不同品种红小豆的组织培养与快繁技术

明显影 响 ， Ａ Ｎ Ａ优 于 Ｉ Ａ。丛生 芽增 殖 的最 佳 培养基 为 ＭＳ Ａ ＋ ６一Ｂ ． ｇＬ＋Ｎ Ａ０ ２ｍ ／ 。比较不 同品种 的红小 Ａ ０ ５ｍ ／ Ａ ． ｇ Ｌ 豆再 生 分 化 诱 导 率 ， 小 豆 保 ８６ —１ 红 ７ ６平 均 分 化 率 为 ６．３ ， ０ ０ ％ 红小豆保 红 ９ ７平均 分化 率 为 ５ ． １ ， ４ ９ ３ ％ 红小 豆保
分 别 添加 ６一Ｂ 和 Ｎ Ａ、 Ａ Ａ ６一Ｂ 和 Ｉ Ａ、 Ｔ和 Ｎ Ａ、 Ｔ和 Ａ Ａ Ｋ Ａ Ｋ
２ １ 不 同激 素 配 比对 愈 伤 组 织诱 导影 响 ．
将红 小 豆 小 真 叶 接 种 在 添 加 ６一Ｂ 和 Ｎ Ａ、Ａ 和 Ａ Ａ ＩＡ ６一 Ａ Ｎ Ａ和 Ｋ Ｂ 、Ａ Ｔ等 ３ 种组合培养基中， 进行愈伤组织和不定
根数 为 ３～ ４条 ， 均根长为 ４～６ｃ 生 根速度慢 。１２ 平 ｍ， ／ ＭＳ＋ （ 下转第 ３ ４页）
一
３ ４一
江苏农业科学
２１ ０２年第 ４ ０卷第 ８ 期
杨
胡， 军厚．斑节对虾 １种 ｌ ｔ 杨 ｅ ｉ 因的电子克隆及分析［ ］ ｃｎ基 Ｊ ．江苏农业科 学，０ ２，０ ８ ：４—３ ２ １ ４ （ ）３ ６
主要集 中在对红小豆生长发 育、 品种选育及产量等方面 ， 但有
关不 同品种红小豆 的组织培养 与繁殖技术鲜有报道。本试验 对红小豆新 品种保 ８６— ６和保红 ９ ７的组织培养与高效快 ７ １ ４ 繁技术进行研究 ， 为红小豆育苗确定合 理播 种温度 、 度 ， 湿 为 早熟 、 丰产 、 抗逆性强 的小豆新品种选育 ， 为进行规模化生产 和 田间大量快速育苗提供科学依 据。
芽诱 导 。 由 表 １可 知 ： ＭＳ＋６ 一 Ｂ ． ｇＬ ＋Ｎ Ａ 在 Ａ ０ ２ ｍ／ Ａ ０ １ ｇ Ｌ配 比下 ， 豆保 ８６—１ 导率 为 ７ ．％ ， 小 豆 ． ／ ｍ 红小 ７ ６诱 ５９ 红
Ｎ Ａ４种组合进行愈伤 和不定芽诱 导。待种子 培养 ５ｄ后 ， Ａ 选取 生长旺盛 、 叶色浓绿 的无菌苗 ， 取小真 叶剪成 ０ ５ｅ ． ｍ ｘ ０ ５ｅ 的小块 ， ． ｍ 分别接种在添加不 同激素梯度 的诱 导培养基 上（ １ ， 表 ） 每瓶 ３块 ， 每个处理 ｌ ， Ｏ瓶 重复 ３次。以上培养基
虹 （９ ４ ） 女 ， １７ 一 ， 内蒙古包头人 ， 硕士 ， 讲师 ， 从事植物
遗传与育种研究 。 通信作者 ： 马建 军， 士， 博 副教授 。Ｅ—ｍ ｒ ｍ ａｄａ８ ８ ＠１３ ｅｍ。 ａ ： ａｎ ｙｏ １４ ６ ．ｏ ｌ
为愈伤组织诱导培养 基。比较 不同品种愈 伤组织诱 导率 ， 保 ８６— ６平均诱导率 （３４ ％ ） ７ １ ５ ．９ 显著高于保红 ９７ ５ ．０ 。 ４ （１７ ％）
