右美托咪定抑制缺氧复氧诱导的人肾小管上皮细胞Parthanatos死亡

基金项目：广东省医学科学技术研究基金（Ｂ２０１９０３５）
谷　宇　尧永华　陆殿宇：广州医科大学附属肿瘤医院　广东广州　５１００３０
通信作者：陆殿宇
右美托咪定抑制缺氧／复氧诱导的人肾小管上皮细胞Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡
谷　宇　尧永华　陆殿宇
【摘　要】　目的　观察右美托咪定（Ｄｅｘ）对缺氧／复氧（Ｈ／Ｒ）肾小管上皮细胞内活性氧（ＲＯＳ）含量及ＰＡＲＰ－１依赖性细胞死亡（Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ）的影响，探讨Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ与急性肾损伤（ＡＫＩ）之间的关系，以及Ｄｅｘ对肾细胞的保护作用。

方法　选择人肾小管上皮细胞（ＨＫ－２），分为对照（Ｃｏｎｔｒｏｌ）组、Ｄｅｘ组、Ｈ／Ｒ组和（Ｄｅｘ＋Ｈ／Ｒ）组。

检测细胞活力和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放，细胞内ＲＯＳ含量，并通过ｑＰＣＲ检测Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡关键基因多聚ＡＤＰ核糖聚合酶－１（ＰＡＲＰ－１）和凋亡诱导因子（
ＡＩＦ）的表达。

结果　与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，Ｈ／Ｒ组ＨＫ－２细胞活力明显降低，ＬＤＨ释放明显增加，细胞内ＲＯＳ含量，ＰＡＲＰ－１和ＡＩＦ的表达均明显增多（Ｐ＜０ ０５）。

而给予Ｄｅｘ预处理能明显提升Ｈ／Ｒ细胞的活力，降低ＬＤＨ释放，显著抑制细胞内ＲＯＳ含量的增加以及细胞ＰＡＲＰ－１和ＡＩＦ表达的增多（Ｐ＜０ ０５）。

结论　肾细胞Ｈ／Ｒ损伤过程中Ｐ
ａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡可能发挥重要作用，而Ｄｅｘ可能通过抑制ＲＯＳ的产生降低Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡的发生。

