饮料中柠檬黄、日落黄的测定能力验证研究
液相色谱法测定饮料中日落黄、柠檬黄和胭脂红的含量
第40卷第5期2021年5月Vol.40No.5May.2021绵阳师范学院学报Journal of Mianyang Teachers'CollegeD01：10.16276/51-1670/g.2021.05.008液相色谱法测定饮料中日落黄、柠檬黄和胭脂红的含量李娟1,张形2,龙丽1（1.绵阳师范学院化学与化学工程学院，四川绵阳621000；2.绵阳市安州生态环境监测站，四川绵阳622651）摘要：通过高效液相色谱法对饮料中常见的日落黄、柠檬黄和胭脂红含量进行测定.选用Cleanert PWAX-SPE混合型弱阴离子交换柱和Cleanert PA聚酰胺小柱，吸附饮料中的合成着色剂，再用氨化甲醇洗脱，最后经反相色谱分离.采用Venusil®XBP C185»m4.6x150mm,用0.02mol/L乙酸铁溶液和色谱纯甲醇为流动相梯度洗脱，根据保留时间定性和峰面积比较进行定量.结果表明：0落黄、柠檬黄、胭脂红在20p,g/mL~100ixg/mL范围内都有良好的线性关系，相关系数R2^0.999,加标回收率为82.8%-102.36%，相对标准偏差为0.65%~1.32%.关键词：高效液相色谱法；饮料；日落黄；柠檬黄；胭脂红；合成色素中图分类号：0657.72文献标志码：A文章编号：1672-612X（2021）05-0039-060引言人工合成色素的检测方法有高效液相色谱法、薄层色谱法同、紫外-可见分光光度法⑺、液一质联用法⑹等.很多方法包括前处理只适用于检测基质比较简单的食品卩财，对于一些蛋白质含量高且基质复杂的食品（如:海产品，腌制蔬菜等）却不能准确测定其中的含量，而国家标准《食品中合成着色剂的测定》（GB/T5009.35-2003）⑷中规定的高效液相色谱法、薄层色谱法和示波极谱法来测定色素,这些方法前处理步骤繁琐，费时，成本高.为了方便检测不同饮料中柠檬黄、胭脂红和日落黄的含量，本文建立了同时检测以上3种合成色素的方法，该方法适用于各类不同饮料中日落黄、柠檬黄和胭脂红的测定，适用范围广、准确、操作简便、成本低且重复性好.1日落黄、柠檬黄、胭脂红的介绍和含量测定的研究现状11日落黄、柠檬黄、胭脂红的简介日落黄（sunset yellow,简称SY）［11］（图1-1）,又名食用黄色5号（日本）、食用黄色3号、橘黄、夕阳黄、晚霞黄，是一种水溶性偶氮类着色剂•化学名称为1-（4，-磺基-1，-苯偶氮）-2-蔡酚-6-磺酸二钠盐，分子式为C16H10N2Na2O7S2,相对分子质量452.37,是一种常用的人工食用色素，性质稳定，价格较低，广泛用于食品和药物的着色••柠檬黄又称酒石黄、腓黄血（图1-2）.分子式为C16H9N4O9S2Na3,化学名称为1-（4-磺酸苯基）-4-（4 -磺酸苯基偶氮）-5-毗哩咻酮-3-竣酸三钠盐，食用柠檬黄外观为橙黄色粉末，微溶于酒精，不溶于其他有机溶剂•主要生产原料为对氨基苯磺酸及酒石酸，由对氨基苯磺酸经重氮化，与1-（4-磺基苯基）-3-竣基-5-毗哩咻酮在碱性溶液中偶合、精制而成•大多用于食品、饮料、药品、化妆品、饲料、烟草、玩具、食品包装材料等的着色，也可以用于羊毛、蚕丝的染色•胭脂红，又名食用赤色102号（日本）、食用红色7号、丽春红4R、大红、亮猩红问（图1-3）,为水溶性偶氮类着色剂•分子式为C22H2°Oi3,化学名称为1-（4，-磺酸基荼偶氮）-2-荼酚-6,8-二磺酸三钠盐，是收稿日期：2020-01-15第一作者简介:李娟（1968-）,女，四川绵阳人，副教授,研究方向:仪器分析化学及结构化学.绵阳师范学院学报（自然科学版）觅菜红的异构体.胭脂红（Ponceau 4R ）是目前我国使用最广泛、用量最大的一种单偶氮类人工合成色素. 胭脂红作为食品色素可用于果汁饮料、配制酒、碳酸饮料、糖果、糕点、冰淇淋、酸奶等食品的着色，而不能用于肉干、肉脯制品、水产品等食品中,主要是为了防止一些不法分子通过使用色素将不良的原料肉如变质肉 的外观掩盖起来，欺骗消费者■图1日落黄Fig.l The sample ofsunset yellow图2柠檬黄Fig.2 The sample of tartrazine 图3胭脂红Fig.3 The sample of carmine12日落黄、柠檬黄、胭脂红含量测定的研究现状柠檬黄、日落黄、胭脂红色素是世界上最常用的合成食用色素，在饮料调色方面起着至关重要的作用•而作为广泛应用于饮料中的合成食用色素,消费者对这些色素的超标使用和食品安全也越来越关注,推动研 究学者们不断地对这几种色素的测定进行研究■刘奋等介绍了用高效液相色谱法配合DAD 检测器对柠檬黄、胭脂红、日落黄含量进行测定的方法％］，流动相为甲醇和0.02 mol/L 乙酸钱，梯度洗脱•针对各种合成色素的不同出峰时间，分别选用其最佳检测波长检 测,大大提高检测灵敏度，并有效克服了在254 nm 处的梯度洗脱时造成的基线漂移，提高了定量准确性.林壮森等介绍了采用分光光度法检测饮料中柠檬黄和日落黄的方法①一词，通过测定饮料在426 mm 和482 nm 波长处的吸光度，与柠檬黄和日落黄标准溶液比较，计算样品中柠檬黄和日落黄的含量•Medeiros 等采用掺硼金刚石电极结合流动注射分析，实现了对饮料和明胶样品中4种合成色素（柠檬黄、日落黄、亮蓝和SY ）的同时检测"I .2液相色谱法测定三种色素含量的实验原理日落黄、柠檬黄、胭脂红均具有苯磺酸钠结构，本文选用Cleanert PWAX-SPE 混合型弱阴离子交换柱 和Cleanert PA 聚酰胺小柱,用以吸附不同饮料中的合成着色剂，选用氨化甲醇洗脱，采用Venusil ® XBPC185 Jim 4.6X150 mm,以0.02 mol/L 乙酸钱溶液和色谱纯甲醇为流动相梯度洗脱，最后再经反相色谱分离.根据保留时间进行定性和比较峰面积进行定量■这种方法浓缩时间短，适用于大批量样品的同时检测•3实验部分3.1实验药品甲醇（分析纯佛山予华仪器科技有限公司、色谱纯西安天茂化工有限公司）；乙醇、甲酸、柠檬酸、氨水 （优级纯佛山予华仪器科技有限公司）；乙酸钱（色谱纯西安天茂化工有限公司）；柠檬黄标准储备液、日落黄标准储备液、胭脂红标准储备液（标准物质500 zg/mL ）深圳市时得佳科技有限公司）；超纯水（该实验所用水均为超纯水）.3.2主要实验仪器赛默飞高效液相色谱仪（UltiMate3000美国赛默飞世尔热电仪器有限公司）；PH 计（PHS-25型北京合 悦达科技有限公司）；圆形水浴氮吹仪（CM-36型北京成萌伟业科技有限公司）；多管真空固相萃取仪（5982-9110安捷伦科技（中国）有限公司）；固相萃取柱（Cleanert PWAX 杭州赛析科技有限公司）；溶剂过滤器李娟,等:液相色谱法测定饮料中日落黄、柠檬黄和胭脂红的含量（AL-01北京同德创业科技有限公司）3.3实验条件实验所需条件如下所示：色谱柱:Venusil®XBP C185pjn4.6x150mm；流速：1.0mL/min；进样量：20jxL；波长：254nm；柱温：35°C.3.4实验步骤3.4.1样品提取用分析天平分别称取市售10g（精确至0.000lg）茶类饮料（康师傅冰红茶、和其正）、果蔬汁类饮料（统一鲜橙多、农夫果园30%混合果蔬）、碳酸饮料（芬达、美年达）、功能饮料（东鹏特饮、乐虎）放入100mL烧杯中，含二氧化碳的样品（芬达、美年达）先表1实验梯度表Tab.l Table of experimental gradient 时间A%(0.02mol/L B%（色谱(min)乙酸皱）纯甲醇）0955108020 184060 2540602795540955加热以除去二氧化碳.3.4.2标准系列溶液的配制配制不同浓度的日落黄、柠檬黄、胭脂红标准系列溶液.3.4.3固相萃取柱净化Cleanert PWAX-SPE在全自动固相萃取仪中,依次向Cleanert PWAX-SPE小柱中加入6mL甲醇,6mL pH=6的水，完成SPE小柱的净化过程•将全部提取液转移到柱子中，然后再用6mL 水（pH=4）、6mL甲醇-甲酸溶液（6：4）和6mL水（pH=6）淋洗;然后通入空气约5min吹干小柱,最后用6mL2%氨化甲醇洗脱并接收洗脱液，将洗脱液置于圆形水浴氮吹仪中，在50T水浴中用氮气吹干，用1mL 超纯水溶解并定容，经0.45jim水系滤器过滤到样品瓶中，供HPLC待测.3.4.4测定取相同体积的样品溶液和标准系列溶液分别置于高效液相色谱仪中按照3.3所示的实验条件进行测定，根据保留时间定性，外标峰面积定量-4结果与讨论4.1溶液标准曲线的绘制按照3.3所示的实验条件，将日落黄、柠檬黄、胭脂红标准系列工作溶液注人液相色谱仪中，测定相应的峰面积，得到日落黄标准系列浓度与峰面积的关系，黄标准曲线，如图4、5、6所示.of sunset yellow of lemon yellow of carmine