专题1基因工程-专题复习课件
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为——ACTAG和GATC——。少数限制酶却可识别不止一种 碱ers） 有些来源不同的限制 酶却识别和切割相同的序列，这类限制酶称为同 裂酶。同裂酶产生同样切割，形成同样的末端， 酶切后所得到的DNA片段经连接后所形成重组序列， 仍可能被原来的限制酶所切割。同裂酶之间的性 质有所不同（如对离子强度、反应温度以及对甲 基化碱基的敏感性等方面可能有所差别）。
正确的是 A．染色体和质粒的化学本质都是DNA
( C)
B．染色体和质粒都只存在于原核细胞中
C．染色体和质粒都与生物的遗传有关
D．染色体和质粒都可作为基因工程的常用载体
解析：染色体由DNA和蛋白质构成；原核 生物没有染色体；质粒可以做为基因工程的
载体，而染色体不行。
9、限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特 定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI， HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特 定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端 可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？
黏性末端
G
A ATTC
CT TAA
G
黏性末端
什么叫平末端？
生物A基因片段
生物B基因片段
……GAATTC…… ……GAATTC…………GAATTC…… ……CTTAAG…… ……CTTAAG…………CTTAAG……
同一种 EcoRⅠ 酶切
……G AATTC…… ……G AATT…C………G AATTC… ……CTTAA G…… ……CTTAA …G………CTTAA G…
④注意与细胞膜上载体的区别，两者的化学本质和作用都不 相同。
⑤质粒能自我复制，既可在自身细胞、受体细胞内，也可在 体外。
1、下列关于限制酶的说法正确的是（ B ） A、限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中 很少 B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C、不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键
AUGUGCACGUAGUUA
非编码区 终止子
启动子：位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能 起始mRNA合成的序列。没有启动子，基因就不能转录。
RNA聚合酶:能够识别启动子上的结合位点并与其结合 的一种蛋白质.
终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断， 它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链 上脱离下来，使转录终止。
2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 （D ）
A、能复制
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因 D、它是环状DNA
3.右图为DNA分子结构示意图，对该图的正确描述是
A．④的名称是胞嘧啶脱氧核苷酸
BD
B．解旋酶作用的部位是⑨
C．某限制性核酸内切酶可选择⑨处作为切点
D．DNA连接酶可连接⑩处断裂的化学键
A.2.0、3.0、1.0和0.5
B.2.0、3.0、0.5、0.5和0.5
C.3.0、和3.5
D.2.5和4.0
DNA片段长度
E
B +E
5.0 3.0
2.0 1.5 1.5
H+ E 5.0
1.0 0.5
CD
二、基因工程的基本操作程序
基因工程基本操作的四个步骤 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定
4．下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变
化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、
DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是
(C )
A．①②③④ C．①④②③
B．①②④③ D．①④③②
5．可以用于重组DNA技术的酶是(多选)
A．DNA聚合酶 B．限制性核酸 C．DNA连接酶 D．反转录酶
解析：DNA重组技术会用DNA聚合酶(实现 目的基因的扩增，如PCR)、限制性核酸内切 酶(目的基因的切割和运载体的切割)、DNA 连接酶(目的基因与运载体的连接)、反转录 酶(目的基因的获取)。
① 概念：PCR全称为聚__合__酶__链__式__反__应___，是一项 在生物_体__外_复制特__定__D_N_A_片__段__的核酸合成技术
②原理：_D_N_A_复__制____
不同来源的DNA片段混合
……GAATTC… ……GAATTC…… 将不同种来源的
…
……CTTAAG…… DNA片段连接起来
……CTTAAG…
用同一种…限制性酶处理不同DNA片段，会
形成同样的黏性末端，可进行重组。
……GAATTC…… ……CTTAAG……
EcoRⅠ
一G↓GATCC一 一CCTAG G一
• 同尾酶(Isocaudomers) 有些来源不同的限制 酶，识别及切割序列各不相同，但却能产生出相 同的粘性末端，这类限制酶称为同尾酶。但两种 同尾酶切割形成的DNA片段经连接后所形成的重组 序列，不能被原来的限制酶所识别和切割。EcoRI 和MunI属于同尾酶。
“分子缝合针” —ＤＮＡ连接酶
非编码区
启动子
编码区
编码蛋白质
非编码区
终止子
外显子
内含子
（能编码蛋白质） （不能编码蛋白质）
真核生物基因结构
（2）真核与原核生物基因结构的比较
①相同点：都是由能够编码蛋白质的编码区和具有 调控作用的非编码区。
②不同点：原核细胞基因的编码区是连续的；真 核细胞的编码区是间隔的，不连续的。
外显子：真核细胞基因DNA 中的编码序列，这些序列被 转录成RNA并进而翻译为蛋 白质。 内含子 ：真核细胞基因 DNA中的间插序列，这些序 列被转录成RNA，但随即被 剪除而不翻译。
主要是从原核生物中分离纯化出来的一 种酶 化学本质：蛋白质。
2、特性：
识可别用双于链目DN的A基分因子和的载某种体特的定切的割核苷酸
序列，并且使每一条链中特定部位的两 限制个酶核是苷一酸类之酶间，的而磷不酸是二一酯种键酶断。开。
形成两种末端
黏性末端 平末端
限制酶切割ＤＮＡ分子示意图
GA ATTC CT TAAG
（一）、获取目的基因的常用方法有哪些?