【关键词】　右美托咪定；缺氧／复氧；Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ
中图分类号：Ｒ
６９２．６；Ｒ９７１＋
．２ 文献标志码：Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－３３２Ｘ．２０２１．０５．０４１ＤｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅｉｎｈｉｂｉｔｓＰａｒｔｈａｎａｔｏｓｉｎｈｕｍａｎｒｅｎａｌｔｕｂｕｌａｒｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｄｕｒｉｎｇｈｙｐｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙ
ｇｅｎａｔｉｏｎ
ＧＵＹｕ ，ＹＡＯＹｏｎｇｈｕａ，ＬＵＤｉａｎｙｕ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅ（Ｄｅｘ）ｏｎｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ（ＲＯＳ）ｃｏｎｔｅｎｔ
ａｎｄＰａｒｔｈａｎａｔｏｓｉｎｒｅｎａｌｔｕｂｕｌａｒｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｄｕｒｉｎｇｈｙｐｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ（Ｈ／Ｒ）ａｎｄｔｏｆｕｒｔｈｅｒｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅ ｔｗｅｅｎＰａｒｔｈａｎａｔｏｓａｎｄａｃｕｔｅｋｉｄｎｅｙｉｎｊｕｒｙ（ＡＫＩ）ａｓｗｅｌｌａｓｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆＤｅｘｏｎｒｅｎａｌｃｅｌｌｓＨ／Ｒｉｎｊｕｒｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｈｕｍａｎｒｅｎａｌｔｕｂｕｌａｒｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ（ＨＫ ２）ｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄａｎｄｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，Ｄｅｘｇｒｏｕｐ，Ｈ／Ｒｇｒｏｕｐａｎｄ（Ｄｅｘ＋Ｈ／Ｒ）ｇｒｏｕｐ．Ｃｅｌｌｖｉａｂｉｌｉｔｙ，ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ（ＬＤＨ）ｒｅｌｅａｓｅａｎｄｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒＲＯＳｃｏｎｔｅｎｔｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅａｐｐｒｏｐｒｉ ａｔｅｋｉｔｓ，ａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＰａｒｔｈａｎａｔｏｓ ｒｅｌａｔｅｄｋｅｙｇｅｎｅｓｓｕｃｈａｓｐｏｌｙＡＤＰ ｒｉｂｏｓｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ １（ＰＡＲＰ １）ａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎ ｄｕｃｉｎｇｆａｃｔｏｒ（ＡＩＦ）ｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｑＰＣＲ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ＬＤＨｒｅｌｅａｓｅａｎｄｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒＲＯＳｃｏｎ ｔｅｎｔ，ａｓｗｅｌｌａｓＰＡＲＰ １ａｎｄＡＩＦｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｉｎＨＫ ２ｃｅｌｌｓｏｆｔｈｅＨ／Ｒｇｒｏｕｐｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒ，ｗｈｉｌｅｃｅｌｌｓｖｉａｂｉｌｉｔｙｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｅｄ（Ｐ＜０．０５）．Ｄｅｘｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｏｕｌｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｍｐｒｏｖｅｃｅｌｌｓｖｉａｂｉｌｉｔｙ，ｍｅａｎｗｈｉｌｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄＬＤＨｒｅｌｅａｓｅａｎｄｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒＲＯＳｃｏｎｔｅｎｔ，ａｎｄｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＰＡＲＰ １ａｎｄＡＩＦｉｎＨＫ ２ｃｅｌｌｓｄｕｒｉｎｇＨ／Ｒ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＰａｒｔｈａｎａｔｏｓｍａｙｂｅａｖｉｔａｌｆａｃｔｏｒｉｎｔｈｅｄｅａｔｈｏｆＰａｒｔｈａｎａｔｏｓａｍｉｄｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆＨ／Ｒｉｎｊｕｒｙｏｆｒｅｎａｌｃｅｌｌｓ，ｗｈｉｌｅＤｅｘｍａｙａｌｌｅｖｉａｔｅＰａｒｔｈａｎａｔｏｓｂｙｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇＲＯＳｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．
【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】　Ｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅ；Ｈｙｐｏｘｉａ／ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ；Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ
【Ａｕｔｈｏｒ′ｓａｄｄｒｅｓｓ】 ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＣａｎｃｅｒＨｏｓｐｉｔａｌａｎｄＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＧｕａｎｇｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１００３０，Ｃｈｉｎａ
急性肾损伤（Ａｃｕｔｅｋｉｄｎｅｙｉｎｊｕｒｙ，ＡＫＩ）是一种常见的临床并发症，以肾小球滤过率突然下降为主要特征。

近年来尽管肾脏替代疗法等支持治疗取得了较大进步，
ＡＫＩ发生５年后死亡率仍高达５０％［１］。

肾缺血再灌注
损伤（Ｒｅｎａｌｉｓｃｈｅｍｉａｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ，ＲＩＲＩ）是引发ＡＫＩ的主要原因，可见于许多临床情况下，如肾移植、部
分肾切除、心脏手术、败血症等［２］。

既往多项研究指出，
ＲＩＲＩ过程中肾小管上皮细胞主要发生凋亡和坏死，然而
采取相应的干预性治疗措施并不能有效降低患者的发
病率及死亡率［３］。

因此，深入探讨ＲＩＲＩ的致病机制，寻
找有效的防治方法仍是临床亟待解决的难题。

新近研究发现Ｄ
ＮＡ损伤参与多种疾病的细胞损伤和死亡过程，尤其在缺血再灌注损伤（Ｉｓｃｈｅｍｉａｒｅｐｅｒｆｕ
ｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ，ＩＲＩ）相关的细胞死亡中起重要作用［４－５］。

轻
度细胞ＤＮＡ损伤可以通过活化多聚ＡＤＰ核糖聚合酶－１（ＰｏｌｙＡＤＰ－ｒｉｂｏｓｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ－１，ＰＡＲＰ－１）完全修复；较严重ＤＮＡ损伤会引发细胞凋亡；而广泛严重的ＤＮＡ损伤会引发一种独特的细胞死亡形式———ＰＡＲＰ－１依赖性细胞死亡（Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ）。

最近有研究提示Ｐａｒｔｈａｎａ ｔｏｓ可能是ＩＲＩ细胞死亡的重要形式。

本研究旨在探讨Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ与ＲＩＲＩ病理过程之间的关系，为进一步寻找
现代医院２０２１年５月第２１卷第５期　ＭｏｄｅｒｎＨｏｓｐｉｔａｌｓＭａｙ２０２１Ｖｏｌ２１Ｎｏ５
有效药物干预Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡并防治ＡＫＩ打下基础。

