HEPES-BSA溶液(HA溶液)
培养基中hepes的作用
培养基中hepes的作用Hepes是一种氢氧化氢盐缓冲剂，被广泛应用于生物学和生物化学实验中。
在细胞培养中，Hepes通常被添加到培养基中以维持pH值的稳定性和生理范围内的细胞活性。
下面我们将详细介绍Hepes在细胞培养中的作用和其对细胞的影响。
保持培养液的pH值稳定pH值是描述溶液酸碱程度的指标，对于细胞培养来说，保持培养液pH值的稳定性是十分重要的。
pH值过高或过低都会影响细胞的生长和代谢。
Hepes是一种良好的缓冲剂，可以有效维持培养液pH值的稳定性。
类似的缓冲剂还有Tris、Bicarbonate等，但由于Hepes的pKa值在7.3-7.5左右，还可以在生理pH值下保持良好的缓冲效果。
影响细胞代谢Hepes可以对细胞代谢产生一定的影响。
首先，Hepes 可以提供细胞所需的碳源和能源。
事实上，Hepes可以经由糖代谢途径转化为三磷酸腺苷（ATP），并且在无血清培养中，还可以作为细胞代谢的唯一碳源。
但对于有血清的培养，由于血清中已经含有丰富的营养成分，所以Hepes在这种条件下可能并不是细胞所需的主要碳源。
另外，Hepes还可以影响细胞的酶活性和代谢产物的转运。
例如，Hepes可以抑制乳酸脱氢酶的活性，从而减少细胞产生的乳酸。
另外，Hepes还可以促进细胞葡萄糖摄取和转运磷酸，从而促进葡萄糖代谢。
对细胞形态和功能的影响除了对细胞代谢的影响外，Hepes还可以影响细胞的形态和功能。
一些研究表明，将含有Hepes的培养基与含有NaHCO3的培养基进行比较，Hepes培养基能够更好地维持细胞的功能和形态。
此外，Hepes还可以促进细胞的黏附和生长，从而提高细胞的收集率和活性。
然而，Hepes也有其缺点。
一些研究表明，Hepes会导致细胞的DNA损伤，从而导致细胞凋亡和增加突变的风险。
因此，在使用Hepes时，需要注意使用相应的浓度和时限。
总结Hepes是一种良好的pH缓冲剂，在细胞培养中起到十分重要的作用。
常用实验试剂配制
1DEPC水(1‰) 1000ml 水1ml DEPC根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。
配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。
20.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris1000ml DEPC水用HCL调ph至7.5，高压备用。
3 4%PFA的配制(ph 7.0)40g PFA1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。
30.2% 甘油/0.1M tris20ml 甘油980ml 0.1Mtris4 20XSSC Nacl 175.3g（ph 7.0）柠檬酸钠88.2gDEPC水1000ml分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用5 HEPES 溶液HEPES 23.8g(ph6.8-8.0)DEPC H2O 100ml6 50X Denhaldt′s 液聚蔗糖（Ficoll 400）0.2g聚乙烯吡咯烷酮(polyvinypyrrolidone) 0.2g牛血清蛋白（BSA）0.2gDEPC 水20ml7 预杂交bufferDeinoized formanmid 5ml20X SSC 1.5ml1M HEPES 0.5ml50X Denhanldt′s液1ml龟精DNA 0.6ml(4ug/ul)DEPC水 1.4ml龟精DNA 要先95℃10-15min加热变性，随即冰浴。
杂交buffer分装后-20℃保存。
8Washing buffer(ph7.5) maleic acid 5.8gNACL 4.4gTween（吐温） 1.5ml定容至500ml溶质浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 0.3% Tween9Maleic acid buffer(ph7.5) Maleic acid 5.8gNacl 4.4g定容至500ml 溶质的浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl10Detection buffer(ph 9.5)0.1M Tris-Hcl 7.9g (9.0g)0.1M Nacl 2.9g定容至500ml.使溶质的终浓度为0.1M Tris-Hcl ,0.1M nacl.11blocking reagent（封闭液）(2-8℃保存)(bottle 5) 5gmaleic acid buffer 50ml12blocking solution封闭液（新鲜配制）1mlMaleic acid buffer 10ml13抗体（AP）10000rpm离心5min，吸上清，1：5000稀释，考虑先稀释100倍，用时再稀释。
HEPES裂解缓冲液
北京雷根生物技术有限公司
HEPES 裂解缓冲液
产品简介：