保红 ９ ７诱 导 率为 ７ ． ％ ； ４ ３ ４ ＭＳ＋６一Ｂ ． ｇＬ＋Ｎ Ａ Ａ ０ ２ｍ／ Ａ
０ １ｍ ／ ． ｇ Ｌ配 比下 ， 红小豆保 ８６— ６诱导率为 ６ ．％ ， ７ １ ０ ８ 红小 豆
保红 ９７诱 导 率 为 ５ ． ％； Ｓ＋ Ｋ ． ｅ Ｌ＋Ｎ Ａ ４ ９１ Ｍ Ｔ １ ０ ｍ， ／ Ａ
０ ２ｍ ／ ． ｇ Ｌ配比下 ， 红小豆保 ８６ ６诱 导率 为 ５ ．％ ， ７ —１ ７ ２ 红小豆 保红 ９７诱导率 为 ４ ． ％。６一Ｂ ４ １６ Ａ与 Ｎ Ａ的配合使 用优 于 Ａ ６一Ｂ 与 ＩＡ、 Ｔ和 Ｎ Ａ Ｋ Ａ Ａ Ｋ Ａ 、 Ｔ和 Ｉ Ａ， 养 基 Ｍ Ａ 培 Ｓ＋６一Ｂ Ａ ０ ２ｍ ／ ． ｇ Ｌ＋Ｎ Ａ０ １Ⅱ Ｌ诱导的愈伤组织较致密 ， Ａ ． 暗绿色， 易
中每 ５ｄ观察记录 １次 ，０ｄ ２ 后分别统计污染率、 诱导率。
１２３ 继代培养与再分化诱 导 待愈伤组织 块达到最 大体 ．．
积， 细胞正处于旺盛分裂时进行继代培养 ， 每隔 ２周继代培养 １次 。将愈伤组织 上生长 的绿色 芽点切下 ， 接种到再 分化 培养基 （ ２ ， 表 ） 诱导不定 芽。 １２ ４ 生根培养 ．． 以 １２ ／ ＭＳ为基本 培养 基 ， ２～３ｅ 的 将 ｍ 芽接种 到生根培养基 （ ３ 上进行生根 ， 表 ） 每瓶接种 ３个 ， 每处 理ｌ ０瓶 ， 重复 ３次。预筛选 出适宜红小豆生根激素配 比。培 养 ２ 后统计生根率 、 ０ｄ 生根数和平均根长 。 １２ ５ 炼苗移栽 ．． 组 培苗在生 根培养基 中生 长 １ ８ｄ后 ， 苗 高 ４～ ｍ， ５ｅ 根长在 ０ ８～２ ５ｃ 时进 行移 栽。选择合 适 的 ． ． ｍ 基质 ， 并配合 以相应的管理措施 ， 能确保整个组织培养 工作 才
表 ３ 不 同激素对生根的影响
ห้องสมุดไป่ตู้
８ ６—１ ７ ６的平均分化率显著高于红小豆保红 ９ ７ Ｐ＜ ．５ 。 ４ （ ０ ０ ）
表 ２ 不 同激素对丛生芽 的发 生和植株再 生的影 响 品种 激 素
培基 专 养
生状 长态
萃
２ ４ 不 同移栽基质对成活率的影 响 ． 不 同基质对移栽苗成 活有很大 影响 。由表 ４可知 ： 最有 利 于红 小 豆 无 菌苗 移 栽存 活 的 基质 类 型 为腐 殖 质 ：河沙 （ １， １： ） 成活率可达 ８ ．％ ， ３３ 其次是珍珠 岩 ： 蛭石 （ １ ， １： ）成 活率为 ８． ％ ， １８ 腐殖质为移栽 基质 的成活率 最低 ， ７ ． ％ ， 为 ７７ 河沙的成 活率最高 ， ９ ％ ， 达 ０ 但长势较差 。从成活率 和生 长状
态两方面综合考虑 ， 腐殖质 ： 河沙（ １ 为最佳移栽基质 。 １： ）
表 ４ 不 同移 栽 基 质 对 成 活 率 的 影 响
移栽基质
生长状 态
２ ３ 不 同激 素 对 生 根 的 影 响 ．
一
