苹果赤霉素3-氧化酶1(MdGA3ox1)启动子区的克隆及序列分析

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苹果乙烯信号转导相关基因MdEIL1的克隆及功能鉴定

园艺学报，2016，43 (3)：409–418.Acta Horticulturae Sinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0830；http：//www. ahs. ac. cn 409苹果乙烯信号转导相关基因MdEIL1的克隆及功能鉴定苏玲，王淑惠，郝玉金，王小非*，由春香*（山东农业大学园艺科学与工程学院，作物生物学国家重点实验室，农业部黄淮地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，山东泰安 271018）摘要：以苹果‘嘎拉’（Malus × domestic‘Royal Gala’）为试材，分离了乙烯信号转导相关的MdEIL1基因（基因序列号：MDP0000423881）。

序列分析表明，该基因包含长为1 980 bp完整的开放阅读框，编码658个氨基酸的蛋白。

进化树分析表明MdEIL1属于EIN3/EIL转录因子家族蛋白。

定量分析显示，MdEIL1基因在苹果的根、茎、叶、花和果实中有不同程度的表达，而且它的表达也受到乙烯、生长素和细胞分裂素的诱导。

通过原核表达试验体外诱导MdEIL1蛋白成功，为后续蛋白功能鉴定奠定了基础。

MdEIL1基因在拟南芥中异位表达，增强其乙烯响应，在暗处表现为下胚轴变短，并且AtERF1的表达量上升，显示转基因植株对乙烯的敏感性提高。

关键词：苹果；MdEIL1；表达分析；原核表达；功能鉴定中图分类号：S 661.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2016）03-0409-10 Molecular Cloning and Functional Characterization of the Ethylene Signaling Related Gene MdEIL1 in AppleSU Ling，WANG Shu-hui，HAO Yu-jin，WANG Xiao-fei*，and YOU Chun-xiang*（College of Horticulture Science and Engineering，Shandong Agricultural University，State Key Laboratory of Crop Biology，MOA Key Laboratory of Horticultural Crop Biology（Huanghuai Region）and Germplasm Innovation，Tai’an，Shandong 271018，China）Abstract：An ethylene signal relative transcription factor named MdEIL1 was cloned from Malus × domestic‘Royal Gala’. Sequence analysis showed that MdEIL1 contained 1 980 nucleotides，which encoded a protein containing 658 amino acids. Phylogenetic tree analysis showed that MdEIL1 belonged to EIN3/EIL transcription factor family proteins. qRT-PCRs analysis indicated that MdEIL1 has different levels of expression in apple’s roots，stems，leaves，flowers and fruits，and was induced by ethylene，auxin and cytokinin hormones hormones in plants. We obtained the recombinant MdEIL1 protein by Prokaryotic expression，which was essential for protein functional identification in vitro. Ectopic expression of MdEIL1 in Arabidopsis can partially enhance ethylene response，which exhibited the short hypocotyl in darkness and expression of AtERF1 was improved in the MdEIL1 overexpressing transgenic lines.Key words：apple；MdEIL1；expression analysis；prokaryotic expression；functional identification收稿日期：2016–01–12；修回日期：2016–03–04基金项目：国家重点基础研究发展计划（‘973’）项目（2013CB945103）；国家自然科学基金项目（31272142，31471854）* 通信作者Author for correspondence（E-mail：xfwang2004@；youchunxiang@）Su Ling，Wang Shu-hui，Hao Yu-jin，Wang Xiao-fei，You Chun-xiang.Molecular cloning and functional characterization of the ethylene signaling related gene MdEIL1 in apple. 410Acta Horticulturae Sinica，2016，43 (3)：409–418.乙烯的功能涉及调控植物的生长发育，如种子萌发、细胞伸长、叶片衰老、生殖、果实成熟、衰老等（Abeles & Biles，1991；Bleecker & Kende，2000；Barry & Giovannoni，2007；Lin et al.，2009），同时也可响应外界环境的生物和非生物胁迫（Yang & Hoffman，1984；Johnson & Ecker，1998）。