为了分离酵母亚细胞组分，细胞壁较厚的酵母菌必须经过裂解。
差速离心法能够依照原生质体中各个亚细胞组分的大小，粗略的将他们分开，获得较多的细胞器或膜成分，并去除多余组分或减少样品体积。
Leagene HEPES 裂解缓冲液主要由HEPES 、乙酸钾、100 mM 山梨醇、2mM EDTA 组成，高压灭菌，用于裂解原生质体，获得亚细胞组分。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验要求操作。
注意事项：
1、 注意无菌操作，避免反复冻融。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 3个月有效。
相关：
编号 名称 CS0041 Storage HEPES 裂解缓冲液 100ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称
CC0007 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
CC0130 胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%)
CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
DC0032 Masson 三色染色液
NR0003 Lezol(总RNA 提取试剂)
PW0053 Western 抗体洗脱液(碱性)
TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)。
HEPES溶液(1molL,pH7.4)
北京雷根生物技术有限公司
HEPES 溶液(1mol/L,pH7.4)
简介：
HEPES 即4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid ，中文名称N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-2磺酸，分子式为C 8H 18N 2O 4S ，分子量为238.31，CAS Number 7365-45-9，对细胞无毒性作用。
HEPES 是一种非离子两性缓冲剂，能有效控制pH 范围，具有较好的缓冲能力，终浓度一般为mmol/L ，培养液内含mmol/LHEPES 即可达到较好的缓冲能力。
HEPES 优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定pH 值。
Leagene HEPES 溶液(1mol/L,pH7.4)是一种常用溶液，pH 值，经过滤除菌处理，直接加入到培养基中即可。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 根据具体实验要求操作。
2、 一般工作终浓度为mmol/L ，最常用的浓度为mmol/L ，即稀释使用。
注意事项：
1、 注意无菌操作，尽量避免污染。
2、 高浓度HEPES 对某些细胞可能有一定毒性。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 6个月有效。
4℃储存有效期为2个月。
相关：
编号 名称 CC0065 Storage HEPES solution (1mol/L,pH7.4) 100ml -20℃ 使用说明书 1份
编号 名称 CC0007 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁) PW0053 Western 抗体洗脱液(碱性) TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
HEPES-BSA溶液(HA溶液)
北京吉美生物技术有限公司
HEPES-BSA溶液(HA溶液)
产品简介：
HEPES即4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid,中文名称N-(2-羟乙基)哌嗪-N，-2磺酸，分子式为C8H18N2O4S，分子量为238.31，CAS Number 7365-45-9，对细胞无毒性作用。
HEPES是一种非离子两性缓冲剂，能有效控制pH在 6.8~8.2范围，尤其在pH7.2~7.4具有较好的缓冲能力，终浓度一般为10~50mmol/L，培养液内含20 mmol/L HEPES 即可达到较好的缓冲能力。
HEPES优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定pH值。
Jimei HEPES-BSA溶液,简称为HA溶液，属于细胞培养液的成分之一。
其中HEPES 浓度为20 mmol/L，BSA浓度为0.025%，不含Ca2+、Mg2+ ，含部分其他盐离子，经过滤除菌处理，多适用于组织细胞原代培养中的清洗、培养。
产品组成：
操作步骤（仅供参考）：
1、剪取组织并消化。
2、洁净细胞筛选过滤，收取滤液，4。
C 400g离心10min，吸去上清。
3、用HEPES-BSA溶液重悬沉淀细胞，4。
C保存。
按要求进行下游实验。
