实验七 薄层扫描法测定香莲片中盐酸小檗碱含量

实验七薄层扫描法测定香莲片中盐酸小檗碱含量
一、目的要求
1、掌握TLCS测定中药制剂含量的方法
2、掌握薄层定量的点样和展开技术
3、熟悉薄层扫描仪的使用
二、基本原理
薄层扫描法是利用某种波长的单色光对薄层上的斑点进行扫描，通过测定该斑点对光的吸收度而确定其含量。

本实验采用荧光扫描，测定香莲片中盐酸小檗碱含量。

三、仪器与试药
1、薄层扫描仪、分析天平、索氏提取器、定量毛细管
2、薄层涂铺器、薄层展开缸
3、薄层层析用硅胶，其他试剂均为分析纯
4、盐酸小檗碱对照品（中国生物制品检定所）
5、香连片（市售品）
四、操作步骤
1、供试品溶液的制备：取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸小檗碱60mg），置索氏提取器中，加盐酸-甲醇（1：100）混合液适量，加热回流提取至提取液无色，将提取液移至100ml量瓶中，用少量盐酸-甲醇（1：100）的混合液洗涤容器，洗液并入提取液中，加混合液至刻度，摇匀，精密量取2ml，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2、对照品溶液的制备取盐酸小檗碱适量，加甲醇制成每1ml含0.02mg的溶液，作为对照品溶液。

3、测定法精密吸取供试品溶液2μl，对照品溶液2μl与6μl，交叉点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水（12：6：3：3：0.6）为展开剂，在另槽中加入等体积的浓氨试液，预平衡15分钟后，展开，展距约10cm，取出，晾干，进行荧光扫描测定，激发波长=366nm，测定供试品与对照品荧光强度积分值，计算，即得。

《中国药典》2005版规定，本品每片含黄连以盐酸小檗碱计，小片不得小于
7.0mg，大片不得少于20mg。

五、思考题
1、影响薄层扫描测定含量的因素有哪些？点样误差是不是主要因素？
2、薄层扫描法中常用的点样器有哪些？。