苹果生长素响应因子MdARF5的克隆与功能鉴定

ｔｏｐｒｏｖｉｄｅａｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｂａｓｉｓｆｏｒａｕｘｉｎ—ｍｅｄｉａｔｅｄａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ．［ＭｅｔｈｏｄＩＴｈｅａｐｐｌｅａｕｘｉｎｒｅｓｐｏｎｓｅｆａｃｔｏｒｇｅｎｅＭｄＡＲＦ５ｗａｓｃｌｏｎｅｄｂｙＰＣＲｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｆｒｏｍａｐｐｌｅ（Ｍａｌｕｓｘｄｏｍｅｓｔｉｃａ ‘ＲｏｙａｌＧａｌａ’）．Ｔｈｅｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｔｒｅｅｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｂｙ
（ＭＤＰ００００１４３７４９）ｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄ．Ｔｈｅｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅ（ＯＲＦ）ｏｆＭｄＡＲＦ５ｃｏｎｔａｉｎｅｄ２６９１ｂｐ，ｅｎｃｏｄｉｎｇａｐｒｏｔｅｉｎｏｆ８９６ａｍｉｎｏ
ａｃｉｄｒｅｓｉｄｕｅｓ．ＰｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃｔｒｅｅａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｈｏｍｏｌｏｇｙｏｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌａｎａｌｙｓｉｓｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔＭｄＡＲＦ５ｗａｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙａｕｘｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｏｎｔｈｅｃｏｎｔｒａｒｙ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｇｅｎｅｓｗｅｒｅｒｅｐｒｅｓｓｅｄ．ＴｈｅＭｄＡＲＦ５一ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇａｐｐｌｅｃａｌｌｉｅｘｈｉｂｉｔｅｄｄｅｃｒｅａｓｅｄａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｃｏｎｔｅｎｔ，ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇｔｈａｔＭｄＡＲＦ５ｇｅｎｅｍｉｇｈｔｐｌａｙａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｎｇａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ．ＴｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆＭｄＭＹＢ１ｐｒｏｍｏｔｅｒｒｅｇｉｏｎｗａｓ

红平菇HP1漆酶基因及启动子克隆和序列分析

红平菇HP1漆酶基因及启动子克隆和序列分析作者：郑苗苗邵淑丽张令昻焦战战来源：《江苏农业科学》2014年第08期摘要：以优化后的漆酶培养基为基础，将RT-PCR、RACE技术相结合，从红平菇菌株中获得漆酶基因cDNA全长及Genomic DNA全长序列，Genomic DNA大小为2 344 bp。

通过对漆酶基因cDNA全长和Genomic DNA全长序列的比较，结果显示该基因包含13个外显子和12个内含子。

基因cDNA全长为1 746 bp，其中包含1个完整的ORF，长度为1 590 bp，编码529个氨基酸。

序列在氨基酸水平上与桃红侧耳Pleurotus salmoneostramineus的氨基酸序列具有较高的同源性，相似性达97%，与齿耳菌Steccherinum murashkinskyi漆酶氨基酸序列相似性达到72%。

通过SEFA-PCR的方法，扩增得到漆酶基因起始密码子上游长1 126 bp的启动子序列。

分析表明，该启动子区域上除分布有TATA-box、CAAT-box、AP2等基本的转录起始元件外，还存在多个潜在的顺式作用元件序列位点，包括4个MRE元件、2个CreA热击元件、2个STRE元件、1个NIT2元件、1个HSEs元件、1个XRE异生物质反应元件、4个氮因子结合位点等。

不同外源诱导物可以调节红平菇HP1漆酶基因的表达。

关键词：红平菇；漆酶基因；启动子克隆；转录调控中图分类号：S646.1+40.1 文献标志码：A文章编号：1002-1302（2014）08-0021-05漆酶（laccase）是一种含铜的多酚氧化酶，属于氧化酶的蓝铜家族。