１　材料与方法
１．１　材料
正常人肾小管上皮细胞ＨＫ－２（中国典型培养物保藏中心）；胎牛血清，胰蛋白酶（Ｇｉｂｃｏ）；右美托咪定（Ｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅ，Ｄｅｘ，江苏恒瑞）；ＣＣＫ－８检测试剂盒（Ｄｏｊｉｎｄｏ）；ＬＤＨ试剂盒（Ｒｏｃｈｅ）；活性氧（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙ ｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）检测试剂（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）；Ｔｒｉｚｏｌ试剂（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）；ＲｅｖｅｒＴｒａＡｃｅｑＰＣＲＲＴＭａｓｔｅｒＭｉｘ和ＳＹＢＲ ＧｒｅｅｎＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘ（ＴＯＹＯＢＯ）。

１．２　方法
１．２．１　细胞培养及Ｈ／Ｒ处理　我们采用人肾小管上皮细胞缺氧／复氧（Ｈｙｐｏｘｉａ／Ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ，Ｈ／Ｒ）模型模拟ＲＩＲＩ。

细胞培养箱（温度３７℃，湿度９０％，９５％空气＋５％ＣＯ
２
）内细胞培养于含１０％胎牛血清的ＤＭＥＭ培养基中。

ＨＫ－２细胞培养至融合约８０％，进行Ｈ／Ｒ处理，细胞更换为无糖无血清培养基，放入湿润的缺氧培养箱（Ｇａｌａｘｙ４８Ｒ；Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ，Ｈａｍｂｕｒｇ，德国）进行低
氧（９５％Ｎ
２＋５％ＣＯ
２
）处理２４ｈ，随后取出放入常氧环
境进行复氧处理４ｈ，即缺氧２４ｈ复氧４ｈ（Ｈ／Ｒ）处理。

１．２．２　实验分组及药物处理　细胞用随机数字表分为４组：对照组（Ｃｏｎｔｒｏｌ）组、Ｄｅｘ组、Ｈ／Ｒ组、Ｄｅｘ＋Ｈ／Ｒ组，每组ｎ＝５。

Ｄｅｘ组和Ｄｅｘ＋Ｈ／Ｒ组预先用含１ｎｍｏｌ／Ｌ右美托咪定的培养基处理１ｈ，随后Ｄｅｘ组更换为普通培养基放回常氧培养箱继续培养，Ｄｅｘ＋Ｈ／Ｒ组则更换为无糖无血清培养基放入低氧培养箱进行Ｈ／Ｒ处理。

１．２．３　细胞活力和ＬＤＨ释放检测　将ＨＫ－２细胞接种于９６孔板，细胞密度约５０００个／孔。

不同处理完成后，应用细胞计数（ＣｅｌｌＣｏｕｎｔｉｎｇＫｉｔ－８，ＣＣＫ－８）试剂盒和乳酸脱氢酶（Ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，ＬＤＨ）试剂盒，按照试剂盒说明书进行具体操作，使用酶标仪检测检测细胞活力以及ＬＤＨ释放情况。

１．２．４　检测细胞内ＲＯＳ含量　细胞接种于２４孔板，各组处理完毕后，应用２，７－二氯荧光素二乙酸脂（２，７－ｄｉｃｈｌｏｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎｄｉａｃｅｔａｔｅ，ＤＣＦＨ－ＤＡ）检测细胞内ＲＯＳ水平。

１．２．５　实时定量ＰＣＲ（ｑＲＣＲ）　应用Ｔｒｉｚｏｌ试剂（Ｉｎ ｖｉｔｒｏｇｅｎ）提取细胞中总ＲＮＡ，ＮａｎｏＤｒｏｐ－１０００分光光度计检测ＲＮＡ量和浓度，ＲｅｖｅｒＴｒａＡｃｅｑＰＣＲＲＴＭａｓｔｅｒＭｉｘ（ＴＯＹＯＢＯ）进行逆转录，ＳＹＢＲ ＧｒｅｅｎＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘ（ＴＯＹＯＢＯ）以及ＲｏｃｈｅＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ１ １行ｑＲＣＲ定量分析ＰＡＲＰ－１ｍＲＮＡ和凋亡诱导因子（ａｐｏｐ ｔｏｓｉｓＩｎｄｕｃｉｎｇＦａｃｔｏｒ，ＡＩＦ）ｍＲＮＡ变化，使用ＧＡＰＤＨ作为管家基因。

