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《细胞生物学实验》PPT课件

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实验作业
1.细胞间凝集的原理是什么？ 2.简图表示血细胞凝集原理
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实验总结
1.为什么对照组有PBS液作对照呢？没什么巧，因为凝集素中本身含PBS缓冲
液，当含本身凝集素是不含PBS的，只是因为本实验中凝集素的提取时用到了PBS.
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实验总结
2.那么红细胞悬液是怎么制备的呢？其实也不难，无菌抽取动物静脉血液，当然血液
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三、实验仪器
显微镜、粗天平、载玻片、滴管、离心管、离心机等.
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四、实验材料
土豆块茎
鸡血细胞
五、实验内容与实施过程
1.凝集素粗提液制备（50分钟）：用天平称取去皮的土豆块茎2g+10mlPBS缓冲液，浸泡2h→粗提液中含有可溶性土豆凝集素。
2.鸡红细胞悬液制备（35分钟）：以无菌方法抽取鸡血注射器中抽取3.8%柠檬酸
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③詹纳斯绿B：詹纳斯绿B能专一的对线粒体进行活体染色。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态，即有色状态，呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态
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三、实验仪器
显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、镊子、双面刀片、解剖盘．载玻片、凹面载玻片、盖玻片、表面皿、吸管、牙签、吸水纸。
本实验过程很简单，只需要将植物凝集素与红细胞混合后用低倍显微镜观察现象即可。具体如下：
实验组凝集素1滴红细胞悬液1滴对照组 PBS液1滴红细胞悬液1滴 8
实验内容与实施过程
4、实验小结（15分钟）：总结实验过程中学生的操作是否规范；实验是否成功，如果不成功，问题出在哪里；哪些实验作得比较好。提醒预习下节课实验内容，提问。共150分钟。

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目录
• 引言 • 细胞生物学基础知识 • 实验操作流程 • 实验结果分析 • 结论
01 引言
实验目的
01
02
03
04
掌握细胞生物学的基本实验技能
了解细胞的结构和功能
学习细胞培养和细胞转染技术
探究细胞信号转导的机制
实验背景
细胞是生命的基本单位，是生物体结构和功能的基础
能量转换
细胞中的线粒体和叶绿体可以将光能或化学能转换为细胞可利用的ATP等能量形式。
信息传递
细胞通过分泌化学信号和电信号传递信息，协调各种生理活动。
细胞的生命活动
细胞分裂
通过有丝分裂和减数分裂，细胞可以复制自身并产生新的子细胞。
细胞分化
在发育过程中，细胞会逐渐失去其全能性，并获得特定的功能和形态。
定性分析
根据实验结果，对实验现象进行解释和推理，探究可能的机制和影响因素。
结果解读与讨论
结果解读
根据实验结果，结合理论知识，对实验结果进行解释和解读，明确实验目的和结论。
结果讨论
对实验结果进行深入讨论，探讨实验的局限性和改进方向，提出可能的假设和研究方向。
05 结论
实验总结
实验目的
通过实验，学生能够掌握细胞生物学的基本实验技能，了解细胞的结构和功能，以及细胞的生命活动规律。
实验步骤
实验包括细胞培养、显微观察、细胞计数等步骤，每个步骤都有详细的操作说明和注意事项。
实验原理
实验涉及细胞培养、显微观察、细胞计数等技术，通过这些技术，学生可以深入了解细胞的结构和功能，以及细胞分裂、分化等生命活动过程。
实验结果
实验结果清晰，学生能够观察到细胞的形态、结构和功能，并得出准确的实验结论。

