一旦用生理盐水 或Liss液洗涤后则应该在24小时内使用,否则会 因污染、抗原丢失导致试验错误。
二、交叉配血:交叉配血有两个重要作用: 确认供血者及受血者的ABO血型的相合性。 可检测出受血者血清中不规则抗体,此抗 体可能在抗体筛选试验中由于筛选试剂红 细胞缺乏相应抗原而漏检。
1、主侧交叉及次侧交叉试验: 主侧交叉:由病人血清及供血者红细胞组成
次侧交叉:由病人红细胞及供血者血清组成 (由于我市尚未对供血者进行抗体筛选,因 此次侧交叉是非常必要的)。
(二)不规则抗体的检测和鉴定:
1. 血型不规则抗体检测:必须对有输血史、 妊娠史或短期内需要接受多次输血者及交 叉配血不合者进行抗体筛选试验。
⑴ 抗体筛选的重要性:有利于早期发现和确 认具有临床意义的抗体,并可以在配血前 鉴定此意外抗体,获得充足的时间来选择 缺少相应抗原的相配合的血,避免由于寻 找不到相合的血液而造成患者病情的延误。
② Rh(D)阴性及弱D的受血者只能提供Rh(D)阴性 血,不得使用D阳性及弱D的血。即弱D针对受血 者而言为D阴性,而对于供血者而言则为D阳性。
③ 对直接抗人球蛋白试验阳性的Rh(D)阴性红细 胞进行Rh(D)定型时,易引起假阳性反应,因此 必须按照试剂生产商的试剂使用说明书要求,增 加对照试验。
子女不可能有的血型 A,B,AB B,AB A,AB O B,AB A,AB AB,O -----O O
主侧:+ 病人血清中的同种 自身:- 抗体与供血者红细 抗体筛选:+
胞上相应抗原反应
对病人血清进行 抗体鉴定,选择 无对应抗原的血
主侧:+ 病人血清中可能同 自身:+ 时存在自身抗体和 抗体筛选: +
同种抗体 病人血清不正常: 白蛋白/球蛋白比值 不正常 血浆扩容物 污染
对病人血清自身 吸收及抗体鉴定, 用吸收后血清配 血 盐水添加试验解 决缗钱 抽去新标本 使用新器具
输血相关知识
赵娟
血液标本的采集及准备
1. 输血申请单:必须含有病人姓名、身份号、 住院号、床号及负责医师的签名。还应包 含申请日期、用血原因及时间、用血种类 及数量;病人出生年月、性别、种族、疾 病诊断、输血史、妊娠史、输血反应史、 有无不规则抗体及血型等。
2. 受血者血样:
① 认真核对后,方可采集;
正定型 反定型 自身对照
抗-A 抗-B 抗-AB A B A2 O 抗-A1 抗-H
正定型试验中的抗-AB是用来确认弱A和弱B 抗原,抗-A1用于鉴定A1亚型,抗-H用于 鉴定亚型及孟买型。
反定型试验中的A2细胞是用于鉴定A2亚型。 O细胞用于鉴定是否存在ABO系统以外的同 种抗体影响定型;自身对照用于是否存在自 身抗体影响定型;如果与O细胞或自身对照为 阳性,则定型结果不可靠,必须进一步进行 血型鉴定。
1、ABO新生儿溶血病:选择ABO血型与婴儿及母 亲相配合的且Rh血型与婴儿相同的红细胞及AB型 血浆组成的血液使用。
2、Rh(D)新生儿溶血病:选择Rh(D)阴性ABO血型 与婴儿和母亲相配合,或O型Rh(D)阴性的洗涤红 细胞及AB型血浆,用母血清进行交叉配血。
3、其他任何新生儿溶血:选择不含特异性抗体所对 应抗原的ABO系统与婴儿相同的血输注。
某些疾病导致球蛋白水平增高引起缗钱状凝集; 纤维蛋白原水平的增高也会引起缗钱状凝集,导致 假阳性凝集; 血浆增溶剂(葡聚糖、PVP)也会引起缗钱状凝集。
Ⅳ、其他原因引起的正反定型不符: 多凝集:当病人感染细菌或病毒后,病毒或细菌 产生的酶使红细胞上掩蔽的T抗原暴露激活,由于 正常人血清中都含有抗-T抗体,因此可与正常人 血清产生凝集反应,正定型试验假阳性; 冷自身抗体引起的自家凝集反应,正反定型均可 出现假阳性; 存在ABO系统的意外抗体,如A2或A2B个体血清 中可能存在天然抗-A1,导致反定型试验多出抗 体;
