7种小蠹虫酯酶同工酶的比较研究
第四章 昆虫分子科学
一、生物技术在昆虫分类中的应用 一、转基因抗虫育种的发展概况
许多边界口岸水果和蔬菜中那些检疫性、危险性害虫, 如: 桔小实蝇、地中海 实蝇等, 其主要以幼虫危害, 它们的外部形态比较相似, 借助常规方法从外部 形态上很难鉴别区分, 把它们饲养为成虫, 是一个既费时又花费人力和物力的 过程。又由于水果和蔬菜在保存上容易腐烂变质的特殊性, 利用分子生物技 术可以提供便利, 它既可以缩短鉴定分类时间, 又节省大量的人力和物力。
桔小实蝇除柑桔外，尚能为害芒果、番石榴、 番荔枝、阳桃、枇杷等200余种果实。
一、生物技术在昆虫分类中的应用 一、转基因抗虫育种的发展概况
地中海实蝇有250多种寄主，主要危害柑桔、 苹果、梨等水果和茄科蔬菜。
一、生物技术在昆虫分类中的应用 一、转基因抗虫育种的发展概况
现代遗传学研究表明, 一切物种的遗传性状 都是由基因决定。基因的变异不仅体现在外 部形态的变异上, 还体现在体内蛋白质分子 结构的变化上。而基因的变异取决于DNA 分 子碱基序列的变异。在生物分类和系统的发 展中, 采用分子生物学技术, 从DNA 水平进行 分类研究, 解决形态分类上不能解决的问题。
第四章 昆虫分子科学
昆虫学的研究成果导致了分子生物学的 迅猛发展（果蝇分子生物学、转基因抗虫作物等在现代分子生物
学和生物技术中占有非常的地位。）
分子生物学及生物技术的发展，也有利 的促进了昆虫学在分子和细胞水平上的 基础研究。（昆虫分类学、利用昆虫生物反应器生产药物等。）
昆虫学和分子生物学相互交融而形成的 交叉学科----昆虫分子科学已成为当前昆 虫学发展的前沿学科。
一、生物技术在昆虫分类中的应用
二、转基因抗虫育种的发展概况
三、转基因昆虫的应用
半翅目部分昆虫酯酶同工酶的酶谱模式图
２ ． １ 斑 须蝽 同种 不 同个 体 间 Ｅ Ｓ Ｔ同 工酶 的 比较及 其模 式 图
传变异研究 。酯酶同工酶（ ｅ ｓ ｔ ｅ ｎ ａ ｓ ｅ ｉ ｓ ｏ ｚ ｅ ｙ ｅ ｍ ｅ ｓ ， Ｅ Ｓ Ｔ ） 是一组 能水解酯键的酶 ， 在生物体 内广泛存在 ， 许 多试验需做大量的探索。本试验 对宁夏常见的 ４种 半翅 目蝽科 昆虫 酯酶 同工酶 进行 比较分 析， 分析同种不 同个体昆虫酯酶同工酶酶谱的共 同点和差异 ，
通过多次 的重复试验 ， 找 出共有的酶带 ， 对每一条酶带在凝胶
图 １为斑须蝽的 ８个个 体的酯 酶同工酶 酶谱 ， 其 中前 ２ 道是 同一相同个体的酶谱 ， 后 ２道也 为同一个体 的酶谱 。从
（ 宁夏大学生命科学学院 ， 宁夏银川 ７ ５ ０ ０ ２ １ ）
摘要： 应用 聚丙烯酰胺凝胶垂直板 电泳技术 ， 对 宁夏地区半翅 目（ Ｈ ｅ ｍ ｉ ｐ ｔ ｅ ｒ ａ ） 蝽科 （ Ｐ ｅ ｎ ｔ ａ ｔ ｏ ｍｉ ｎ ａ ｅ ） ４种蝽不 同个体 的酯酶 同工酶 （ Ｅ Ｓ Ｔ ） 作 了 比较研究 。结果表明 ， ４个种的 Ｅ Ｓ Ｔ同工酶谱带清 晰 ， 稳定性 好 ， 且 显示 出各 自的特征谱带 。 ４种蝽模式图的 比较表明 ， 种 内不 同个 体酶谱 差异较小 ， 不 同种之 间模式 图差异 比较 明显 ， 并且 每种都有 自己 的特征 谱型 ， 可作为半翅 目昆虫系统分类学研究 的重要分类特征 。 关键词 ： 半 翅 目； 蝽科 ； 酯酶同工酶 ； 聚丙烯 酰胺凝胶 电泳
８ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ离心 １ ５— ２ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ， 取上清液备用。采用垂直板聚 丙烯酰胺凝胶不 连续 电泳 ， 分离胶浓 度为 ７ ． ５ ％， ｐ Ｈ值 ８ ． ９ ， 浓缩胶浓度为 ３ ． ５ ％， ｐ Ｈ值 ６ ． ７ ， 点 电极缓 冲液 为 ｐ Ｈ值 ８ ． ３ 的Ｔ ｉ ｆ ｓ 一甘氨酸溶液 ， 电泳时浓缩胶 电压 为 １ １ ０ Ｖ， 分离胶 电 压为 ２ ８ ０ Ｖ， 电泳全过程约需 ４ ｈ 。
试验简报 小菜蛾乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶活力测定
[试验简报]小菜蛾乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶活力测定周先志，刘波*（福建省农科院生物技术中心）1前言通过田间三龄小菜蛾幼虫与网室内长期饲养的三龄小菜蛾幼虫的乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶的活性作比较，并测定不同温度下饲养的三龄小菜蛾幼虫的羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的活力，发现抗性产生的原因。
通过测定小菜蛾不同龄期幼虫以及蛹和成虫的羧酸酯酶、乙酰胆碱酯酶的比活力，发现其酶活差异，并找出其酶活最小的发育阶段，即耐药性最差的发育阶段，指导田间用药，并将田间三龄小菜蛾幼虫与网室内长期饲养的三龄小菜蛾幼虫的乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶的活性作比较，发现抗性产生的原因。
2 材料与方法羧酸酯酶比活力测定参考Van Asperen(1962)的方法；乙酰胆碱比活力测定参考Ellman(1961)的方法；酶源蛋白质含量测定参考Bradford (1976)记述的考马斯亮蓝G-250染色法测定。
3结果与分析3.1 不同龄期小菜蛾幼虫及蛹和成虫α-NA羧酸酯酶活力由表1可知不同龄期的小菜蛾幼虫α-NA羧酸酯酶的总活力和比活力均随龄期的增大而增大，四龄小菜蛾幼虫的总活力和比活力最大，一龄小菜蛾幼虫总α-NA羧酸酯酶活力的最小，蛹的α-NA羧酸酯酶的比活力最小，蛹期的总活力要高于一龄幼虫，但比活力要低于一龄幼虫，这是由于一龄小菜蛾幼虫的蛋白质浓度要低于蛹。
小菜蛾蛹、成虫和一龄幼虫的α-NA羧酸酯酶比活力差异不显著，四龄小菜蛾幼虫的总活力和比活力与一龄小菜蛾幼虫的相比差异较大，分别是一龄的7.32和5.31倍。
表1 不同龄期小菜蛾幼虫以及蛹和成虫α-NA羧酸酯酶活力虫龄 总活力umol.min.头比值 比活力umol.min.mg比值1 2 3 4 蛹成虫2.0421×108.3993×10-31.1393×10-21.4943×10-24.8466×10-32.947×10-31.004.115.587.322.371.446.519×102.1454×10-23.2283×10-23.4630×10-25.231×10-36.6749×10-31.003.294.955.310.801.023.2 不同龄期小菜蛾幼虫以及蛹和成虫乙酰胆碱酯酶活力由表2可知，不同龄期的小菜蛾幼虫的乙酰胆碱的总活力和比活力均随虫龄的增大而增大，蛹的乙酰胆碱总活力高于四龄幼虫，但比活力低于四龄幼虫。