医学细胞生物学实验

采用荧光染色、流式细胞术、免疫组化等方法检测细胞凋亡的数量、形态和相关蛋白的表达。
细胞凋亡诱导与检测
细胞凋亡检测
细胞凋亡诱导
自噬诱导
通过饥饿、药物刺激等手段诱导细胞自噬，以研究自噬的生物学意义和作用机制。
自噬检测
采用荧光染色、电镜观察、蛋白质印迹等方法检测自噬体的形成、数量和相关蛋白的表达。
自噬诱导与检测
03
02
01
实验原理
实验设计
根据实验目的和原理，设计具体的实验方案和操作流程。
实验操作
按照实验方案进行实验操作，包括细胞培养、显微观察、分子生物学检测等步骤。
数据收集与分析
收集实验数据，进行统计分析，得出实验结果。
结果汇报与讨论
将实验结果以书面形式汇报，并进行讨论和总结。
实验步骤
02
细胞培养
CHAPTER
利用免疫荧光染色、荧光共振能量转移等技术，可以检测和定位细胞内特定信号分子的分布和动态变化，进而揭示其在信号转导中的作用机制。
详细描述
总结词
信号转导抑制剂的应用
总结词：信号转导抑制剂是一类能够干扰细胞信号转导过程的化合物，具有潜在的治疗作用。
07
细胞凋亡与自噬研究
CHAPTER
通过使用化学物质、射线、病毒等手段诱导细胞凋亡，以研究其发生机制和生物学意义。
电子显微镜
利用电子束代替可见光，观察细胞超微结构。
显微镜观察
通过显微镜或细胞计数板，统计细胞数量。
细胞计数
利用染色剂或荧光染料，检测细胞活性，如MTT法、染色排除法等。
细胞活力检测
细胞计数与活力检测
利用染色剂对细胞进行染色，以便观察细胞形态和结构。
染色技术

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nuclei
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四、作业
1．绘制口腔上皮细胞(点线绘图法) 2．低倍镜、高倍镜下测微尺的标定方法及结果 3．计算核质比
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镜台测微尺
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目镜测微尺（200小格）
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实验二、细胞生理活动的实验观察
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实验目的
通过制片与观察加深理解细胞吞噬等生理活动掌握死活细胞鉴别的原理及方法
许多酸性染料不易穿过活细胞的质膜进入细胞内，却能渗入死亡的细胞内，使其着色，以此来鉴别死活细胞。
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(一)临时制片——口腔上皮细胞标本的制备
取载玻片一张(揩净)→加一滴生理盐水→取材(口腔内颊部上皮细胞)→涂于生理盐水中→盖盖玻片→染色(甲基蓝)1’→观察
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(二)显微测量
1．显微测量计
目镜测微尺镜台测微尺
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(1) 目镜测微尺
1.外形是一圆形玻片，装入目镜镜筒中。用于测量标本用。 2.刻度标记0~100，实际分为200等份，每一个格的长
度需用镜台测微尺标定。
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(2) 镜台测微尺
1.外形是一载玻片，上有一带精细刻度的标尺。 2.总长度为1mm，分为100等份，每一个格的长度为
0.01mm(10μm)。
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(3)标定方法
①将镜台测微尺置镜台上。 ②低倍下找到镜台测微尺，使之与目镜测微尺平行且
左端对齐(0刻度重合)。
using of the microscope
(I) Use of low objective lens (II) Use of high objective lens
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Structure of the microscope Mechanical part Optics part Lighting part

医学细胞生物学实验

细胞毒性实验
原理
评估化学物质、药物对细胞的毒性影响。
技术
包括细胞存活率、细胞毒性指标的测量方法。
应用
用于研究药物筛选、环境污染物评估等。
细胞信号传导实验
原理
研究细胞内外信号传递的分子机制，如细胞膜受体激活、信号转导途径等。
技术
包括Western blot、ELISA 等分析方法。
应用
医学细胞生物学实验
医学细胞生物学实验是研究细胞结构和功能的重要手段。本演示将介绍几种常见的细胞实验以及它们在医学领域的应用。
细胞分离实验
1
原理
通过酶溶解组织样本中的细胞间质，使细胞分散成单个细胞。
2
应用
用于分离研究特定细胞类型，如癌细胞，干细胞等。
3
技术
包括悬浮液培养法、胶原酶消化法等。
细胞培养实验
用于研究细胞生长、分化、细胞死亡等。
细胞分化实验
原理
研究细胞从幼稚状态到成熟细胞的进程。
技术
包括诱导分化、干细胞培养等方法。
应用
用于研究胚胎发育、组织再生等。
细胞凋亡实验
原理
探究细胞凋亡的信号通路和调控因子。
技术
包括细胞凋亡检测方法、荧光染料等的使用。
应用
用于研究肿瘤治疗、器官发育等领域。
细胞色素实验
Hale Waihona Puke 1原理通过染色体标记的方法研究细胞的遗传变异和突变。
2
应用
用于检测遗传性疾病、突变的发生与演化。
3
技术
常用的染色体标记方法有FISH、GISH等。
1 目的
在体外创建适宜的环境条件来培养和繁殖细胞。
2 技术

