高效液相色谱法测定吡拉西坦片的含量-医药导报

流速：１．００ｍＬ·ｍｉｎ １；纸速：０．２５ｃｍ·ｍｉｎ １。

室温操
作。

２．４．２　标准曲线制备　精密称取１０５℃干燥至恒重的青藤碱对照品２
５．０ｍｇ于１００ｍＬ量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，得２
５０ｍｇ·Ｌ １
的青藤碱标准液。

精密称取氯霉素对照品２０．０ｍｇ于１００ｍＬ量瓶中，以甲
醇溶解并稀释至刻度，得２００ｍｇ·Ｌ １
的内标液。

精密
量取青藤碱标准液０．５，１．０，２．０，３．０，４．０，５．０ｍＬ于５０ｍＬ量瓶中，精密加入内标液２．５ｍＬ，加甲醇至刻度，取２０μＬ进样，记录峰面积。

以青藤碱峰面积与内标峰面积比（
Ｓ）对浓度（Ｃ）回归，得标准曲线方程：Ｓ＝－０．０２６０９＋０．０６９１９Ｃ（ｒ＝０．９９９９），线性范围为
２．５～２５．０ｍｇ·Ｌ １。

２．４．３　回收率测定　按处方比例配成空白基质，精密加入不同量的青藤碱，混合均匀，称取０．５ｇ于１００ｍＬ量瓶中，用适量甲醇振摇，超声提取３０ｍｉｎ，使青藤碱溶解，过滤，取续滤液５．０ｍＬ于５０ｍＬ量瓶中，加入内标２．５ｍＬ，加甲醇至刻度，冰箱放置４ｈ，取出迅速用微孔滤膜过滤，取滤液２０μＬ进样，记录峰面积，计算回收率。

结果见表１。

２．４．４　样品的测定　取样品约０．５ｇ，精密称定，按２．４．３项处理后测定峰面积，代入回归方程，计算样品含量，３批含量结果分别为９３．７９％，９８．９６％，９８．０１％。

３　讨论
青藤碱凝胶剂中含２％青藤碱，由于凝胶基质的 表１　青藤碱回收率测定结果
ｎ＝３编号投入量
／ｍｇ·Ｌ １
测得量
／ｍｇ·Ｌ １
回收率／％
平均回收率／％ＲＳＤ
／％１５．０６
４．９９
９８．６１２１０．１２１０．０８９９．６０９９．６
１．３
３
２０．２４
２０．４９
１０１．２３
干扰，我们采用高效液相色谱法测定青藤碱的含量，方
法简便，快速。

流动相为甲醇 ０．０１ｍｏｌ·Ｌ １
ＮａＨ２ＰＯ４
（５０∶５０），按此比例可使峰分离完好，能分开青藤碱、内标和杂质峰，基质和分解产物也不干扰主药的测定。

根据试验，在此条件下青藤碱理论塔板数在２０００以上。

根据青藤碱具有生物碱的性质，与碘化铋钾反应能生成紫红色沉淀，但由于基质中存在干扰，本项鉴别采用薄层色谱法，对青藤碱凝胶剂中主要成分青藤碱进行定性鉴别。

此法操作简便，重现性好，专属性强，可作为凝胶剂的有效成分鉴别手段之一。

紫外扫描中基质虽有较小的吸收，但不影响青藤碱的最大吸收波长，因此可以用于青藤碱的鉴别。

［参考文献］
［１］　刘　强，周莉玲，李　锐，等．青藤碱的研究概况［Ｊ］．中草
药，１９９７，２８（４）：２４７－２４８．
［２］　王隶书，金向群，孙亚冬，等．薄层扫描法测定复方青藤片
中青藤碱的含量［
Ｊ］．中成药，１９９６，１８（７）：１０－１１．高效液相色谱法测定吡拉西坦片的含量
俞信真
（浙江省绍兴市药品检验所，３１２０００）
［摘　要］　目的：探讨灵敏、准确测定吡拉西坦片含量的方法。

方法：采用ＡｌｌｔｉｍａＣ８柱（
２５０．０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ），以甲醇 水（５０∶５０）为流动相，流速１．０ｍＬ·ｍｉｎ １
，检测波长２１０ｎｍ。