red4.2各合成色素测定的标准曲线方程和相关系数根据3.3设定的实验条件测得日落黄、柠檬黄、胭脂红在设定浓度范围内，具有线性关系良好的标准曲线，日落黄、柠檬黄、胭脂红标准曲线的回归方程和相关系数见表2.4.3三种合成色素标准溶液色谱图日落黄、柠檬黄、胭脂红的混合标准溶液（80jxg/mL）的色表2各合成色素回归方程和相关系数表Tab.2Regression equation and related coefficient table of each synthetic pigment 合成回归方程相关系数疋日落黄彳=0.1735+0.03450.9998柠檬黄A=0.2519*c+0.09620.9992胭脂红A=0.1669*c+0.30160.9990绵阳师范学院学报（自然科学版）谱图如图3所示,积分结果如表4所示:表4日落黄、柠檬黄、胭脂红积分结果Tab.4 Integrating results of sunsetyellow , tartrazine and carmine峰名称保留时间/m in 峰面积样品量 pig/mL 柠檬黄 3.01715.27079.900 1胭脂红5.62015.35681.766 2日落黄6.60314.01580.787 5图7日落黄、柠檬黄、胭脂红混合标准溶液色谱图Fig.7 Chromatogram of mixed standard solutionof sunset yellow , tartrazine , and carmine4.4样品中三种合成色素的测定与结果4.4.1样品中日落黄的测定与结果 取3.5.3处理好的样品液，在波长为254 nm 处测定其的峰面积，平行测定三次，取平均值•结果如表5所示:表5饮料中日落黄的含量表Tab.5 Content table of sunset yellow in beverage种类峰面积日落黄浓度伽-mL-1样品质量/g样品日落黄含量/g ・kg -1统一鲜橙多5.633 032.362 110.008 30.003 2农夫果园30%混合果蔬 6.015 634.572 810.001 70.003 5芬达1.978 411.236 29.999 70.001 1美年达0.384 4 2.023 110.002 40.000 2康师傅冰红茶 4.764 527.341 110.121 30.002 7和其正0010.106 40东鹏特饮0010.010 30乐虎10.000 8由表5可知，不同类饮料中,果蔬汁类饮料（统一鲜橙多、农夫果园30%混合果蔬）中日落黄含量较茶类饮料（康师傅冰红茶、和其正）、碳酸饮料（芬达、美年达）和功能饮料（东鹏特饮、乐虎）的高，但均远小于《食 品添加剂使用卫生标准》（GB2760-1996）中规定的最大使用量■4.4.2样品中柠檬黄的测定与结果 取3.5.3处理好的样品液，在波长为254 nm 处测定其的峰面积，平行测定三次,取平均值•结果如表6所示:表6饮料中柠檬黄的含量表Tab.6 Content table of tartrazine in beverage种类峰面积柠檬黄浓度/憾'mL -1样品质量/g 样品柠檬黄含量/g ・kg -1统一鲜橙多6.494 625.400 810.008 30.002 5农夫果园30%混合果蔬&226 432.275 610.001 70.003 2芬达1.409 75.214 49.999 70.000 5美年达0.631 1 2.12310.002 40.000 2康师傅冰红茶7.508 329.424 810.121 30.002 9和其正0010.106 40东鹏特饮0010.010 30乐虎10.000 8李 娟,等:液相色谱法测定饮料中日落黄、柠檬黄和胭脂红的含量由表6可知，不同类饮料中,果蔬汁类饮料（统一鲜橙多、农夫果园30%混合果蔬）中柠檬黄含量比茶类饮料（康师傅冰红茶、和其正）、碳酸饮料（芬达、美年达）和功能饮料（东鹏特饮、乐虎）的高，但均远小于《食 品添加剂使用卫生标准》（GB2760-1996）中规定的最大使用量■4.4.3样品中胭脂红的测定与结果 取3.5.3处理好的样品液，在波长为254 nm 处测定其的峰面积，平行测定三次，取平均值•结果如表7所示:表7饮料中胭脂红的含量表Tab.7 Content table of carmine in beverage种类峰面积胭脂红的 浓度/阳■ mL'1样品质量/g样品胭脂红 含量/g * kg -1统一鲜橙多2.175 911.230 610.008 30.001 1农夫果园30%混合果蔬 5.327 730.114 710.001 70.003 0康师傅冰红茶 5.328 930.121 710.121 30.002 9和其正0010.106 40芬达009.999 70美年达0010.002 40东鹏特饮0010.010 30乐虎10.000 8由表7可知，不同类饮料中,果蔬汁类饮料（统一鲜橙多、农夫果园30%混合果蔬）中柠檬黄含量比茶类饮料（康师傅冰红茶、和其正）、碳酸饮料（芬达、美年达）和功能饮料（东鹏特饮、乐虎）的高，但均远小于《食 品添加剂使用卫生标准》（GB2760-1996）中规定的最大使用量.4.4.4日落黄、柠檬黄、胭脂红的加标回收率和精密度测定为了验证该方法的可靠性，进行了加标回收实验■准确称取不含日落黄、柠檬黄、胭脂红的不同类饮料10 g （精确至0.0001 g ），分别加入浓度为0.5|jLg/mL 、l.OjLg/mL.2.0 fig/mL 的混合标准溶液做加标回收实验，每个加标水平平行测定7次，以此来验证该方法的回收率和精密度，其结果如表8所示:表8加标回收率和精密度测定结果表（n=7）Tab.8 Results of standard recovery rate and precision measuring （n=7）加标浓度（lig/mL ）—合成色素 样品0.5 1.0 2.0________________回收率％~RSD%~回收率％~RSD%~回收率％~RSD%黄落 日红旨 月 胭84.360.8990.58 1.06100.230.9887.39 1.2188.650.9689.57 1.328&620.9991.29 1.1191.870.9689.56 1.2889.680.98101.050.8789.690.7590.220.8799.72 1.2499.680.8689.940.9983.45 1.0682.80.76100.210.88101.420.9899.890.65102.870.力102.360.69101.820.66100.360.力9&990.71100.290.7898.580.8587.890.82100.540.81100.240.91100.870.9689.980.8795.930.8597.580.81黄檬柠由表8可知日落黄、柠檬黄、胭月购:的平均加标回收率为82.8%~ 102.36%,相对标准偏差为0.65%-1.32%.5结论本文选用Cleanert PWAX-SPE 混合型弱阴离子交换柱和Cleanert PA 聚酰胺小柱,用以吸附不同饮料中的合成着色剂，选用氨化甲醇洗脱，采用Venusil®XBP C185“m4.6x150mm,以0.02mol/L乙酸钱溶液和色谱纯甲醇为流动相梯度洗脱，最后再经反相色谱分离•根据保留时间定性和比较峰面积进行定量得出:在市售常见的几类饮料中，果蔬汁类中日落黄、柠檬黄、胭脂红的含量较另外种类饮料的含量要高•其中茶类饮料中，康师傅冰红茶的日落黄含量为0.0027g/kg、柠檬黄含量为0.0029g/kg、胭脂红含量为0.0029g/kg；和其正的日落黄、柠檬黄、胭脂红含量均为未检出■果蔬汁类饮料中，鲜橙多的日落黄含量为0.0032g/kg、柠檬黄含量为0.0025g/kg、胭脂红含量为0.0011g/kg；农夫果园30%混合果蔬的日落黄含量为0.0035g/kg、柠檬黄含量为0.0032g/kg、胭脂红含量为0.0030g/kg.碳酸饮料中，芬达的日落黄含量为0.0011g/kg、柠檬黄含量为0.0005g/kg、胭脂红含量未检出;美年达的日落黄含量为0.0002g/kg、柠檬黄含量为0.0002g/kg、胭脂红含量未检出•功能饮料中，东鹏特饮和乐虎三种合成色素含量均为未检出•由实验数据可知，果蔬汁类饮料中合成色素较其他三类饮料相比含量最多,其中农夫果园30%混合果蔬的三种合成色素都是最高的.而在日落黄、柠檬黄、胭脂红这三种合成色素种，日落黄、柠檬黄含量相对较高，胭脂红含量最少•同时在这几类饮料中，日落黄、柠檬黄、胭脂红的含量都远小于其检出限和中国《食品添加剂使用卫生标准》中规定的最大使用量，说明这些饮料的色素添加要求都是符合中国《食品添加剂使用卫生标准》的.参考文献：[1]祁广建，王熠，沈国英，等.染色大米中苹果绿色素含量的HPLC测定[J].中国公共卫生,2002,19(5):629.[2]林春晓，曾红慧，付斌，等.高效液相色谐法检测熟食肉制品中人工合成色素的研究[J]冲国热带医学,2005,5(3)：556-557.[3]张正尧，高效液.相色谱法测定禽肉、乳制品中合成色素的研究[J].中国卫生检验杂志,2006,16(8):928-929.