细菌药物敏感性试验及标准化0课件

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阳性菌有抗菌活性。(表 )
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5.链阳性素(streptogranin) RP59500是一种由两个半合成的链阳性菌素组 成,即由链阳性菌素B(喹奴普宁,quinupristim) 和链阳性菌素A(达福普宁,dalfopristim)以30: 70比例组成的化合物,可治疗各种耐药菌所引起 的重症感染,包括MRSA菌血症、肠球菌性菌血 症,不良反应少,可作为万古霉素的替代药物, 用于治疗不能耐受万古霉素治疗的病人。

冷却至50摄氏度左右调节pH至7.2-7.4 (加添加剂)
制板,厚度为4mm,水平
冷却至室温使用或储存
注意事项: 1、全程无菌操作 2、湿度控制
3、胸腺嘧啶核苷或胸腺嘧啶的影响
4、培养基用水
5、质控
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培养基
Mueller-Hinton琼脂培养基(非苛氧菌) HTM培养基:其组成成分如下:M-H琼脂粉;15µɡ/ml牛羟基血红素;
头孢噻肟( cefotaxime)对肠杆菌科细菌的作 用优于其他第三代品种,对酶稳定,毒性低;但在 体内代谢,抗菌作用减弱,严重感染用药量需高; 此外,对绿脓作用较差。
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头孢他啶(ceftazidime)是头孢菌素中对 绿脓杆菌作用最优的品种,对不动杆菌属、葡 萄糖不发酵革兰阴性杆菌也有一定作用;毒性 低,几无肾毒性;对β-内酰胺酶稳定;对免疫 功能不全者感染具有良好疗效。
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克拉维酸(clavulanic acid)和舒巴坦 (sulbactam)他唑巴坦三种β-内酰胺类的抑制 剂,与青霉素或头孢菌素类联合应用时,可保 护β-内酰胺类药物不被酶破坏,扩大临床应用 适应症。
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克拉维酸+替卡西林
酶抑制剂
舒巴坦+头孢哌酮
PH7.2-7.4;NCCLS不推荐用M-H巧克力培养基作嗜血杆菌药敏试验。(嗜 血杆菌) GC琼脂.此补充品(1升水中加入1.1g L-胱氨酸, 0.03g 盐酸鸟嘌呤, 3mg盐酸硫 胺,13mg对鞍基苯甲酸,0.01g维生素B12,0.1g辅羧酶,0.25gNAD,1.0g腺嘌 呤,10gL-谷氨酰胺,100g葡萄糖,和0.2g硝酸铁)是在GC琼脂高压灭菌后加入 的.(淋病奈瑟菌) 5-7%脱纤维羊血的M-H琼脂(链球菌)
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第二代头孢菌素的抗菌谱比头孢唑 林(cefazolin)等第一代头孢为广。对耐 药金葡菌等革兰阳性菌的抗菌作用稍次 于第一代,但对革兰阴性菌的作用更强, 头孢呋辛(cefuroxime)是第二代头孢中 较好的品种。
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第三代头孢菌素的主要特点是对各种革兰阴性 杆菌包括绿脓杆菌的抗菌作用突出,肾毒性低,对 β-内酰胺酶稳定。
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氨曲南(aztreonam)属单环β-内酰胺类。 其抗菌谱狭窄,对肠杆菌科细菌、气单胞菌属、 流感杆菌、淋球菌等具相当强的抗菌作用。但不 动杆菌属、产碱杆菌和各种厌氧菌对本品的敏感 性差。
主要用于严重的革兰阴性菌感染,对伴有粒 细胞减少和脓毒症的癌症患者感染也可获良好的 疗效。
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试验平板的接种
接种物浊度调整好后,最好在15分钟内接种,用无菌 棉拭子蘸取调好的菌液,在液面上方管壁处旋转并用力挤 压几次,挤出多余的接种菌液。用棉拭子在无菌的稍干燥 的M-H琼脂表面划线接种,再重复操作两次,每次将平 板转动约60度,保证接种物均匀分布,最后用棉拭子涂 抹琼脂的边缘。在加含药的纸片之前,可以将培养皿盖 半开3-5分钟,但不超过15分钟,促使表面过多的水分被 吸收。
及替考拉宁高。 雷莫拉宁
雷莫拉宁(ramoplanin)属于缩酚酞类 (depsipeptide)抗生素,对艰难梭菌、耐万古 肠球菌(VRE)和MRSA有效。将成为抗耐
药菌的有效药物。
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阳离子多肽 与其它抗菌药物相比,其体外抗菌活性几乎无 区别,但其对一些耐药菌,如绿脓杆菌、不动杆 菌、嗜麦芽窄食单胞菌、MRSA、VRE、产ESBLs 的大肠菌和多重耐药革兰阴性杆菌的抗菌活性相 比,可与目前最好的抗菌药物相媲美。其MIC为