漆酶含有4个铜原子，分别位于3个不同结合位点，并且高度保守[1]。

1883年吉田在漆树中发现漆酶，1893年Laborde在真菌中发现漆酶。

目前证实漆酶普遍存在于细菌、真菌、植物、昆虫中[2]。

其中真菌中的白腐菌是最重要的漆酶生产菌。

近年来，漆酶是医学、化学、生物学、环境科学等领域的研究热点[3]。

苹果中乙烯响应转录因子基因的克隆及序列分析

苹果中乙烯响应转录因子基因的克隆及序列分析蔡玉迎1，宫钰1，王娟2，于立帅2，陈广艳2，成妮妮1（1.临沂大学生命科学学院，山东临沂 276005；2.临沂大学农林学院，山东临沂 276005）摘要：乙烯响应因子(AP2/ERF)转录因子家族是植物中广泛存在的一类转录因子，它们对植物的生长发育、次生代谢过程和植物的抗胁迫能力具有重要的调控作用。

通过对苹果中响应乙烯的转录因子(ERF)家族进行分析，选择具有代表性的转录因子基因进行设计引物。

以苹果果皮为试验材料，从中分离出响应乙烯的转录因子1、2、3、5的基因，并对其进行序列比对分析，发现这4个基因序列差别较大，但具有很保守的共同序列，初步确定其功能上有一定的相关性。

关键词：AP2/ERF；苹果；转录因子；乙烯疾病、高温、干旱、盐碱等环境胁迫对植物的生长发育、器官形成等过程具有不利的影响。

研究发现，当植物在生长过程中被环境胁迫刺激后，就会激活植物中含有的气体激素信号途径，像植物激素脱落酸、赤霉素、细胞分裂素、乙烯等，它们在植物体内的含量虽然不高，但却在植物的生长发育和环境适应中起着至关重要的作用[1,2]。

近年来，随着测序技术的发展和研究的深入，许多物种的基因组已经完成测序，例如拟南芥等模式生物，在基因组序列测定中发现了大量的转录因子编码基因，如AP2/ERF是植物中特有的转录因子，属于超家族因子，参与花[3]、果实[4]和种子发育[5]等植物生长发育的多种生物学过程，在植物抵抗干旱[2]、高盐[6]、低温[1]等非生物胁迫和真菌、细菌、病原体等生物胁迫方面有重要作用[7,8]，是目前研究的热点之一。

它们对植物的生长发育、次生代谢过程和植物的抗胁迫能力具有重要的调控作用。

乙烯作为一种激素能促进植物的成熟，乙烯响应因子在生长发育、器官形成、抗病虫害以及对胁迫环境的响应等方面具有重要作用[9,10]。

近年来，乙烯的研究已经延伸到下游转录因子的调控机制，转录因子在植物的次生代谢过程中参与多步反应，因而也具有重要的调控作用。

侵染‘舞美’苹果的苹果锈果类病毒检测与全序列分析

侵染‘舞美’苹果的苹果锈果类病毒检测与全序列分析刘洪玉;孙子豪;李保华;王彩霞【摘要】2017年9月,在山东胶州调查苹果病毒病时发现‘舞美’果实表现出明显的花脸症状,取发病树体芽组织嫁接于健康‘富士’苹果幼树上,采用RT-PCR技术对其是否含有苹果锈果类病毒进行了检测,并利用DNAMAN、MEGA 5.1等软件对其全序列进行了分析.结果表明,显症‘舞美’果实、发病树体枝条及嫁接‘富士’枝条中均可检测出ASSVd,无症状‘舞美’果实和相应树体枝条中均未检测到ASSVd.‘舞美’分离物基因组主流序列为333 nt(登录号MG745387),与GenBank中已报道的ASSVd序列一致性为92％～99％.序列多重比对及系统进化树分析发现,该分离物的末端保守区和中央保守区与ASSVd参考序列一致,且与不同来源的ASSVd分离物亲缘关系较近.这是首次在‘舞美’苹果上发现和鉴定出苹果锈果类病毒.【期刊名称】《植物保护》【年(卷),期】2019(045)004【总页数】4页(P176-179)【关键词】苹果锈果类病毒;‘舞美’;RT-PCR;序列分析【作者】刘洪玉;孙子豪;李保华;王彩霞【作者单位】青岛农业大学植物医学学院,山东省植物病虫害综合防控重点实验室,青岛 266109;青岛农业大学植物医学学院,山东省植物病虫害综合防控重点实验室,青岛 266109;青岛农业大学植物医学学院,山东省植物病虫害综合防控重点实验室,青岛 266109;青岛农业大学植物医学学院,山东省植物病虫害综合防控重点实验室,青岛 266109【正文语种】中文【中图分类】S432.1苹果锈果病在辽宁[1]、新疆[2]、山东[3]、河北[4]等苹果主产区均有发生,近年来呈不断蔓延趋势,已成为制约我国苹果产业健康发展的主要限制因子。