结果：吡拉西坦的线性范围为２５～１５０ｍｇ·Ｌ １，ｒ＝１．０００，平均回收率９９．７％，ＲＳＤ＝０．３７％（ｎ＝９）。

结论：该方法灵敏、准确，可作为吡拉西坦片含量测定的方法。

［关键词］　吡拉西坦；高效液相色谱法；含量测定
［中图分类号］　Ｒ９７１；Ｒ９２７．２ ［文献标识码］　Ａ ［文章编号］　１００４ ０７８１（２００３）０８ ０５７２ ０２
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＣｏｎｔｅｎｔｏｆＰｉｒａｃｅｔａｍｉｎｔｈｅＴａｂｌｅｔｓｗｉｔｈＨＰＬＣ
ＹＵＸｉｎ ｚｈｅｎ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌｏｆＳｈａｏｘｉｎｇＣｉｔｙ，ＺｈｅｊｉａｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｓｈａｏｘｉｎｇ３１２０００，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｐｉｒａｃｅｔａｍｉｎｔｈｅｔａｂｌｅｔｓｗｉｔｈＨＰＬＣ．　Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＡｎＡｌｌｔｉｍａＣ８（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）ｃｏｌｕｍｎｗａｓｕｓｅｄａｓｔｈｅｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅ；ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｃｏｍｐｏｓｅｄｏｆｍｅｔｈａｎｏｌａｎｄｗａｔｅｒ（５０∶５０
ｂｙｖｏｌｕｍｅ）；ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅ１．０ｍＬ·ｍｉｎ １
；ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ，２１０ｎｍ．　Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｌｉｎｅｒａｒｉｔｙｏｆｐｉｒａｃｅｔｉｎｗａｓｇｏｏｄｗｉｔｈｉｎ
ｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ２５～１５０ｍｇ
·Ｌ １（ｒ＝１．０００），Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒａｔｅｏｆｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ９９．７％，ＲＳＤ＝０．３７％（ｎ＝９）．　Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗａｓｓｈｏｗｎｔｏｂｅｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，ａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ．Ｉｔｓｈｏｕｌｄｂｅａｄｏｐｔｅｄｉｎｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｐｉｒａｃｅｔａｍｉｎｔｈｅｔａｂｌｅｔｓ．
ＫＥＹＷＯＲＤＳ　Ｐｉｒａｃｅｔａｍ；Ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；Ｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
·
１８５·医药导报２００３年８月第２２卷第８期
［收稿日期］　２００３ ０２ ０９ ［修回日期］　２００３ ０３ １０［作者简介］　俞信真（１９６２－），女，浙江绍兴人，副主任药师，学士，从事药品检验工作。

吡拉西坦为脑代谢改善药，临床主要用于脑动脉硬化症及脑血管意外所致的记忆和思维功能减退的治疗。

吡拉西坦含量测定《卫生部药品标准》［１］采用凯氏定氮法，也有非水滴定法的报道［２］，还有用高效液相色谱法测定吡拉西坦原料的报道［３］，但对吡拉西坦片尚未见到报道。

笔者采用高效液相色谱法对吡拉西坦片进行含量测定。

１　仪器与试药
１．１　仪器　ＨＰ１１００型高效液相色谱系统，岛津ＵＶ ２５５０紫外分光光度计。

１．２　试药　吡拉西坦对照品（由扬州制药厂提供原料，精制后经归一化法测定含量，含量大于９９．５％，作为工作对照品），吡拉西坦片（天津金世制药，简称Ａ厂，批号：０２０２１１；杭州民生药业，简称Ｂ厂，批号：０２０４７８；浙江瑞新药业，简称Ｃ厂，批号：２００２０５２１）。

甲醇为色谱纯，水为重蒸水。

２　方法与结果
２．１　色谱条件及测定结果　ＡｌｌｔｉｍａＣ
８
柱（２５０．０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相：甲醇 水（５０∶５０）；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ １；检测波长：２１０ｎｍ；进样量２０μＬ。

测得对照品和样品的色谱图见图１。

图１　吡拉西坦对照品（Ａ）及片剂（Ｂ）色谱图
２．２　对照品溶液的配制　精密称取吡拉西坦对照品适量，加流动相制成每１ｍＬ中含０．１ｍｇ的溶液，摇匀，即得。

２．３　供试品溶液的配制　取吡拉西坦片１０片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于吡拉西坦０．１ｇ），置５０ｍＬ量瓶中，加流动相适量，超声使吡拉西坦溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，稀释至０．１ｇ·Ｌ １，作为供试品溶液。

２．４　线性关系考察　精密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥至恒重的对照品６２．５ｍｇ，置５０ｍＬ量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取此溶液１，２，３，４，５，６ｍＬ分别置５０ｍＬ量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，进样２０μＬ，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，结果吡拉西坦在２５～１５０
ｍｇ·Ｌ １范围内呈良好的线性关系，回归方程：Ｙ＝２４．７４３Ｘ＋４２．１４４，ｒ＝１．０００。

