6 维生素C含量的测定

五、注意事项
1. Vc不稳定，在空气中易被氧化，研磨时，尽可能要快，
以减少Vc的氧化。
2. 2% 草酸可以有效抑制Vc氧化酶活性。若用样品含有大量
Fe2+，可用8%醋酸溶液提取，因在2%草酸中Fe2+ 仍可以
还原2,6-D, 改用8%醋酸溶液提取，Fe2+不会很快与染料 起作用。 3.维生素C提取时要避光、避免与铜铁接触，以免Vc氧化。
1、为什么在测定维生素C的同时要进行 2,6-D溶液的标定？ 2、为了保证抗坏血酸含量测定准确，
应注意些什么？
4. 样品提取液定容时若泡沫太多，可加几滴乙醚或辛
酸、丁醇消除泡沫后再定容。
5. 当样品本身带有颜色时，可以用白陶土脱色。
6. 滴定时间一般不超过2分钟，滴定终点以淡红色存
在30秒为准。因为样品中某些杂质亦能还原2,6-D，
但速度较Vc慢，假如滴定速度过慢，其它物质也会
还原2,6-D。
六、思考题
滴定管活塞操作
滴定操作
2.6-二氯酚靛酚滴定法
维生素C: 强的还原性
将染料2.6-D 还原成无色的 2.6-D
2.6-二氯酚靛酚:强的氧化性
中性/碱性: 蓝色 酸性:红色
滴定操作
Cl |
O=
| Cl
O =C
| HO— C ‖ HO— C | H— C | HO— CH | CH2OH
标准Vc 样品提取液 2, 6-D滴定值
0 0 y1
10 0 V
10 0Hale Waihona Puke Baidu
0 10 y0
0 10
四、结果计算
抗坏血酸含量 （mg/100g 鲜重） =
从上述标定求出
（y0-y1）×A
100
× × 100
样品重(g)
10

y1---滴定空白所用染料ml数


y0---滴定样品所用染料ml数
A---1mL染料溶液相当的抗坏血酸的mg数
=N
—
—
O-
氧化型2.6-二氯酚靛酚（蓝色） H+ OH-
还原型 抗坏血酸
O
Cl |
O=
| Cl
=N
—
—
OH
氧化型2.6-二氯酚靛酚 （红色）
O =C
脱氢 抗坏血酸
| O=C | O=C | H— C | HO— CH | CH2OH
Cl |
O
HO —
| Cl
—
N
—
—
| H 还原型2.6-二氯酚靛酚
（无色）
OH
三、操作步骤
1. 样品提取
5g 新鲜蔬菜
为什么？
快速匀浆？
少量 2%草酸
充分研磨成匀浆
石英砂
用2% 草酸洗入容量瓶, 并定容至100 mL
干燥滤纸过滤
2.染料标定及样品中Vc测定
取5个50 mL干燥洁净的三角瓶，编号,按下表操作:
试剂（ml） 2%草酸 空白 10 染料 染料标 样品 标定1 定2 测定1 0 0 0 样品 测定2 0
实验六 维生素C含量的测定
（2, 6-D滴定法）
一、目的意义
人类营养中最重要的维生素之一。缺乏时引
起坏血病。
果蔬品质的重要指标之一。
不同栽培条件，不同成熟度都可以影响水果、
蔬菜中维生素C的含量。 水果、蔬菜保鲜贮藏必须测定维生素C含量， 了解果蔬品质量的高低。
测定方法：
2.6-二氯酚靛酚滴定法