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第四代头孢菌素主要特点抗菌谱广,如头孢 吡肟,对肠杆菌科细菌的抗菌活性要强于头孢 他啶,对铜绿假单胞菌活性要优于头孢噻肟, 但略低于头孢他啶。对革兰阳性球菌,特别是 其中的耐青霉素肺炎链球菌的杀菌活性较第三 代头孢菌素明显增强。但对厌氧菌和甲氧西林 耐药的金葡菌(MRSA)作用仍不理想。
类:氟康唑(fluconazole)不仅抗真菌谱广, 而且口服吸收迅速而完全,血药浓度高,蛋白结合 率低(12%),组织分布好,可透过血脑屏障。临床 上已用于各种真菌深部感染,包括败血症、脑膜炎 等可获良好疗效。
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达托霉素 为脂肽类抗生素,其抗菌谱与万古霉素和替考 拉宁相似,但对MRSA有效,主要作用机制是 扰乱细胞膜对氨基酸的转运,从而阻碍细菌细 胞壁肽聚糖的合成,以及改变细胞膜的性质, 为浓度依赖型抗生素,其抗菌作用比万古霉素
操作方法
纸片扩散法(Kindy-Bauer, KB法)
原理 培养基的制备及注意事项
接种物的制备及接种 贴药敏纸片 孵育 判读
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K-B法原理
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按说明书配制一定

浓度的培养基原液

高压灭菌
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课间休息
• 感恩的心.mp3 • 感恩.ppt
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细菌药物敏感性试验 及其标准化
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方法分类
• 纸片扩散法(耐药监测常用方法) • 肉汤(宏量和微量)和琼脂稀释法 • Etest法 • 仪器法
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万古霉素、去甲万古霉素的抗菌谱与药理特点 相似,后者的作用较万古霉素略强。
主要对革兰阳性菌有强大抗菌活性。特别耐甲 氧西林金葡菌(MRSA)与表葡菌(MRSE),及肠 球菌属对本品非常敏感,几无耐药菌株。本品有明 显的耳、肾毒性,轻症感染者不宜选用;
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临床常用稳可信具有独特的作用机制: (1)抑制细菌细胞壁的合成; (2)损害细菌细胞膜,改变细胞膜通透性,破坏其 屏障作用; (3)阻碍细菌RNA的合成影响遗传信息的复制。
甲氧苄啶
酮康唑
夫西地酸
新生霉素
杆菌肽
莫比罗星
香豆霉素
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抗菌药物品种
1、β-内酰胺类 2、氨基糖甙类 3、喹诺酮类 4、大环内酯类 5、多肽类 6、抗真菌类
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β内酰胺类抗生素包括青霉素类、头孢霉素和 不典型的β内酰胺类抗生素,主要抑制粘肽合成的 第3步,阻止粘肽链的交叉连接,使细菌无法形成 坚韧的细胞壁。
他唑巴坦+哌拉西林
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氨苄西林—舒巴坦(unasyn,优力新)主要 用于产酶的流感杆菌、淋球菌、卡他布拉汉菌、 肠杆菌科细菌、金葡菌、表葡菌、肠球菌属、 脆弱类杆菌等感染。该静脉注射与肌注制剂在 国内临床应用,取得良好疗效。
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碳青霉烯类抗生素:亚胺培南(imipenem )。 抗菌谱极广,抗菌活性甚强,对革兰阴性菌和阳性 菌、需氧菌和厌氧菌,以及多重耐药或产β-内酰胺 酶的细菌皆有良好的抗菌作用,其毒性低。
• 为新药的研究和评估提供有价值的信息。
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药物敏感试验规则
• 我国主要以临床实验室标准委员会(CLSI)NCCLS2007英文版-M100S17E.pdf的规则为规则
• 德国、欧洲标准
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抗生素的作用机制
根据主要作用靶位的不同,抗菌药物 的作用机制可分为; 干扰细菌细胞壁的合成,使细菌不能生 长、繁殖; 损伤细菌细胞膜,破坏其屏障作用; 影响细菌细胞蛋白质的合成,使细菌丧失 生长、繁殖的物质基础; 影响核酸的代谢,阻碍遗传信息的复制; 其他。
适用于严重的革兰阴性菌感染、混合感染和免 疫功能缺陷者感染。
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亚胺培南的独特结构
特异的(反式结构)羟乙基侧链β-内酰胺环, 此侧链正好遮挡了细菌的β内酰胺酶结合点,细菌 产生的多种酶不能与内酰胺环结合,因此不被分 解。