初始目的基因的来源 1. 从生物中直接获取 2. 人工合成
注意：要保持基因的完整性
目的基因的核苷酸序列未知
）含有某种生物不同基因的许多DNA片断， 导入到受体菌的群体中，各个受体因工程的基本操作工具
１. 基因工程的概念
这种技术是在生物体外，通过对 DNA分子进行人工“剪切”和“拼 接”，对生物的基因进行改造和 重新组合，然后导入受体细胞内 进行无性繁殖，使重组基因在受 体细胞内表达，产生出人类所需 要的基因产物。
341、、作结来用果源：：
“分子手术刀” ——限制酶
一.目的基因的概念
主要是指编码蛋白质基因，也可以 是一些具有调控作用的因子。 例如：与生物抗逆性相关的基因，与生物 优良品质相关的基因，药物和保健品相关 的基因，与毒物降解相关的基因，以及与 工业所需要酶相关的基因。
目前被广泛提取使用的目的基因有： 苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因 （抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。
磷酸二 酯键
DNA 聚合酶
脱氧核苷酸
磷酸二 酯键
解旋酶
DNA 分子 碱基对间 的氢键
作用 特点
切割目的基因及载体， 能专一性识别双链DNA 分子的某种特定的核 苷酸序列，并且使每 一条链中特定部位的 两个核苷酸之间的磷 酸二酯键断开
将双链DNA片 段“缝合” 起来，恢复 被限制酶切 开了的两个关信息
如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋因序列时
2.利用PCR扩增目的基因
１.作用：连接磷酸二酯键,而不是氢键。
２.DNA连接酶的种类
E·coliDNA连接酶：连接黏性末端
T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端
3.DNA连接酶的作用部位：
脱氧核苷酸链上相邻的两个脱氧核苷 酸之间的磷酸二酯键
DNA连接酶
DNA连接酶无特异性，其催化DNA片段末端 形成磷酸二脂键。连接情况有两种：一是 催化互补的粘性末端连接，二是催化平末 端连接。只要是相同的粘性末端、平末端 DNA连接酶就能催化连接，而与切割的限制 酶无关。
DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？
连接DNA链
DNA连接酶
双链
DNA聚合酶
单链
连接部位
在两DNA片段之间 形成磷酸二酯键
将单个脱氧核苷 酸加到已存在的 核酸片段上，形 成磷酸二酯键
相同点
都能形成磷酸二酯键
种类 项目
作用 底物
作用 部位
限制酶
DNA分子 磷酸二
酯键
DNA连 接酶
DNA分子 片段
只能将单个脱 氧核苷酸添加 到脱氧核苷酸 链上
将DNA 两条链之 间的氢键 打开
作用 形成黏性末端或平末 形成重组DNA 形成新的DNA 形成单链
结果 端
分子
分子
DNA分子
“分子运输车” —载体
1. 载体的必要条件
• 能自我复制，或能进入受体生物细胞并在受体生物细 胞内复制并表达；
• 有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入。 • 具有某些标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
1.基因的结构
（1）原核生物基因结构
非编码区
编码区
非编码区
…A‥………ATGTGCACGTAGTTA………‥G… …T‥启…动子……TACACGTGCATCAAT……终…止子‥C…
编码区上游
编码蛋白质 调控遗传信息的表达
（调控程序）
编码区下游
非编码区 启动子
RNA聚合酶
编码区
ATGTGCACGTAGTTA TACACGTGCATCAAT
限制酶I
一↓GATC 一 一 CTAG 一
限制酶Ⅱ
黏性末端不相同
黏性末端相同
同一种DNA片段用不同限制性酶处理， 形成的黏性末端一般不相同。
基因工程疑难问题的解读：
1、限制酶识别序列的方向性：
限制酶识别序列是指5ˊ------3ˊ那条链上的碱 基序列.