注意事项：
1、注意无菌操作，尽量避免污染。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
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制备HEPES缓冲液的方法介绍
制备HEPES缓冲液的方法介绍Hepes是一种通用的两性离子缓冲剂，不结合镁，钙，锰或铜离子。
其中细胞培养应用的缓冲液强度通常在10至25mm之间，在加入Hepes后，用NaOH或HCl调节pH。
必须注意保持培养基中的重量克分子渗透压浓度，并且需要评估对于给定细胞系的毒性。
根据文献得到，HEPES在控制pH方面优于碳酸氢钠。
Hepes的缓冲液可以通过好几种方法来制备，可以将游离酸添加到水中，然后用大约一半摩尔当量的氢氧化钠或氢氧化钾滴定至所需的pH。
或者，相等摩尔浓度的Hepes和Hepes钠盐，可以将它们以大约相等的体积混合，然后用任一种溶液反滴定至合适的pH。
可以用HCL滴定钠盐，得到一半当量的氯化钠。
但是，离子强度的增加会改变溶液的重量克分子渗透压浓度。
Hepes半钠的大多数溶液都会溶解在水中，形成pH值7.5，几乎不用做调整。
Hepes缓冲盐水（2X）的俩种配方：1、氯化钠1.6克氯化钾0.074克Na2HPO4二水合物0.027克葡萄糖0.2克HEPES，游离酸1克将上述成分溶解在总体积为90毫升的蒸馏水中，用0.5 N NaOH 调节pH到7.05，然后调节用蒸馏水定容至100毫升。
通过0.22微米的过滤器对溶液进行灭菌，分装在-20°C下。
2、氯化钠16.4克HEPES，游离酸11.9 gNa2HPO4 0.21克水 1升加入上述成分并搅拌直至溶解，用5 M NaOH滴定至pH 7.05（准确的pH值非常重要），筛选消毒。
在与转染实验一起使用之前测试制剂，通过将0.5 ml的上述缓冲液与0.5 ml的250 mM CaCl2混合并涡旋进行测试。
应形成细的沉淀物，该沉淀物在显微镜下很容易看到。
如果没有形成沉淀，不要将这批缓冲液用于转染实验。
实验室常用溶液配制
一. 常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA 酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA•2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
培养基中hepes的作用
培养基中hepes的作用培养基是生物学研究中非常重要的实验工具，它可以为细胞提供必须的营养物质和环境，促进细胞的生长和繁殖。
在培养基中添加不同的化学物质可以影响细胞的生长和代谢，因此选择合适的培养基成分是非常重要的。
其中，hepes是一种常用的缓冲剂，它在细胞培养中起到了重要的作用。
本文将从hepes的定义、作用机理和应用等方面进行探讨。
一、hepes的定义hepes是一种缓冲剂，全称为4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸（4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid），化学式为C8H18N2O4S，分子量为238.3。
它是一种无色无味的结晶粉末，易溶于水，pH值在6.8-8.2之间具有缓冲作用。
二、hepes的作用机理在细胞培养中，hepes主要起到了缓冲作用。
缓冲液是指在一定pH值下，能够稳定溶液中酸碱度的一种溶液。
细胞在培养基中需要一个稳定的pH值，否则会影响细胞的生长和代谢。
hepes作为一种缓冲剂，可以稳定培养基的pH值，保持细胞的生长环境稳定。
此外，hepes还可以调节细胞的渗透压。
渗透压是指溶液中溶质浓度对水分子运动的影响。
细胞在不同的渗透压环境下，细胞内外的水分子会发生渗透压的变化，导致细胞的膨胀或收缩。
hepes 可以控制培养基中的渗透压，保持细胞在稳定的环境中生长和繁殖。
三、hepes的应用hepes广泛应用于细胞培养和生物化学实验中。
在细胞培养中，hepes常常被用作缓冲液的成分，以稳定培养基的pH值和渗透压。
在生物化学实验中，hepes也常被用作缓冲剂，用于稳定酶的活性和保持反应体系的稳定性。
此外，hepes还可以用于病毒培养和染色体分离等方面。
在病毒培养中，hepes可以稳定病毒粒子的结构和保持病毒的活性。
在染色体分离中，hepes可以稳定染色体的结构，避免染色体的破碎和断裂。
四、hepes的注意事项在使用hepes时，需要注意以下几点：1. hepes的浓度应该适当，过高或过低的浓度都会影响细胞的生长和代谢。
常用溶液的配置方法
一、常用溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）：溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为1 0ml。