不同品系果蝇酯酶同工酶的分析
不同品系果蝇酯酶同工酶的分析内蒙古师范大学毕业论文不同品系果蝇酯酶同工酶的分析生命科学与技术学院2001生物技术班柴锦彪指导教师耿星河摘要: 本文将用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法来分析黑体果蝇和黑檀体果蝇以及残翅果蝇的酯酶同工酶～通过酶谱分析发现黑体果蝇和黑檀体果蝇的酯酶同工酶在条带数目～分区以及强弱程度上都有很大的相同之处～通过对其迁移率和分子量以及各酶的含量的比较发现它们在迁移率和分子量上有一定的差别～特别是在各酶带的含量上相差特别大。
至于残翅与前两种不仅表现在迁移率和分子量以及酶的含量上有不同～更重要的是它的酶的条带数以及分区也与前两种有明显的不同。
关键词:果蝇,同工酶,电泳迁,移率1 概念及意义1895年Fisher提出了同工酶的概念，是指生物体内一些结构不同但催化作[1]用相同的酶称之为同工酶。
分析同一物种不同品种之间的同工酶电泳谱带可以从分子水平上得知它们的关系。
因为同工酶的遗传学基础是通过DNA转录为RNA再翻译成酶蛋白，这就是说组成酶蛋白的多肽链中的氨基酸的种类和顺序是由多[2]个核苷酸决定的。
因此，使用同工酶资料的最根本依据是酶在电场里移动性的改变反映了编码DNA顺序上的改变。
所以通过分析果蝇同工酶的电泳谱带可以从分子水平上得知不同品系果蝇间的差别。
2 电泳技术的发展及原理2.1 电泳技术的发展同工酶的分离技术有:电泳法，酶学法和免疫学法，其中以电泳法应用的最为广泛。
Tiselius(1937)第一次应用电泳技术区分在电流作用下迁移的血清蛋白。
在以后的几十年里，电泳技术有了很大的改进，它包括现在广泛应用的凝胶1 柴锦彪 11/2/2010内蒙古师范大学毕业论文电泳的发展及组织化学染色方法的应用，使得可以对酶蛋白进行电泳变异的研究。
当前电泳的种类因支持物的不同可分为纸电泳和凝胶电泳。
分离同工酶技术主要用凝胶电泳。
常用的凝胶有:淀粉凝胶;醋酸纤维薄膜和聚丙烯酰胺凝胶，其中聚丙烯酰胺凝胶具有电渗作用小，不易与样品相互作用，需要样品量少，凝胶具有一定的弹性且易于保存，对热稳定，无色透明，纯度大等优点而被广泛应[3]用。
7种负蝗酯酶同工酶的比较
Abstract: By using PAGE (polyacrylam ide gel electrophoresis) techniques, EST isozymes of the A tractom orpha sinensis, A. psittacina, A. sag itta ris, A. la ta, A. pereg rina, A. yunnanensis and A. bu rri are studied. The results show that there are 24 different mobility bands in seven species. According to the relative mobility, the bands can be divided into six kinds. The EST isozymes differ greatly among seven species and each species has its own distinctive zymogram s, which makes it easy to be distinguished. M eanwhile, seven species all appear a band in each of the ESTⅤand the ESTⅥ, these two bands are p robably the characteristic band of the A tractom orpha. The clustering analysis disp lays that the A. yunnanensis has the closest relationship w ith the A. bu rri, and the most distant relationship w ith the A. sag itta ris. Key words: A tractom orphas; EST isozyme; taxonomy; clustering analysis
北虫草不同菌株酯酶同工酶谱的比较分析
文 章 编 号 １０ － ３ ７ ２ １ ）５ Ｏ Ｏ — ２ ００ ８ ５ （０ Ｏ 一 Ｏ ９ ０ １
１ ． 酶 源提 取 ．１ ２
分 别 取 上 述北 虫 草 新 鲜 子 实 体适 量 ，加 液
氮 反 复研 磨 成 粉 ， 分装 入 １ Ｌ离 心 管 中。ຫໍສະໝຸດ 种样 品加 磷 酸 一 ．ｍ ５ 每
和育种提供 依据。
收 稿 日期 ：０ １ ０ — ０一 稿 ；０ １０ — ２修 改 稿 。 ２１－３２ ２ １－ ５ １
ｅ ｉ ａ ｌ ｍｏ ａ ４ ＠ １ ．ｏｎ － ｎ ｉ ： ｎ ０ ０８ ６３ｃ ｉ
５ｍＬ丙 酮 中 ， 加 固 兰 Ｒ 再 Ｒ染 色 剂 ， 始 染 色 时 ， 染 色 剂 加 开 把
入 １ ｏ Ｌ染 色缓 冲液 中 。３ ℃染 色 １ ￣ ０ ｉ ； 酸脱 色 固定 。 ０ｍ ２ ０２ ｒｎ醋 ａ １２ 数 据 处理 酯 酶 同 工 酶相 对 迁 移 率 （ ，： ｒ Ｘ Ｘ ．． ４ Ｒ）Ｒ ＝
理睁
． ． 生 ５３６ 抓 好 食 用 菌专 业 合 作 社 建 设 ２ １ 年 在 全 市 开 展 食 ０１ 按上述补贴外 ， 在基 础设 施 、 地 等 方 面 给 予 优 惠 ； 是 鼓 励 用 三
基 地 发 展 ， 合 作 社 （ 业 ） 用 菌 基地 发 展 达 １０万 袋 以 上 对 企 食 ０
化
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用菌专业合作社“ 优争先” 动 ， 进食用菌专业 合作社 的 创 活 促
发 展 。 着重 引导 食 用 菌 专 业 合 作 社 在 产 品 加工 、 牌 注册 、 品 市
的 每 年 给予 适 当 的补 助 ； 四是 鼓 励 品 牌 申报 和 商 标 注 册 ， 合 对 作 社 申报 无 公 害 农 产 品 和 绿 色食 品 以及 品 牌 申报 和商 标 注 册