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氨基糖甙类
阿米卡星的抗菌谱与庆大霉素相似,其 抗菌活性优于卡那霉素,但次于庆大霉素, 其肾毒性与耳蜗及前庭功能损害与庆大霉素 无明显差别。
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表1抗菌药物的主要作用部位
细胞壁合成 细胞膜渗透性 Β-内酰胺类 多粘菌素B
细菌蛋白质合 成
四环素
核酸合成 叶酸合成 利福霉素类 磺胺类
万古霉素 磷霉素 环丝氨酸
两性霉素B 制霉菌素 吡咯类 米糠唑
氯霉素 大环内脂类 林可霉素类 氨基糖甙类
灰黄霉素 喹诺酮类 甲硝唑 呋喃类
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大环内大酯环类内酯类抗生素
阿齐霉素(azithromycin)、克拉霉素 (clarithromycin)抗菌作用不如红霉素,但半衰期较长, 每日只需服药2次,除一般革兰阳性菌感染外,可用于支 原体、军团菌、衣原体等引起的特殊感染。
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多肽多类肽类抗生素
抗生素及抗生素 敏感试验
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药敏试验的意义
• 查出耐药,减少治疗错误,便于医生选择个体 化疗方案、节省费用
• 进行耐药监测,为医院感染控制部门提供防治依 据,为经验用药提供可靠依据。2006细菌数据xiugai.xls
• 利用耐药监测结果控制抗菌药物应用,减少耐 药菌株的出现,延长新药使用寿命。
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非典型β-内酰胺类
主要包括头霉素、头孢烯类、 碳青霉烯类、单环β-内酰胺类和β内酰胺酶抑制剂等
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头 孢 西 丁 ( cefoxitin ) 并 非 头 孢 菌 素 , 实 属头霉素类。其抗菌谱与第二代头孢相似,但 对包括脆弱类杆菌在内的各种厌氧菌具良好的 抗菌活性;毒性低;对酶非常稳定。适用于腹 部外科、妇产科、口腔科等的需氧菌与厌氧菌 的混合感染。
1-8μg/ml,且耐药菌与敏感菌无区别。 恶唑烷酮类抗菌药物
20世纪80年代后期,杜邦公司开发了恶唑烷酮 类抗菌药物,其后普强公司合成了两个新的化合
物,即羟哌恶酮(eperezolid)和吗啉恶酮 (linezolid),具有很好的治疗效果,吗啉恶酮 于2000年上市,吗啉恶酮和吗啉恶酮对许多革兰
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(5)革兰阴性杆菌骨髓炎、关节炎; (6)革兰阴性杆菌所致其他感染,如皮肤软组 织 感染、五官与伤口感染等; (7)联合用药用于不能耐受万古霉素的耐甲氧 西林金葡菌感染。
亦用于沙眼衣原体、支原体、耐药结核杆 菌和其他分支杆菌感染等胞内感染。
临床广泛应用后必然导致耐药性的提高, 应引起高度重视。
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奈替米星的抗菌作用与庆大霉素相似;对各 种氨基糖甙类钝化酶较稳定,但不如阿米卡星, 故耐庆大霉素菌株的作用不如阿米卡星。其耳、 肾较庆大霉素为低。主要用于严重的革兰阴性杆
菌感染。
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氟喹诺酮类
抗菌谱广,对革兰阴性杆菌包括绿脓杆菌均 具良好抗菌活性,对革兰阳性菌也有一定作用, 对临床分类的耐药菌株呈一抗菌活性。
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培养基厚度
• 4mm 是影响KB法准确性最重要的因素
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接种物的制备
1.直接菌落悬液法多用,广泛 2.生长法少用,局限性 3.注意事项:
嗜血杆菌、淋球菌配制菌悬液必须采用巧克力培养基上的菌落作直接悬浮 法。菌液浓度应严格要求0.5麦氏单位
口服生物利用度较高,组织分布好,细菌内 穿透力强,适用于细胞内感染。
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第一代:萘啶酸 第二代:氧氟沙星,环丙沙星 第三代:左氟沙星,帕珠沙星 第四代:加替沙星,莫西沙星
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氟喹诺酮类主要适应症为: (1)泌尿系感染:单纯性、复杂性尿路感染、 细菌前列腺炎、淋病等; (2)胃肠道感染:菌痢、旅游者腹泻、胃肠炎 等; (3)耐药菌株所致伤寒及其他沙门菌属感染; (4)呼吸系感染,革兰阴性菌支气管及肺部感 染,鼻咽部耐甲氧西林金葡菌带菌者;
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