[4]中华人民共和国卫生部,中国国家标准化管理委员会.GB5009.35-2003食品中合成着色剂的利定[S].北京:中国标准出版社，2004.[5]食品中化学污染物及有带因素监调工作号[S].2012.123-1&[6]严浩英，张军，李树华，等.5种人工合成食用色素的薄层色谱扫描分析[J].现代预防医学,1997,24(2):192-194.[7]李必斌,张海霞，潘连富.紫外-可见吸收光谱法定性定量测定食用合成色素[J].中国卫生检验杂志,2001,11(1)-58-60.[8]李帮锐，冯家力,潘振球，等.高效液相色谱-质谱联用法测定饮料中的人工合成色素[J].中国卫生检验杂志,2007:17(4)：579-580[9]召卩仕萍，奚星林,陈洁贞,等.饮料和糖果中5种非法添加色素的检测[J].食品科学,2011,32⑷：189-192.[10]周宏霞，韩喜东,于军强，等.食用色素及其检测方法的研究进展[J].检验检疫科学,2009,19(4):71-76.[11]周家华主编.食品添加剂[M].北京:化学工业出版社,2001:520.[12]周家华，崔英德，曾顾.食品添加剂[M]：北京:化学工业出版社,2008：85[13]Talaska G,A-l Zoughoo IM.A romatic am ines and b iom arkers of human exposure[J].J Env iron SciH ealth C Env ironCarcinog E cotox ico1Rev,2003,21(2):133-164.[14]林奕芝，刘奋，戴京晶，等•高效液相色谱法同时测定饮料中多种添加剂方法研究[J]•食品科学,2001,22(1)：63-65.[15]林壮森，蔡泽凤,陈楚珊，等•分光光度法快速检测饮料中柠檬黄的研究[J].广西轻工业,2011(2):8-9.[16]林壮森，张美珍,江英志，等•分光光度法快速检测饮料中日落黄的研究[J].广州化工,2011(7):109-110.[17]Medeiros,R.A,Lourencao,B.C,Rocha-Filho,R.ei al.Flow injection simultaneous de-termination of synthetic colorants in foodusing multiple pulse amperometric detection with a boron-doped diamond electrode[J].Talanta,2012,99：883-889.(下转第50页)［17］方黎•“课程思政”为什么受青年学生喜爱:基于青年文化选择的学理分析［J］.广西社会科学,2019,35(04):179-183.［18］陈华栋，苏锣锣•课程思政教育内容设计要在六个方面下功夫［J］冲国高等教育,2019,39(23):18-20.Construction and Practice of Ideological and Political Education in Chemistry Disciplinary Didactics Curriculum for the New EraWANG Xiaojun12,WANG Houxiong2,LIU Shuxin1,TANG Jie1(1.School of Chemistry and Chemical Engineering,Mianyang Teachers y College,Mianyang,Sichuan621000；2.College of Teachers z Education,Central China Normal University,Wuhan,Hubei430079)Abstract:Disciplinary didactics is closely related to many subjects,which affects the teaching practice in elementary education and determines the quality of talent training.From the perspective of"Three essential issues and the direction of the output-oriented supply-side reform are discussed to educate excellent teachers.Integration of i-deological and political education into course is concerned to fulfill the fundamental task of cultivating successor with morality.As an example,Chemistry didactics curriculum is reconstituted to contain ideological and political education.It is shown that the integrated course education plays a role of demonstration,guidance and diffusion.Keywords:integration of ideological and political education into course,disciplinary didactics,outcomes-based education,Chemistry(责任编辑:陈英)(上接第44页)Determination of Sunset Yellow,Lemon Yellow and Carmine in Drinks by Liquid ChromatographyLI Juan1,ZHANG Tong2,LONG Li1(1.School of Chemistry and Chemical Engineer,Mianyang Teachers'College,Mianyang,Sichuan621000；2.Anzhou Ecological Environment Monitoring Station of Mianyang City, Mianyang,Sichuan622651)Abstract:The contents of sunset yellow,tartrazine and carmine,which are common in beverages,are determined by high performance liquid chromatography.Cleanert PWAX-SPE mixed weak anion exchange column and Cleanert PA polyamide column are used to adsorb the synthetic colorant in the beverage,eluting with ammoniated methanol,and finally separated by reverse phase ing Venusil®XBP C185|xm4.6x150mm, eluting with0.02mol/L ammonium acetate solution and chromatographically pure methanol as mobile phase gradient,quantitative according to retention time qualitative and peak area comparison.The results show that there is a good linear relationship between sunset yellow,tartrazine and carmine in the range of20jjig/mL~100jjLg/mL.The correlation coefficient was R2^0.999,and the recoveries were82.8%~102.36%,The relative standard deviation is0.65%~1.32%.Keywords:high performance liquid chromatography,beverage,sunset yellow,lemon yellow,carmine red, synthetic pigment(责任编辑:陈英)。
高效液相色谱法测定杏罐头中的柠檬黄_日落黄
2010年9月第31卷第9期食品研究与开发[J].分析测试学报，2004，23(3)：26-30收稿日期：2009-09-03为了改善食品的感官性状，常在食品中添加人工合成着色剂（又称色素）。
色素色泽鲜艳，着色力强，性质稳定，不易褪色，用量较低，可任意拼色，价格便宜。
