正常家兔磺胺嘧啶钠药动学参数的测定
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② 另取30mg%磺胺嘧啶钠标准液0.2ml加入到标 准管中，以配置标准血样品；
③ 各试管分别加入5%三氯醋酸4ml，并摇匀，然 后1000rpm离心5min。
N H 2 N aN O 3 C C l3C O O H
NNC l
H 3C
+
SO 2N H R
SO 2N H R
2. 重氮化及偶联呈色
O H N aO H C H (C H 3)2
⑤ 为了防止凝血，由耳缘静脉注射 1%肝素（1ml/kg）；
⑥ 颈总动脉下穿过两根手术线，一 根线头端结扎，另一根线备用， 心端用动脉夹夹住。
⑦ 眼科小剪刀近头侧结扎处下剪小 口，插动脉插管，结扎，固定。
3. 空白血样品收集：
➢ 从动脉插管放空白血0.5ml，用离心管收集，并摇匀。
4. 给药：
➢ 向一侧耳缘静脉内注入20%的磺胺嘧啶钠（1ml/kg）
NN
H 3CΒιβλιοθήκη O N aC H (C H 3)2
➢ 从各离心管提取上清2.0ml并转移至玻璃试管中
➢ 试剂按照如下顺序添加：
① 0.5ml 2N HCl ② 0.5ml 0.5% NaNO2 ③ 1.0 ml 0.5%麝香草酚，然后摇匀。
注意：加亚硝酸钠和加麝香草酚的顺序不要颠倒！
3.分光光度计分析：
血放掉。 ③ 每吸取一个血样时，必须更换枪头；加样时枪头不要碰到三
氯醋酸液面。 ④ 将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀，否则易出现血凝块。 ⑤ 加亚硝酸钠和麝香草酚的顺序不要混乱。 ⑥ 注意各比色杯要清洗干净、擦干并匹配、取药液要准确。 ⑦ 离心时要注意离心管的配平。 ⑧ 注意严格按照722型分光光度计操作方法进行操作。
➢ 每个样品的吸光度值由722型分光光度计测 定，最大吸收波长设定于480nm.
➢ 以空白血样品作为空白对照进行分光光度计 调零。
Ⅶ 计算血药浓度
➢ 偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关。可用光度 计测出其吸光度值，通过与标准品吸光度值的比较 及运算，即可推算出磺胺的浓度。计算公式如下：
血浆中 标 标 磺 管 浓 吸 准 准 胺 度 度 光 （ 管 浓m 给 度 g% 药 m 吸 g 度 后 光 % 给测 药定 吸 前 度 管 光
光度，通过与标准品吸光度的比较及运算，即可推算出磺胺的 浓度。计算公式如下：
血浆中 标 标 磺 管 浓 吸 准 准 胺 度 度 光 （ 管 浓m 给 度 g% 药 m 吸 g 度 后 光 % 给测 药定 吸 前 度 管 光
1. 脱蛋白
① 取空白血样与各时间点血样0.2ml，放入各离 心管中并标记，每个离心管分别加水1.8ml(※ 标准管加水1.6ml)；
5. 血样品收集：
➢ 在给药后每个时间点收集0.5ml血样。 ➢ 时间点：1、3、5、15、30、60、90、120min。 ※ 每次取血前，要先放2滴血再取，以免不同时间点的血
样间产生污染。
注意事项
① 动脉插管后，由耳缘静脉注射肝素（1ml/kg）。 ② 采血试管取血前一定要用肝素浸润；每次取血之前要先将残
（D）你能计算出零时血药浓度Co及表现分 布容积Vd吗？
Ⅱ.实验药品:
1. 20%磺胺嘧啶钠 2. 30mg%磺胺嘧啶钠（标准液） 3. 5%三氯醋酸 4. 0.5%麝香草酚（用20%NaOH溶液配制） 5. 0.5%亚硝酸钠 6. 2N盐酸 7. 1%肝素（1ml/kg） 8. 20%乌拉坦（5ml/kg）
Ⅲ. 实验动物
家兔，2.0～2.5kg.