该病的病原为苹果锈果类病毒Apple scar skin viroid (ASSVd),属于马铃薯纺锤块茎类病毒科Pospiviroidae苹果锈果类病毒属Apscarviroid[5]。

青香蕉苹果α—法尼烯合酶基因启动子的克隆及序列分析

青香蕉苹果α—法尼烯合酶基因启动子的克隆及序列分析作者：王亚男刘晓楠戚伟宋媛媛张渝洁成妮妮来源：《科技视界》2016年第13期【摘要】α-法尼烯的合成及α-法尼烯合酶基因的表达调控机制的研究在苹果等虎皮病的防治中具有重要作用。

本实验利用Tail-PCR技术克隆了青香蕉苹果中α-法尼烯合酶基因的启动子序列，长度为1235bp。

序列分析结果发现，该启动子序列含有明显的启动子特征序列TATA-box和CAAT-box，还有含有GARE-motif，TATC-box，TGA element等赤霉素和生长素等激素响应元件，HSE，ARE等热胁迫响应元件，大量的光反应元件G-box，GA-motif，GAG-motif，以及MYB结合位点MBS。

序列分析表明该启动子可能受到激素、温度和光的调节。

【关键词】α-法尼烯合酶；启动子；虎皮病α-法尼烯是一种普遍存在于植物体内的倍半萜类次生代谢物质，研究发现果皮中α-法尼烯的生物合成是通过类异戊二烯途径中的甲羟戊酸途径[1-2]。

多年来的研究普遍认为，在储存过程中倍半萜α-法尼烯在果皮尤其是果皮蜡质中的积累是引起苹果和梨果实中的重大生理病害—虎皮病的主要原因[3-6]。

Busatto等（2014）研究发现，α-法尼烯及其氧化产物共轭三烯（CTols）一个新的作用即作为苹果果实褐变的信号开关。

研究表明苹果虎皮病发生过程中多酚提取液的变化也与乙烯合成抑制剂1-MCP有关。

这些代谢物积累的变化与参与这个途径的基因以及两种特异的挥发物α-法尼烯和共轭三烯（Ctols）的最终氧化形式6-甲基-5-庚烯-2-酮（MHO）关系密切[7]，这与Whitaker等（2000）报道的MHO 与苹果虎皮病发病率之间存在正相关关系，且只有在发病的果实上才能检测到MHO一致[6]。

候真等（2013）在研究MHO 对苹果虎皮病发生和果皮活性氧代谢的影响时发现，外源MHO可能通过降低抗氧化酶活性，进而参与苹果虎皮病的发病过程[8]。

苹果丙二烯氧化物环化酶基因MdAOC1的克隆与表达分析

ＳＣＩＥＮＴＩＡ
ＳＩＬＶＡＥ
ＳＩＮＩＣＡＥ
苹果丙二烯氧化物环化酶基因ＭｄＡＯＣ１的克隆与表达分析
曹晏彬柏素花戴洪义
（１．青岛农业大学园艺学院青岛２６６１０９；２．青岛农业大学生命科学学院青岛２６６１０９）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｌｌｅｎｅｏｘｉｄｅｃｙｃｌａｓｅ（ＡＯＣ）ｉｓａｋｅｙｅｎｚｙｍｅｉｎｔｈｅｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｊａｓｍｏｎｉｃａｃｉｄａｎｄｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅ
第４９卷第１２期
２０１３年１２月
ｄｏｉ：１０．１１７０７／ｊ．１００１－７４８８．２０１３１２１１
林
业
科
学
Ｖｏ１．４９．Ｎｏ Байду номын сангаас１２Ｄｅｃ．，２０１３
能被机械伤所诱导，而且能被外源激素ＭｅＪＡ、ＳＡ处理所诱导。结果暗示ＭｄＡＯＣ１基因可能参与苹果对生物或非生
物胁迫的防御反应。
关键词：苹果；ＡＯＣ基因；茉莉酸；基因克隆；基因表达中图分类号：￥７１８．４６文献标识码：Ａ文章编号：１００１— ７４８８（２０１３）１２— ００７３— ０８

