基于特异性基因的副溶血性弧菌快速分离鉴定

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第３Ｏ卷第３期２１Ｏ１年５月
食品与生物技术学报
ＪｕｎｌｆＦｏｃｅｃｎｏｅｈｏｏｙｏｒａｏｄＳｉｎｅａｄＢｉｔｃｎｌｇｏ
Ｖｏ．Ｎｏ１３０．３
Ｍａ２Ｏ１ｖ１
关键词：副溶血性弧菌；异性基因；ｌ；ｏＲ；特ｔｔｘ鉴定ｈ中图分类号：７Ｓ３文献标识码：Ａ
ＲａｄＩｏａｉｎａｄＩｅｉｉａｉｎＭｅｈｏｓｄｏｐｅｉｉｎｅｐｉｓｌｔｏｎｄｎｔｆｃｔｏｔｄＢａｅｎＳｃｆｃＧｅ
性基因分离鉴定所得１９株菌的准确性为１０，程检测时间为３ｄ０全。上述结果显示本研究开发的基于特异性基因的副溶血性弧茵分离鉴定法是一种高效、快速的检测方法，异性强且耗时短，特
在食源性致病菌的风险评估和大规模样本的分析检测领域具有较高的潜在应用价值。
文章编号：６３１８（０１０—４７０１７ —６９２１）３０１－５
基于特异性基因的副溶血性弧菌快速分离鉴定
翁仕强，赵勇，潘迎捷，卢瑛
（上海海洋大学食品学院，海２１０）上０３６
摘要：副溶血性弧菌（ｉｒｏｐｒｈｅｌｔｕ）海洋环境中常见的食源性致病菌。采用自行Ｖｂｉａａａｍｏｙｉｓ是ｃ
ｆｒＶｉｒｏｉｕ
ＷＥＮＧ — ｉｎＺＨＡＯｎｇ，Ｓｈｉｑａｇ，Ｙｏ
ＰＡＮｎ —ｉ，ＬＵｎＹｉｇｊｅＹｉｇ
（ｌｇｆＦｏｃｅｃｎｃｎｌｇＣｏｌｅｏｏｄＳｉｎｅａｄＴｅｈｏｏｙ，ＳａｇａｅｎＵｎｖｒｉｅｈｎｈｉＯｃａｉｅｓｔｙ，Ｓａｇａ０３６ｈｎｈｉ１０，Ｃｈｎ）２ｉａ
ａｏｎｄｔｘＲ）Ｂｙｕｓｎｇｈｉｍｅｈｏ．ｉｔｓｔｄ，１ｓｒｉｏｂｉｐａｒｈａｍｏｙｔｃｗｅｅｓｌｔｄｒｍｔａｎｓｆＶｉｒｏ９ａｅｌｉｕｓｒｉｏａｅｆｏｍａｉｔｒ，ｏｅａｈｒｅｍａｉｅｐｏｄｔ．Ａｌｏ，ｔ６ｒｒｎｅｗａｅｏｚｎｄｔｅｒｎｒｕｃｓｓｈｅ１ＳＤＮＡｒｆｏｍｈｓａｅｔａｎｓｗａｔｅｉｏｌｔｄｓｒｉｓｓｑｅｅｔｖｌｄｔｔｅｐｅｉｉｉｙ．Ｔｈｒｓｔｏｂａｎｄｙｈｅｐｅｉｉｔｈ，ｔ３Ｒｇｎｅｅｕｎｃｄｏａｉａｅｈｓｃｆｃｔｅｅｕｌｓｔｉｅｂｔｓｃｆｃｌｏ；ｅ
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Ａｂｓｒｃ：ｂｉｒｈａｍｏｙｔｃｓａｆｅｅｏｄ— ｂｏｎｅｐｔｏｇｎｉｒｎｎｉｏｎｅｓｔａｔＶｉｒｏＰａａｅｌｉｕｓｉｒｑｕｎｔｆＯｒａｈｅｎｍａｉｅｅｖｒｍｎｔ．Ａ
设计的改良初筛方案结合ｔ、ｏＲ这２种特异性基因的２次筛选开发了一种副溶血性弧菌的快ｌｔｘｈ速分离鉴定方法。应用该法从海水、泥及３种海产品中分离得到了１海９株副溶血性弧茵，经再１Ｓｒ６ＤＮＡ测序对分离鉴定结果的特异性进行了验证。实验结果显示基于ｔ、ｏＲ这两种特异ｌｔｘｈ
ｉｅｔｆａｉｎｍｅｈｄｗｅｅｃｎｉｔｎｔｈｔｆｏ１Ｓｒｄｎｉｃｔｏｔｏｒｏｓｓｅｔｗｉｔａｒｍ６ＤＮＡｅｕｎｉｇ，ｓｏｈｔｔｅｉｈｓｑｅｃｎｈｗｎｔａｈｖｒｃｔｆｔｅｉｅｔｆａｉｎｍｅｈｄｂｓｄｏｐｃｆｃｇｎｓ１０．Ｏｕｅｕｔｐｅｒｄｔａｅａｉｏｈｄｎｉｃｔｏｔｏａｅｎｓｅｉｅｅｉｙｉｉ０ｒｒｓｌｓａｐａｅｈｔｔｅｉｏａｉｎａｄｉｅｔｆａｉｎｍｅｈｄｂｓｄｏｐｃｆｃｇｎｓｆｒＶｉｒｏｐａａａｍｏｙｉｕｓａｈｓｌｔｏｎｄｎｉｉｔｔｏａｅｎｓｅｉｅｅｏｂｉｒｈｅｌｔｃｓｉｎｃｏｉ