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B
C
糖异生作用
非糖物质如乳酸、甘油等转变为葡萄糖或糖原的过程，以维持血糖水平稳定。
糖代谢的调控机制
包括激素调节（如胰岛素、胰高血糖素）和酶活性的调节（如己糖激酶、磷酸果糖激酶等）。
D
脂类代谢过程及意义
脂肪酸的合成与分解
脂肪酸在细胞内的合成主要发生在肝和脂肪组织，而分解则主要发生在需要能量的组织如
包括转录和翻译两个过程，其中转录是以DNA为模板合成RNA的过程
，而翻译则是以mRNA为模板合成蛋白质的过程。
02 03
蛋白质降解
细胞内蛋白质的降解主要通过溶酶体途径和泛素-蛋白酶体途径进行。溶酶体途径主要降解细胞内受损或老化的蛋白质，而泛素-蛋白酶体途径则主要降解短寿命或异常蛋白质。
蛋白质代谢的调控机制
凋亡途径和调控机制
凋亡途径
外源性途径（死亡受体介导）、内源性途径（线粒体介导）。
调控机制
Bcl-2家族蛋白、Caspase家族蛋白酶、IAP家族蛋白等参与凋亡调控，通过信号转导途径实现细胞凋亡。
医学相关疾病与细胞生物学关
05
系
肿瘤发生发展过程中细胞变化
肿瘤细胞增殖失控
正常细胞增殖受到严格调控，而肿瘤细胞能够逃避这些调控机制，实现无限增殖。
医学领域应用
在医学领域，细胞生物学被广泛应用于疾病的诊断、治疗及预防等方面，如肿瘤学、免疫学、神经生物学等。
意义
细胞生物学的研究对于揭示生命现象的本质和规律具有重要意义，同时也有助于推动医学科学的进步和发展，提高人类健康水平。
细胞结构与功能
02
细胞膜组成与功能
01
细胞膜的主要成分
脂质、蛋白质和糖类

1-细胞生物学实验

五、实验操作

1. 取猪肝1g，放入小烧杯中，加4ml 0.25M蔗糖缓冲液，将组织剪成约1mm立方的小块。 2. 将剪碎的组织移入匀浆器的外管中，再将内管（带柄的活塞）插入外管中，缓慢而均匀地施力，上下旋转拉动，匀浆7-10分钟，然后用六层纱布过滤回洗净的原烧杯中。（这两步操作略） 3. 每组取1个5ml离心管，加入匀浆液 2ml，2000rpm离心10分钟。（每组1管）接下去的操作见下面的流程图。健那绿染色：各取10μlD4悬浮液和健那绿染液在载玻片上混合，10分钟后加盖玻片，观察线粒体。改良苯酚品红染色：取10μlD6涂片，滴10μl改良苯酚品红染液，5分钟后加盖玻片，观察细胞核。
2.细胞核的分离提取
3.高速离心分离提取线粒体
操作步骤装有上清液的高速离心管→ 17000rpm 离心 20 分钟 → 弃上清，留取沉淀物 → 加入 0．25mol／L蔗糖－0.003 mol／L氯化钙液1ml，用吸管吹打成悬液→17000rpm离心20分钟→将上清吸入另一试管中，留取沉淀物，加入 0.1ml 0． 25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化钙溶液混匀成悬液→取上清液和沉淀物悬液，分别滴于载玻片上，各滴一滴 0.02 ％詹纳斯绿 B 染液盖上盖片染20分钟→油镜下观察，颗粒状的线粒体被詹纳斯绿B染成蓝绿色。
(2) 镜台测微尺