2、限制酶特异性的理解：
一般情况下，一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，这就 是限制酶的特异性。但有些特例，不同的限制酶识别同一种碱基 序列且切点相同。如：BamHⅠ、BstⅠ都可识别—— GGATCC——序列。不同限制酶切割DNA分子后产生相同粘性末 端。如： BamHⅠ识别——GGATCC——序列,切点在G与G之间； BglⅡ识别——AGATCT——，切点在A与G之间；粘性末端均
ABCD
6．下列有关限制性内切酶识别的叙述，不 正确的是:
A．从反应类型来看，限制性内切酶催化 的是一种水解反应
B．限制性内切酶的活性受温度、pH的影 响
C．一种限制性内切酶只能识别双链DNA 中某种特定的脱氧核苷酸序列
D．限制性内切酶识别序列越短，则该序 列在DNA中出现的几率就越小
D
7．(2019·南京三模)下列关于染色体和质粒的叙述，
2. 载体的种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。
3. 常用的载体：质粒
提醒 ①一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求， 因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工 改造。
②常见的标记基因有抗生素抗性基因、产生特定颜色的表达 产物基因、发光基因等。
③作为载体必须具有一个至多个限制酶切点，而且每种酶的 切点最好只有一个。因为某种限制酶只能识别单一切点，若载 体上有一个以上的酶切点，则切割重组后可能丢失某些片段， 若丢失的片段含复制起点区，则进入受体细胞后便不能自主复 制。一个载体若只有某种限制酶的一个切点，则酶切后既能把 环打开接纳外源DNA片段，又不会丢失自己的片段。
D
A.BamHI和EcoRI；末端互补序列—AATT— B. BamHI和HindⅢ；末端互补序列—GATC— C. EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—AATT— D. BamHI和BglII；末端互补序列—GATC—
11、用限制酶E将长度为5.0kbp （千碱基对）的质粒的一处切断； 接着用限制酶E切割某一DNA分子 得长度为1.5kbp的目的基因；再 用DNA连接酶连接成重组质粒， 扩增。现用限制酶B、E、H对克 隆的重组质粒进行切割，电泳分 离的结果如图。则用限制酶B和限 制酶H共同完成切割一个重组质粒， 预计产生的片段长度（kbp）可能 是（多选）
正确的是 A．染色体和质粒的化学本质都是DNA
( C)
B．染色体和质粒都只存在于原核细胞中
C．染色体和质粒都与生物的遗传有关
D．染色体和质粒都可作为基因工程的常用载体
解析：染色体由DNA和蛋白质构成；原核 生物没有染色体；质粒可以做为基因工程的
载体，而染色体不行。
9、限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特 定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI， HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特 定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端 可以互补黏合？其正确的末端互补序列为何？
黏性末端
G
A ATTC
CT TAA
G
黏性末端
什么叫平末端？
生物A基因片段
生物B基因片段
……GAATTC…… ……GAATTC…………GAATTC…… ……CTTAAG…… ……CTTAAG…………CTTAAG……
同一种 EcoRⅠ 酶切
……G AATTC…… ……G AATT…C………G AATTC… ……CTTAA G…… ……CTTAA …G………CTTAA G…
④注意与细胞膜上载体的区别，两者的化学本质和作用都不 相同。
⑤质粒能自我复制，既可在自身细胞、受体细胞内，也可在 体外。
1、下列关于限制酶的说法正确的是（ B ） A、限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中 很少 B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C、不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键
AUGUGCACGUAGUUA
非编码区 终止子
启动子：位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能 起始mRNA合成的序列。没有启动子，基因就不能转录。
RNA聚合酶:能够识别启动子上的结合位点并与其结合 的一种蛋白质.
