黄金香柳的组织培养与快速繁殖

黄金香柳的组织培养与快速繁殖
兰伟;杨京霞;王玲;王菲菲;郁琳洁
【摘要】以黄金香柳(Melaleuca bracteata cv.)为材料,研究基本培养基中不同浓度6-BA和NAA对黄金香柳试管苗增殖的影响.试验结果表明,温度为(25±1)℃、光照时间12h·d-1、光照强度2000 LX的培养条件下,在13种培养基处理中,适宜黄金香柳试管苗快速增殖的培养基是MS+6-BA0.1 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+琼脂6.2g· L-1+蔗糖30 g·L-1,该培养基配比的每瓶试管苗平均增殖倍数可达16.17倍.丛生芽在1/2MS+琼脂6.2 g·L-1+蔗糖30g· L-1的培养基上易生根,可以获得健壮完整的小苗.
【期刊名称】《阜阳师范学院学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2013(030)001
【总页数】4页(P36-39)
【关键词】黄金香柳;组织培养;快速繁殖
【作者】兰伟;杨京霞;王玲;王菲菲;郁琳洁
【作者单位】阜阳师范学院生命科学学院,安徽阜阳236037;阜阳师范学院生命科学学院,安徽阜阳236037;抗衰老中草药安徽省工程技术研究中心安徽阜阳236037;阜阳师范学院生命科学学院,安徽阜阳236037;阜阳师范学院生命科学学院,安徽阜阳236037;安徽阜阳金丰生态农业有限公司,安徽阜阳236001
【正文语种】中文
【中图分类】S722.3+7
黄金香柳(Melaleuca bracteata cv.)别名千层金，桃金娘科白千层属常绿小乔木，原产新西兰、荷兰等濒海国家。

可用于庭园景观、道路、小区绿化，是优良彩叶树种［1］，在广州、岳阳、重庆、成都等地引种成功［2-4］，适宜我国大部分地区庭院栽培或社区种植［5］。

黄金香柳的应用范围相当广泛，种苗需求量很大［6］。

黄金香柳传统的繁殖方法是依赖枝条扦插［7］，耗时长，生根率低，还易受到季节的限制，不能满足市场的需求。

目前国内外有关黄金香柳试验的报道较少，而且不同学者认为适宜黄金香柳继代培养过程中培养基中所添加的6-BA、NAA的浓度配比各不相同［2，6］，不利于试验和生产的开展。

本试验对适宜黄金香柳试管苗增殖及生根培养基进行了筛选研究，以期短期内获得健壮的试管苗，满足生产需要。

1 材料与试剂
黄金香柳，引自阜阳生态园热带植物园，试验所用药品匀为国产分析纯。

2 试验方法
2.1 不同浓度激素配比的培养基对黄金香柳增殖的影响
剪取黄金香柳枝条嫩梢，接种于MS+6-BA 0.1mg·L-1+NAA 0.01mg·L-1培养基上诱导侧芽萌发，将生长健壮的试管苗截为1～1.5 cm茎段，所取茎段要求留取自然生长方向上端6片嫩叶，接种到各试验组培养基上。

以MS+琼脂6.2 g·L-1+蔗糖30 g·L-1基本培养基为对照组，附加不同浓度6-BA(0、0.1 mg·L-1、0.5 mg·L-1、1.0 mg·L-1)和NAA(0、0.05 mg·L-1、0.1 mg·L-1、0.3 mg·L-1，0.5 mg·L-1)共12组处理(详见表1)，对试管苗进行组培快繁。

每种处理接种15瓶，每瓶接种2～3个试材茎段，培养24 d后，大部分的试管苗茎段开始芽的萌发或伸长，开始观测记录上述13种试验组试管苗茎段的增殖、生根状况，结合数据分析不同6-BA和NAA浓度配比的两种激素对试管苗增殖、生根的影响。

2.2 生根培养
将长1.0 cm左右、带有4片嫩叶的顶芽转接到不同培养基成份MS、1/2MS和改良1/2MS(大量元素、微量元素含量减半，有机成分不加，铁盐、琼脂和蔗糖含量不变)生根培养基上培养。

每种处理10瓶，每瓶接种5株。

培养基的pH值均为5.8～6.0。

培养温度为(25±1)℃，光照时间为12 h·d-1，光照强度为2000 LX。

观测的项目为丛生芽数、有效芽数、增殖倍数、平均株高、生长状况、生根率、平均根数、平均根长等。

3 结果与分析
3.1 不同6-BA和NAA的浓度配比对试管苗增殖的影响
6-BA和NAA浓度对试管苗增殖的影响结果见表1、图1所示。

表1 不同6-BA和NAA浓度配比对试管苗生长的影响编号6-BA(mg·L-
1)NAA(mg·L-1)接种外植体(段)观测项目(培养60 d)丛生芽(个)有效芽(个)增殖倍数(倍)平均株高(cm)MS(CK)33 76 43 2.30 1.85 A1 0.1 0.05 36 582 239 16.17 1.21 A2 0.1 0.1 36 437 187 12.14 0.98 A3 0.1 0.3 33 379 152 11.48 1.30 A4 0.1 0.5 42 488 190 11.62 1.28 B1 0.5 0.05 33 915 167 27.73 0.71 B2 0.5 0.1 39 914 113 23.44 0.61 B3 0.5 0.3 33 757 51 22.94 0.54 B4 0.5 0.5 36 863 59 23.97 0.52 C1 1.0 0.05 42 599 6 14.26 0.24 C2 1.0 0.1 42 1175 34 27.98 0.42 C3 1.0 0.3 45 893 31 19.84 0.39 0 0 C4 1.0 0.5 42 875 12 20.83 0.31
图1 不同6-BA和NAA浓度配比对黄金香柳增殖的影响(MS为对照组;A～C组分别为试管苗在不同浓度配比的6-BA和NAA培养基中培养60 d的生长情况)
表1表明，两种激素的不同浓度配比，对试管苗增殖和生长的影响较大。