酯酶同工酶在玉米不同世代中的差异分析
中 ， 均 每 个 位 点 的 等位 基 因数 为 １３ 多 态 位 点 的 百 分 数 Ｐ ３ ， 态 位 点 的 平 均 等 位 基 因 数 Ａｐ ． 代 平 ．， 一３ 多 Ａ ｏ ＝２ 早 系 、 代 系 和 晚 代 系 间差 异 显 著 ， 中 有其 特 征 谱 带 ， 带 位 置 ， 色 深 浅 都 存 在 差 异 ． 同 世 代 的 特 征 带 差 异 明 酶 染 不 显 ， 作 为 世 代 分类 及 鉴定 的 补充 ． 带数 量 在 中代 系 （ 交 种 除 外 ） 明显 增 加 ， 晚 代 系又 有一 定 的 减 少 ． 可 酶 单 有 到
第３ ２卷
第 ２期
延
边
大
学
农
学
学
报
２１ ０ Ｏ年 Ｏ ６月
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｒｃ ｌｕ ａ ｃｅ ｃ ｎ ｉｎ Ｕ ｎｖ ｒｉｙ ｏ ｒ ａ ｆＡｇ ｉｕ ｔ ｒ ｌ ｉｎ ｅ Ｙａ ｂａ ｉｅ ｓｔ Ｓ
Ｖｏ ． ２ ． １３ ＮＯ ２ Ｊｎ ００ ｕ ．２ １
酯酶 同工 酶在 玉 米不 同世 代 中的差 异分 析
２ ）试 剂 三 羟 基 氨 基 甲 烷 （ ｉ） Ｎ， 一 亚 甲 基 双 丙 烯 酰ｃ） 盐 ＨＣ ） 四
（ ＭＥ ） 溴 酚蓝 、 固牢 蓝 Ｒ ＴＥ Ｄ 、 坚 Ｒ盐等 ．
１ ３ 酯 酶 电 泳 方 法 ．
１ ）制 样及 提取
关键 词 ： 米 ； 酶 ； 玉 酯 同工 酶 ； 因频 率 基
中 图分 类号 ：￥ １ ５３ 文 献标 识码 ：Ａ 文章 编 号 ：１ Ｏ —７ ９ （ ０ ０ ０ —０ ３ － ０ ０ ４ ９９ ２ １ ） ２ １８ ５
同工 酶 （ｓ ｚｍｅ一 词是 Ｍａｋ ｒ 和 Ｍｏｌｒ １ ５ Ｉｏｙ ） ｒ ｅｔ ｌ 于 ９ ７年提 出来 的［ ， ｅ １ 同工 酶是 指具 有 相同催 化 功能 而化 ］
四种蚂蚁酯酶同工酶分析
四种蚂蚁酯酶同工酶分析摘要:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对膜翅目蚁科4种蚂蚁的酯酶同工酶进行了比较研究｡经比较分析发现4种蚂蚁的酯酶同工酶酶谱带清晰､稳定性好､差异显著,显示出各自的特征酶带,可以用它作为遗传标志反映种群基因结构的变化和种内､种间的亲缘关系｡关键词:聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE);蚁科;同工酶;酯酶同工酶Analysis of the Esterase Isozyme in Four Species of AntsAbstract: The esterase isozymes of four species of ants(Hymenoptera:Formicidae) were studied by polyacrylamide gel electrophoresis. The results showed that the zymograms of esterase isozymes in four species ants were in significant difference. The zymograms were very clear and stable. It indicated that they could be as a genetic marker to identify the variation of genomic structure in species and their genetic relationship.Key words: polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE); ants; isozyme; esterase isozyme自从Hunter和Markert创立了同工酶酶谱(zymogram)技术以来,同工酶的研究得到了很大的发展,酶谱的变化已作为鉴定物种､研究分类与进化､遗传与变异的重要指标｡同工酶电泳技术具有客观､恒定､精确的优点[1]｡酯酶同工酶是目前应用最多的酶类,酯酶(Esterase,E.C.3.1.1,简称EST)是具有多态性的一组同工酶,是生物体内广泛存在的水解酶类,是由染色体上不同的基因或共显性等位基因译制的,是直接的基因产物,在种属鉴定和遗传变异的研究中具有重要作用｡研究结果证明,酯酶同工酶谱带丰富清晰,在不同物种间差异明显,可以有效地区分不同物种[2]｡同工酶电泳技术已广泛应用于昆虫纲多个类群(如双翅目､鳞翅目､同翅目､鞘翅目､半翅目､膜翅目等)的分类学研究中｡并已证明对同工酶酶谱资料的分析在鉴定种类､确定亲缘关系､区分近缘种､姐妹以及解决类群的分类地位争端方面具有重要意义和应用价值[3]｡但目前把同工酶电泳技术应用于膜翅目蚁科进行研究的报道相对较少,徐畅等[4]对此进行了研究,结果表明利用同工酶电泳技术进行蚁科种类的分类研究是可行的;李绍文等[5]研究表明蚁科总科昆虫同其他总科昆虫的酯酶同工酶基因差异显著;Heinz等[6]的研究发现细胸蚁属类群的酯酶同工酶种间表现出一些差异;张家萍[7]研究了切叶蚁亚科与蚁亚科6属8种昆虫的酯酶同工酶酶谱,并进行了聚类分析｡本文对切叶蚁亚科和伪切叶蚁亚科的2属4种蚂蚁的酯酶同工酶进行比较研究,旨在从分子水平对膜翅目蚁科物种的分类进行试验探究｡1材料和方法1.1材料的种类及来源所用蚂蚁材料为2007年5月采自河南商丘市郊区｡供试材料种类､地点见表1｡1.2仪器DYC—24B型垂直电泳槽(北京六一仪器厂);DYY—5型稳压稳流电泳仪(北京六一仪器厂);GL—20G—II高速台式冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂);500 μL欧林巴斯数码相机(日本);FA2004电子天平(北京六一仪器厂);微量进样器20 μL､100 μL和1 000 μL(上海安亭微量进样器厂)｡1.3试验药品及试剂配制A液:丙烯酰胺Acr30 g,双丙烯酰胺Bis0.2g,加水至100 mL;B液:丙烯酰胺Acr30 g,双丙烯酰胺Bis 0.8 g,加水至100 mL;C液:1 mol/L盐酸48mL,Tris 33.6 g,TEMED 230 μL,加水定容到100mL,pH值为8.9;D液:1 mol/L盐酸48 mL,Tris5.98g,TEMED 460 μL,加水定容到100 mL,pH值为6.8;E液:过硫酸铵5g加水至50 mL;电极缓冲液:Tris 6 g,Gly 28.8 g加水至1 000 mL;溴酚蓝指示剂:甘油0.8 mL,pH值为6.8的D液1 mL,5%的溴酚蓝2滴;研磨液:0.1 mol/L盐酸89.4 mL,Tris 1.211 4 g,加水至200 mL,pH值为7.2;染液[8]:取醋酸-1-奈酯､醋酸-2-奈酯各100 mg,溶于10 mL丙酮;坚牢蓝RR盐200 mg,溶于10 mL丙酮,混合后,再加pH值为7.2的Tris-盐酸缓冲液定容到200 mL,现配现用｡