２．５　精密度和稳定性试验　精密吸取同一供试品溶液２０μＬ，连续进样５次，测得峰面积积分值的ＲＳＤ为０．３０％（ｎ＝５）。

精密吸取同一供试品溶液２０μＬ，分别于０，４，８，１２，２４ｈ依法测定，测得峰面积积分值的ＲＳＤ为０．５１％（ｎ＝５），表明供试品溶液在２４ｈ内稳定。

２．６　重复性试验　取同一供试品５份，精密称定，依法重复测定５次，结果ＲＳＤ为０．４８％（ｎ＝５），表明本法具良好重现性。

２．７　回收率试验　精密称取对照品适量（约含吡拉西坦８０，１００，１２０ｍｇ）各３份，分别置５０ｍＬ量瓶中，按处方（由Ｂ厂提供）加入空白辅料，按供试品同法制备后测定，结果见表１。

表１　含量测定回收率试验结果
试验号加样量／ｍｇ测得量／ｍｇ回收率／％１８１．９８１．７９９．７６
２８２．１８２．５１００．５０
３８１．１８０．９９９．７５
４１００．２９９．９９９．７０
５１００．５１００．１９９．６０
６１０５．６１０４．７９９．１５
７１２１．４１２０．８９９．５１
８１２１．８１２１．０９９．３４
９１２４．４１２４．０９９．６８
由上表可知：平均回收率＝９９．７％；ＲＳＤ＝０．３７％（ｎ＝９）
２．８　样品测定　取吡拉西坦片３批，按上述色谱条件，依法进行测定，并与卫生部颁布的定氮滴定法比较，结果见表２。

表２　样品含量测定结果％，ｎ＝２
厂家批号本法定氮滴定法
Ａ０２０２１１　９６．７９７．８
Ｂ０２０４７８　９８．８９８．３
Ｃ２００２０５２１９６．４９６．９
由上表可知：高效液相色谱法测定结果与定氮滴定法结果基本一致。

３　讨论
对吡拉西坦对照品溶液在２００～３００ｎｍ波长范围内扫描发现，在２０８ｎｍ处有最大吸收，故选择２１０ｎｍ作为检测波长。

用Ｃ
１８
柱的出峰时间太短，峰形与柱效
不理想，改用Ｃ
８
柱效果较好。

保留时间为３．０ｍｉｎ，理论塔板数可达１０９００。

本法灵敏，准确，重现性好，辅
·
２
８
５
·ＨｅｒａｌｄｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＶｏｌ．２２Ｎｏ．８Ａｕｇｕｓｔ２００３
料不干扰其测定，可替代较为繁琐费时的凯氏定氮法。

［参考文献］
［１］　国家药典委员会．卫生部药品标准（二部）［Ｚ］．第３册．北京：化学工业出版社，１９９４．２８．［２］　彭文兵，杨纯华，王菊芳．非水滴定法测定吡乙酰胺含量的探讨［Ｊ］．药物分析杂志，１９９０，１０（１）：４９－５０．［３］　熊发高，汪若跃．吡拉西坦含量的ＨＰＬＣ测定［Ｊ］．中国医药工业杂志，２０００，３１（９）：４１０．
芦荟样品中芦荟多糖的含量测定
程万清，蒋从清，程义琳
（湖北省随州市中心医院药剂科，４４１３００）
［摘　要］　目的：建立芦荟样品中芦荟多糖的含量测定方法。

方法：采用分光光度法。

结果：芦荟多糖的浓度与吸光度在２．６２～５．９２ｍｇ·Ｌ １范围内呈良好线性关系，ｒ＝０．９９９３，回归方程为Ａ＝１２１．６Ｃ－０．０１９。

结论：该方法快速简便，重复性好，可作为定量检测样品中芦荟多糖含量的方法。

［关键词］　芦荟多糖；分光光度法；含量测定
［中图分类号］　Ｒ２８４；Ｒ９２７．２ ［文献标识码］　Ａ ［文章编号］　１００４ ０７８１（２００３）０８ ０５７４ ０１
芦荟为百合科芦荟属植物，性寒味苦，能清肝热、通便，用于治疗便秘、小儿疳积、惊风；外用治湿癣［１］。