分装成小份，贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份，贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA)：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份，贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA：配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8. 2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
分子实验常用溶液配制
分子实验常用溶液配制一. 常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml 水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA•2H2O和20g 的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH （6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
PBS-BSA溶液(0.1%BSA)
北京雷根生物技术有限公司
PBS-BSA 溶液(0.1%BSA)
简介：
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ，BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
PBS-BSA 溶液(0.1%BSA)主要由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、BSA 组成，不含Ca 2+、Mg 2+，pH 值为7.4，该试剂经过滤除菌，常用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 无需配制，直接使用。
1、 在进行细胞培养过程中细胞的洗涤时，应注意无菌操作，避免被微生物污染。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 R00088 Storage PBS-BSA 溶液(0.1%BSA) 500ml 4℃ 使用说明书 1份。
Hepes缓冲液配制方法
Hepes缓冲液配制方法
化学名：2-[4-（2-Hydroxyethyl）-1-piperazinyl] ethanesulfonic acid
中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸
分子式：C8H18N2O4S
分子量：238.3
HEPES是一种非离子两性缓冲液，其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。
其最大优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值。
在这种培养条件下，细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。
大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色。
HE PES有些昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒。
原则上，HEPES作为缓冲剂可用
来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。
实际操作中并非如此简单。
溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。
HEPES使用方法有两种：
（1）HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中，再过滤除菌。
每1000ml培养液中加入2.38克HEPES，待溶后用lN NaOH 调pH至7.2，滤过除菌后使用。
此时HE PES的使用浓度为10 mmol/L。
（2）亦可配成 100 x 贮存液（l mol/L），使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液，最终应用浓度仍为10mmol/L。
l mol/L（100 x）HEPES贮存液配制方法：取23.8g H EPES溶于90ml双蒸水中，用lN NaOH调pH至7.5一8.0，然后用水定容至100ml，过滤除菌，分装小瓶（2ml/瓶），4℃或-20℃保存。
HEPES溶液与PBS缓冲液的对比
由于磷酸盐与二价阳离子有关。较高浓度的PBS会导致严重沉淀，从而阻止细胞有效过滤到过滤器上使用
用于层析法
于层析法中适用
于层析法中适用
HClO荧光检测
不适用
适用
与金属离子的关系
可以忽略不计的金属离子产生络合物或沉淀。
与部分金属离子结合会产生络合物或沉淀。
与酶促反应的关系
适合用于酶促反应
可能会抑制酶促反应
在冷冻情况下的变化
