现代分析化学PPT

方法的应用
检测人体血浆样本中亚硝酸盐的浓度。七个年轻健 康的男性志愿者的血浆样品被用来分析。平均基底的 亚硝酸盐浓度用这种方法测量是159.4±58.5nM，这 符合常见的报道结果，即大多数研究小组用100nM到 200nM所测试的结果。
4. 结 论
荧光毛细管电泳法快速灵敏的测定人体 血浆中的亚硝酸盐的方法已经成功开发并 得以验证。相比现有的条件要求严格的高 效液相色谱法，新的毛细管电泳法具有操 作简单和低成本的优点。
该方法也可用于检测和量化其他生物系 统中的亚硝酸盐，亦可作为一个有用的工 具来探索NO的合成在病变过程中的作用。
用50nM的荧光素作内标物。对三份样品中标 准亚硝酸盐的加入 (0、2、20、40、200、400、 500 nM)得到一个线性关系，线性回归方程为： y=0.0084x+0.2031，R2=0.9975，Syx=0.01。
不同浓度的亚硝酸盐的回收率范围在85.3～112.3%内, 表明该方法的精密度是可接受的(见表1)。
通过荧光-毛细管电泳法快速灵敏检测 人体血浆中的亚硝酸盐的方法
本文选自塔兰塔 爱思唯尔出版 分析化学期刊
安.范.舒普代尔 比利时鲁汶大学
成员：田锋 张宇 张珊
目 录
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背 景
实 验 结果与讨论 总 结
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1. 背 景



亚硝酸盐在实验和临床研究中可能作为 一个生化参数 准确灵敏地分析测定人体血浆中的亚硝 酸盐浓度是一个难题 现有的高效液相-荧光检测亚硝酸盐有一 定的缺陷
此研究的目的是开发一个快速、 简单和灵敏的荧光毛细管电泳法来 测定人体血浆中亚硝酸盐。
2. 实 验
药品：
亚硝酸钠、十水四硼酸二钠、二氨基萘、 荧光素、乙腈、氢氧化钠（均为分析纯）
0.2微米的再生纤维素过滤器过滤缓冲溶液
样品制备
静脉血液
混合液，pH=6
分离
血浆
上清液
去蛋白血浆
荧光素
样 本
DAN 合成 NAT
酸性条件下,二氨基萘 （DAN）与亚硝酸 盐反应迅速， 生成强荧光性的产物萘酚三 唑（NAT），其在碱性溶液中是稳定的
3. 结果与讨论


增益值1100时，pH值增加对荧光强度变 化无显著影响 反应时间保持在15分钟 短程注射相比一般注射，其分离时间几 乎缩短了3倍
检测荧光强度
图1：血浆样品包括137nM的亚硝酸盐以及50nM的内标物的电泳图谱。 A为短程注射，B为一般注射。(DAN: 2,3-diaminonaphthalene（二氨基 萘）; NAT: 2,3-naphthotriazole（萘酚三唑）; I.S.: Internal standard).