1.外形是一载玻片，上有一带精细刻度的标尺。
2 . 总长度为 1mm，分为 100 等份，每一个格的长度为 0.01mm(10μm)。
(3)标定方法

①将镜台测微尺置镜台上。 ②低倍下找到镜台测微尺，使之与目镜测微尺平行且左端对齐(0刻度重合)。

医学细胞生物学实验2

二、DNA和RNA的显示和的显示 3#血涂片凉干甲基绿一哌罗宁混合血涂片→凉干血涂片凉干→ 染液染色20分钟冲洗→吸干分钟→冲洗吸干→观察染液染色分钟冲洗吸干观察三、作业（ 1）绘制蟾蜍红所显示的酸性蛋白或）绘制蟾蜍红C所显示的酸性蛋白或碱性蛋白的分布图所显示的DNA和RNA （2）绘制蟾蜍红所显示的）绘制蟾蜍红C所显示的和分布图
实验二细胞化学成分的分析酸性蛋白和碱性蛋白的显示一、酸性蛋白和碱性蛋白的显示 1#、 2#血涂片凉干血涂片→凉干、血涂片凉干→70%乙醇中固乙醇中固分钟→冲洗定 5分钟冲洗分钟冲洗→90℃ 的 5%三氯醋酸 ℃ 三氯醋酸处理15--20分钟冲净分钟→冲净处理分钟 → 1#→0.1%酸性固绿染色分钟酸性固绿染色3分钟酸性固绿染色 2#→0.1%碱性固绿染色分钟碱性固绿染色30分钟碱性固绿染色 →冲洗吸干观察冲洗→吸干冲洗吸干→观察
酸性蛋白的显示结果
（左图×100，右图×4左图×100，右图×400）左图× ，右图× ）左图
DNA和RNA的显示结果和的显示结果
（左图×100，右图×400）左图× ，右图× ）

《细胞生物学实验》课件

05
结论与讨论
实验结论
01 02
实验结论总结
通过本次实验，我们成功地观察到了细胞分裂的各个阶段，验证了细胞周期的存在和细胞分裂的机制。实验结果与预期一致，进一步证实了细胞生物学理论的正确性。
实验结果的意义
本实验结果对于深入理解细胞分裂和增殖的机制具有重要意义，为后续的细胞生物学研究和应用提供了有力支持。
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目录
CONTENTS
• 实验概述 • 实验材料 • 实验操作 • 实验结果 • 结论与讨论
01
实验概述
实验目的
掌握细胞培养技术
通过本实验，学生将熟悉并掌握细胞培养的基本技术和方法，了解细胞在体外生长和繁殖的条件和要求。
理解细胞形态与功能的关系
通过观察不同类型细胞的形态和生长特点，学生将进一步理解细胞形态与其功能之间的关系。
培养实践操作能力
本实验将提供实际操作的机会，培养学生的实验技能和动手能力，提高其解决实际问题的能力。
实验原理
细胞培养的生物学基础
细胞生长与增殖的过程
介绍细胞培养的基本概念、发展历程和应用领域，为学生提供相关的生物学基础知识。
解释细胞在体外生长和增殖的过程，包括细胞周期、分裂方式、接触抑制等基本概念。
03
实验结论的应用
实验结论可应用于教学、科研和实际生产中，有助于提高人们对细胞生
物学领域的认识和理解。
结果分析
数据分析方法
在实验过程中，我们采用了显微观察、图像处理和统计分析等多种方法，确保实验结果的准确性
和可靠性。
实验误差分析
在实验过程中，可能存在一些误差，如观察角度、显微镜倍数等因素可能影响实验结果。我们通过多次重复实验和交叉验证等方

《医学细胞生物学》PPT课件

激光共聚焦扫描显微镜
绿蓝色色为为微细管胞
核
激光共聚焦扫描显微镜用激光作扫描光源，由于激光束的波长较短，光束很细，所以共焦激光扫描显微镜有较高的分辨力，大约是普通光学显微镜的3倍。
调焦深度不一样时，就可以获得样品不同深度层次的图像，这些图像信息都储于计算机内，通过计算机分析和模拟，就能显示细胞样品的立体结构。
1932年Ruska发明了以电子束为光源，用电磁场作透镜的电子显微镜。电子显微镜的放大倍数最高可达近百万倍透射电子显微镜扫描电子显微镜
透射电子显微镜
RER的形态
显与分子生物学技术
细胞化学技术
组织化学或细胞化学染色：是利用染色剂可同细胞的某种成分发生反应而着色的原理，对某种成分进行定性或定位研究的技术。
分子杂交技术
具有互补核苷酸序列的两条单链核苷酸分子片段，在适当条件下，通过氢键结合，形成DNA-DNA，DNA-RNA或RNA-RNA杂交的双链分子。这种技术可用来测定单链分子核苷酸序列间是否具有互补关系。
人类染色体端粒DNA的荧光原位杂交
最初是使用带放射性的DNA探针，通过放射自显影来显示位置。后来又发明了免疫探针法，将探针核苷酸的侧链加以改造，探针杂交后，其侧链可被带有荧光标记的抗体所识别，从而显示出位置。
显微光谱分析技术
细胞中有一些成分具有特定的吸收光谱，核酸、蛋白质、细胞色素、维生素等都有自己特征性的吸收曲线。例如，核酸的吸收波长为260nm，而蛋白质的则为280nm。根据细胞成分所具有的这种特性，可利用显微分光光度计对某些成分进行定位、定性，甚至定量测定
放射自显影术
用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，组织中的放射性即可使乳胶感光。显示还原的黑色银颗粒，即可得知标本中标记物的准确位置和数量。