苹果谷胱甘肽还原酶cDNA片段的克隆及表达分析

苹果谷胱甘肽还原酶cDNA片段的克隆及表达分析师守国;梁东;马锋旺;张军科【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2007(016)006【摘要】从嘎啦苹果叶片中提取分离mRNA,然后根据报道的多种植物谷胱甘肽还原酶保守区设计引物,RT-PCR获得1条长度为594 bp的条带,回收该条带并进行克隆,蓝白斑筛选,得到阳性克隆.经过质粒大小比较和PCR验证序列测定和分析发现,该序列与嘎啦苹果果实序列同源性为97%,与其他植物的相似性也达85%.该片断编码130个氨基酸,推导的氨基酸序列与其他植物同源性高达75%～82%.【总页数】5页(P97-101)【作者】师守国;梁东;马锋旺;张军科【作者单位】西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌,712100【正文语种】中文【中图分类】S634【相关文献】1.柠条锦鸡儿抗坏血酸过氧化物酶基因(CkAPX)和谷胱甘肽还原酶基因(CkGR)cDNA片段的克隆及表达分析 [J], 康太;武宏豆;逯佰艳;龙晓刚;龚春梅;白娟2.枇杷果实蔗糖磷酸合酶基因cDNA片段的克隆及表达分析 [J], 倪照君;高志红;顾林平;章镇;黄蕾芳;王秀云3.黄鳝性逆转过程中Gsdf基因cDNA片段的克隆和表达分析 [J], 潘丽莎;荣萍;吴昊伟;王倩;曲宪成4.多枝赖草谷胱甘肽还原酶cDNA片段的克隆与分析 [J], 史仁玖;赵茂林;杨清5.甜菜夜蛾雄蛾触角内2个细胞色素P450 cDNA片段的克隆与组织表达分析 [J], 邵刚锋;董双林;贺鹏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

一个苹果 β-微管蛋白基因及其启动子序列特征分析

一个苹果β-微管蛋白基因及其启动子序列特征分析张海月;肖玉雄;田义轲;王彩虹;杨绍兰;李昱;李玉琪【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2018(033)003【摘要】为了探讨来自苹果的β-微管蛋白基因家族成员之一(转录本号:MDP0000749824.1)对茎生长的影响,以普通型苹果品种烟富3号和柱型苹果品种舞姿的茎尖为材料,克隆到了该基因的编码序列,该序列全长1332 bp,编码443个氨基酸.DNAMAN比对结果表明,烟富3号和舞姿上该基因的编码序列完全一致.以舞姿及烟富3号的DNA为模板,用启动子特异性引物PCR扩增后,均获得一段1661 bp的核苷酸序列,二者有6处碱基差异.启动子序列分析发现,其中具有赤霉素、脱落酸、茉莉酸甲酯和水杨酸等激素响应元件.构建Cam35S-MDP0000749824-GFP重组载体,在烟草叶片中完成瞬时表达,激光共聚焦显微镜观察结果表明,MDP0000749824.1编码蛋白位于细胞膜和微管上.以普通型苹果品种烟富3号和柱型苹果品种舞姿的茎尖组织为试材,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析表明,该基因在柱型苹果舞姿茎尖中的转录水平显著低于普通型的烟富3号.因此,推测该基因的表达水平可能受激素调控的作用,进而对茎的伸长生长造成影响.【总页数】8页(P78-85)【作者】张海月;肖玉雄;田义轲;王彩虹;杨绍兰;李昱;李玉琪【作者单位】青岛农业大学园艺学院,青岛市园艺植物遗传改良与育种重点实验室,山东青岛 266109;青岛农业大学园艺学院,青岛市园艺植物遗传改良与育种重点实验室,山东青岛 266109;青岛农业大学园艺学院,青岛市园艺植物遗传改良与育种重点实验室,山东青岛 266109;青岛农业大学园艺学院,青岛市园艺植物遗传改良与育种重点实验室,山东青岛 266109;青岛农业大学园艺学院,青岛市园艺植物遗传改良与育种重点实验室,山东青岛 266109;青岛农业大学园艺学院,青岛市园艺植物遗传改良与育种重点实验室,山东青岛 266109;青岛农业大学园艺学院,青岛市园艺植物遗传改良与育种重点实验室,山东青岛 266109【正文语种】中文【中图分类】S661.03;Q78【相关文献】1.海岛棉一个受体类似蛋白基因Gbvdr3的启动子特征分析 [J], 任永哲;杨郁文;王荣富;陈天子;张保龙2.酵母核糖体蛋白基因启动子序列的特征 [J], 李慧敏;张静3.猪精浆蛋白基因PSP-Ⅰ和PSP-Ⅱ启动子序列克隆及生物信息学分析 [J], 周辉云;李庆平;吴晗;何庆玲;宋成义;陈国宏4.家鼠的核糖核蛋白基因中内含子序列间成环匹配特征分析 [J], 杨萨如拉; 李瑞芳; 冯雪5.水稻白叶枯病菌hrpF启动子序列调控的绿色荧光蛋白基因表达体系的构建 [J], 张文蔚;刘莉;付月灵;简桂良;齐放军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高等植物赤霉素20-氧化酶基因的克隆、表达及其调控技术的研究进展

