sds-page电泳原理
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sds-page电泳原理
SDS-PAGE电泳是一种将蛋白质分离并确定分子量的方法。
首先,将要检测的蛋白质样品加入含有丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝胶中。
接着,在凝胶开始聚合的过程中,添加SDS(十二烷基硫酸钠)和β-巯基乙醇,用于使蛋白质带负电荷和还原二硫键。
凝胶结束后,将凝胶放入电泳缸中,加入电泳缓冲液,使用电场将带负电荷的蛋白质分离。
较小的蛋白质在凝胶中移动较快,较大的蛋白质移动较慢。
最后,使用染料将蛋白质染色并进行可视化。
通常使用科曼蓝或银染法。
通过比较带电荷的蛋白质的迁移位置和已知分子量的标准品,可以确定每个蛋白质的分子量。