细胞生物学实验ppt课件

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镜普通复氏显微
镜相差显微
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镜暗视野显微
镜荧光显微
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3、如何提高显微镜分辨率
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1、数片孔径：孔径愈大，显微镜能力俞强。 2、分辨率：分辨率以分辨俩点之间的最小距离表示。目镜与显微镜的分辨率无关，物镜的分辨率即为显微镜的分辨率，照明光线波长越短，物镜的数值孔径越
大显微镜的分辨率的越大。 3、放大率：总放大率超过物镜数值孔径的1000倍时，细微结构分辨不清，为空的放大，低于500倍时由于放大率过低，肉眼难以分辨。 4、焦点深度：焦深加大，总放大率提高。
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三、实验器材
观察材料（草履虫，洋葱内表皮，紫鸭趾草等花粉，菠菜叶），普通光学显微镜，暗视野显微镜，相差显微镜，荧光显微镜，载玻片，盖玻片，吸管，镊子，剪刀等。
观察。
3．紫鸭趾草花粉外形、表面突起的观察在载玻片
上滴一滴水，取紫鸭趾草雄蕊在其中沾几下，然后
盖片观察。
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实验一、几种光学显微镜的使用
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一、实验目的：
了解几种光学显微镜的结构、使用方法、工作原理等。掌握使用普通光学显微镜提高分辨率的方法。
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二、实验原理ห้องสมุดไป่ตู้
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1、基本原理
一般光学显微镜主要是由目镜、物镜、聚光器以及反光镜等构成。各种光学显微镜的放大原理基本相同，各种特殊用途的显微镜只是在主要器件上进行了稍微改动而已。

山东大学医学细胞生物学实验课件01细胞的结构

16 山东大学医学院细胞生物学研究所
生物绘图的要求和方法
1 实事求是 2比例 3用铅笔，用线条和点绘图，禁止涂 4标注
17 山东大学医学院细胞生物学研究所
18 山东大学医学院细胞生物学研究所
19 山东大学医学院细胞生物学研究所
9 山东大学医学院细胞生物学研究所
10 山东大学医学院细胞生物学研究所
11 山东大学医学院细胞生物学研究所
12 山东大学医学院细胞生物学研究所
13 山东大学医学院细胞生物学研究所
原理线粒体中的细胞色素氧化酶能使詹纳斯绿
（Janus Green B）保持氧化状态而呈淡蓝绿色，而在细胞质区域的染料则被还原成无色，故能特异地对线粒体进行活体染色。
山东大学医学院细胞生物学研究所
3
山东大学医学院细胞生物学研究所
4
山东大学医学院细胞生物学研究所
5
1 熟悉实验室规范 2 掌握光镜下细胞器的形态、分布特点 3 掌握临时制片法 4 学会生物绘图
6 山东大学医学院细胞生物学研究所
7 山东大学医学院细胞生物学研究所
8 山东大学医学院细胞生物学研究所
山东大学医学院细胞生物学研究所
山东大学医学院细胞生物学研究所
2
1 请同学们察看实验室前面的分班情况，找到自己的座位号，每次实验按照座位号入座。根据实验室实验台的布局，三位同学一组，合用试剂。
2 请同学们注意保护自己，上课穿隔离衣，禁止在实验室吃饭。实验台上只摆放实验用品。上课时带好实验指导、实验报告纸及绘图文具。实验报告要当堂完成。
14 山东大学医学院细胞生物学研究所
漱口 ↓
刮取口腔粘膜上皮细胞 ↓
涂片 ↓
滴詹纳斯绿染料 ↓5min