但色素主要以苯、甲苯、萘等化工产品为原料，经化学合成，主要属苯胺类色素，有的色素在人体内可形成致癌性物质α-氨基萘酚和β-萘胺。
因此，世界各国对色素的品种、使用范围和使用量都有严格限制。
目前，我国对人工合成着色剂的使用范围和使用量都有严格的规定。
GB 2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》[1]规定，西瓜酱罐头允许限量使用日落黄外其余均不得添加合成色素。
采用无水乙醇-氨水溶液浸泡，离心的方法提取被杏果肉吸附的柠檬黄、日落黄，高效液相色谱法测定，方法的重复性好，回收率、精密度较高。
1材料与方法1.1仪器与试剂1.1.1仪器液相色谱仪：FINNIGAN Surveyor LC 美国菲尼根高效液相色谱仪JJ-2型；匀浆机：江苏省金坛市环宇科学仪器厂SK-1型；快速混匀器：江苏省金坛市医疗仪器厂KQ-250DB ；超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司型；AK/QC-058型离心机：上海安亭。
1.1.2试剂柠檬黄、日落黄溶液标准物质：国家标准物质研究中心；去离子水；无水乙醇、氨水、甲醇、甲酸、乙酸、柠檬酸、乙酸铵，均为分析纯；聚酰胺粉过200目筛；甲醇：色谱纯[2]。
1.2色谱条件色谱柱：Inertsil ODS-3V 4.6×250mm ；流动相：甲高效液相色谱法测定杏罐头中的柠檬黄、日落黄王冬妍，杨书宁（沈阳产品质量监督检验院，辽宁沈阳110022）摘要：水果罐头中添加的合成色素大部分被果肉所吸附，为充分提取色素，优化水果罐头中合成色素的测定方法。
采用无水乙醇-氨水溶液浸泡、离心，提取被杏果肉吸附的柠檬黄、日落黄，高效液相色谱法测定。
玻碳电极测定饮料中柠檬黄_日落黄
图 1 铁氰酸钾溶液的 CV 图文章编号 ： 1003-8507（2009）18-3514-03 中图分类号 ： R155.5 文献标识码 ： A【实验技术及其应用】玻碳电极测定饮料中柠檬黄、日落黄梁敏思 1， 邹永德 2， 王玉东 1， 白燕 1柠檬黄和日落黄是我国批准使用的 21 种合成着色剂之一。
食用合成着色剂大多为含有苯环或者氧杂蒽结构的化合物， 它 们颜色鲜艳、 稳定， 但对人体存在一定的毒性， 过多使用会对 人体产生危害。
我国已发布的食品中合成着色剂的国家标准参考检验方法有 3 种， 一是高效液相色谱法 ［1，2］， 二 是 薄 层 色 谱法 ［3］， 三 是 极 谱 法 ［4］。
有 文 献 报 道 用 分 光 光 度 法 ［5，6］ 等 方 法 测定 。
鉴于卫生检验工作的需要和电化学方法可对一些 物 质 定 性、 定量的特征， 以极谱法测定为参照， 我们对饮料中的柠檬 黄、 日落黄在玻碳电极上的伏安特性及定量检测的可行性进行 了研究。
结果表明， 在玻碳电极上测定饮料中的柠檬黄、 日落 黄， 方法简便， 结果准确， 并且较之极谱法更为环保。
1 实验部分 1.1 仪器与试剂BAS -100B 型电化学分析仪 （BAS 公司， 美国）， pHS -3C 型 精 密 pH 计 （ 中 国 ， 上 海 雷 磁 仪 器 厂 ） 。
柠 檬 黄 （ GB W100001） 和 日 落 黄 （ GB W100003） 浓 度 均 为 1.00 mg ／ml 。
铁氰化钾、 硝酸钾以及其他试剂均为分析纯， 实验用水为二次蒸馏水。
1.2 玻碳电极预处理基金项目 ： 国家质检总局科研项目经费资助课题 ［2002IK039］ 作者简介： 梁敏思 （1980-）， 女， 在读研究生， 研究方向： 生物分析化学通讯作者： 邹永德， E -mail ： wingdakcho *********；白燕， E -mail ： tbaiyan @作者单位 ： 1.暨南大学化学系 ， 广州 ， 510632； 2.南海出入境检验检疫局电 极 用 氧 化 铝 悬 浊 液 抛 光 ， 在 1 ︰ 1 甲 醇 中 浸 泡 30min ， 依次在 1︰1 硝酸、 1︰1 氨水、 1︰1 乙醇中超声 20 min ， 在 1 ︰1 硝酸中循环伏案扫描 5～8 次， 再次打磨、 抛光后， 以铁氰 酸钾溶液为基准 ， 于 +600～-200 m V 范围内进行循环伏安法 （Cyclic Voltam m etry ， C V ） 扫描至标准图形为止。
HPLC法测定饮料中色素柠檬黄_日落黄前处理方法的比较
型, Beckm an Coulte r公司 )。 1. 2 试剂与材料 1. 2. 1 标准储备溶液 柠 檬黄: 中国 计量科 学研究院 , 批 号: 07003, 浓度: 0. 50 m g /m ,l 不确定度为 1% , 有效期 至 2010年 8 月, 等级标准号为 GBW ( E) 100001a。
0. 56% ~ 2. 23% 之间, 由表中数 据可知, 经稀 释法处 理的 两个 样品的相对标准偏 差均 小于 聚酰胺 吸附 法 处理 的, 原因 在于 稀释法处理简单, 与聚酰胺法相 比, 少 了很多 中间吸 附、淋 洗、 解吸、蒸干、溶解、定容 的操 作, 减少 了操 作 误差 的产 生, 因此 样品的平行性较好。
表 2 两种方法的回收率比较
样品 1 原含量
方法 1(稀释 )
方法 2(吸附 )
柠檬黄 日落黄 柠檬黄 日落黄
( mg / kg) ( mg / kg) ( m g/ kg) ( m g /kg)
116. 58 93. 02 110. 19 84. 72
加入量
100. 00 100. 00 100. 00 100. 00
中国卫生检验杂志 2011年 1 月 第 21卷 第 1期 C h inese Jou rnal of H ea lth Laboratory Technology, Jan 2011; V ol 21 N o 1
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化学测定方法
H PLC法测定饮料中色素柠檬黄、日落黄前处理方法的比较
蔡增轩, 黄百芬, 王天娇, 冯靓, 任一平
1 材料与方法 1. 1 仪器
A lliance 2695高效 液相 色 谱仪 ( W aters公 司 ), 2996 二极 管阵列检测器 (W aters公司 ), 循 环水式 真空泵 ( SH Z - D ( III) 型, 予华仪器公司 ) , 旋转 蒸发 仪 ( RE - 52AA, 上 海亚 荣 ) , pH 计 ( 雷磁 PH SJ- 4A 型, 上 海精 科 ) , 高速 离心 机 ( m icrofuge 18
食用合成色素日落黄和柠檬黄荧光光谱解析
食用合成色素日落黄和柠檬黄荧光光谱食用色素,又称食用染料或着色剂,作为最重要的食品添加剂之一,一直被广泛用于食品生产、医药和化妆品工业。
食用色素按其来源可分为天然色素和食用合成色素,食用合成色素大多为含有R-N=N-R键、苯环,或氧杂蒽等结构的化合物,被人体吸收后可转化成致癌物质,对人体造成不同程度的损害。
因此,必须严格控制其使用品种、数量,限制每日允许摄入量(ADI),并建立快速有效的检测方法。
近几年,在世界范围内,食品安全事件屡屡发生(如苏丹红事件、农药残留、三聚氰胺奶制品等),触目惊心、举世震惊。
世界各国都将食品安全视为国家公共安全,纷纷加强管理制度,积极建立有效的检测方法。
目前,科研人员已运用紫外分光光度法,高效液相色谱法,导数吸附伏安法等方法对食用合成色素进行了检测研究。
然而,在国内外,鲜有运用分子荧光光谱法定性表征、定量检测食用合成色素的报道。
分子荧光光谱法具有测量精确,样品量少、高分辨率等特点,能解决传统方法中,分析过程繁琐、费时且不易推广等不足,是高效、精确的分析方法,近年来在测定物质种类、含量残留等方面取得了很好的应用。
但是,食用合成色素含有多个荧光团,其荧光光谱规律较复杂,荧光相对强度与其浓度存在的非线性关系难以用偏最小二乘(PLS),多元线性回归等方法定性、定量分析。
本文采用Roper Scientific SP--2558多功能光谱测量系统对浓度为0.100mg/ml的日落黄、柠檬黄溶液的荧光光谱进行了实验研究,实验发现,在波长310nm-400nm的紫外光激励下,日落黄溶液荧光光谱的最佳激发波长为370nm,荧光峰值波长为576nm,柠檬黄溶液荧光光谱的最佳激发波长为350nm,荧光峰值波长为569nm。
根据分子光谱理论,日落黄和柠檬黄能产生荧光,是因为其分子中含有=C=O、、苯环或萘环等荧光发色基团及-OH、-SO3Na等荧光助色基团,通过偶氮键连结在一起,形成足够长的共轭双键体系,电子主要以π→π*跃迁方式吸收光子,产生荧光。
液相色谱法测定果酱中的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝
食品实验为了改善食品的颜色或外观，从而有利于产品销售，着色剂在食品工业中得到了很广泛的应用。
与天然色素相比，合成着色剂的着色力强、色泽鲜艳、不易褪色、稳定性好、易溶解、易调色、成本低，但安全性低，所以国家对合成着色剂的监管很严格。
