新生儿溶血卡式游离放散试验及判定表

游离和放散试验操作程序
（微柱凝胶法）
一、被捡者红细胞悬液的制备：取被检者压积红细胞400微升，加入5毫升生理盐水，离心1
分钟，弃去上清液，再入5毫升生理盐水，离心，反复4次，第4次弃去上清液后，再离心然后弃去上清液。

取洗涤后的压积红细胞与350微升生理盐水混匀，即为红细胞悬液。

二、放散液制备：将红细胞悬液置于56℃水温箱，孵育10分钟，期间不断摇动，以离心力1000g，
离心2－3分钟，取上清即红细胞放散液。

三、操作步骤：
（一）反定型红细胞悬液的制备。

取反定型红细胞A、B、O各1滴（约50微升）于标记好的试管中，加生理盐水250微升。

（二）取抗人球蛋白试剂卡，写上姓名，1、2、3孔分别加入50微升新生儿血浆（游离试验），4、5、6孔分别加入50微升红细胞放散液（放散试验）。

（三）在第1、4孔分别加入新配制的A型红细胞悬液各50微升；在第2、5孔分别加入新配制的B型红细胞悬液各50微升；在第3、6孔分别加入新配制的0型红细胞悬液各50微升。

（四）将检测卡置于37℃孵育器孵育15分钟。

（五）使用专用离心机离心5分钟（900rpm2分钟，1500 rpm3分钟），取出检测卡，根据表格判读结果：
阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或悬于胶中，表明被检者血清中含有对应其抗原的抗体或红细胞被致敏。

用”+”表示。

阴性结果：红细胞完全沉降到微柱管尖底部，表明血清中无相应抗原免疫的抗体或红细胞没有被致敏。

用”0”表示。

新生儿溶血病游离放散试验判定表。