2试验步骤2.1样品的制备称取活体蚂蚁各0.2 g用液氮速冻,置于预冷的研磨器中,分别加预冷的pH值为7.2的Tris-HCl缓冲液2 mL,在冰浴中研磨｡将研磨后的混合液在4℃下12 000 r/min离心15 min,上清液保存待用｡2.2凝胶制备按表2的配方配制分离胶,快速混匀｡用注射器灌胶(不要有气泡),并在凝胶顶部加少量水(一般为5 mL)以隔绝空气,使胶面平整,室温静置约1 h,凝胶聚合反应完成后,去除上层水层｡然后按表2配方制备浓缩胶,快速混匀,加入分离胶上端,同时迅速插入合适的样品梳,静置聚合,约40~60 min后,轻轻取出梳齿待用｡凝胶配方见表2｡2.3点样用微量进样器取40 μL样品和20 μL溴酚蓝指示剂(预冷的)混匀,再取混合液15 μL加入样品槽中｡再用电极缓冲液(用时稀释10倍)注满样品槽,并使上槽液浸没胶板,即可进行电泳｡2.4电泳电泳时上槽电极接负极,下槽电极接正极｡电泳槽置于4℃的冰箱中｡开始电压为100V｡待溴酚蓝指示剂进入分离胶后调电压为150V｡电泳时间为6~7 h｡电泳完毕从槽中取下玻璃板用蒸馏水冲洗干净,再取出胶板｡2.5染色固定将配好的染液经过滤后,把剥取好的凝胶移入其中,37℃保温,10 min开始显色,直至出现清晰的棕红色酶带｡当出现棕红色的酶带时,迅速倾出染液,用pH值4.7的乙酸缓冲液漂洗,再保存于7%的固定液中,置于冰箱中保存｡2.6凝胶计算和拍照使用米尺或游标卡尺分别量取样品迁移距离和溴酚蓝指示染色迁移距离,进行分析｡使用数码相机对固定好的凝胶进行拍照,然后置于冰箱保存｡2.7酶谱记录酶谱记录包括溴酚蓝指示剂染料迁移距离､酶带的数目及迁移距离,测量时计数应以酶带的中部为准｡同一样品中不同酶带的相对强弱(酶带的宽度､染色强度)也应记述｡记录的酶谱可直接用于分析亚科､属及种间差异｡电泳图谱中,不同样品迁移距离之差小于0.5 mm即可看作是同一位置的酶带｡各酶带的相对迁移率(Relative mobility,Rm)是以指示剂溴酚蓝在每次电泳时移动的距离(Xf)为标准计算的｡若某一条酶带从负极向正极移动的距离为X,则该酶带的相对迁移率:Rm= Xi / XfRm值一般在0~1之间,是不同胶板之间比较的关键,其差异反映了同工酶分子量或所带电荷的差异,是遗传变异直接在电泳图谱上的表现｡2.8聚类分析将所测得的各酶带的迁移率直接输入SPSS 17.0软件,采用欧式距离系数,运用类平均法进行聚类分析｡3结果与分析本试验采用PAGE法对蚁科四种昆虫的EST同工酶进行了研究,对不同亚科､属､种间的EST同工酶进行了比较分析｡主要以各种蚂蚁所呈现的同工酶谱带作为基础,进一步测定各酶带的相对迁移率,从而比较不同分类阶元之间的差异｡根据酶带迁移率(Rm)的不同,将蚂蚁EST同工酶谱划分为3个区域:(1)Rm值为0.00~0.30,划为EST-1区;(2)Rm值为0.30~0.60,划为EST-2区;(2)Rm值为0.70~0.90,划为EST-3区｡4种蚂蚁的酯酶同工酶酶谱见图1｡4种蚂蚁酯酶同工酶酶谱各带的相对迁移率见表3｡3.14种蚂蚁酯酶同工酶的比较3.1.1切叶蚁亚科切叶蚁亚科分析了铺道蚁属的铺道蚁和沃尔什氏铺道蚁｡2种蚂蚁的EST同工酶酶谱及各酶带的迁移率(Rm值)见表3､图1｡(1)铺道蚁Tetramorium caespitum(L),共有6条酶带,EST-1区为0条,EST-2区4条,EST-3区2条｡EST-2区中4条酶带染色最深,较宽,且分带明显,酶活性最强;后2条酶带染色较浅,酶活性较弱｡(2)沃尔什氏铺道蚁Tetramorium walshi (Forel),共有5条酶带,EST-1区为0条,EST-2区4条,EST-3区2条｡EST-2区中4条酶带染色最深,较宽,且分带明显,酶活性最强;后1条酶带染色较浅,酶活性较弱｡3.1.2伪切叶蚁亚科伪切叶蚁亚科分析了细长蚁属的飘细长蚁和黑细长蚁｡2种蚂蚁的EST同工酶酶谱及各酶带的迁移率(Rm值)见表3､图1｡(3)飘细长蚁Tetraponnera allaborans(Walker),共有1条酶带,EST-1区为0条,EST-2区1条,EST-3区0条｡EST-2区中1条酶带染色较深,较宽,且分带明显,酶活性较强｡(4)黑细长蚁Tetraponnera nigra(Jerdon),共有2条酶带,EST-1区为1条,EST-2区1条,EST-3区0条｡EST-1区的1条酶带染色浅,酶活性较弱;EST-2区中1条酶带染色较深,较宽,且分带明显,酶活性较强｡3.2聚类分析利用各4个种每一条酶带的迁移率Rm值,在SPSS软件中采用欧式距离对上述4种蚂蚁进行聚类分析｡聚类结果显示,铺道蚁属的铺道蚁和沃尔什氏铺道蚁首先聚在一起,说明这2个种关系较近;细长蚁属的飘细长蚁和黑细长蚁也聚在了一起,说明这2个种的亲缘关系较近｡最后,切叶蚁亚科和伪切叶蚁亚科的相聚,说明这2个亚科或这2个属的关系较近｡综上,聚类图直观的显示了这4种蚂蚁的关系,与形态学分类基本一致｡4种蚂蚁的相关系数及聚类结果如表4､图2所示｡综上所述,无论从酯酶同工酶酶谱带颜色的深浅､条数､Rm值及聚类分析,均可以得出:铺道蚁属与细长蚁属之间的差异非常显著,几乎不存在相似性,说明两属之间的亲缘关系相对较远;而同一属内不同种之间虽然有一定的差异,但也存在很大的相似性,说明铺道蚁和沃尔什氏铺道蚁之间､黑细长蚁和飘细长蚁之间的亲缘关系相对较近｡4讨论4.1酯酶同工酶的分类价值4.1.1酯酶同工酶蚁科不同亚科级之间或不同属之间的差异本文研究的蚁科2个不同亚科的2个不同属,即切叶蚁亚科的铺道蚁属和伪切叶蚁亚科的飘细长蚁属｡酯酶同工酶在亚科､属等高级､中级阶元中的差异较大,从酶带数量上来看,切叶蚁亚科或铺道蚁属的相对较多,有5~6条酶带;伪切叶蚁亚科或细长蚁属酶带数量相对较少,仅1~2条酶带｡从酶活性上来看,在所研究的酶谱中,切叶蚁亚科或铺道蚁属酶活性较强,伪切叶蚁亚科或细长蚁属相对较弱｡因此,铺道蚁属与细长蚁属2属之间的差异非常显著｡4.1.2酯酶同工酶在同一属内不同种之间的差异切叶蚁亚科铺道蚁属研究了2种蚂蚁即铺道蚁和沃尔什氏铺道蚁;伪切叶蚁亚科飘细长蚁属研究了2种蚂蚁即飘细长蚁和黑细长蚁｡