般生根培养基的营养 成分要比正常的分化芽 培养基减
少一半或更少 。
由表 ３可知 ： ２ Ｓ空 白培养基上生根率 为 ６ ． ％ ， 均 １ Ｍ ／ ９５ 平
斑节对虾 １ ｌｔ 基 因的电子克 隆及 分析 种 ｅｉ ｃｎ
不 同。尽管 １２ ／ ＭＳ＋ Ａ ． ｇ Ｌ＋ＩＡ０２ｍ ／ Ｎ Ａ０ ２ｍ ／ Ｂ ． ｇＬ的生根率
略低于 １２ ＋Ｎ Ａ０ ２ ｍ ／ ， 是生根 快 ， ／ ＭＳ Ａ ． ｇＬ 但 根较 粗壮 ， 以 所 从生 根 率 和 生 长 状 态 两 方 面 综 合 考 虑 ， ／ ＭＳ＋Ｎ Ａ １２ Ａ ０ ２ｍ ／ ＋ Ｂ ． ｇ Ｌ为生根理想的培养基 。 ． ｇＬ＿Ｉ Ａ０ ２ｍ ／
摘要 ：以红小 豆新 品种保 ８６—１ ７ ６和保红 ９ ７的小真 叶为外植体 ， ４ 进行组织 培养与高效快 繁技术研究 ， 确定最适 的愈伤诱导 、 代增 殖 、 继 生根培养的激素浓度 ， 以及不 同移栽基质对成活率 的影响 。结果表明 ： 愈伤诱导率最高 的培养 基为 Ｍ Ｓ＋６ Ａ ０ ２ｍ ／ Ｎ Ａ ０ １ｍ ／ ， 一Ｂ ． ｇ Ｌ＋ Ａ ． ｇ Ｌ 出愈率 达 ７ ．％ ， ５ ９ 愈伤组织 紧密且 呈现暗绿色 ； 丛生 芽增 殖 的最适培养 基 为 Ｍ ６一 Ａ０ ５ｍ ／ Ｎ Ａ０ ２ｍ ／ ， Ｓ＋ Ｂ ． ｇ Ｌ＋ Ａ ． ｇ Ｌ 芽分化率达 ９ ． ％ ， ４ ４ 分化时 间短 ， 化芽健康 ； 分 生根培养的最适培养基 为 １２ Ｓ＋Ｎ Ａ ０ ２ｍ ／ ／Ｍ Ａ ． ｇＬ＋Ｉ Ａ０ ２ｍ ／ ， Ｂ ． ｇ Ｌ 生根率达 ８ ． ％ ， ０４ 生根快 ， 根粗壮 ； 组培苗在腐殖质 ： 河沙为 １： １的基质 中 成 活率 高。红小 豆保 ８ ６—１ ７ ６的愈 伤诱 导率 、 芽分化率 、 生根率 总体高于红小豆保红 ９７ ４。 关键词 ： 红小豆 ； 组织 培养 ； 快繁技术
分 化 出根 。最 后 选 用 Ｍ Ｓ＋６一Ｂ ． ｇＬ＋Ｎ Ａ ０ １ｍ ／ Ａ ０ ２ｍ ／ Ａ ． ｇＬ
收稿 日期 ：０ ２一 １—１ ２１ Ｏ ３ 基金 项 目： 河北省廊坊市科学技术研 究与发展计 划 自筹经 费 （ 编号 ：
２ １０ ２ １ ） ０ Ｏ １０ ２ 。
作者简介 ： 姚
一
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江苏农业科 学 ２ １ ０ ２年第 ４ Ｏ卷第 ８期
姚
虹， 马建军．不同品种红 小豆 的组织培养与快繁技 术［ ］ Ｊ ．江苏农 业科 学，０ ２４ （ ） ３ ３ ２ １ ，０ ８ ：２— ４
不 同品种红小豆 的组织培养与快繁技 术
姚 虹 ，马建 军
（ 廊坊师范学院生命科学学院 ， 河北廊坊 ０ ５ ０ ） ６ ０ ０
质（ ４ 中， 表 ） 浇足水并用 ＭＳ大量元 素母 液作为肥料 ，０ｄ后 ３