高等植物赤霉素20-氧化酶基因的克隆、表达及其调控技术的研究进展石海燕;张玉星【摘要】The molecular characteristics of GA 20-oxidase genes were revealed, gibberellin content in rnplant body was regulated by using transgenic technology to provide a new train of thought for breed rnimprovement. The cloning, expression and regulation of GA 20-oxidase genes and its application in plant rngenetic engineering were reviewed in this paper.%揭示赤霉素20-氧化酶基因的分子特征,通过转基因技术调控植物体内活性赤霉素的含量,可为改良品种提供新的思路.从赤霉素20-氧化酶基因的克隆、表达调控及其在植物基因工程中的应用等方面进行了综述.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2011(039)004【总页数】4页(P19-22)【关键词】赤霉素20-氧化酶;基因克隆;表达调控;高等植物【作者】石海燕;张玉星【作者单位】河北农业大学,园艺学院,河北,保定,071001;河北农业大学,园艺学院,河北,保定,071001【正文语种】中文【中图分类】S184赤霉素(gibberellins，GAs)是一种重要的植物激素，共有136种，但只有部分具有生物活性[1]，这些有生物活性的赤霉素对高等植物整个生命周期的生长发育起关键作用[2]。

赤霉素的生物合成过程可分为3步：第1步在质体中进行。

由牻牛儿牻牛儿焦磷酸(geranylgeranyl pyrophosphate，GGPP)在古巴焦磷酸合成酶(copal pyrophosphate synthase，CPS)和内根-贝壳杉烯合成酶(ent-kaurene synthase，KS)催化下环化为赤霉素的前身内根-贝壳杉烯(ent-kaurene)。

山定子抗苹果褐斑病菌侵染过程中 DNA ladder 与类 caspases 活性的检测

山定子抗苹果褐斑病菌侵染过程中 DNA ladder 与类caspases 活性的检测范涛;任斌;韩青梅;黄丽丽【摘要】Detached leaves of Malus baccata and Malus domestica cv .Fuji were inoculated with conidia suspension of Diplocarpon mali .Samples were harvested one day after inoculation (dai) ,3 dai and 5dai ,respectively .DNA of the samples was extracted for detection of DNA ladder .Gross proteins of the samples were extracted for detection of caspase-like activities using special fluorescent substrate .DNA ladder and caspase-like activities were examined to explain the re-lationship between programmed cell death (PCD ) and resistance of M . baccata infected by D . mali . The results showed that DNA ladder was barely detected in M . baccata 1 dai ,3 dai or 5 dai .Activities of YVADase ,DEVDase ,I-ETDase and VEIDase in leaves of M . baccata were shown to have no variations 1 dai and 3 dai ,while became decreased 5 dai to about 30% of those 1dai ,which was significantly lower than those of the control group .This study showed that DNA ladder was not generated in M . baccata during the infection of D . mali with the accompany of declining caspase-like activities .%接种褐斑病菌分生孢子悬浮液于山定子与富士苹果叶片，接种后1、3d和5d取样，提取DNA，检测DNA ladder；提取样品粗蛋白，用特异性荧光底物检测粗蛋白中类caspase活性，探索山定子受褐斑病菌侵染过程中引起的细胞程序性死亡（PCD ）与抗性的关系，检测DNA ladder和类caspases活性变化的规律。