１．３　统计学处理
使用ＳＰＳＳ１３ ０软件进行统计学分析。

计量数据用均数±标准误表示，组间比较使用单因素方差分析，Ｐ＜０ ０５表明差异有统计学意义。

表１　实验使用的引物序列
基因引物序列（５′－３′）
ＰＡＲＰ－１ＡＧＧＧＣＡＧＣＡＧＣＧＡＣＴＣＴＣＡＧ
ＴＣＣＡＧＣＡＧＧＴＴＧＴＣＡＡＧＣＡＴＴＴＣＣ
ＡＩＦＴＴＣＣＡＣＡＧＧＣＴＣＣＣＧＴＣＣＡＧ
ＴＣＡＴＧＣＴＧＣＴＣＡＣＣＧＴＣＣＴＴＡＡＴＧ
ＧＡＰＤＨＡＣＡＣＣＣＡＣＴＣＣＴＣＣＡＣＣＴＴＴ
ＴＡＧＣＣＡＡＡＴＴＣＧＴＴＧＴＣＡＴＡＣＣ
２　结果
２．１　Ｄｅｘ能明显减轻Ｈ／Ｒ处理导致的ＨＫ－２细胞损伤
与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，Ｈ／Ｒ处理能明显降低ＨＫ－２细胞的活力（Ｐ＜０ ０５），而应用１ｎｍｏｌ／ＬＤｅｘ预处理１ｈ后再行Ｈ／Ｒ处理，能明显提升ＨＫ－２细胞的活力（Ｐ＜０ ０５），Ｄｅｘ本身对ＨＫ－２细胞的活力无明显作用。

见图１。

　注： 与对照组比较有显著差异，Ｐ＜０ ０５；＃与Ｈ／Ｒ组比较有显著统计学差异，Ｐ＜０．０５
图１　ＣＣＫ－８法检测ＨＫ－２细胞的活力
与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，Ｈ／Ｒ处理能明显增加细胞ＬＤＨ的释放（Ｐ＜０．０５），而应用１ｎｍｏｌ／ＬＤｅｘ预处理１ｈ后再行Ｈ／Ｒ处理，能明显降低ＨＫ－２细胞ＬＤＨ的释放（Ｐ＜０．０５），Ｄｅｘ本身对ＨＫ－２细胞ＬＤＨ的释放无明显作用。

见图２。

　注： 与对照组比较有显著差异，Ｐ＜０ ０５；＃与Ｈ／Ｒ组比较有显著统计学差异，Ｐ＜０ ０５
图２　检测ＨＫ－２细胞ＬＤＨ的释放
２．２　Ｄｅｘ能明显抑制Ｈ／Ｒ处理ＨＫ－２细胞内ＲＯＳ含量的增多
与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，Ｈ／Ｒ处理能明显增加细胞内ＲＯＳ的含量（Ｐ＜０ ０５），而应用１ｎｍｏｌ／ＬＤｅｘ预处理能明显抑制Ｈ／Ｒ处理ＨＫ－２细胞内ＲＯＳ含量的增加（Ｐ＜０ ０５），Ｄｅｘ本身对ＨＫ－２细胞ＲＯＳ的含量无明显
０
９
７现代医院２０２１年５月第２１卷第５期　ＭｏｄｅｒｎＨｏｓｐｉｔａｌｓＭａｙ２０２１Ｖｏｌ２１Ｎｏ５
作用。

见图３。

　注：
与对照组比较有显著差异，Ｐ＜０ ０５；＃与Ｈ／Ｒ组比较有显著统
计学差异，
Ｐ＜０ ０５图３　检测ＨＫ－２细胞内ＲＯＳ含量
２．３　Ｄｅｘ能明显抑制Ｈ／Ｒ处理ＨＫ－２细胞内ＰＡＲＰ－１ｍＲＮＡ和ＡＩＦｍＲＮＡ表达
与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，Ｈ／Ｒ处理能明显提升细胞内ＰＡＲＰ－１ｍＲＮＡ和ＡＩＦｍＲＮＡ表达（Ｐ＜０ ０５），而应用１ｎｍｏｌ／ＬＤｅｘ预处理能明显抑制Ｈ／Ｒ处理ＨＫ－２细胞内ＰＡＲＰ－１ｍＲＮＡ和ＡＩＦｍＲＮＡ表达（Ｐ＜０ ０５），Ｄｅｘ本身对ＨＫ－２细胞ＰＡＲＰ－１ｍＲＮＡ和ＡＩＦｍＲＮＡ表达无明显作用。