根据GB 2760－2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》的规定，果酱（食品分类号04.01.02.05）产品允许使用合成着色剂，限值为：柠檬黄0.5g/kg、日落黄0.5g/kg、苋菜红0.3g/kg、胭脂红0.5g/kg、亮蓝0.5g/kg。
不过，GB 5009.35－2016《食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》只适用于巧克力豆、硬糖、着色糖衣制品、蜜饯、配制酒、饮料、淀粉软糖等7种产品的测定，对于允许而且经常使用合成着色剂的果酱产品，则不在适用范围内。
本文通过检出限、回收率和精密度等检验数据，验证GB 5009.35－2016《食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》的检测方法是否适用于果酱产品的检测，从而解决实验室选择测试方法的问题。
一、实验材料1.试剂及配制方法。
甲醇：色谱纯。
乙酸铵（CH3COONH4）溶液（0.02mol/L）：称量乙酸铵1.54g，加水至1L，后经微孔滤膜（0.45μm）过滤。
柠檬酸（C6H8O7·H2O）溶液（20g/100m L水），用该浓度的柠檬酸溶液把水调到pH6和pH4。
氨水溶液：氨水含量要求20％－25％，把2mL的氨水加水稀释至100mL。
甲醇－甲酸溶液：把甲醇、甲酸按体积比（6＋4）混匀。
无水乙醇－氨水－水溶液：把无水乙醇、氨水溶液、水按体积比（7＋2＋1）混匀。
聚酰胺粉（尼龙6）：过200μm（目）筛。
无水乙醇（CH3CH2OH），乙酸（CH3COOH）。
2.标准品。
柠檬黄（CAS︰1934－21－0）；苋菜红（CAS︰915－67－3）；胭脂红（CAS︰2611－82－液相色谱法测定果酱中的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝7）；日落黄（CAS︰2783－94－0）；亮蓝（CAS︰3844－45－9）。
高效液相色谱法同时测定饮料中柠檬黄、日落黄和诱惑红的含量
高效液相色谱法同时测定饮料中柠檬黄、日落黄和诱惑红的含量孙晓娟;许泳吉【摘要】采用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)同时测定了有色饮料中的合成色素柠檬黄(E102)、日落黄(E110)和诱惑红(E129).样品经溶解、超声去除气泡、稀释、0.45 μm的滤膜过滤后,直接用HPLC分析.考察了流动相的体系及比例、紫外测定波长和柱温对3种色素的分离检测效果的影响.确定流动相为V(甲醇)∶V(乙酸铵(0.02 mol· L-1》)=40∶60,紫外检测波长为254 nm,柱温为30℃.结果表明:柠檬黄、日落黄和诱惑红在该条件下均有较好的分离和检测,定量范围分别为0.30～10、0.50～10和1.0～10 μg·mL-1,3种色素的线性相关系数R2为0.999 0～0.999 3,检出限为0.09～0.50 μg·mL-1,相对标准偏差为0.07％～0.16％,回收率为94.77％～100.23％.该方法样品预处理简单、分离效果好,适用于饮料中柠檬黄、日落黄和诱惑红的同时测定.【期刊名称】《青岛科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2019(040)002【总页数】6页(P30-35)【关键词】高效液相色谱;饮料;柠檬黄;日落黄;诱惑红【作者】孙晓娟;许泳吉【作者单位】青岛科技大学化学与分子工程学院,山东青岛266042;青岛科技大学化学与分子工程学院,山东青岛266042【正文语种】中文【中图分类】O657.7合成色素作为常用的食品添加剂，因其颜色均匀、性质稳定、价格低廉等优点，往往受到生产者的青睐[1]。
然而，合成色素主要是由苯环和偶氮基团等物质缩合而成，研究表明，长期摄入过量的合成色素，会对人的身体健康造成威胁，易出现儿童注意力缺陷症、免疫系统损坏和过敏反应等[2-3]问题。
GB 5009—2016对目前允许使用的添加剂进行了严格的控制，其中包括柠檬黄(E102)、日落黄(E110)、诱惑红(E129)等多种合成色素[4-6]。
液相色谱法测定果蔬汁中柠檬黄和日落黄方法优化
液相色谱法测定果蔬汁中柠檬黄和日落黄方法优化程小会;邓敬颂【摘要】对液相色谱法测定果蔬汁中柠檬黄和日落黄进行了方法优化,对色谱条件进行了调整,采用ODS-C18型(250 mm×4.6 mm)色谱柱,流动相甲醇-0.02 mol/L 乙酸铵(体积比40:60,pH 4),流速为0.6 mL/min.采用紫外检测器,柠檬黄检测波长为430 nm,日落黄检测波长为510 nm.该方法测定结果的相对标准偏差为柠檬黄1.3%(n =4)、日落黄2.3%(n=4).柠檬黄和日落黄的平均回收率分别为84.17%、88.33%.该法满足实验要求.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2010(019)002【总页数】2页(P70-71)【关键词】高效液相色谱法;柠檬黄;日落黄;果蔬汁【作者】程小会;邓敬颂【作者单位】广州市农业科学研究院,广州,510308;广州市农业科学研究院,广州,510308【正文语种】中文合成着色剂柠檬黄、日落黄是国家批准使用的人工合成色素，因其独特的外观颜色，作为食品添加剂已经广泛地应用于果蔬汁中，但是其添加必须在规定范围内按规定限量使用，而且添加之后必须在食品标签上注明。
GB 2760-1996[1]规定，柠檬黄、日落黄用于果汁饮料的最大使用量为0.1 g/kg。
据了解，人体食用过量的柠檬黄、日落黄可引起过敏、腹泻、偏头痛、忧郁症、支气管哮喘等症状，还可能对人体的肾脏、肝脏和神经系统造成危害。
因此对食品中的柠檬黄、日落黄进行检测非常重要。
测定柠檬黄、日落黄的检测方法多是高效液相色谱法[2]，其原理是将果蔬汁中的合成着色剂用聚酰胺粉吸附提取制成水溶液，注入高效液相色谱仪，经反相色谱分离，根据保留时间定性与峰面积比较进行定量。
但在大量的实验中发现，国标法中规定的聚酰胺粉难以将柠檬黄和日落黄完全吸附，样品回收率较低。
为此笔者做了多次实验对国标法进行了优化，方法优化后能较好地将果蔬汁中的柠檬黄和日落黄提取出来，提高了实验的准确度。
高效液相色谱法测定糕点中的柠檬黄、日落黄
高效液相色谱法测定糕点中的柠檬黄、日落黄刘芳【摘要】The method for determination of lemon yellow and sunset yellow in pastry by high performance liquid chromatography was established. Samples was extracted by water immersion, and mixed rapidly by vortex mixer, and than soaked overnight. After taking centrifugal supernatant, lemon yellow and sunset yellow were determined with gradient elution of methanol and ammonium acetate solution by UV detector at 430 nm and 482 nm, respectively. The linear correlation coefficient was 0.999, and the detection limit of lemon yellow and sunset yellow was 0.4 and 0.3 mg/kg, respectively. The recovery was 72.5%-82.0%,and the relative standard deviation of determination results was 4.8%and 3.7%(n=5) for lemon yellow and sunset yellow. This method is simple and quick approach with less reagent,reducing the impurity interference and increasing the sensitivity at the same time.%建立高效液相色谱法测定糕点中的柠檬黄、日落黄的方法。
超高效液相色谱法同时测定饮料中5种人工合成色素
Abstract ：Objective: To develop an ultra performance liquid chromatography (UPLC) method for the determination of five