近年来，因为芦荟中含有芦荟多糖，具有抗衰老、抗溃疡、抗炎、抗肿瘤、降血糖、降血脂等生物活性［２］。

被广泛用作保健食品、美容护肤品等，本实验采用苯酚 硫酸法［３］测定芦荟多糖的含量。

１　仪器与试药
５３ＷＢ型紫外分光光度计（上海光学仪器厂），１００∶１芦荟凝胶喷雾干燥粉（海南五和堂芦荟有限公司），１∶１芦荟汁（南通市绿源芦荟制品厂），葡萄糖对照品（重庆制药五厂，批号：２００１１０１２）。

其他试剂均为分析纯。

２　实验方法与结果
２．１　标准曲线的制备　
２．１．１　苯酚液的制备　取苯酚１００ｇ，加铝片０．１ｇ，ＮａＨＣＯ
３０．０５ｇ，蒸馏收集１８２℃馏分，称取此馏分１０．０ｇ，加纯化水１５０ｇ，置棕色瓶中备用。

２．１．２　葡萄糖标准液的制备　精密称取１０５℃干燥至恒重的葡萄糖１００ｍｇ，置１００ｍＬ容量瓶中，加纯化水溶解，并稀释至刻度。

此标准溶液１．０ｍＬ含葡萄糖１．０ｍｇ［４，５］。

２．１．３　标准曲线的制备　吸取葡萄糖标准液０．５，１．０，２．０，３．０，４．０，５．０ｍＬ，分别置于１００ｍＬ容量瓶中，加纯化水定容。

吸取上述溶液各２．０ｍＬ，再加苯酚液１．０ｍＬ，摇匀，迅速滴加浓硫酸５．０ｍＬ，摇匀后放置５ｍｉｎ，置沸水浴中加热１５ｍｉｎ，取出后冷却至室温，于４９０ｎｍ处以纯化水作参比测吸光度（Ａ），得标准曲线方程Ａ＝１２１．６Ｃ－０．０１９，ｒ＝０．９９９３，样品在２．６２～５．９２ｍｇ·Ｌ １范围内线性良好。

２．２　芦荟多糖提取与精制　精密称取１００∶１芦荟凝胶喷雾干燥粉０．１ｇ，置于１５０ｍＬ圆底烧瓶中，加１０ｍＬ蒸馏水稀释成１∶１原汁的浓度，或精密量取１∶１芦荟汁１０．０ｍＬ，置于１５０ｍＬ圆底烧瓶中，各加入９倍体积的９５％乙醇，回流提取１ｈ，趁热过滤，残渣用９５％乙醇５ｍＬ洗涤３次，将残渣连同滤纸置于烧瓶中，加纯化水５０ｍＬ，在６０℃水浴中加热提取３０ｍｉｎ，趁热过滤，残渣用５ｍＬ热水洗涤３次，洗液并入滤液，放冷后移至１００ｍＬ
［收稿日期］　２００２ １２ ２８ ［修回日期］　２００３ ０２ ２４
［作者简介］　程万清（１９７０－），男，湖北云梦人，主管药师，在读硕士，主要从事药物制剂及新药制剂开发等工作。

容量瓶中，稀释至刻度，备用。

２．３　样品中多糖含量的测定　精密吸取１００∶１芦荟凝胶喷雾干燥粉或１∶１芦荟汁经过２．２项中预处理后的溶液各２．０ｍＬ，置于１０ｍＬ容量瓶中，加纯化水定容。

吸取上述溶液各２．０ｍＬ，按照标准曲线制备项下方法测定吸光度。

另取纯化水２．０ｍＬ，同上法操作做空白。

测定以上两种样品中芦荟多糖的含量，结果见表１。

表１　样品中芦荟多糖测定结果
２．４　稳定性试验　取样品溶液，照样品测定方法操作，分别于１，５，１０，２４，４８ｈ测定吸光度值，结果吸光度值基本无变化。

３　讨论
选用乙醇提取以除去单糖、低聚糖、苷类及生物碱等干扰成分，然后用蒸馏水提取其中所含的多糖类成分。

多糖在硫酸作用下，水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，与苯酚缩合成有色化合物，用分光光度法测定吸光度。

用紫外可见分光光度法测定多糖含量，具有简便快速、灵敏度高、重现性好的优点［４］，可以作为一些芦荟制品中芦荟多糖定量检测的有效方法。

芦荟被越来越多地应用于医药、保健、饮食、化妆品等行业，芦荟多糖逐渐被人们所认知，但芦荟多糖的结构和生物活性以及作用机制有待深入探讨。

［参考文献］
［１］　国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［Ｚ］．北京：化学工业出版社，２０００．１２９．
［２］　田庚元，冯宇澄，林　颖．植物多糖的研究进展［Ｊ］．中国中药杂志，１９９５，２０（７）：４４１．
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医药导报２００３年８月第２２卷第８期。