赤霉素及其功能类似物与赤霉素受体的研究进展

赤霉素及其功能类似物与赤霉素受体的研究进展李冬玲;段红霞;刘鸿晨;王珊珊;彭炜;杨新玲【期刊名称】《农药学学报》【年(卷),期】2013(15)6【摘要】赤霉素是一类以贝壳杉烯为骨架的植物激素,现已鉴定出136种赤霉素结构,但仅有少部分具有调节植物生长和发育的生理功能。

近年来,赤霉素受体的研究取得了重大突破,尤其是最近成功鉴定了拟南芥Arabidopsis thaliana中GA3/GA4-GID1A-DELLA复合物的晶体结构,这为基于受体蛋白结构进行新型赤霉素功能类似物的生物合理设计奠定了重要基础。

主要针对赤霉素及其功能类似物的化学结构与合成、赤霉素受体蛋白的结构特征及其与赤霉素类化合物分子间的相互识别规律进行归纳和总结,以期能够为以生物靶标蛋白为导向,开发新型骨架的赤霉素功能类似物提供参考。

【总页数】8页(P601-608)【关键词】赤霉素;赤霉素功能类似物;赤霉素受体;分子识别机制【作者】李冬玲;段红霞;刘鸿晨;王珊珊;彭炜;杨新玲【作者单位】中国农业大学理学院应用化学系【正文语种】中文【中图分类】S482.8【相关文献】1.百子莲赤霉素受体基因ApGID1全长的克隆及功能分析 [J], 岳建华;张荻;申晓辉2.赤霉素的代谢途径及其受体GID1的功能研究进展 [J], 齐蒙;李国瑞;黄凤兰;陈永胜3.植物赤霉素受体GID1基因的分析 [J], 唐文芳;徐升胜;龙雯虹4.基于分子对接研究甜菊醇、异甜菊醇对赤霉素受体GID1的作用机制 [J], 张军;王杭;于宁康;张珂;韩文龙5.一种赤霉素的功能类似物——苯邻二甲酰亚胺(phthalimide) [J], 李伟强;刘小京;山口信次郎因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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Ｇｉｂｒｌｎ３ｏｉａｅｂｅｅｌ－ｘｄｓｌｉ
Ｚａｕｊｎ，ｏｇＺｎｙｎＹａｚｏｇＳｎｏｇｉｈｏｉＴｎｏｇｏｇ，ｕＨｉｎｕｎｌＨｕｈ，Ｙｎ
（ｉｇａｎｖｒｔ，ｉｎｙｎｕｅ４１５；ｈｎｇｉｌｒｌｎｖｒｔ，ｅｉｇ１０９ａｆｎＵｉｓｙＸａｇａｇｂｉ４０３ＣｉａｒｕｔａＵｉｓｙＢｉｎ０１３ＸｎｅｉＨＡｃｕｅｉｊ）
用染色体步移法列，ＰＡＡＲＣＧｏｌ用ＬＮＴＣＥ启动子分析软件分
析此启动子序列，并把其构建到载体上，转化入根癌农杆菌中初步验证了其功能。获得一个７４ｂ５ｐ的