synthetic pigments such as tatrazine, amaranth, carmine, sunset yellow and brilliant blue in beverage. Methods: Synthetic
收稿日期：2010-04-14 基金项目：北京市科学技术研究院创新团队项目(IG200801N/C2) 作者简介：张婉(1984 —)，女，实习研究员，硕士，主要从事理化检验研究。E-mail：wanzhang@ * 通信作者：张经华(1958 —)，男，研究员，博士，主要从事分析化学及天然产物分离提纯研究。E-mail：z_j_h2006@
将质量浓度 0.5g/L 的色素单标溶液，根据需要混 合，并用超纯水稀释成质量浓度分别为 3.0、5.0、10.0、 20.0、50.0、80.0mg/L 的混合标准溶液，经 0.22μm 滤 膜过滤后，进行 UPLC 测定。 1.4 样品的制备
称取饮料试样 15g，置于 100mL 烧杯中，对碳酸 饮料样品加热驱除二氧化碳。加 20g/100mL 柠檬酸调节 试样 pH 值到 6，加热至 60℃，加入 1g 聚酰胺粉，充 分搅匀，以 G3 垂融漏斗抽滤，用 60℃ pH4 的去离子 水洗涤 3 次(10mL/ 次)，然后用甲醇 - 甲酸(6:4)溶液洗涤 3 次(10mL/ 次)，再用水洗涤至中性，用无水乙醇 - 氨水 水(7:2:1)溶液解吸 3～5 次(10mL/ 次)，收集解吸液，加 乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至 1 0 m L 。 定容后的样品经 0.22μm 滤膜过滤后，进行 UPLC 测定。
高效液相色谱法测定饮料中柠檬黄的不确定度评定
液相色谱法测定饮料中柠檬黄的不确定度评定1. 测量方法按照《食品中合成着色剂的测定》（GB/T 5009.35-2003）中高效液相色谱法测定。
取样10.00g （m 2a ），用水定容至10 mL （V 1）容量瓶刻度后混匀，待固相萃取。
取Strata X-AW （60mg/3mL ），依次用甲醇3mL 、水3mL 活化，上样1.00mL （V 2），再依次用水3mL 、甲醇3mL 过柱洗涤，然后用2%氨水甲醇溶液2mL 洗脱，收集洗脱液，真空离心浓缩至干，加水定容至1mL （V 3），待HPLC 测定，进样20uL 。
仪器：Agilent 1200高效液相色谱仪 2. 数学模型2.1 样品中被测组分浓度10001000123⨯⨯⨯⨯=V Vm v c w式中：w —样品中被测组分浓度， mg/Kg ；c —检测液中被测组分浓度，µg/mL ； m —取样量，g ；v 1—待上样样液体积，mL ； v 2—上样体积，mL ； v 3—检测液体积，mL 。
2.2 检测液中被测组分浓度bay c -=2.3 标准曲线y =b c +a(b 为斜率，a 为截距) 2.4 标准系列溶液浓度被稀释标准溶液的浓度×被稀释标准溶液的取出量÷定容体积 3. 不确定度来源与量化上述计算式依据不确定度传播公式，可得被测样品中合成色素的相对不确定度u rel ：u rel=)5(2)4(2)3(2)3(2)2(22)1(2)(2)1(rel rel rel v rel v relv rel m rel rel u u u u u u u u +++++++式中：u rel (1)一标准溶液配制产生的相对不确定度；u rel (m)一取样产生的相对不确定度；u rel (v1)一取样后的定容产生的相对不确定度； u rel (v2)一上样量产生的相对不确定度；u rel (v3)一收集的洗脱液在真空离心浓缩至干后定容产生的相对不确定度； u rel (3)一样品重复性测定产生的相对不确定度； u rel (4)一工作曲线拟合产生的相对不确定度； u rel (5)一 回收率相对不确定度。
反相高效液相色谱法检验饮料中人工合成色素
反相高效液相色谱法检验饮料中人工合成色素作者：张琦惠梁伟刘庚来源：《食品界》2018年第10期目的：对饮料中7种人工合成色素（柠檬黄、新红、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝、赤藓红）进行高效液相色谱法（HPLC）分析。
方法用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取，将样品制成水溶液，经Mono Tower C18（3μm×100mm）色谱柱分离后，以甲醇：乙醇铵溶液（0.02mol/L）进行梯度洗脱，流速为1.00ml/min，在检测波长为254nm条件下进行检测，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。
结果：7种人工合成色素在1.00-20.00mg/L质量浓度范围内的线性关系较为良好（r>0.999），回收率为95%- 101%，相对标准差（RSD）0.1%- 0.4%。
结论：高效液相色谱法操作简便，结果准确可靠，重复性好，可广泛应用于饮料人工合成色素的检测。
食品着色剂分为两类：人工合成色素和天然色素，两者相比，因人工合成色素的着色效果更佳，且成本较低，而被广泛应用于食品生产中。
人工合成色素的主要原料包括有苯、甲苯、萘和苯胺等，经有机反应（磺化、硝化、卤化和偶氮化等）后制成色素，长期食用后会对人体健康造成严重的损害。
GB 2760- 2011《食品添加剂使用卫生标准》中对食品添加剂的使用原则、允许使用的品种、使用范围和最大使用量或残留量进行了规定。
目前，我国允许使用的人工合成色素包括有柠檬黄、新红、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝、赤藓红和酸性红等。
目前，人工合成色素的检测方式主要有薄层色谱法、高效液相色谱法、超高效液相色谱法和毛细管电泳法等。
此次研究根据GB5009.35- 2016《食品中合成色剂的测定》中的实验原理，利用高效液相色谱法对饮料中的人工合成色素（柠檬黄、新红、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝、赤藓红）进行检测，为相关检测单位提供一定的参考依据。
材料和方法仪器。
Agilent 1260 高效液相色谱仪，二极管阵列检测器。
HPLC法测定饮料中日落黄含量的不确定度评定
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引言
自古以来， 食品的安全问题一直同人类的生 产活动紧密相连， 它是关系到人类健康和社会进 食品安全问题受到了人们 步的重要因素。 目前， 前所未有的关注， 各国政府、 各种国际组织和学术 ［1 ］ 机构都在致力于研究和解决食品安全问题 。 “日落黄” 是一种人工合成着色剂， 有改变食 品外观颜色的作用， 国家食品卫生标准 GB 2760 － 2007 对其使用有明确的限量规定。 如果消费 者长期或一次性大量食用日落黄含量超标的食 可能会引起过敏、 腹泻等症状， 当摄入量过大， 品， 超过肝脏负荷时， 会在体内蓄积， 对肾脏、 肝脏产 生一定伤害。 按 ISO / IEC 17025《检测和校准试
对样品进行了 4 次测量， 根据校正曲线得到 103． 50 ， 98． 31 ， 100． 47 μg / 的结果分别为： 104． 27 ， mL， 平均值为 101． 64 μg / mL。 n = 4， 由 p = 15 ， 则： S 1 1 （ c － c标 ） u （ A2 ） = + + m p n S xx 2 25 ． 03539 = × 29 ． 82189
样品定容引入的不确定度为： u（ V） = [ u2 （ V1 ） + u2 （ V2 ） ] 1 / 2 = 0 ． 01954 （ mL） 其相对不确定度为： u r （ V） = 2． 2． 5 u（ V） 0 ． 01954 = = 0 ． 0007816 V 25
HPLC 法测定饮料中日落黄含量的不确定度评定 — — —王梅， 赵凤敏， 刘威， 董云雷， 陈玥昕
HPLC 法测定饮料中日落黄含量的不确定度评定
王 梅， 赵凤敏， 刘 威， 董云雷， 陈玥昕