3. 献血员血样:
① 从血袋上附着的血样小辫获得献血员血液标本; ② 在标本收集管上粘贴血袋上有关血液制品号的 条形码标签; ③ 准确核对血袋上及标本管上的号码。
血清学试验
一、受血者试验 (一)血型鉴定 1.ABO血型鉴定: ⑴ 常规鉴定: ① 正定型:用抗-A抗-B试剂检测受血者红细胞。 ② 反定型:用A和B型试剂红细胞检测血清中的抗体。
2、Rh系统: ①Rh(D)阳性患者可以选择阳性血及阴性血 ②Rh(D)阴性及弱D患者只能选择Rh(D)阴性 血。 3、其他系统:对于已经明确抗体特异性的病 人,则应选择缺乏相应抗原的血液。
(二)、储存时间:一般来说,首先使用较 陈旧的血,但以下情况属于例外,需用新 鲜血 1、病人将接受大量的血液(超过自身总血 量)。 2、新生儿换血及婴幼儿输血(病人本身血容 量小,而用血量又大)。 3、接受定期输血的病人(如地中海贫血病人、 肾透析病人、再障病人),使输血间隔时 间延长 。
Ⅱ、弱反应或缺失抗原: A亚型、B亚型或AB亚型; 白血病导致A或B抗原减弱,何杰金病有时会抑制抗 原表达,与白血病类似; 某种疾病(如腹腔癌、胰腺癌)导致血浆中存在大 量的型物质,中和抗-A或抗-B抗体,引起正定型 为假阴性或弱阳性;洗涤红细胞可解决此问题;
Ⅲ、蛋白或血浆不正常引起的正反定型不符:
② 血液标本必须收集到有正确标记的带塞子的试管里,且标明病人 姓名、住院号、采集日期及采集者; ③ 血液标本应是不抗凝血,以避免纤维蛋白、抗凝剂成分对血清学 试验的干扰; ④ 溶血或混入静脉输注液体而致标本稀释的血液标本不得使用; ⑤ 须用输血前3天以内采集的血液标本; ⑥ 输血后,病人的血液标本须在1~4℃至少保存7天,以备重复试 验。
⑶ 如果无法找到正反定型不一致的原因,则 只能给病人输注O型红细胞,病人血型可请血 液中心血型参比试验室协助鉴定。
⑷ ABO定型不一致的原因:
Ⅰ、反定型试验出现弱反应或缺失抗体: 新生儿; 老人; 低球蛋白症的白血病人或淋巴瘤病人(恶性); 使用免疫抑制剂而致低球蛋白的病人; 先天丙球缺乏的病人; 免疫缺陷者; 骨髓移植病人; 双胞胎嵌合体。
3、特殊配血技术: ⑴预温配血技术:主要用于解决室温反应活 性的无临床意义的抗体引起的交叉配血不 配合。 ⑵冷型自家溶贫病人的配血试验,用于解决 自身冷凝集引起的配血困难。 ⑶温型自家溶贫病人的配血试验,用于解决 自身温抗体引起的配血困难。 ⑷纤原未完全析出的血样,如肾透析、凝血 功能差的病人,在配血时引起假阳性。
4、结果的解释:
⑴主侧交叉配血不相合的原因: 病人或供血者ABO定型不正确,或二者的ABO血型不配合 病人血清中存在同种抗体,与供血者红细胞上的相应抗原反应。 病人血清中存在自身抗体,与供血者红细胞上的相应抗原反应。 供血者红细胞上已经包被了抗体,导致抗球蛋白试验阳性。 病人血清不正常,如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状假凝 集,血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性(用盐水添 加试验来解决)。 试验系统被污染。
⑵次测交叉配血不相合的原因: 供血者血浆中存在针对病人红细胞抗原的抗 体。 病人与供血者的ABO血型不相合。 病人的红细胞已经包被了抗体,直接抗人球 蛋白试验阳性。
交叉配血与抗体筛查不一致处理
现象
交叉配血:抗体筛查:+
可能原因
解决方案