见图４。

　注：
与对照组比较有显著差异，Ｐ＜０ ０５；＃与Ｈ／Ｒ组比较有显著统
计学差异，Ｐ＜０ ０５
图４　检测ＨＫ－２细胞内ＰＡＲＰ－１ｍＲＮＡ和ＡＩＦｍＲＮＡ的表达
３　讨论
ＡＫＩ的病理学特征主要是肾小管上皮细胞损伤和
死亡［
６］。

既往研究认为坏死和凋亡是ＡＫＩ肾细胞最重要的死亡方式［７］。

ＲＩＲＩ不同阶段细胞死亡的主要形式
不同，短暂肾缺血导致细胞凋亡，而长期持续的肾缺血
则造成细胞的坏死［８］。

然而针对坏死和凋亡的干预治
疗并未有效改善ＲＩＲＩ患者的预后。

近年来研究发现，ＤＮＡ损伤与多种疾病的细胞损伤和死亡相关，尤其在器
官缺血性疾病中似乎扮演着重要的角色［４－５］。

ＤＮＡ储存着生命体赖以生存和繁衍的遗传信息，其完整性的维系对个体生存和物种稳定起着至关重要的作用。

然而，在生命进程中ＤＮＡ难免会受到多种外源性（如紫外线辐射和电离辐射）以及内源性（如Ｒ
ＯＳ）损伤因素的攻击，进而引起ＤＮＡ损伤［９－１１］。

据报道，ＲＯＳ诱导的氧化应激是引起细胞ＤＮＡ损伤的重要因素［１２］。

我们的前期研究已经证实ＲＩＲＩ过程中会产生大量的
ＲＯＳ［１３］。

因此我们推测ＲＩＲＩ中发生的严重氧化应激可能
造成肾细胞ＤＮＡ损伤，甚至直接导致细胞死亡。

ＰＡＲＰ－１是一种能感应ＤＮＡ损伤的核蛋白酶。

ＰＡＲＰ－１在细胞ＤＮＡ氧化损伤中具有双向作用：促进ＤＮＡ损伤修复与细胞存活以及诱导Ｐ
ａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡。

过多ＲＯＳ诱导的氧化应激会造成持续的ＤＮＡ损伤，导致ＰＡＲＰ－１过度活化，消耗细胞内的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（ＮＡＤ）和ＡＴＰ，引起能量耗竭及线粒体功能障碍，最终引发ＡＩＦ介
导的Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡［１４］。

本研究建立与动物ＲＩＲＩ模型
相对应的细胞Ｈ／
Ｒ模型，排除了神经体液的影响，直接探讨其对细胞ＤＮＡ损伤和细胞Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡的影响。

研究发现，
Ｈ／Ｒ能明显诱导细胞内ＲＯＳ的过量产生，同时Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡关键基因ＰＡＲＰ－１和ＡＩＦ的表达明显也增高，这与细胞活力的降低以及ＬＤＨ释放的增加具有明显的同步性。

提示Ｐ
ａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡可能与Ｈ／Ｒ导致的肾细胞活力下降以及细胞死亡关系密切。

Ｄｅｘ是一种高选择性的α２肾上腺素能受体（α２－ＡＲ）激动剂，具有镇静、镇痛、抗焦虑和抗交感神经的活
性，广泛应用于临床麻醉及重症医学［１５－１７］。

近年来，
Ｄｅｘ在抑制氧化应激和全身炎症反应、降低细胞死亡等
方面的作用受到越来越多的关注［
１８－２２］。

本研究发现，应用Ｄｅｘ能明显抑制Ｈ／Ｒ肾细胞内ＲＯＳ含量的增加，同时还显著降低Ｈ／Ｒ肾细胞内ＰＡＲＰ－１和ＡＩＦ的表达，提示Ｄｅｘ可能通过减轻氧化应激，进而降低Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡的发生。

这与Ｄｅｘ预处理可明显增加Ｈ／Ｒ肾细胞活力、降低肾细胞ＬＤＨ释放的结果相吻合。

综上所述，我们认为肾细胞缺氧复氧过程中Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡可能具有重要作用，而Ｄｅｘ可能通过抑
制ＲＯＳ的产生降低Ｐａｒｔｈａｎａｔｏｓ死亡的发生。

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现代医院２０２１年５月第２１卷第５期　ＭｏｄｅｒｎＨｏｓｐｉｔａｌｓＭａｙ２０２１Ｖｏｌ２１Ｎｏ５。