（ 中国农业机械化科学研究院， 北京 100083 ） 摘要： 对 HPLC 测定饮料中的日落黄含量测定结果进行不确定度分析， 通过对各影响因素的不确 定度评定， 标准曲线拟合对饮料中合成着色剂的测量结果不确定度的影响最大 ， 其次是样品处理回收率 和实验重复性引入的不确定度对实验结果也有较大的影响 。结果表明， 饮料中日落黄的含量为 （ 81． 61 ± 2． 80 ） mg / kg， k = 2。 关键词： 饮料； 日落黄； 不确定度； 评定 中图分类号： TS264． 4 文献标识码： A 文章编号： 1005 － 1295 （ 2011 ） 04 － 0021 － 04 doi： 10． 3969 / j． issn． 1005 － 1295． 2011． 04． 006 Assessment of Uncertainty in Determination of Sunset Yellow Content by HPLC in Beverage WANG Mei， ZHAO Fengmin， LIU Wei， DONG Yunlei， CHEN Yuexin （ Chinese Academy of Agricultural Mechanization Sciences， Beijing 100083 ， China） Abstract： Sunset yellow content in beverage was determined by HPLC ，from analyzing the uncertainty and evaluating every affecting factor，the main factor affecting the determination uncertainty of sunset yellow content in beverage is fitting of specification curve，then are coefficient of recovery and measurement repeatability． The result is that sunset yellow content in beverage is （ 81． 61 ± 2． 80 ） mg / kg， k = 2． Key words： beverage； sunset yellow ； uncertainty； assessment 验室能力的通用要求 》 的规定， 当检测结果处于 产品标准要求的临界值即有可能判定被检测产品 ［2 ］ 不合格时， 应该给出测量不确定度 。 不确定度 是检测技术的重要概念， 也是保证检测结果质量 的关键要素。 随着全球经济发展的需要， 评估不 确定度已成为国际检测实验室之间互认和通用准 ［3 ］ 则接轨的基础 。 根据 JJF1059 —1999《测 量 不 确 定 度 评 定 与 原理与方法， 对采用高效液相色谱法测定 表示》 的饮料中的日落黄含量进行了不确定度分析与评 定。通过不确定度分析， 建立了高效液相色谱法 测定合成着色剂的评定方法， 找出了影响日落黄 测定过程中不确定度的主要来源， 从而对检测过 确保检 程中易引入高不确定度的环节加以控制，
液相色谱法测定馒头中柠檬黄和日落黄的含量
液相色谱法测定馒头中柠檬黄和日落黄的含量摘要】目的：建立HPLC法测定馒头类食品中柠檬黄和日落黄的含量。
方法：以Waters Xterra C18 色谱柱（4.6×250mm，5?m）为固定相，以0.02mol/L乙酸铵为流动相A，甲醇为流动相B进行梯度洗脱。
流速1ml/min，检测波长254nm。
结果：柠檬黄、日落黄浓度在1～20?g/ml的范围内线性关系良好。
回收率符合要求。
结论：该方法检测馒头类食品中添加色素准确，重复性好。
【关键词】柠檬黄；日落黄；馒头；高效液相色谱【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）09-0395-03HPLC determination of lemon yellow and sunset yellow in steamed buns Luo Yuan,Chen Xia,Yuan Tao.Chengdu Food and Drug Control，Chengdu，610045,China【Abstract】Objective To develop a HPLC method for the determination of lemon yellow and sunset yellow in steamed buns. Method A Waters Xterra C18 column （4.6×250mm，5?m）was used. The mobile phase A consisted of 0.02mol/L ammonium acetate，methanol as mobile phase B. Gradient elute at a flow rate of1ml/min. The wavelength of detector was 254nm. Result The calibration curves of lemon yellow and sunset yellow showed good linearity in the range of 1~20 ?g/ml. The recoveries meet the requirement. Conclusion This method is accurate and reproducible, suitable for the determination of lemon yellow and sunset yellow in steamed buns.【Key words】Lemon yellow;Sunset yellow;Steamed bun;HPLC在我们日常生活中，食品色素的使用很广泛。
液相-子空间夹角判据联用分析饮料中的柠檬黄和日落黄
液相-子空间夹角判据联用分析饮料中的柠檬黄和日落黄宋光均;刘柳;粟晖;孙增强;罗嘉利【摘要】通过液相-光谱联用,采用向量-子空间夹角判据进行计算,建立了饮料中柠檬黄和日落黄的分析方法。
该方法先采用全波长光纤光谱仪建立不同浓度柠檬黄和日落黄的标准光谱数据库,以及市售碳酸型饮料和功能型饮料的样品光谱数据,再进行液相-光谱联用,得到扣除饮料中待测组分后的本底光谱数据；运用向量-子空间夹角判据进行计算饮料中柠檬黄和日落黄的含量。
试验结果表明,在3~30μg/mL 内柠檬黄和日落黄的标准工作曲线线性关系良好(R2柠檬黄=0.9976,R2日落黄=0.9998)；向量-子空间夹角判据计算结果与高效液相色谱法测定结果比较,相对误差小于2.5％,样本加标回收率为89.5％~109.0％, RSD为4.9％~6.1％,该方法能满足定量分析需求。
%In this paper,a new analysis method for testing tartrazine and the sunset yellow in drinks was established based on vector-subspace criterion with high performance liquid chromatography and spectrometer. At first, the spectral databases of the drinks and the standard spectral databases of tartrazine, sunset yellow were constructed by multi-wavelength spectrometer. Then the multi-wavelength UV spectral databases of drinks background were constructed after the tartrazine or the sunset yellow was decucted from drinks by HPLC-spectrometer, respectively. Three kinds of spectral libraries were computed to analysis for determinating the tartrazine and the sunset yellow in drinks based on Vector-subspace angle criterion. The results showed that the linear relationship of standard curve of tartrazine and sunset yellow were good in the range of 3~30μg/mL (R2tartrazine=0.999 8,R2sunset yelow=0.999 8).Comparing the results of vector-space angle criterion with the results of high performance liquid chromatography, the RSDs were less than 2.50%. And the recoveries of tartrazine, sunset yellow were 89.5%~109.0%with RSDs of 4.9%~6.1%, so the method met the requirement of quantitative analysis.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2015(000)017【总页数】4页(P4277-4280)【关键词】向量-子空间夹角;多波长紫外-可见光谱;高效液相色谱;柠檬黄;日落黄【作者】宋光均;刘柳;粟晖;孙增强;罗嘉利【作者单位】广州标旗电子科技有限公司，广州 510640;广西科技大学生物与化学工程学院/糖资源绿色加工广西高校重点实验室，广西柳州 545006;广西科技大学生物与化学工程学院/糖资源绿色加工广西高校重点实验室，广西柳州 545006;广西科技大学生物与化学工程学院/糖资源绿色加工广西高校重点实验室，广西柳州 545006;广西科技大学生物与化学工程学院/糖资源绿色加工广西高校重点实验室，广西柳州 545006【正文语种】中文【中图分类】O657.3柠檬黄和日落黄是碳酸型饮料和功能型饮料中广泛添加的人工合成色素，由于添加过量色素会对健康造成不良影响，因此建立碳酸型饮料和功能型饮料中柠檬黄和日落黄的分析方法对食品安全检测具有重要的作用。