精选饱 满、 种皮完好 的红小豆种子 ， 自 统计成活率 ， 然后移栽到温室的花盆 中。
２ 结 果 与分 析
１２ １ 无 菌苗培养 ． ．
来水 冲洗 １ ｉ ， ５ｒ ｎ后 先用 ７ ％ 乙醇灭菌 ２ ， ａ ０ ０ｓ再用 ０ １ ． ％的升 汞处理 ８ｒｎ 后用无菌水冲洗 ４～ ｉ， ａ ５次 。将 灭菌后 的红小 豆 种子种植于无菌的加有 适量水 的垫有 ３层纱 布的培养瓶 中 ， 在 （ ５± ２ １）ｏ Ｃ的条件下进行暗培养。 １２ ２ 愈伤组织诱导 和分化 ．． 以Ｎ Ｓ培养基 为基本培养基 ，
姚
虹 等 ： 同品种红小 豆的组织培养与快繁技术 不
一 ３ ３—
２ ２ 不 同激 素 配 比对 丛 生 芽 的发 生和 植 株 再 生 的 影 响 ．
Ｎ Ａ０ ２ｍ ／ Ａ ． ｇＬ培 养基 上生 根率 达 到 ８ ． ％ ， 于 １２ ２５ 高 ／ ＭＳ＋ ＩＡ ０２ｍ ／ Ｂ ． ｇ Ｌ与 １２ Ｓ＋ＩＡ ０ ２ｍ， ／Ｍ Ａ ． ｇＬ培养基上 的生根率 。 ／ 同时 ，／ ＭＳ＋ Ａ ． ｇ Ｌ培养基上生 根快 ， 根较细长 ； １２ Ｎ Ａ０ ２ｍ ／ 但 １２ ／ ＭＳ＋ Ｂ ． ｇＬ和 １２ Ｓ＋ Ａ ． ｇ Ｌ培养基 上生 ＩＡ ０２ｍ ／ ／ Ｍ Ｉ Ａ０ ２ｍ ／ 根慢 ， 但根较粗壮 ， 可见 ， 激素 Ｉ 、 Ａ 从 Ｎ Ａ和 ＩＡ对生根 的效果 Ｂ
中 图 分 类 号 ： ５ １０ ３ ￥２ ．４ 文献 标 志 码 ： Ａ 文章 编 号 ：０２—１０ （０２ ０ ０ ３ Ｏ ｔ０ ３ ２ ２ １ ） ８— ０ ２一 ２
红小豆 （ ｉ ａｕ ｂｌ ｔ） 又名小 豆、 Ｖｇ ｍ ｅａａ ， ｎ ｌ 赤豆 ， 是我 国主要 的食用豆类作物之一 ， 有着悠 久的栽培 历史 。红小 豆广 泛分 布于全 国各地 ， 抗旱耐瘠 ， 适应性强 ， 其种植面积 、 总产量 均居世界第一位 。Ｊ 。近年来 ， 关于红小豆 的研 究 日益增 多 ，
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ． ‘
的顺 利 完 成 。在 移栽 前 ４— ７ｄ先将 瓶 塞 打 开 ， 无 菌 苗 适 让
所用 红小 豆 品种 为 红小 豆 保 ８６—１ 红 小 豆保 红 ７ ６与 ９７ 其种 子购 于廊坊市种子公司。 ４，
１２ 方 法 ．
应外界环境。移栽 时小心取出小苗 ， 洗净根上所带 的培养基 ， 把根浸泡在 １００倍 的多菌灵溶液中浸泡 ３ｒｉ， ０ ｎ 栽人不 同基 ａ
待愈伤组织块 达到最大体 积、 细胞 正处 于旺盛分 裂时进
行继代培养 ， 每隔 ２周继 代培养 １ 次 。将愈 伤组 织上生长
的绿色芽点切 下 ， 接种到再分化培养基上。结果 （ ２ 显示 ， 表 ）
６一Ｂ 是 影 响丛 生 芽增 殖 的 主导 因子 ， Ｔ对 丛 生 芽 增 殖 没 有 Ａ Ｋ