终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断， 它能阻碍RNA聚合酶的移动，并使其从DNA模板链 上脱离下来，使转录终止。
2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 （D ）
A、能复制
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因 D、它是环状DNA
3.右图为DNA分子结构示意图，对该图的正确描述是
A．④的名称是胞嘧啶脱氧核苷酸
BD
B．解旋酶作用的部位是⑨
C．某限制性核酸内切酶可选择⑨处作为切点
D．DNA连接酶可连接⑩处断裂的化学键
A.2.0、3.0、1.0和0.5
B.2.0、3.0、0.5、0.5和0.5
C.3.0、和3.5
D.2.5和4.0
DNA片段长度
E
B +E
5.0 3.0
2.0 1.5 1.5
H+ E 5.0
1.0 0.5
CD
二、基因工程的基本操作程序
基因工程基本操作的四个步骤 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定
4．下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变
化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、
DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是
(C )
A．①②③④ C．①④②③
B．①②④③ D．①④③②
5．可以用于重组DNA技术的酶是(多选)
A．DNA聚合酶 B．限制性核酸 C．DNA连接酶 D．反转录酶
解析：DNA重组技术会用DNA聚合酶(实现 目的基因的扩增，如PCR)、限制性核酸内切 酶(目的基因的切割和运载体的切割)、DNA 连接酶(目的基因与运载体的连接)、反转录 酶(目的基因的获取)。
① 概念：PCR全称为聚__合__酶__链__式__反__应___，是一项 在生物_体__外_复制特__定__D_N_A_片__段__的核酸合成技术
②原理：_D_N_A_复__制____
不同来源的DNA片段混合
……GAATTC… ……GAATTC…… 将不同种来源的
…
……CTTAAG…… DNA片段连接起来
……CTTAAG…
用同一种…限制性酶处理不同DNA片段，会
形成同样的黏性末端，可进行重组。
……GAATTC…… ……CTTAAG……
EcoRⅠ
一G↓GATCC一 一CCTAG G一
• 同尾酶(Isocaudomers) 有些来源不同的限制 酶，识别及切割序列各不相同，但却能产生出相 同的粘性末端，这类限制酶称为同尾酶。但两种 同尾酶切割形成的DNA片段经连接后所形成的重组 序列，不能被原来的限制酶所识别和切割。EcoRI 和MunI属于同尾酶。
“分子缝合针” —ＤＮＡ连接酶
非编码区
启动子
编码区
编码蛋白质
非编码区
终止子
外显子
内含子
（能编码蛋白质） （不能编码蛋白质）
真核生物基因结构
（2）真核与原核生物基因结构的比较
①相同点：都是由能够编码蛋白质的编码区和具有 调控作用的非编码区。
②不同点：原核细胞基因的编码区是连续的；真 核细胞的编码区是间隔的，不连续的。
外显子：真核细胞基因DNA 中的编码序列，这些序列被 转录成RNA并进而翻译为蛋 白质。 内含子 ：真核细胞基因 DNA中的间插序列，这些序 列被转录成RNA，但随即被 剪除而不翻译。
主要是从原核生物中分离纯化出来的一 种酶 化学本质：蛋白质。
2、特性：
识可别用双于链目DN的A基分因子和的载某种体特的定切的割核苷酸
序列，并且使每一条链中特定部位的两 限制个酶核是苷一酸类之酶间，的而磷不酸是二一酯种键酶断。开。
形成两种末端
黏性末端 平末端
限制酶切割ＤＮＡ分子示意图
GA ATTC CT TAAG
（一）、获取目的基因的常用方法有哪些?
初始目的基因的来源 1. 从生物中直接获取 2. 人工合成
注意：要保持基因的完整性
目的基因的核苷酸序列未知
）含有某种生物不同基因的许多DNA片断， 导入到受体菌的群体中，各个受体因工程的基本操作工具
１. 基因工程的概念
这种技术是在生物体外，通过对 DNA分子进行人工“剪切”和“拼 接”，对生物的基因进行改造和 重新组合，然后导入受体细胞内 进行无性繁殖，使重组基因在受 体细胞内表达，产生出人类所需 要的基因产物。
341、、作结来用果源：：
“分子手术刀” ——限制酶
一.目的基因的概念
主要是指编码蛋白质基因，也可以 是一些具有调控作用的因子。 例如：与生物抗逆性相关的基因，与生物 优良品质相关的基因，药物和保健品相关 的基因，与毒物降解相关的基因，以及与 工业所需要酶相关的基因。
目前被广泛提取使用的目的基因有： 苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因 （抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。
磷酸二 酯键
DNA 聚合酶
脱氧核苷酸
磷酸二 酯键
解旋酶
DNA 分子 碱基对间 的氢键
作用 特点
切割目的基因及载体， 能专一性识别双链DNA 分子的某种特定的核 苷酸序列，并且使每 一条链中特定部位的 两个核苷酸之间的磷 酸二酯键断开