从以上这4种蚂蚁酯酶同工酶酶谱带结果可以看出,同属种间酯酶酶谱差异较小,其相似性也大于异属种间的酶谱相似性,酶谱差异大小与形态变化一致,这是由于在低级阶元中,EST同工酶位点独立进化的时间相对较短,很少或不受平行或趋同等进化现象的影响,因此它们之间的差异与分化时间成正比｡在低级阶元内EST同工酶酶谱的差异和相似是真实的,与系统发育关系是一致的,因而应用于分类上是可靠的｡4.2同工酶电泳分析方法用于昆虫分类的局限性同工酶方法的优点主要体现在试验取材和操作简单易行､结果可比性､可重复性强,并通过酶谱分析可直接获得类群的遗传信息,区分近缘种和阐明类群间的亲缘关系等特点｡但此法仍有一定局限性[7]:一是取样的局限性｡由于同工酶分析方法是建立在居群遗传学概念的基础上的,要求取样越多越好,通常每个居群取样不应少于20个个体,而且要使用新鲜活材料才能保持所有酶的活性,这就要求高效率的采集和迅速把新鲜材料运送到实验室,这对于研究分布广,在交通不便地区､零星分布､个体较少的种类来说取材会遇到一些困难｡二是电泳检测能力的局限性｡目前电泳方法只能测定结构基因编码的可溶性酶和蛋白质,另外,因大约有30%的氨基酸的替代物没有电荷上的不同,电泳后可能没有被区分出来,因此,电泳方法有一定的局限性｡三是研究阶元的局限性｡同工酶电泳一般最适合于研究种下阶元､同属种及近缘属,因为同工酶电泳研究是以相同等位基因的比较为基础的｡酯酶同工酶是水解酯键的一组酶,在昆虫体内不仅含量丰富,而且组成复杂,这组酶既受到DNA不同位点的控制,同时又受到同一位点不同等位基因的控制,因而表现的酶很复杂｡参考文献:[1] 齐宝瑛,郑哲民.昆虫学研究中酯酶同工酶电泳及PCR-RAPD技术的应用[J]. 内蒙古师范大学学报(自然科学版),2002,31(3):252-261.[2] 郭晓霞,郑哲民,于广志.酯酶同工酶多态性及其在昆虫分类学中的应用价值[J]. 昆虫知识,2000,37(6):371-374.[3] 白海艳,史丽,铁军.酯酶同工酶电泳技术在昆虫分类学中的应用[J]. 晋东南师范专科学校学报,2004,21(5):38.[4] 徐畅,王辉,沈聆苏,等.蚂蚁酯酶同工酶的比较研究[J].林业科学研究,1992,5(1):22-25.[5] 李绍文,孟玉萍,张宗炳,等. 膜翅目昆虫酯酶同工酶的比较研究[J]. 昆虫学报,1987,30(3):266-271.[6] HEINZE J,BUSCHINGER A. Electrophoretic variability of esterases in the ant tribe Leptot-horacini[J].Biochem Syst Ecol,1988,16:217-221.[7] 张家萍. 蚁科部分种类酯酶同工酶及触角显微结构研究[D]. 长春:东北师范大学硕士学位论文,2009.[8] 胡能书.同工酶技术及应用[M].长沙:湖南科学技术出版社,1981.。
中国黑木耳主要栽培菌株酯酶同工酶的研究
中国黑木耳主要栽培菌株酯酶同工酶的研究摘要：利用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术对国内34个黑木耳主要栽培菌株进行酯酶同工酶分析，结果表明其酶带数一般为2～6条不等，其中在Rf为0.484处，34个菌株都有谱带出现，34个菌株之间的相似系数在0.143～1.000之间，应用NTSYS软件进行聚类分析结果表明，供试菌株在遗传相似水平为80%时可分六大类，并且根据酯酶同工酶图谱能对部分菌株进行初步鉴别。
关键词：黑木耳；酯酶同工酶；菌株鉴别黑木耳是我国重要的栽培食用菌，在中国自然分布很广，北自黑龙江、吉林，南到广西、贵州，西起陕西、甘肃，东至福建、台湾，遍及二十多个省、市和自治区[1]。
20世纪80年代以来同工酶电泳技术逐渐广泛应用于食用菌的菌株鉴定和分类，在黑木耳菌株鉴别和亲缘关系分析等研究中，以酯酶同工酶分析比较多。
边银丙等的研究表明木耳老龄菌丝的酯酶分析在其菌株鉴别和遗传育种研究中具有更大的应用价值[2]。
韩增华等的研究结果表明，酯酶同工酶可以用来进行黑木耳菌种鉴定[3]。
因此，我们对中国主要栽培的34个黑木耳菌株菌丝体的酯酶同工酶进行分析，旨在探讨供试菌株之间酯酶同工酶的关系，初步构建供试菌株酯酶同工酶鉴别图谱。
1 材料和方法1.1供试菌株34个黑木耳菌株收集自中国黑木耳生产区。
1（黑29）、2（8808）号由黑龙江省微生物研究所提供；3（长白山7号）、4（延明1号）、5（黑916）号由吉林农业大学菌物研究所提供；6（9809）、7（东A 1）、8（东A 2）、9（东A 3）号由黑龙江省科学院应用微生物研究所提供；10（139）、11（燕耳K3）、12（神龙A8）、13（薛坪10）、14（8129）、15（黑人901）、16（陕1）、27（新科5号）号由华中农业大学菌种实验中心提供；17（黑木耳1号）号由云南省昆明食用菌研究所提供；18（Au110）、19（地栽1号）号由河南省科学院生物所提供；20（细耳987）、21（细耳887）号由山东济宁光大食用菌中心提供；22（黑耳9号）号由山东省寿光市食用菌研究所提供；23（冀诱1号）号由河北省微生物研究所提供；24（杂交310）、25（木耳6号）号由中国农业大学食用菌研究室提供；26（沪耳3号）号由上海农科院食用菌研究所提供；28（新科1号）号由湖北省随州海斌菌种总厂提供；29（植5）、30（97 1）号由陕西省汉中植物研究所提供；31（C21）、32（C22）号由陕西省微生物研究所提供；33（173）、34（186）号由陕西省西乡食用菌研究所提供。
华山松大小蠹不同龄期幼虫酯酶同工酶的比较研究
期 幼 虫的 酯酶 同工酶 进行 了分析 测 试 。 结果 表 明华 山松 大小 蠹不 同龄 期 幼 虫的 酯酶 同工酶 具 有 个体 间的 差异 ， 差 异主 要表 现 在酶 带带数 、 其 迁移 率 、 带 染 色深 浅 、 带 宽 窄等 方 面。 酶 酶 关 键词 ： 山松 大 小 蠹 ；聚 丙烯 酰胺 凝胶 电泳 （ ＡＧＥ） 酯 酶 同工 酶 华 Ｐ ；
中 图 分 类 号 ： ６ ；￥ ３ ． Ｑ９ ６ ４ ３ ５ 文 献标 识 码 ： Ａ
华 山松 大 小蠢 （ ｎ ｒ ｃｏ ｕ ｒ ｎ ｉ 是 鞘 Ｄｅ ｄ ｏｔｎ ｓ ｍａ ｄ ） ａ 翅 目小 蠹 科 的毁 灭 性森 林 蛀 干害 虫 。该 害虫 广 泛
（ ） 胶 经 预 实 验 确 定 分 离 胶 的 用 量 为 ７ ２制
５ｍＬ注射 器 吸 出蒸 馏 水 ， 用 滤 纸 吸 干 残 余 水 并
