Zorbax SB C8快速分离柱中文说明书

Agilent ZORBAX SB-C8快速分离色谱柱
使用说明书
色谱柱特性
图 1 显示了 4.6 mm（内径）× 30 mm 3.5 µm ZOR BAX SB-C8 快速分离色谱柱的典型质量控制色谱图。

有关您所购买的色谱柱的实际质量控制测试结果和性能信息，请参阅色谱柱随附的“色谱柱性能报告”。

安全注意事项
• 液相色谱系统中的所有连接处均有可能渗漏。

液相色谱设备的用户须注意其流动相的毒性及易燃性。

• 这些快速分离色谱柱的机械性能稳定，且已通过极高的压力测试，可确保在各种 LC 仪器上安全地进行实验室操作。

内径 2.1 和 3.0 mm 的色谱柱可耐受 20,000 psi (1,300 bar) 的操作压力，而内径 4.6 mm 的色谱柱可耐受 16,000 psi (1,000 bar) 的操作压力。

打开色谱柱可能会降低这些压力极限。

在超过 600 bar 的条件下色谱柱的性能未被测试。

• 由于柱内的填料颗粒尺寸较小，干燥的 ZOR BAX 填料可能会被吸入体内，所以如欲打开色谱柱，请在通风良好的环境中操作。

操作指南
• 流动相方向已在色谱柱上标明。

• 虽然反向使用色谱柱不会损坏色谱柱，但也应尽量避免，除非需要去除进样口端堵塞物（请参阅“色谱柱保养”部分）。

• 这些色谱柱经过填充和安装适用于高压操作（最高600 bar）。

拆装色谱柱将降低色谱柱的性能。

• ZOR BAX SB-C8 与水和所有常用的有机溶剂兼容。

对于本文中所包含的错误或与设备、性能或使用本资料相关的偶发性或继发性损害，
安捷伦概不承担责任。

此出版物中的信息、说明和规格如有变更，恕不另行通知。

© 安捷伦科技公司，2007美国印刷
2007 年 10 月 9 日
部件号：820115-006CN
/chem/cn
• 避免在 pH 值低于 1.8 或高于 8.0 的情况下使用色谱柱。

• 最大操作压力为 600 bar (9,000 psi)。

• 最高操作温度为 80 °C 。

注意：StableBond 柱专为在低 pH 值（如，pH 值小于5）情况下获得高稳定性分析而设计。

但是，所有硅胶填料在 pH 值大于 6 的水相流动相中均具有一定的溶解度。

因此，在 pH 值大于 6 的条件下使用硅胶色谱柱时，请在较低的温度（低于 40 °C ）条件下使用低浓度（范围在 0.01 到 0.02 M 之间）的缓冲液操作可获得最长的色谱柱寿命。

通过避免使用磷酸盐和碳酸盐缓冲液，也可以在 pH 值大于 6 时增加色谱柱的稳定性。

（引自：H. A. Claessens 、M. A. van Straten 和 J. J. Kirkland ，J. Chromatogr. [A]，728 [1996] 259）。

流动相选择
键合固定相本质上是非极性的，最适合与流动相，如甲醇/水或乙腈/水混合液，共同使用。

增加有机相比例通常会减小样品的保留时间。

如果所使用的流动相具有相当高的粘度，在 40 到 65 °C 的温度范围内使用色谱柱能够提高效率。

此填料的梯度洗脱通常会使用 5% 的甲醇或乙腈水溶液作为初始梯度和 100% 的甲醇或乙腈作为最终梯度。

有关溶剂选择的详细信息，请参阅 L. R. Snyder 和 J. J. Kirkland 合著的 Introduction to Modern Liquid Chromatography （John Wiley & Sons ，1979）一书第二版的第六和第七章，以及 L. R. Snyder 、J. J. Kirkland 和 J. L. Glajch 合著的 Practical HPLC Method Development （John Wiley & Sons ，1997）一书第二版的第六、七、八章。

应用
ZOR BAX SB-C8 可用于碱性、中性或酸性分析物。

对于许多碱性化合物，通常不必使用碱性改性剂（如三乙胺）就能够获得有效、对称、分离效果好的峰。

但是，强碱性化合物可能需要添加碱性改性剂，如 10 到 20 mM 的二甲基辛胺或 20 到 30 mM 的三乙胺。

在使用 pH ﹦3 的流动相时，此类样品通常可获得最佳的色谱分析结果。

这里强烈推荐一种用于强碱性化合物的流动相，使用三乙胺将 0.1% 三氟乙酸调节至 pH ﹦3，并与适当比例的甲醇或乙腈混合。

ZORBAX SB-C8 能够在 80 °C 的低 pH 溶液中使用，因此它是在较高温度条件下进行分离的理想选择。

高温能够降低流动相的粘度、降低操作压力并更改峰间距（选择性）。

色谱柱保养
含有颗粒物质的样品可能会堵塞色谱柱进样端滤芯，因此在进样前应该过滤样品。

如果溶剂流速看起来受阻（色谱
柱反压特别高），首先检查溶剂在到达色谱柱进样端之前是否畅通无阻。

如果色谱柱受阻，则进样端滤芯前可能存在颗粒。

建议反接色谱柱并冲洗 25 到 30 mL 的流动相，以此尝试清除前端的堵塞物。

如果该操作无法令色谱柱恢复到接近其起始反压，则应该更换色谱柱。

要从色谱柱中清除附着力强的物质，请用较强（极性较弱）的溶剂冲洗色谱柱。

如甲醇、乙腈或二氯甲烷/甲醇混合液 (95/5) 等溶剂能够清除附着力较强的化合物。

在极个别情况下，低流速的二甲亚砜或二甲基甲酰胺也可用于此目的。

当更换的溶剂之间的极性差异较大时，必须首先使用可互溶的溶剂（如异丙醇）冲洗色谱柱。

由于色谱柱具有 3/8 英寸的端螺帽，因此应该使用 3/8 英寸的扳手将色谱柱连接到仪器上，应避免将柱端接头拧得过紧。

过度紧固柱端接头可能会导致损坏，且需要更换色谱柱。

储存建议
应该在纯有机溶剂中长期储存硅胶基质的键合相色谱柱，最好是质子惰性溶剂，如 100% 的乙腈。

如果色谱柱之前已使用了含缓冲盐的流动相，则首先应使用 20 到 30 倍柱体积的甲醇或乙腈与水 (50/50) 混合液清洗色谱柱以清除缓冲盐，然后再用 20 到 30 倍柱体积的纯有机溶剂冲洗。

储存色谱柱前，应使用色谱柱随附的末端堵头将两端封紧，以防止填料变干。

色谱柱在大多数流动相中可短期地安全储存。

但是，为保护仪器，需要使用不带缓冲液的相同水相比例的流动相冲洗色谱柱，以从仪器和色谱柱中清除盐分（例如，使用 60/40 ACN/H 2O 清除 60/40 ACN/0.02 M 磷酸盐缓冲流动相）。

当使用此方法时，起始流动相会迅速达到重新平衡，并且还会消除盐腐蚀所造成的任何危险。

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