人血清白蛋白-白介素-2融合蛋白在CHO细胞中的表达

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人血清白蛋白-白介素-2融合蛋白在CHO细胞中的表达卢慧惠;彭林;段作营;蔡燕飞;金坚;李华钟
【期刊名称】《食品与生物技术学报》
【年(卷),期】2017(036)005
【摘要】白细胞介素-2在人体免疫应答中具有重要作用,常用于治疗肿瘤、肝炎和免疫缺陷性疾病等多种疾病,但因其体内半衰期短而限制了其临床应用.文中构建了合有融合蛋白基因HSA-IL-2的pMH3质粒,并通过电转染的方法转入中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovarycell,CHO细胞)中,利用pMH3质粒所携带的neo 基因进行筛选,经96孔板培养并筛选得到稳定表达目的蛋白质的重组细胞,融合蛋白HSA-IL-2表达量达到2.26 mg/L.利用反转录PCR和Western blot对重组细胞鉴定后发现,融合蛋白编码基因整合入重组CHO细胞基因组中,而且融合蛋白同时具有HSA和IL-2双重免疫原性.利用对IL-2具有依赖性的CTLL-2细胞进行活性分析后发现,筛选得到的表达细胞分泌得到的融合蛋白具有较高的生物活性,表明成功构建具有表达IL-2生物活性能力的CHO细胞.
【总页数】5页(P456-460)
【作者】卢慧惠;彭林;段作营;蔡燕飞;金坚;李华钟
【作者单位】江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学药学院,江苏无锡214122;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122【正文语种】中文
【中图分类】Q786
【相关文献】
1.重组毕赤酵母表达人血清白蛋白-人白介素2融合蛋白过程的代谢特性 [J], 王舒;郑志永;詹晓北;史仲平;高敏杰;刘立明;金坚;李华钟
2.牛pAcGFP-FADD融合蛋白真核表达载体构建及在CHO-K1细胞中的表达 [J], 杨润军;许尚忠;张路培;李俊雅;高雪
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4.甲状旁腺激素-人血清白蛋白融合蛋白在CHO细胞中的表达 [J], 张焕;徐栋生;蔡燕飞;陈蕴;金坚;
5.人白介素-2/人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的表达 [J], 郭泽峰;段作营;张莲芬;金坚;李华钟
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