HEPES 溶液的冷冻不会导致 pH 变化。
PBS 溶液的冷冻导致显著的 pH 变化。
高压灭菌
不可高压灭菌
可高压灭菌
用于电子显微镜研究的前缀固定剂
生物缓冲液可稳定水溶液的 pH 值，因此被广泛使用于生物实验中。而过去常用的传统缓冲液 ，如碳酸盐缓冲液和磷酸盐缓冲液，在很多生物实验中不适用。这些试剂在 pH 7.5 以上不能有效的缓冲， 并会产生一些干扰反应。因此Norman Good 博士等人于1966 年提出了一系列可解决传统缓冲液限 制的两性离子缓冲液，这些缓冲液的pKa 值等于或接近生理 pH 值，对细胞无毒，且不会通过细胞膜吸收。在此为您整理出较常用的PBS(Phosphate buffered saline)与HEPES使用上的优缺点。
HEPES
PBS
有效的pH范围
6.8-8.2
5.8-8.0
生物毒性
不具生物毒性不具生物毒性源自渗透压使用 0.1 M HEPES 显著提高了培养基的渗透压。
具备等渗透压的特性，可防止细胞破裂。
细胞活力
HEPES 缓冲系统中可以看到更高的最大细胞密度和活力。
PBS 稀释的细胞培养样品可能会无意中降低细胞活力。
非还原蛋白上样缓冲液配方
非还原蛋白上样缓冲液配方
非还原型蛋白上样缓冲液通常由以下成分组成：
1.缓冲剂：常见的缓冲剂有Tris、HEPES、MES等，用于维持溶液的酸碱度和稳定性。
2.盐类：如NaCl、KCl等，用于维持离子强度和蛋白质的稳定性。
3.添加剂：如甘油、牛血清蛋白(BSA)等，用于提高蛋白质的稳定性和减少非特异性结合。
4.另外，非还原型蛋白上样缓冲液的作用主要是维持蛋白质的稳定性和防止其在电泳过程中发生变性。
同时，该缓冲液也可以帮助蛋白质在电泳过程中更好地分离和迁移。
在准备配方时，应根据具体的实验需求和目标蛋白的特性进行选择。
同时，实验过程应遵循相应的安全规定和操作规范，以确保实验的安全性和准确性。
BSA的性质、作用及应用
BSA的性质、作用及应用（1%、0.1%BSA 是多少mg/ml）Bovine serum albumin (BSA) makes up approximately 60% of all proteins in animal serum.BSA的基本性质Number of residues：607Molecular weight：69323.4 DapI in water at 25 ℃： 4.7Optical absorbance of 1 g/l at 279nm： 0.667 mL mg-1 cm-1 at 279nm Dimensions： 40x40x140 cubic angstromsA 18-residue signal peptide is cut off from the precursor protein upon secretion, hence the precursor has 607 amino acid residues and a molecular weight of 69.4 kDa.不同浓度单位的换算BSA溶液常用的浓度单位是质量体积百分比（g/ml）如：1%、0.1%；和质量/体积比如10mg/ml。
这两种单位的换算如下：1% BSA = 10 mg/ml BSA；0.1% BSA = 1 mg/ml BSA根据BSA的分子量为69 KDa可以估算出：10 mg/ml BSA = 0.145 mM = 145 μMBSA的应用1、细胞培养时作为添加剂It is commonly used in cell culture protocols, particularly when protein supplementation is necessary and the other components of serum are unwanted. In cell culture its main role is as a carrier of small molecules. Because of its negative charge, BSA binds water, salts, fatty acids, vitamins and hormones, then carries these bound components between tissues and cells. The binding capacity also makes BSA an effective scavenger for removing toxic substances, including pyrogens, from the medium.2、免疫组化实验中作为封闭剂eg. ELISAs (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), immunoblots, and immunohistochemistry3、作为其他酶的保护剂eg.In restriction digests, BSA is used to stabilize some enzymes during digestion of DNA and to prevent adhesion of the enzyme to reaction tubes and other vessels.4、蛋白定量时作为标准物eg. Bradford Assay, BCA assay5、一些酶活测定反应中作为阴性对照eg. DNA binding assay。