将双链DNA片 段“缝合” 起来，恢复 被限制酶切 开了的两个关信息
如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋因序列时
2.利用PCR扩增目的基因
１.作用：连接磷酸二酯键,而不是氢键。
２.DNA连接酶的种类
E·coliDNA连接酶：连接黏性末端
T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端
3.DNA连接酶的作用部位：
脱氧核苷酸链上相邻的两个脱氧核苷 酸之间的磷酸二酯键
DNA连接酶
DNA连接酶无特异性，其催化DNA片段末端 形成磷酸二脂键。连接情况有两种：一是 催化互补的粘性末端连接，二是催化平末 端连接。只要是相同的粘性末端、平末端 DNA连接酶就能催化连接，而与切割的限制 酶无关。
DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？
连接DNA链
DNA连接酶
双链
DNA聚合酶
单链
连接部位
在两DNA片段之间 形成磷酸二酯键
将单个脱氧核苷 酸加到已存在的 核酸片段上，形 成磷酸二酯键
相同点
都能形成磷酸二酯键
种类 项目
作用 底物
作用 部位
限制酶
DNA分子 磷酸二
酯键
DNA连 接酶
DNA分子 片段
只能将单个脱 氧核苷酸添加 到脱氧核苷酸 链上
将DNA 两条链之 间的氢键 打开
作用 形成黏性末端或平末 形成重组DNA 形成新的DNA 形成单链
结果 端
分子
分子
DNA分子
“分子运输车” —载体
1. 载体的必要条件
• 能自我复制，或能进入受体生物细胞并在受体生物细 胞内复制并表达；
• 有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入。 • 具有某些标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
1.基因的结构
（1）原核生物基因结构
非编码区
编码区
非编码区
…A‥………ATGTGCACGTAGTTA………‥G… …T‥启…动子……TACACGTGCATCAAT……终…止子‥C…
编码区上游
编码蛋白质 调控遗传信息的表达
（调控程序）
编码区下游
非编码区 启动子
RNA聚合酶
编码区
ATGTGCACGTAGTTA TACACGTGCATCAAT
限制酶I
一↓GATC 一 一 CTAG 一
限制酶Ⅱ
黏性末端不相同
黏性末端相同
同一种DNA片段用不同限制性酶处理， 形成的黏性末端一般不相同。
基因工程疑难问题的解读：
1、限制酶识别序列的方向性：
限制酶识别序列是指5ˊ------3ˊ那条链上的碱 基序列.
2、限制酶特异性的理解：
一般情况下，一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，这就 是限制酶的特异性。但有些特例，不同的限制酶识别同一种碱基 序列且切点相同。如：BamHⅠ、BstⅠ都可识别—— GGATCC——序列。不同限制酶切割DNA分子后产生相同粘性末 端。如： BamHⅠ识别——GGATCC——序列,切点在G与G之间； BglⅡ识别——AGATCT——，切点在A与G之间；粘性末端均
ABCD
6．下列有关限制性内切酶识别的叙述，不 正确的是:
A．从反应类型来看，限制性内切酶催化 的是一种水解反应
B．限制性内切酶的活性受温度、pH的影 响
C．一种限制性内切酶只能识别双链DNA 中某种特定的脱氧核苷酸序列
D．限制性内切酶识别序列越短，则该序 列在DNA中出现的几率就越小
D
7．(2019·南京三模)下列关于染色体和质粒的叙述，
2. 载体的种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。
3. 常用的载体：质粒
提醒 ①一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求， 因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工 改造。
②常见的标记基因有抗生素抗性基因、产生特定颜色的表达 产物基因、发光基因等。
③作为载体必须具有一个至多个限制酶切点，而且每种酶的 切点最好只有一个。因为某种限制酶只能识别单一切点，若载 体上有一个以上的酶切点，则切割重组后可能丢失某些片段， 若丢失的片段含复制起点区，则进入受体细胞后便不能自主复 制。一个载体若只有某种限制酶的一个切点，则酶切后既能把 环打开接纳外源DNA片段，又不会丢失自己的片段。
D
A.BamHI和EcoRI；末端互补序列—AATT— B. BamHI和HindⅢ；末端互补序列—GATC— C. EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—AATT— D. BamHI和BglII；末端互补序列—GATC—
11、用限制酶E将长度为5.0kbp （千碱基对）的质粒的一处切断； 接着用限制酶E切割某一DNA分子 得长度为1.5kbp的目的基因；再 用DNA连接酶连接成重组质粒， 扩增。现用限制酶B、E、H对克 隆的重组质粒进行切割，电泳分 离的结果如图。则用限制酶B和限 制酶H共同完成切割一个重组质粒， 预计产生的片段长度（kbp）可能 是（多选）