亚甲基蓝——精选推荐
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
亚甲基蓝(MB)对吸附在CF上的葡萄糖氧化酶的稳定性,这是一套拥有一个随机的三维结构微碳纤维微电极(直径约7μm)。
通过循环伏安法在开机启动真空泵使用HQ作为电子转移载体。
当对被吸附的解决方案GOx-dissolved[例如:纯净水1,10和100mM的磷酸盐缓冲(pH值6.8),100mMNACL和KCL],被吸附的GOX 几乎没有明显生物电催化活性,很可能主要由于吸附感应不利的构象变化或不利的酶表面与活性部位的出场基质和介体引起的。
相反,当GOX被混合的GOX和MB 吸附,被吸附的GOX表现出足够的HQ介体生物电催化活性。
对于吸附溶液,较低的离子强度的溶液(例如,纯净水及1mM的磷酸盐缓冲,pH值6.8)似乎更有可能获得更大的活动。
同时 GOX和MB的混合溶液的吸附比逐步的吸附更有效。
MB 和GOX在水溶液中的约束力相互作用已经被紫外可见光谱和圆二色谱证实。
2012电化学的社会。
[DOI: 10.1149/2.jes036205]保留所有权利。
对于高度发展的功能性生物传感器、生物反应器、生物燃料电池,建立简单、方便和稳定的酶的固定化策略是重要的研究课题支持矩阵。
在各种酶的固定化方法(例如,物理吸附法、共价交联改性,在表面,并且残留在凝胶,小泡,多孔材料),物理吸附是一个最简单的方法来进行,可以在温和的条件下进行。
总之,蛋白质吸附是一个复杂的过程,需要范德华、氢键、疏水相互作用和静电相互作用,吸附过程中含有丰富的蛋白质。
例如,表面吸附蛋白质要尽量放松,例如,优化与表面相互作用。
这个松弛过程往往带来一定程度的表面蛋白质分子传播,涉及结构重组蛋白质的构象变化。
1即在某些情况下,各种蛋白质之间的相互作用和基质的表面的构象分析和蛋白质结构的改变可能导致蛋白质的功能变化。
1-6对酶,这些类型的不利的构象变化通常导致损失或减少吸附酶的催化活性(表面诱发变性或是吸附诱发变性)。
7,8
例如,相比而言,亲水性表面吸收剂比疏水性表面吸收剂能够引起更大范围的结构变化。
2,4,5再举一个例子,蛋白质构象的变化取决于石墨纳米粒子的大小和弯曲度。
3例如,据报道,单价阳离子(钠、钾、和锂)与葡萄糖氧化酶对三级结构的影响。
9在这篇报告中,提出了有阳离子捆绑的GOX和拥有一个更紧凑的结构的原酶相比,它所提供的耐热性和尿素的变性诱导。
同样,据报道,由于离子和
疏水特性的蛋白质和ANS的结合使ANS对牛血清白蛋白和球蛋白造成广泛的分子凝结.10在这种情况下,ANS徒作为蛋白质构象紧缩的中介。
但是这种配体结合的方法还没有被用来研究进行提高稳定性的不利的吸附诱导的蛋白质构象变化以及生物传感器、生物反应器、生物燃料电池的应用。
MB是一种水溶性多核芳烃染料(典型的服用吩噻嗪染料),它在不同电极表面上电催化活性都很高。
MB的化学结构被显示在图1中。
一些吸附在石墨电极上的吩噻嗪的染料能够显著降低NADH氧化潜力。
33此外,MB是众所周知的,作为电子传递一些氧化还原酶34,并成功地应用于以电化学酶为基础的生物传感器34,35和酶燃料电池。
22-24MB和某些蛋白质互相反应。
36-38MB作为蛋白质的稳定剂应用于电化学(例如:生物传感器和生物燃料电池)目前还未被报导。
在本研究中,我们发现,在GOX和MB的混合溶液中,GOX被吸附在CF表面,被吸附的GOX对HQ介导展出足够的生物催化活性,而没有MB的吸附溶液,几乎没有明显生物催化活性,可能是由于不利的构象变化或不利的酶活性中心定位与基底,无法引起强烈CF表面互动。
紫外光谱和CD光谱显示GOX和MB的混合溶液的相互作用。
揭示,第一次对GOX和MB的结合产生的至关重要的作用对HQ介体CF 表面被吸附的GOX的生物活性。