ｔｅｂｓｌｍｅｔ：ＴＡ— ｏ，ＣｈａｉｅｅｎｓＡＴｂｘＡＡＴｂｘａｄｏｈｒｉｄｃｄｅｅｎｓｉｈ，ｇｂｅｅｌ，ｅｔｙｅｅａｄｃ — ｏｎｔｅｎｕｅｌｍｅｔ：ｌｔｉｂｒｌｎｎｈｌｎｎｇｉ
中’ 亏通揠２１，８１）４－５圈荩０２２（０：６１０１
ＣｈｎｅｅＡｇｉｕｔｒｌｉｎｃｉｓｒｃｌｕａｅｅＢｕｌｅｉＳｃｌｔｎ
苹果赤霉素３氧化酶ＭｄＡｏ１启动子区一ｌＧ３ｘ）（的克隆及序列分析
ｂＬｙＰＡＮＴＣＡＲＥ．ｈｅｕｎｅｗａｎｅｔｄｉｔｈｅｔｒａｄｔａｓｒｄｉｔｇｏａｔｒｍｏｖｒｙｔｅＴｅｓｑｅｃｓｉｓｒｎｏｔｅｖｃｏｎｎｆｍｅｏａｒｂｃｅｉｔｅｉｅｒｏｎｕｆｈｆｎｔｎｐｅｉｎｒｌ．ｈｕｃｉｒｌｏｍｉａｉＴｅＤＮＡｓｑｅｃｆ７４ｂｓａｌｉｄＴｅＭｄＡ３ｘｅｅｐｏｔｒｃｎａｎｄｙｅｕｎｅｏ５ｐｗａｍｐｉｅ．ｈＧｏｌｇｎｒｍｏｅｏｔｉｅｆ
ＤＡ序列，Ｎ分析此序列发现有ＣＡｂｘＴＴｂｘ赤霉素、乙烯、落酸等顺式反应元件。把此序ＡＴｏ、ＡＡｏ、光、脱列构建到ｐＡＩ８载体上，ＣＭＢＡ１１３并把此质粒命名为ｐ３１Ａｏｌ。把ｐ３１Ａｏｌ转化入衣杆１８一３ｘｐＧ１８．３ｘｐＧ菌ＥＨＡ１５中，用Ｇ０利ＵＳ染色液染色，杆茵呈蓝色。获得了ＭｄＡ３ｘ的上游序列，农Ｇｏｌ此序列上含有与
．
ＡｂｔａｔｈｉｗａｏｓｕｙｔｅｔａｓｒｐｉｎｒｇｌｔｎｍｅｈｎｓｏｄＡ３ｘｅｅｂｔｄｉｇｔｅｓｒｃ：ＴｅａｍｓｔｔｄｈｒｎｃｔｅｕａｉｃａｉｍｆＭＧｏｌｇｎｙｓｕｙｎｈｉｏｏ
ａｓｉｉａｉｅｐｎｉｅｅｅｎｓＩｒｅｏｖｒｙｔｅｆｎｔｎｏｈｅｕｎｅｈｂｃｓｃｄｒｓｏｓｖｌｍｅｔ．ｎｏｄｒｔｅｆｈｕｃｉｆｔｅｓｑｅｃ，ｔｅＤＮＡｆｇｎｓｗａｃｉｏｒｍｅｔａｓ
ｐｏｔｒｒｇｎｏＧ３ｘｅｅＴｅｕｓｅｍｓｑｅｃｆ‘ ｕｉＭａｕ３１ｅｔａＢｒｈＦｊ’ ｒｍｏｅｉｆＭｄＡｏｌｇｎ．ｈｐｔａｅｕｎｅｏＦｊｅｏｒ ’（ｌｓ× ０７ｉｏｋ．‘ ｕｉ）１ｓｃ
ＭｄＧＡ３ｘｓａｔｉｅｙＧｅｏａｋｎｉｄｎｎｈｒｄＰＲ．ｈｕｃｉｎｌｌｍｅｔｗｒｎｌｚｄｏｗａｔｎｄｂｎｍｅＷｌｉｇｂｎｉｇａｃｏｅＣＴｅｆｎｔａｅｎｓｅｅａａｙｅｌａｏｅ
赵慧君 ‘仝宗勇，海忠孙永林，余，
（樊学院，襄湖北襄阳４１５；中国农业大学，４０３北京１０９）０１３
摘要：通过研究苹果赤霉素３氧化酶ｌＧ３ｘ）．（ＭｄＡｏ１的启动子来探索ＭｄＡｏｌＧ３ｘ的转录调控机制。采
ＧＡ调节相关的顺式反应元件，且初步证明此序列具有启动子活性。并
关键词：ＧＡ３ｘ；Ｍｄｏｌ启动子区；隆；列分析克序中图分类号：８Ｑ７５文献标志码：Ａ论文编号：０１３２２１．３４
ＣｏｉｇａｄＳｑｅｃｎｌｓｆｒｍｏｅｅｉｎｏｐｌ（ａｕｄｍｅｔ）ｌｎｎｎｅｕｎｅＡａｙｉｏｏｔｒＲｇｏｆｐｅＭｌｓｅｓｃｓＰＡｘｉ