分 ， 入 浓缩 胶 ， 即 推 入与 玻板 配套 的 干净 样 品 倒 立 梳子 ， ｌｈ后 进 行 下 一 步 操 作 。在 浓 缩 胶 聚 合 约 期 间 ， 冰 箱 中取 出研 磨 好 的样 品 ， 人 台式 高 速 从 放 离心 机 中 ， ７０ ０ｒｒｉ 心 ｌ ｎ 离 心 完后 以 ０ ／ ｎ离 ａ ０ｍｉ ， 将 样 品放 人 冰箱 待 用 。 （） ３ 点样 浓 缩 胶 聚 合后 ， 轻轻 拔 出样 品梳 子 和去 掉胶 室 底部 的 塑 料 玻 槽 ， 用 滤 纸 擦 净 底 部 再 附着 的凝 胶 ， 安装 于 电泳 仪 上 后 ， 人 稀释 过 的 电 倒 极 缓 冲液 ， 注 意不 使 上 部液 体 下流 ， 冲液 的 高 应 缓 度 应 高 于 电泳 槽 顶 部 ｌｃ 底 端 淹 没 样 品 槽 底 ｍ， 部 。用 弯 曲的针 头排 净 气 泡 ， 冰箱 中取 出样 品 ， 从 用微 量 进样 器 吸 取 ｌ Ｌ的样 品 上 清 夜 ， 顺 序 Ｏ 按
小蠹虫肠道中纤维素降解菌的分离及其产酶性质
中图分 类号 ：７ ５； ９ ８ １ ￥ ８ Ｑ ６ ． 文献标 志码 ： Ａ 文 章编 号 ：０ ５—１ １ ２ １ ） ２— ０ ７— ４ ２９ ９４（０ ２ ０ ０ ０ ０
Ｉｏ ａｉｎ ｏ ｌ ｌ ｓ ｇ ａ ａｉ ｇ Ｂａ ｔｒａ ｆｏ Ｂａ ｋ Ｂｅ ｔ ’ ｓ ｌｔｏ ｆＣｅｌ ｏ ｅ Ｄｅ ｒ ｄ ｔ ｃｅ ｉ ｒ ｍ ｒ ｅｌ Ｓ ｕ ｎ ｅ
ｗｔ ｅｈｇ ｅｔ ｅ ｕａｅａｔ ｉ ３ ． ２Ｕ ｍＬ ， ｈ ｓ ｐｉ ｍ ｃｌ ｌ ｅｐｏｕ ｉｇｃｎ ｉｏｓｗ ｒ ａ ｌ ｗ ： ｉ ｔ ｉ ｓ ｃ ｌ ｌｓ ｃｉ ｔ ２ ６ ／ ） ｗ ｏｅｏ ｔ ｈｈ ｈ ｌ ｖ ｙ（ ｍｕ ｅ ｕａ ｒｄ ｃｎ ｏｄｔ ｎ ｅｅ ｓ ｏｌ ｓ ｌ ｓ ｉ ｆｏ ５ ｆｅｍ ｎａ ｏ ；（ Ｈ ）Ｓ ４ ｓ ｉｏｅ ｏｒｅ ｕ ｄ ｒ Ｈ ｖｌｅｏ ７ ５— ． ｔ ８— ０【； ｎ ２ 一１ ％ ０ｈｏ ｒ ｅ ｔ ｉ ｆ ｔ ｎ Ｎ ４ ２ Ｏ ｔ ｇｎｓｕｃ ； ｎ ｅ ａ ｆ ． ８ ５ａ ２ ３ ｃ ａ ｄ１ ％ ａ ｎｒ ｐ ｕ ＝ ６
小 蠹 虫肠 道 中纤 维 素 降解 菌 的分 离 及 其 产 酶 性 质
康 柳 熊 智 杜健伟 刘绍雄 朱丽丽
（ 西南林业大学西南 山地森林资源保育与利用省部共建教育部重点实验室 ， 云南 昆明 ６ ０２ ） ５ ２４
摘要 ： 从小蠹虫幼虫肠道中筛选分离出降解纤维素的菌株 ５ ， 株 通过杜氏纤维素选择性培养基 ， 以滤纸、
１ ２ １ 样品 处理 ．．
用 ７ ％ 乙醇 对 捕 获 的健康 小 蠹 ５
ＨＳ一１ 一 、 １ ｇ ＨＳ～１ — 。经 以秸 秆 为唯 一碳 源 的发 １ ５
7种小蠹虫酯酶同工酶的比较研究
7种小蠹虫酯酶同工酶的比较研究
梁靓;段立清;尹凤民;杨永生
【期刊名称】《植物保护》
【年(卷),期】2007(33)6
【摘要】检疫性小蠹虫的鉴定,因其虫体小,种间形态特征难以准确把握,给木材的检疫工作带来较大困难.当遇到幼虫时还需饲养为成虫再进行鉴定,增加了工作难度.应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对俄罗斯进境木材7种小蠹虫幼虫、成虫的酯酶同工酶进行了比较分析.结果表明7种小蠹虫幼虫酶带数目均比成虫多,酶活性也较成虫强.幼虫和成虫之间有多条迁移率接近的酶带,酶带相似性及聚类分析均证明可以将这些酶带作为种的特征性谱带.研究表明,当形态特征作为鉴定标准较难准确掌握时,可用幼虫或成虫同工酶电泳图谱来鉴定其种类.
【总页数】5页(P70-74)
【作者】梁靓;段立清;尹凤民;杨永生
【作者单位】内蒙古农业大学农学院,呼和浩特,010019;内蒙古农业大学农学院,呼和浩特,010019;内蒙古出入境检验检疫局,呼和浩特,011100;内蒙古出入境检验检疫局,呼和浩特,011100
【正文语种】中文
【中图分类】S41-34
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3.两种为害牧草叶(虫甲)的酯酶同工酶和过氧化物酶同工酶的比较研究(简报) [J], 张茂新
4.7种小蠹虫过氧化物酶同工酶的比较研究 [J], 梁靓;王菡;李毅然;张琦
5.7种小蠹虫过氧化物酶同工酶的比较研究 [J], 梁靓;王菡;李毅然;张琦
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十种小蠹虫同工酶的比较研究
堕塞宣查些盔兰塑圭兰焦迨窒！圈Ｔ１０种小蠹虫幼虫、成虫Ｆ．ＳＴ同工酶电泳固（＇，２；柏肤小蠢幼虫，成虫：３，４：建庄油松捎小蠹幼虫、成虫：５，８－梓边材小蠢幼虫、成虫：７．８ｃ纵坑切梢小蠢幼虫、成虫；９，１０：十二齿小蠢幼虫、成虫：Ｉｌｔ１２：六齿小蠢幼虫、或虫：ｔ３’１４；重齿小蠢幼虫、成虫；ｆ５，墙：孛重齿小蠹幼鱼、成虫；，７，，８＿藩时松八齿小蠢幼虫、戚虫；１９，锄：云杉八齿小蠹幼虫、成虫）圉２种小蠹虫幼虫、成虫ＥｓＴ同工酶电泳图谱模式图（＇，２：柏肤小蠹幼虫、成虫：３，４．建庄油松梢小孟圉。
４．建庄油松梢小蠹幼虫、成虫；５．６；桦边材小蠢幼虫、成虫：７，８：纵坑切梢小蠹幼虫，成虫：９ｔ１０：十二齿小蠢幼虫，成虫：Ｉｌ，ｔ２：六齿小矗幼虫、或虫：１３，１４．重齿，卜蠹幼虫、成虫：１５，ｔ８：中重鸯，ｊ’蠹幼虫，或虫：１７，１８：落卧松八齿小蠢幼虫、成虫：ｔ９．∞：云杉八齿小蠢幼虫．成虫）内蒙古农业大学硕士学位论文１９１７１８１９２０２ｌｏ．３５＊ｎ３６０．３８Ｏ．２３ｏ．２６ｏ．３０Ｏ．３７．ＯＡＯ０４４０．４６ｎ４９ｏ．１０‘ｏ－ｌＯｎｌＩ’ｏ．１●Ｏ．１４０．１８０．２０·０．２３ｏ．２４－０．２９·０．２９＊ｏ．２９＊０．２９０－３１０．３１０．３ｌ·ｏ．３２Ｏ，３２＊０．３４Ｏ．３４Ｏ．３４０３７ｏｔ３７．ｏ．３８２２·０．５２墼鲞墼：垒！±！兰≥≥苎兰固５１０种小蠢虫幼虫、成虫ＰＯＤ同工酶电泳囝谨（１，２：桦边材小蠢幼虫、成虫：３，４；柏肤小蠹幼虫、成虫：５·６：纵坑切梢小墨幼虫．成虫：７．８：建庄油松稍小矗幼虫、成虫：９．１０：十二齿小蠹幼虫，成虫；１１，１２：六齿小蠢幼虫、成主；１３．１４：藩叶松八齿小蠹幼虫、成虫：１５．１８：云杉八齿小蠹幼虫，戚虫；＇７，１８：重齿小蠢幼虫、成虫；１９．∞：审重齿小蠢幼虫、戚主）●２３４５６７８９ｍ¨他ＢＨｂ婚２４十种小蠹虫同工酶的比较研究围９１０种小蠢虫幼虫．成虫岫Ｈ同工誓电泳图谱（，，２：桦边材小蠢幼虫、成虫：３。
植物同工酶分析技术
同工酶应用
