《微生物的实验室培养》 学历案

《微生物的实验室培养》学历案
一、学习目标
1、了解微生物实验室培养的基本条件和操作流程。

2、掌握培养基的制备方法和无菌操作技术。

3、学会微生物的接种、培养和观察方法。

4、培养科学实验的严谨态度和团队合作精神。

二、学习重难点
1、重点
（1）培养基的制备和无菌操作技术。

（2）微生物的接种和培养方法。

2、难点
（1）无菌操作技术的规范操作和注意事项。

（2）微生物培养过程中的污染防控。

三、知识准备
1、微生物的概念和种类
微生物是指肉眼难以看清，需要借助显微镜才能观察到的微小生物。

包括细菌、真菌、病毒、原生生物等。

2、微生物的特点
（1）个体微小，结构简单。

（2）代谢类型多样，繁殖迅速。

（3）适应环境能力强。

四、学习过程
（一）实验室培养微生物的基本条件
1、合适的培养基
培养基是为微生物生长提供营养物质的基质。

根据微生物的种类和
培养目的不同，培养基的成分和类型也有所差异。

常见的培养基有牛
肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基等。

2、无菌环境
微生物在自然环境中广泛存在，为了避免杂菌污染，实验室培养微
生物需要在无菌环境中进行。

无菌环境的创建包括对实验器具的灭菌、操作空间的消毒以及操作人员的无菌操作等。

3、适宜的温度、pH 和氧气条件
不同的微生物对生长环境的温度、pH 和氧气需求各不相同。

例如，细菌一般在 37℃左右生长良好，真菌则更适合在 25-28℃的环境中生长。

（二）培养基的制备
1、计算
根据要培养的微生物种类和培养目的，确定培养基的配方，并按照
配方计算所需各种成分的用量。

2、称量
准确称量所需的各种成分，包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。

3、溶化
将称好的成分加入适量的蒸馏水，加热搅拌至完全溶解。

4、调 pH
用 pH 试纸或 pH 计测定培养基的 pH，并使用酸碱溶液进行调节，
使其达到适宜的 pH 值。

5、灭菌
将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅中，在 121℃、105kg/cm²的
压力下灭菌 15-30 分钟。

灭菌的目的是杀死培养基中的所有微生物，包括芽孢和孢子。

（三）无菌操作技术
1、消毒
（1）消毒的方法包括煮沸消毒、化学药剂消毒（如酒精、氯气等）和紫外线消毒等。

（2）消毒的对象主要是实验器具和操作空间。

2、灭菌
（1）灭菌的方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。

（2）高压蒸汽灭菌适用于培养基、培养皿等；干热灭菌适用于玻璃器皿、金属用具等；灼烧灭菌适用于接种环、接种针等。

3、无菌操作
（1）在进行微生物接种、培养等操作时，要严格遵守无菌操作原则。

操作人员要洗手消毒，穿戴无菌工作服和手套，操作过程中要避免微生物污染。

（2）接种时，要在酒精灯火焰附近进行，接种环要经过灼烧灭菌冷却后再使用。

（四）微生物的接种
1、平板划线法
（1）用接种环在平板培养基表面通过多次划线，将微生物逐步稀释分散到培养基的不同区域，从而获得单个菌落。

（2）操作要点：每次划线前接种环要灼烧灭菌，冷却后再划线；划线时要避免划破培养基表面。

2、稀释涂布平板法
（1）将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到平板培养基上，培养后可获得单个菌落。

（2）操作要点：稀释操作要准确，涂布要均匀。

（五）微生物的培养
1、将接种后的培养基放入适宜温度的培养箱中进行培养。

2、定期观察微生物的生长情况，记录菌落的形态、大小、颜色等特征。

（六）微生物的观察
1、可以通过肉眼观察菌落的形态特征，初步判断微生物的种类。

2、也可以借助显微镜进一步观察微生物的细胞形态和结构。

五、学习评价
1、完成实验报告，记录实验过程和结果。

2、回答以下问题：
（1）简述培养基制备的步骤和注意事项。

（2）无菌操作技术包括哪些方面？如何确保无菌操作的效果？
（3）平板划线法和稀释涂布平板法的操作要点分别是什么？
（4）在微生物培养过程中，如何控制温度、pH 和氧气条件？
六、拓展与应用
1、了解微生物培养在工业生产（如发酵工程）、医学（如病原微生物的检测）和环境保护（如污水的生物处理）等领域的应用。

2、探究不同条件对微生物生长的影响，如温度、pH、营养物质浓度等。

七、学习反思
通过本次学习，对微生物的实验室培养有了更深入的理解和掌握。

在实验操作过程中，体会到了无菌操作的重要性，也认识到了自己在操作中的不足之处。

在今后的学习和实践中，将更加注重细节，提高实验操作的规范性和准确性。

同时，也对微生物在实际生活中的应用有了更多的思考，激发了进一步探索微生物世界的兴趣。