交叉配血低灵敏度 抗体鉴定(血站) 检测不到潜在的不 (怀孕期间做滴度) 配合 紧急情况必须告之临 床:“有未鉴定抗体, 有保留配合”
新生儿溶血病换血用的ABO系统血型相合红细胞选择 婴儿血型 母血型 供血者血型 O A B AB O,A,B O,B A,AB O,A B,AB O A B AB O O A,O O B,O O A,O B,O AB,A,B,O
父母血型 子女可能有的血型 O×O A×A B×B AB×AB O×A O×B O×AB A×B A×AB B×AB O A,O B,O A,B,AB A,O B,O A,B A,B,AB,O A,B,AB A,B,AB
主侧配血不相合原因分析
现象 可能原因 解决方案 重新定型 检查病人亚型、 输血史及移植 史 对病人血清进 行抗体鉴定 检查供血者直 接抗球蛋白试 验
主侧:+ 病人或供血者ABO错 自身:- 误 抗体筛选:- 病人血清可能含ABO
抗体 病人血清中有抗体, 但筛选细胞上无相应 抗原 供血者红细胞直接抗 球蛋白试验阳性
相关检验指标:Hb↓、网织红↑ 、有核红↑ 、总直胆↑
(二)新生儿溶血症种类: 1、ABO不相容 2、RH不相容 3、 ABO、 RH系统以外不相容
(三)新生儿溶血症特点: 1、母亲多为O型。 2、胎儿多为A型。 3、RH溶血症多发生于第2胎,少数见于有输 血史的第一胎。
(四)、新生儿换血的血液选择:
自身对照:病人自身血清及病人自身红细胞 组成,自身对照有助于分析解释交叉配血 试验中出现的阳性结果。
2、常规配血技术:选择的技术不仅要能检查 出不配合的IgM抗体,还必须能检查出尽可 能多的不配合的IgG抗体。最大限度的减少 抗体的漏检。 ⑴立即离心技术配血法:用于检查ABO的 不配合及室温反应活性抗体引起的不配合。 ⑵抗人球蛋白配血法:用于检查不规则抗 体(IgG)引起的交叉配血不配合,有Liss- 抗人球法、PEG-抗人球法、LIP-抗人球 法。
⑶ 抗体筛选技术:
①技术要求: 尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 尽可能快的完成抗体检测。 ②方法选择:每种方法都有自己的特点, 适应于不同范围及情况。
⑷ 自身对照:即使用病人自己的血清和自 己红细胞进行抗体检测,有助于确定抗体 筛选阳性结果是同种抗体还是自身抗体、 或是缗钱引起 。
人ABO血型是由红细胞的抗原和血浆/血清中的抗 体所决定,因此正反定型的结果应该一致。
表1 常规ABO正反定型试验
正定型 抗A 0 + 0 抗B 0 0 + 反定型 A + 0 + B + + 0 O A B 血型
+
+
0
0
AB
⑵ 如果正反定型不一致,则需进一步鉴定。可 在正定型试验中增加抗-A1、抗-AB及抗-H, 反定型试验中增加A2、O及自身红细胞。 表2 疑难ABO正反定型试验
2. 抗体鉴定:在病人血清不规则抗体检查为 阳性时,且时间允许的情况下,在交叉配 血之前,应该可以进行简单的抗体鉴定试 验,确定抗体的特异性,会有助于选择无 对应抗原的相合血。如抗-cE抗体在人群 中的相合率为30%。
二、供血者检测 从供血中心获得的血液,交叉配血前须 进行ABO定型,对于Rh(D)阴性的血液 还需确认其非弱D型,并把检测结果与血 袋上的标识相比较,确保一致。
交叉配血
一、血液的选择 (一)、血型: 1、ABO 系统: ①全血:必须选择同样血型的全血。 ②成分血:选择血型相配的血。
与病人血型相合血制品
病人血型 O A B 相合的红细 相合的血浆 相合全血 胞 O O,A O,B O,A,B,AB A,AB B,AB O A B
AB
O,A,B,AB
AB
AB