1、在生物学中，同工酶可用于研究物种进化、遗传变异、杂 交育种和个体发育、组织分化等。例如最原始的脊椎动物 七鳃鳗（Lamprey）只有一种LDH肽链，进化到较高级的 鱼类才有A、B两类肽链。又如通过对地理分布不同的物种 间某一同工酶谱的普查可以推测物种的地理来源。动、植 物的遗传变异可通过子代和亲代同工酶谱的比较来鉴别。 法医学中也可用多种同工酶谱的分析来鉴定亲子关系。细 胞杂交或植物杂交育种后是否出现新品种也可用周工酶谱 的比较来确定。在个体发育中，从胚胎到出生，再到成年， 随着组织的分化和发育，各种同工酶谱也有一个分化转变 的过程。某型同工酶在胚胎的大多数组织中出现，成为主 要型式，称为原始型同工酶。但出生后在某些组织中逐渐 减少而被另一型同工酶取代，后者在胚胎组织中几乎不存 在或含量极微，只在分化成熟的少数组织中存在，称为成 年型同工酶。在植物的不同发育阶段，同样可见同工酶谱 的相应改变。
3、电极缓冲液配制 Tris 3.0g,甘氨酸14.4g 加水至1000ml,pH8.8,使用时稀释10倍。 4、染色液配制（过氧化物酶染液） 醋酸 联苯胺溶液5毫升，3％H2O2 2ml，H2O 93ml
5、加样和电泳 向各加样孔中滴加24μl的样品酶粗提 液。加一小微滴1％溴酚蓝，在电压120V下进行电泳 分离，根据指示剂位置确定电泳时间。电泳结束后， 关掉电源，取出玻璃板，用刀片或薄板轻轻将玻璃夹 层分开。
化物酶可作为组织老化的一种生理指标。此外，过氧化物同工酶在遗传育 种中的重要作用也正在受到重视。
一、实验目的
1.通过实验掌握植物同工酶实验技术，了解 植物同工酶分析在遗传学研究中的意义
2.着重掌握过氧化物酶的提取，电泳与染色 技术和分析方法。
二、实验原理
几种真菌产木质素降解酶的比较研究
文章编号:1001-9499(2006)04-0020-05几种真菌产木质素降解酶的比较研究Ξ杜海萍1 宋瑞清1,233 王钰祺1(1东北林业大学,黑龙江 哈尔滨 150040;21黑龙江省林业科学院,哈尔滨 150081)摘要:通过PDA-Bavendamm平板显色反应、PDA-RB亮蓝显色反应、变色圈试验,获得选择性降解稻草木质素的高酶活菌株:糙皮侧耳、彩绒革盖菌和粗毛栓菌。
液态产酶活性试验结果表明,粗毛栓菌是供试菌株中Lac、Mnp、Hcel的高产菌株。
粗毛栓菌出现2次产Lac酶高峰,分别为第6天和12天,12天产Lac酶达894U/ L;产Mnp酶高峰出现在第6天,达185U/L;在18天时出现产Hcel酶高峰,产酶达6217U/L。
关键词:真菌;选择性降解木质素;酶活性;木质素降解酶中图分类号:TQ351101+3 文献标识码:A 在自然界的碳元素循环中,木质素的降解和利用是最关键的限速环节[1]。
而在木质素的生物降解中,漆酶(Lac)、木质素过氧化物酶(Lip)、锰过氧化物酶(Mnp)是3种主要的木质素降解酶类,可以产生这些酶类的微生物以白腐菌为主。
白腐菌是目前已知的自然界中对木质素具有最强降解能力的一类真菌,它们也是已知唯一的在纯培养条件下能够将木质素最终矿化的微生物,因此,白腐菌已成为研究木质素降解的首选微生物。
国际上近年来就如何提高白腐菌木质素降解酶的产量进行了大量工作,而高产菌株的筛选亦是最重要的内容之一。
本文对9个真菌菌株产木质素降解酶类的情况进行了比较研究,分析不同培养阶段其主要化学成分和有关酶活性的变化,测定真菌对稻草秸秆的降解能力,为高木质素降解菌株的获得奠定基础。
1 材料与方法供试菌株9个,包括:糙皮侧耳(平菇)(Pleurot us ost reat us)(牡丹江宏伟食用菌厂提供);莲座革菌(Tholephora vialis)(长春大学赠送);白色韧革菌(S tereum albi dum)(长春大学赠送);泡盖绵皮孔菌(S pongi pellis spumeus)(东北林业大学生命科学学院赠送);稀硬木层孔菌(Phelli nus robust us)(东北林业大学生命科学学院赠送);松木层孔菌(Phelli nus pi ni)(东北林业大学生命科学学院赠送);白干酪菌(Tyrom yces albi dus)(东北林业大学生命科学学院赠送);彩绒革盖菌(Coriol us versicolor)(采自东北林业大学实验林场);粗毛栓菌(T rametes gallica)(采自东北林业大学实验林场)。
同工酶在医学昆虫分类研究中的应用
同工酶在医学昆虫分类研究中的应用
刘志刚;宋杰益
【期刊名称】《生物灾害科学》
【年(卷),期】1992(000)001
【摘要】同工酶(Isoenzyme)自1959年由 Mar-kert 等系统阐述以来,作为酶学的一个分支,发展很快,迅速地被应用于医学和其它生物学科的名个领域。
在医学昆虫
领域中,医学昆虫同工酶研究是其生化分类的重要内容之一。
以往的医学昆虫分类
和鉴定常以形态学、解剖学等资料加上地理分布知识作为区分鉴定不同种类的指标。
但有些医学昆虫(如蚊类)的复合体(complex)相互间存在生殖隔离,在传病媒介作用上也有很大差异,但形态特征却极为相似;有些蜱螨近缘种的形态差异甚微,用以往的形态分类方法往往难以将这些复合体和近缘种的医学昆虫
【总页数】3页(P31-33)
【作者】刘志刚;宋杰益
【作者单位】江西医学院寄生虫学教研室;江西医学院寄生虫学教研室南昌330006;南昌330006
【正文语种】中文
【中图分类】S4
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1.我国重要医学昆虫分类鉴别技术应用研究进展 [J], 马丽华;黄钢
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3.酯酶同工酶在鞘翅目昆虫分类中的应用简介 [J], 聂传朋;李焰焰;郑哲民
4.酯酶同工酶多态性及其在昆虫分类学中的应用价值 [J], 郭晓霞;郑哲民;于广志
5.RAPD技术在医学昆虫分类中的应用 [J], 姚湧;夏立照
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缘蝽科四种昆虫同工酶鉴别(半翅目:缘蝽科 )(英文)
缘蝽科四种昆虫同工酶鉴别(半翅目：缘蝽科 )(英文)
王启瑞;郑哲民;朱刚利
【期刊名称】《昆虫分类学报》
【年(卷),期】2001(23)1
【摘要】本研究运用聚丙烯酰胺垂直板电泳技术对缘蝽科 4个种的酯酶同工酶进
行了检测。
酯酶酶谱可分为 4个区。
酯酶酶谱在属间表现明显差异 ,在属内具有某些共性。
聚类分析显示4个种的分类地位。
【总页数】6页(P9-14)
【关键词】半翅目;缘蝽科;酯酶;同工酶;分类;中国;鉴别
【作者】王启瑞;郑哲民;朱刚利
【作者单位】陕西师范大学生命科学学院
【正文语种】中文
【中图分类】Q969.352.3