B组处理外植体的增殖倍数明显高于A组处理和C组处理，但有效芽的数目比较少;A组处理外植体的增殖倍数虽较低，但植株的木质化程度较高，其中A1(6-BA 0.1 mg·L-1、NAA 0.05 mg·L-1)培养基最适宜芽的分化、生长，有效芽的数目最高达239
个，增殖倍数为16.17倍。

总体上，随着6-BA浓度增加，试管苗芽的增殖呈现低浓度促进高浓度抑制的现象。

3.2 不同培养基成份对试管苗生根的影响
以MS培养基为基本培养基，设置不同浓度配比，分别为MS、1/2MS、改良
1/2MS。

将生长状况良好，长度大于1 cm、带4片嫩叶的顶芽接种于诱导生根培养基中，21 d时3种培养基中的生根率都达到100%。

结果见图2所示。

图2 不同培养基成分对黄金香柳生根的影响
由图2可知，MS培养基中黄金香柳的每株平均根数为8.9条，平均根长为0.50 cm、1/2MS培养基的黄金香柳的每株平均根数为7.5条，平均根长为0.94 cm、改良1/2MS培养基的黄金香柳的每株平均根数为5.8条每株，平均根长为0.49 cm。

1/2MS培养基中黄金香柳根系正常，粗壮，侧根多，虽然其平均根数不是最多，但已满足炼苗生长的需求，综合黄金香柳生根植株根系的颜色、生长情况以及培养基成本综合考虑，1/2MS培养基为最适宜的生根培养基。

3.3 不同浓度NAA对试管苗生根的影响
以MS培养基为基本培养基，添加不同浓度的萘乙酸(NAA)，将生长状况良好，长度大于1 cm、带4片嫩叶的顶芽接种于各生根培养基中。

7 d统计一次，21 d时，5种培养基中的生根率都达到100%。

随着根系的进一步分化，植株增高，茎的颜色不断加深，木质化程度明显提高。

结果见表2。

表2 不同浓度NAA对黄金香柳生根的影响NAA浓度(mg/L)根的形态特征0 50 8.78 0.50乳白色，接种幼苗数(株)平均根数(条/株)平均根长(cm)细0.1 50 9.81 0.52浅绿色，细0.3 50 10.56 0.51浅绿色，粗0.5 50 8.10 0.40黑色，粗0.7 50 7.49 0.28黑色，粗
由表2可知，NAA浓度在0～0.3 mg·L-1范围内，随NAA浓度增加，试管苗平
均根数逐渐增加，但平均根长变化不明显，当NAA浓度为0.3 mg·L-1时，平均
根数为10.56条，平均根长为0.51 cm;当NAA浓度在0.3～0.7 mg·L-1范围内，平均根数和平均根长都明显下降，根的颜色也逐渐加深变黑。

综合平均根长、平均根数、根的形态特征以及根的颜色、生长健壮情况考虑，NAA浓度为0.3 mg·L-1时，黄金香柳组培苗的生根效果最佳。

4 总结与讨论
本研究认为，适宜黄金香柳试管苗快速增殖的培养基配方是MS+6-BA 0.1 mg·L-
1+NAA 0.05 mg·L-1+琼脂6.2 g·L-1+蔗糖30 g·L-1。

该组处理外植体的增殖倍
数较大，芽的分枝、分化、伸长明显，有效芽数较多。

刘俊武等研究结果表明，适宜黄金香柳继代增殖的培养基是MS+6-BA 0.1 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1［2］;
龚峥等研究认为黄金香柳丛生芽快速增殖的培养基配方为MS+6-BA 0.5 mg·L-
1+NAA 0.01 mg·L-1［6］。

本试验以培养适用于生产的有效芽为选取激素浓度
配比的主要依据，培养基配比中选取的6-BA和NAA的浓度都比较低，与已有报道的差别较大，但每个外植体增殖倍数(16.17倍)远大于龚峥等试验报道(8.7倍)。

增殖的丛生芽在1/2MS+琼脂6.2 g·L-1+蔗糖30 g·L-1的培养基上易生根，与常规的MS培养基再附加其它植物激素相比，在相同时间内，完全能够获得健壮完
整的小苗，可以有效降低生产成本，更适用于生产的需要。

有关黄金香柳组培快繁中其它植物生长激素种类及其浓度配比、试管外生根和移栽成活率等问题尚有待进一步研究。

参考文献:
［1］戴英祥.最新色叶树种——千层金［J］.广东园林，2003，(1):43.
［2］刘俊武，李永红，郭康，等.黄金香柳的组织培养［J］.植物生理学通讯，2007，43(3):497.
［3］先锋.色叶乔木千层金［J］.园林，2003，(3):26.
［4］刘婷.移植可防黄金香柳受冻害［J］.中国花卉盆景，2006，(12):27.
［5］吴豪，徐晓帆.黄金香柳的栽培管理及应用［J］.上海建设科技，2005，(4):42-43.
［6］龚峥，周丽华，张卫华，等.黄金香柳组织培养与快速繁殖［J］.广东林业科学，2009，25(5):50-53.
［7］贾立人，贾龙志，程宇，等.千层金扦插繁殖试验研究报告［J］.温州农业科技，2006，(2):17-19.。