Ⅳ.实验设备
1. 家兔操作台 2. 手术器械
手术刀 大镊子 止血钳 弯头小镊子 眼科剪刀 玻璃钩
Ⅳ.实验设备：
3. 动脉插管 4. 722型可见光分光光度计
Ⅳ.实验设备：
5. 离心机
Ⅴ. 实验步骤：
1. 取家兔，称重，通过耳缘静脉给20%乌拉坦 (5ml/kg).
耳缘静脉注射
如何确定家兔已经被完全麻醉呢?
家兔同时出现以下三种体征:
1. 肌张力减弱； 2. 呼吸速率逐渐减慢； 3. 角膜反射消失。
2. 颈动脉剖开
① 固定家兔头部、绑四肢；
② 用弯剪清理颈部毛发；
③ 沿家兔解剖学正中线摸到颈部甲 状软骨，用手术刀沿甲状软骨向 下切开颈部皮肤5-7cm，血管钳 钝性分离，暴露气管；
④ 游离气管一侧的颈总动脉，与周 围组织及迷走、交感神经分离；
Ⅵ. 试管实验
❖ 本实验测定磺胺嘧啶钠的原理：
➢ 显色原理：磺胺类药物在酸性溶液中，可使苯环上的氨基（N重H氮2）反离应子，化产生生成重铵氮类盐化（合-N物=（N+--N）H。3+此）重，氮进盐而在与碱亚性硝溶酸液钠中起 与酚类化合物如麝香草酚起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合 物。
磺胺 H药 C N l a2N O 重氮 麝 盐 香 草 N a O酚 H 偶氮染料 ➢ 偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关。可用光度计测出其吸
Ⅷ 实验结果
Table 1. 结果记录表
Ⅷ 实验结果
1. 以时间为横坐标，浓度的对数为纵坐标，在半对数图 上绘制磺胺嘧啶钠的药时曲线，以lgC对t做直线回归， 得方程: lgC=a+bt。按lgC-t图判断房室数，如果基 本上为一条直线则按一室模型处理
一室模型图
问题：
➢1．测定半衰期有何意义？ ➢2．根据Vd=D／Co，当用药剂量400mg／kg
③ 各试管分别加入5%三氯醋酸4ml，并摇匀，然 后1000rpm离心5min。
N H 2 N aN O 3 C C l3C O O H
NNC l
H 3C
+
SO 2N H R
SO 2N H R
2. 重氮化及偶联呈色
O H N aO H C H (C H 3)2
⑤ 为了防止凝血，由耳缘静脉注射 1%肝素（1ml/kg）；
⑥ 颈总动脉下穿过两根手术线，一 根线头端结扎，另一根线备用， 心端用动脉夹夹住。
⑦ 眼科小剪刀近头侧结扎处下剪小 口，插动脉插管，结扎，固定。
3. 空白血样品收集：
➢ 从动脉插管放空白血0.5ml，用离心管收集，并摇匀。
4. 给药：
➢ 向一侧耳缘静脉内注入20%的磺胺嘧啶钠（1ml/kg）
NN
H 3CΒιβλιοθήκη O N aC H (C H 3)2
➢ 从各离心管提取上清2.0ml并转移至玻璃试管中
➢ 试剂按照如下顺序添加：
① 0.5ml 2N HCl ② 0.5ml 0.5% NaNO2 ③ 1.0 ml 0.5%麝香草酚，然后摇匀。
注意：加亚硝酸钠和加麝香草酚的顺序不要颠倒！
3.分光光度计分析：
血放掉。 ③ 每吸取一个血样时，必须更换枪头；加样时枪头不要碰到三
氯醋酸液面。 ④ 将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀，否则易出现血凝块。 ⑤ 加亚硝酸钠和麝香草酚的顺序不要混乱。 ⑥ 注意各比色杯要清洗干净、擦干并匹配、取药液要准确。 ⑦ 离心时要注意离心管的配平。 ⑧ 注意严格按照722型分光光度计操作方法进行操作。
➢ 每个样品的吸光度值由722型分光光度计测 定，最大吸收波长设定于480nm.