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1.基于EST同工酶的缘蝽亚科10种缘蝽系统发育关系初探(半翅目:缘蝽科) [J],
朱刚利;王启瑞;郑哲民
2.秦巴山区巨缘蝽亚科三种昆虫同工酶的初步研究(半翅目:缘蝽科) [J], 王启瑞;朱
刚利;郑哲民
3.基于EST同工酶的缘蝽亚科10种缘蝽系统发育关系初探（半翅目∶缘蝽科）[J], 朱刚利;王启瑞;郑哲民
4.太行山区(山西境内)半翅目昆虫调查研究(1)——蝽科、缘蝽科、异蝽科、同蝽科、
猎蝽科、长蝽科、盲蝽科 [J], 李长安;王瑞;李青森;郭贵明
5.秦巴山区缘蝽科分类初步研究(昆虫纲:半翅目异翅亚目:缘蝽科) [J], 聂晓萌;郑哲民
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普通伏翼
普通伏翼不同组织三种同工酶的比较王艳梅1，余燕2，牛红星1(1. 河南师范大学生命科学学院,河南新乡,453007; 2. 河南科技学院动物科学学院,河南新乡,453003)摘要：采用聚丙烯酰胺不连续凝胶垂直板活性电泳，分析了普通伏翼的心脏、肝脏、肾脏、胸肌、肺、胃、小肠、舌8种组织的酯酶（EST）、乳酸脱氢酶（LDH）、苹果酸脱氢酶（MDH），3种同工酶。
结果表明：普通伏翼8种组织的3种同工酶存在差异，其分布具有明显的组织特异性，与器官或组织所执行的功能有关。
关键词：普通伏翼；同工酶；电泳；组织特异性中图分类号：Q814.9 文献标识码：A Comparison Study of Three Isozymes from Eight Tissues ofPipistrellus abramussW ANG Y an-mei1 , YU Y an2 , NIU Hong-xing1(1. College of life sciences, Henan Normal University, Xingxiang, 453003;2. College of Animal Science, Henan Institute of Science Technology, Xingxiang, 453007) Abstract:The active polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) was used to detect three isozymes, Esterase, lactate dehydrogenase, malate dehydrogenase from heart, liver, kidney, muscle, lung, stomach, small intestine, tongue of Pipistrellus abramuss. The results showed that the three isozymes had the wide ranging distribution. However, the zymogram pattern of every tissue was different and had the tissue specificity. The electrophoretograms of three isozymes had a close correspondence with the function which the tissue had carried out, which demonstrated that the isozyme played the important roles in the regulation of the metabolisms of tissues.Key word s: Pipistrellus abramuss; isozyme; Electrophoresis; tissue specificity普通伏翼(Pipistrellus abramus)又名家蝠(House bat)，隶属于小蝙蝠亚目蝙蝠科伏翼蝠属,在我国广泛分布[1]。
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第 ３ 卷第 ６ ２０） ３ 期（０７
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Ｐ ＡＮＴ Ｐ ＯＴ Ｃ Ｏ Ｌ Ｒ Ｅ ＴＩ Ｎ Ｖｏ ． ３ Ｎｏ ６（ ０ ７ １３ ． ２ ０ ）
续研究 。
ｌ ９ ６ ４４— ４ ． ９ ４， ３： ５
幼虫和成虫之间有 多条迁移率接近 的酶 带， 酶带相似 性及聚 类分 析均证 明可 以将 这些酶 带作为种 的特征 性谱带 。 研 究表 明， 当形态特征作 为鉴定标准较难准确掌握 时， 可用幼虫或成虫同工酶 电泳 ； 聚 丙 烯 酰胺 凝 胶 电泳
［ ］ 徐伟松 ， ５ 李建丰 ， 胡美英．昆虫病原真菌在害虫防治上的应用 ｍ］ Ｊ．广西农业科学 ， ０ ３ ６ ： １ ２ ２ ０ （ ） ５ —５ ． ［ ２ 裘维蕃．菌物学大全 ［ ．北京： ６ Ｍ］ 科学 出版社 ，１ ９ ：３ ． ９ ８９ ３
ｃｔ ｎ ｒ ｅｉ ｉ ｅ ｎ ｔ ｎｏ ｐ ｒｓＪ ．Ｉｖｒｂ ａｈ ｌ ａｉ ｓｆ ｒ ｌ ｓ ｍｉａｉ ｆｓｏｅ［］ ｎ ｅｔｒＰ ｔｏ， ｏ ｏ ａ ａｄ ｓ ｏ
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幼虫时还需饲养为成虫再进行鉴定 ， 增加 了工作难度。应用聚丙烯酰胺凝胶 电泳技 术对俄 罗斯进 境木材 ７种小 蠹
虫 幼 虫 、 虫 的酯 酶 同 工酶 进 行 了比 较分 析 。结 果 表 明 ７种 小 蠹 虫 幼 虫 酶 带 数 目均 比成 虫 多 ， 活性 也 较 成 虫 强 。 成 酶
７
、 蠹虫酯酶 同工酶 的 比较研 究
梁 靓 段 立 清卜 ， 尹 凤 民 杨 永 生。 ， ，
０ ０ １ ；２ １０ ９ ．内蒙古 出入境检验检疫局 ，呼和浩特 ０ １０ ） １ １ ０
（．内蒙古农业大学农学院 ，呼和浩特 １
摘要
检 疫 性 小 蠹 虫 的鉴 定 ， 因其 虫体 小 ， 间形 态特 征 难 以准 确把 握 ， 木 材 的检 疫 工 作 带 来 较 大 困难 。 当遇 到 种 给
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中图 分 类 号
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