饮料中柠檬黄、日落黄的测定能力验证研究
饮料中柠檬黄、日落黄的测定能力验证研究作者：王冬妍等来源：《品牌与标准化》2015年第03期【摘要】饮料中柠檬黄、日落黄的测定能力验证为2014年辽宁省质量技术监督局组织的能力验证计划之一。
本研究介绍了能力验证计划的实施过程，包括样品制备、均匀性和稳定性检验、结果统计与分析等。
本次能力验证计划共有61家实验室报名，柠檬黄项目有50家实验室取得满意结果，占结果总数的86.2%；日落黄项目有43家实验室取得满意结果，占结果总数的76.8%。
经过不满意原因分析与补测试验，最终柠檬黄项目有60家实验室取得满意结果，占结果总数的98.4%；日落黄项目有56家实验室取得满意结果，占结果总数的94.9%。
【关键词】饮料柠檬黄日落黄能力验证【DOI编码】 10.3969/j.issn.1674-4977.2015.03.007为掌握获证检验检测机构的能力状况，加强对全省实验室资质认定（计量认证）获证单位检验检测工作的监督，促进机构能力和技术水平的提升，提高机构的工作质量，保证数据的准确可靠，提升资质认定（计量认证）单位社会公信力，根据《实验室和检查机构管理办法》和《实验室能力验证实施办法》的规定，辽宁省质量技术监督局2014年在全省范围内开展室内环境、食品、家具、石油产品、电线电缆、防水卷材和机动车安全技术性能等7个项目部分参数的实验室能力验证活动。
本研究介绍了项目之一的“饮料中柠檬黄、日落黄的测定能力验证计划”的实施过程，包括样品制备、均匀性和稳定性检验、结果统计与分析等。
1 材料与方法1.1 材料（1）测试项目：本次能力验证计划的测试项目是柠檬黄和日落黄。
柠檬黄和日落黄是目前世界上应用最广泛的合成色素，在饮料中作为着色剂被广泛使用，合成色素没有任何营养价值，对人体健康也没有任何帮助，合成色素中的偶氮类化合物积累体内具有致癌作用或引起肿瘤，许多食用合成色素除本身或其代谢物有毒外，在生产过程中还可能混入砷和铅，造成重金属超标。
反相高效液相色谱法检验饮料中人工合成色素
分析 检测反相高效液相色谱法检验饮料中人工合成色素 张琦惠 梁伟 刘庚 玉溪市食品药品检验所目的:对饮料中7种人工合成色素（柠檬黄、新红、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝、赤藓红）进行高效液相色谱法（HPLC）分析。
方法 用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取，将样品制成水溶液，经Mono Tower C18（3μm×100mm）色谱柱分离后，以甲醇：乙醇铵溶液（0.02mol/L）进行梯度洗脱，流速为1.00ml/min,在检测波长为254nm条件下进行检测，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。
结果：7种人工合成色素在1.00-20.00mg/L质量浓度范围内的线性关系较为良好（r>0.999），回收率为95%-101%，相对标准差（RSD）0.1%-0.4%。
结论：高效液相色谱法操作简便，结果准确可靠，重复性好，可广泛应用于饮料人工合成色素的检测。
食品着色剂分为两类：人工合成色素和天然色素，两者相比，因人工合成色素的着色效果更佳，且成本较低，而被广泛应用于食品生产中。
人工合成色素的主要原料包括有苯、甲苯、萘和苯胺等，经有机反应（磺化、硝化、卤化和偶氮化等）后制成色素，长期食用后会对人体健康造成严重的损害。
GB 2760-2011《食品添加剂使用卫生标准》中对食品添加剂的使用原则、允许使用的品种、使用范围和最大使用量或残留量进行了规定。
目前，我国允许使用的人工合成色素包括有柠檬黄、新红、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝、赤藓红和酸性红等。
目前，人工合成色素的检测方式主要有薄层色谱法、高效液相色谱法、超高效液相色谱法和毛细管电泳法等。
此次研究根据GB5009.35-2016《食品中合成色剂的测定》中的实验原理，利用高效液相色谱法对饮料中的人工合成色素（柠檬黄、新红、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝、赤藓红）进行检测，为相关检测单位提供一定的参考依据。
材料和方法仪器。
Agilent 1260 高效液相色谱仪，二极管阵列检测器。
色-食用合成色素日落黄和柠檬黄荧光光谱的研究
ａｎｄ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｃｏｕｌｄ ｎｏｔ ｂｅ ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ ａｎｄ
ＳＯ ｏｎ．
ａｎｄ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ
ａｎａｌｙｓｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｓｕｃｈ ａｓ ＰＬＳ，ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ Ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ，Ｏ．１ ＯＯｍｇ／ｍｌ ｓｕｎｓｅｔ ｙｅｌｌｏｗ
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ＢＰ ｎｅｕｒａｌ
ｎｅｔｗｏｒｋ，ｒｄｉａｌ ｂａｓｉｓ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｎｅｕｒａｌ ｎｅｔｗｏｒｋ，ＧＡ—ＢＰ ｎｅｕｒａｌ
ｓｕｎｓｅｔ
ｎｅｔｗｏｒｋ，ａｒｅ
ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ
ｙｅｌｌｏｗ ａｎｄ ｔａｒｔｒａｚｉｎｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｍｐｌｅｘ ｎｏｎｌｉｎｅａｒ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｃｏｕｌｄ ｂｅ
ｏｂｖｉｏｕｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ
ｂｅｔｗｅｅｎ
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ｓｕｎｓｅｔ
ｙｅｌｌｏｗ ａｎｄ ｔｈｅ ｔａｒｔｒａｚｉｎｅ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ
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ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ａｂｉｌｉｔｙ ｉｓ
Ⅱｌ
Ａｂｓｔｒａｃｔ
ｅｎｈａｎｃｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ．Ｓｏｍｅ ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｔ ａｌｇｏｒｉｔｈｍｓ，ｓｕｃｈ
ｓｕｃｈ ａｓ ＵＶ ａｄｓｏｒｐｔｉｖｅ
ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｏｆ ｆｏｏｄ ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ，ｈｉｇｈ
ｐｉｇｍｅｎｔ．Ａｔ
ｌｉｑｕｉｄ
ｐｒｅｓｅｎｔ，ｍａｎｙ ｍｅｔｈｏｄｓ
ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ
ｔｈｅ