➢ 以空白血样品作为空白对照进行分光光度计 调零。
Ⅶ 计算血药浓度
➢ 偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关。可用光度 计测出其吸光度值，通过与标准品吸光度值的比较 及运算，即可推算出磺胺的浓度。计算公式如下：
血浆中 标 标 磺 管 浓 吸 准 准 胺 度 度 光 （ 管 浓m 给 度 g% 药 m 吸 g 度 后 光 % 给测 药定 吸 前 度 管 光
光度，通过与标准品吸光度的比较及运算，即可推算出磺胺的 浓度。计算公式如下：
血浆中 标 标 磺 管 浓 吸 准 准 胺 度 度 光 （ 管 浓m 给 度 g% 药 m 吸 g 度 后 光 % 给测 药定 吸 前 度 管 光
1. 脱蛋白
① 取空白血样与各时间点血样0.2ml，放入各离 心管中并标记，每个离心管分别加水1.8ml(※ 标准管加水1.6ml)；
5. 血样品收集：
➢ 在给药后每个时间点收集0.5ml血样。 ➢ 时间点：1、3、5、15、30、60、90、120min。 ※ 每次取血前，要先放2滴血再取，以免不同时间点的血
样间产生污染。
注意事项
① 动脉插管后，由耳缘静脉注射肝素（1ml/kg）。 ② 采血试管取血前一定要用肝素浸润；每次取血之前要先将残
（D）你能计算出零时血药浓度Co及表现分 布容积Vd吗？
Ⅱ.实验药品:
1. 20%磺胺嘧啶钠 2. 30mg%磺胺嘧啶钠（标准液） 3. 5%三氯醋酸 4. 0.5%麝香草酚（用20%NaOH溶液配制） 5. 0.5%亚硝酸钠 6. 2N盐酸 7. 1%肝素（1ml/kg） 8. 20%乌拉坦（5ml/kg）
Ⅲ. 实验动物
家兔，2.0～2.5kg.
Ⅳ.实验设备
1. 家兔操作台 2. 手术器械
手术刀 大镊子 止血钳 弯头小镊子 眼科剪刀 玻璃钩
Ⅳ.实验设备：
3. 动脉插管 4. 722型可见光分光光度计
Ⅳ.实验设备：
5. 离心机
Ⅴ. 实验步骤：
1. 取家兔，称重，通过耳缘静脉给20%乌拉坦 (5ml/kg).
耳缘静脉注射
如何确定家兔已经被完全麻醉呢?
家兔同时出现以下三种体征:
1. 肌张力减弱； 2. 呼吸速率逐渐减慢； 3. 角膜反射消失。
2. 颈动脉剖开
① 固定家兔头部、绑四肢；
② 用弯剪清理颈部毛发；
③ 沿家兔解剖学正中线摸到颈部甲 状软骨，用手术刀沿甲状软骨向 下切开颈部皮肤5-7cm，血管钳 钝性分离，暴露气管；
④ 游离气管一侧的颈总动脉，与周 围组织及迷走、交感神经分离；
Ⅵ. 试管实验
❖ 本实验测定磺胺嘧啶钠的原理：
➢ 显色原理：磺胺类药物在酸性溶液中，可使苯环上的氨基（N重H氮2）反离应子，化产生生成重铵氮类盐化（合-N物=（N+--N）H。3+此）重，氮进盐而在与碱亚性硝溶酸液钠中起 与酚类化合物如麝香草酚起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合 物。
磺胺 H药 C N l a2N O 重氮 麝 盐 香 草 N a O酚 H 偶氮染料 ➢ 偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关。可用光度计测出其吸
Ⅷ 实验结果
Table 1. 结果记录表
Ⅷ 实验结果
1. 以时间为横坐标，浓度的对数为纵坐标，在半对数图 上绘制磺胺嘧啶钠的药时曲线，以lgC对t做直线回归， 得方程: lgC=a+bt。按lgC-t图判断房室数，如果基 本上为一条直线则按一室模型处理
一室模型图
问题：
➢1．测定半衰期有何意义？ ➢2．根据Vd=D／Co，当用药剂量400mg／kg