组培中的玻璃化与褐变现象

培养材料受其危害（醌类物质抑制其它酶的活性）而慢慢死亡的现象。
（二）造成玻璃化的因素
（2）材料的年龄与取材部位
（2）添加抗氧化剂或其它物质 如：VC、PVP、 AA、牛血清蛋白、 Na2S2O3、NaHSO3 ，活性炭（%）。
增加自然光，光照较弱时，可通过延长时间进行补偿。
（1）基因型（种类和品种）
Ｏ2
二、褐变（褐化）
（二）引起褐变的因素
１. 外植体 （1）基因型（种类和品种） 一般木本植物更容易发生褐变现象。如 红枫、红栌、 鹅掌楸、橡胶树等。但海垦2号橡胶花药褐变较少。
兰科植物中，蝴蝶兰、大花惠兰等易产生褐变。 （2）材料的年龄与取材部位 成龄材料一般比幼龄材料褐变严重。 分化部位一般比分生部位产生的醌类物质多。
玻璃化苗 如，甘蔗培养，6-BA刺激多酚氧化酶活（4）气体：适当的通透性，使用透气性好的封口材料。
（三）克服玻璃化的措施
（1）温度（2）光照（3）湿度（4）气体
褐变：是指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质，使培养基逐渐变成褐色，
二、褐变（褐化）
（二）引起褐变的因素
（3）取材时间与切口大小 生长季节植物体内含有较多的酚类化合物。切口越大， 褐变程度越严重。 2. 培养基的成分 无机盐浓度高时会引起某些外植体褐变。 生长调节物质使用不当时，材料也会褐变。如，甘蔗 培养，6-BA刺激多酚氧化酶活性提高。 3. 培养条件 光照过强，加速褐变。 温度过高，褐变严重。
玻璃化苗与正常苗比较 培养材料受其危害（醌类物质抑制其它酶的活性）而慢慢死亡的现象。
木质素、纤维素↓壁压↓ 吸水↑过分吸水
流水冲洗、低温消毒、预培养。
玻璃化是试管苗的一种生理失调症状，它由多种因素影响与控制。
昼夜变温交替，避免温度过高和温差过大。
（2）温度：适当降低温度
组培中的玻璃化与褐变现象
一、玻璃化
一、玻璃化
（三）克服玻璃化的措施
1. 改良培养基 （1）琼脂、蔗糖 ↑ （2）CTK、GA3↓ （3）NH4+-N、Cl ↓ ，Ca、Mg、Zn、Mn、K、P、 Fe、Cu、NO3—N ↑ （4）添加物质： 间苯三酚/根皮甘/PP333/CCC，活性炭，聚乙烯醇
一、玻璃化
（三）克服玻璃化的措施
2. 改善培养条件 （1）温度 保持适宜温度；昼夜变温交替，避免温度过 高和温差过大。 （2）光照 适当提高光强，延长光照时间；增加自然光， 光照较弱时，可通过延长时间进行补偿。 （3）湿度↓ 降低培养基水势。改善培养容器的通风换气 条件，降低容器内湿度。 （4）气体：适当的通透性，使用透气性好的封口材料。 3. 选择合适的材料部位 避免木质化 4. 控制继代次数。
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《薯类种子种苗生产技术》
组培中的玻璃化与褐变现象
主要内容
一 玻璃化 二 褐变（褐化）
一、玻璃化
（一）玻璃化现象
植物材料进行离体繁殖时，有些组培苗的嫩茎、叶片 出现半透明和水浸状，这种现象称为玻璃化。
一、玻璃化
（一）玻璃化现象
玻璃化是试管苗的一种生理失调症状，它由多种因素 影响与控制。整株矮小肿胀、失绿；叶片皱缩成纵向 卷曲、脆弱易碎；叶表缺少角质层蜡质，没有功能性 气孔，不具有栅栏组织，仅有海绵组织。
玻璃化是试管苗的一种生理失调症状，它由多种因素影响与控制。
（3）湿度↓ 降低培养基水势。
改善培养容器的通风换气条件，降低容器内湿度。
（2）光照 适当提高光强，延长光照时间；
（二）造成玻璃化的因素
褐变：是指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质，使培养基逐渐变成褐色，
二、褐变（褐化）
（三）防止褐变的措施
1. 合理选取外植体材料 （1）基因型：不产生/褐变程度轻的 （2）年龄与部位：幼龄材料、分生部位 （3）时间与切口：生长不旺盛的季节（如冬春季）， 切口宜小。 2. 对外植体进行预处理 流水冲洗、低温消毒、预培养。
二、褐变（褐化）
（三）防止褐变的措施
3. 改进培养基成分 （1）适当降低无机盐浓度与激素水平 （2）添加抗氧化剂或其它物质 如：VC、PVP、 AA、 牛血清蛋白、 Na2S2O3、NaHSO3 ，活性炭（%）。
一、玻璃化
（一）玻璃化现象
组培中的玻璃化现象
机理： 多酚氧化酶
玻璃化是试管苗的一种生理失调症状，它由多种因素影响与控制。
一、玻璃化 叶片皱缩成纵向卷曲、脆弱易碎；
如 红枫、红栌、鹅掌楸、橡胶树等。
（一）玻璃化现象 切口越大，褐变程度越严重。
一般木本植物更容易发生褐变现象。
组培中的玻璃化与褐变现象
二、褐变（褐化）
（一）褐变现象
1. 褐变：是指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶 被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物 质，使培养基逐渐变成褐色，培养材料受其危害（醌 类物质抑制其它酶的活性）而慢慢死亡的现象。
二、褐变（褐化）
（一）褐变现象
2. 机理：
多酚氧化酶
酚类 ————————→醌类（棕褐色）
二、褐变（褐化）
（三）防止褐变的措施
4. 选择合适的培养条件 （1）光照：遮光/暗光培养或预培养，减弱光强 （2）温度：适当降低温度 5. 及时连续继代（转接） 在兰花、无花果、核桃的组织培养中效果尤为明显。 6. 采取特殊的接种方法 如，无菌水中剪切，迅速转接。
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（二）造成玻璃化的因素
玻璃化苗是在芽分化启动后的生长过程，碳、氮代谢 和水分发生生理性异常所引起。其实质是植物细胞分 裂与体积增大的速度超过了干物质生产和积累的速度， 植物只好用水分来充涨体积，从而表现玻璃化。不同 作物种类或品种，玻璃化的发生频率各不相同。
一、玻璃化
（二）造成玻璃化的因素
具体影响因素有： 木质素、纤维素↓壁压↓ 吸水↑过分吸水 1. 培养基成分 （1）琼脂、蔗糖 （2）CTK、GA3 （3）NH4+-N、Cl，Ca、Mg、Zn、Mn、K、P、 Fe、Cu、NO3—N 2. 培养条件 （1）温度（2）光照（3）湿度（4）气体 3. 外植体材料