血库储存血红细胞物理特性变化规律
血库储存血红细胞物理特性变化规律郝希平;宋霄薇;曹彬【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】3页(P435-437)【关键词】红细胞;储存;几何形态;弯曲弹性模量【作者】郝希平;宋霄薇;曹彬【作者单位】河南科技大学物理与工程学院洛阳471003;河南科技大学医学技术与工程学院洛阳471003;暨南大学生物医学工程研究所广州510632【正文语种】中文△女，1964年9 月生，硕士，副教授，研究方向：医用物理，E-mail：**************红细胞作为血液中数量最多的一种血细胞，是氧气和二氧化碳的最主要载体，同时还参与物质转运、信息传递、细胞免疫等功能。
红细胞功能的正常发挥与其形态、细胞膜力学性能以及胞内血红蛋白的结构和功能有关。
研究[1-4]表明血库血储存的过程中，红细胞的变形能力会大大下降，但以上研究中的测量方法均为有扰测量，所测值为群体信息，不能对红细胞作连续跟踪测定。
红细胞在其生存期内，青、中、老龄红细胞的形态结构和变形能力有所差异[5]。
作者采用对细胞正常生理状态无扰测量的快速显微动、静态图像分析技术[5]对不同储存时间的红细胞进行测定，探讨血库血红细胞的数目、形态结构、力学性能随储存时间的变化规律，从而为临床上血库血的合理使用提供指导，以提高临床用血的有效性。
1.1 血库血样品的制备抽取6个健康人的静脉血，立即加入CPDA血液储存液(每100 mL全血中加入14 mL)，于4 ℃下密封储存。
以刚抽取的新鲜血(储存0 d)以及用CPDA储存5、10、15 d的血用于实验。
1.2 不同胞龄红细胞的分离和提取1.2.1 缓冲溶液的配制①HEPES缓冲溶液(HBS)：原料为2.66 mol/L NaCl, 0.09 mol/L KCl, 0.2 mol/L HEPES。
②BSA-HEPES缓冲溶液(SA): 将三蒸水与上述配好的HBS以体积比混合，再加入适量牛血清蛋白(BSA)。
bsa等电点
bsa等电点BSA（贝塞尔氏醇状白汤）等电点，是一种重要的生物化学分析技术，它具有重要的分子量分析、检测复杂混合物及对其组成的理解等功能。
BSA等电点技术的原理是通过测量溶液中的BSA等电点，可以检测出溶液中的不同分子物质的含量。
BSA等电点的测定原理是：在特定pH和电导率等条件下，溶液中不同物质构成的分子有不同的电荷，从而导致不同物质在BSA等电点处浓度的差异。
由于溶液中负载性分子的浓度的差异越大，不同物质的BSA等电点越明显，所以可以利用这种原理测量混合物的相对含量。
BSA等电点的操作方法首先是将溶液中的BSA等电点的浓度以及温度等参数调节好以后，再利用高精度的电导仪将BSA等电点曲线做出来，从而检测不同物质的BSA等电点及其含量。
BSA等电点技术在生物化学分析中有着重要应用，它可以用来分析复杂混合物中的成分组成，可以用来评价物质的结构性质、鉴定生物分子的种类及定量分析复杂的生物物质的含量，用于比较不同含量的混合物的性质等。
BSA等电点技术还可以应用于食品检测，可以检测食品中添加物的成分及含量，以此来确保食品的安全性。
通过BSA等电点检测，可以及时发现食品中的添加物，如抗生素、防腐剂等，从而确保食品的安全性。
BSA等电点技术在分子量分析、检测复杂混合物及对其组成的理解上具有重要的意义，是无可替代的一种生物化学分析技术。
BSA等电点的操作方法显示出其具有良好的精度及准确性，是当今研究生物学的主要工具之一，可应用于科学研究和质控检测工作中。
实际应用中，BSA等电点技术的使用还会遇到一些困难。
因为BSA 等电点技术需要在一定的温度及电导率条件下进行检测，所以其使用费时费力，耗费资源，在结果可靠性方面也存在一定的缺陷。
此外，BSA等电点技术也受到其他因素的影响，如环境温度和电解质条件等。
当控制不住这些变量时，就会影响BSA等电点技术的测试结果，从而导致分析结果的准确性降低。
总之，BSA等电点技术是一种重要的分析技术，可以用来分析复杂的混合物，具有很强的检测能力，但也不可避免地会受到温度电解质等因素的影响，从而影响其准确性。
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HEPES-BSA 溶液(HA 溶液)
简介：
HEPES 即4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid ，中文名称N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-2磺酸，分子式为C 8H 18N 2O 4S ，分子量为238.31，CAS Number 7365-45-9，对细胞无毒性作用。
HEPES 是一种非离子两性缓冲剂，能有效控制pH 在范围，尤其在具有较好的缓冲能力，终浓度一般为mmol/L ，培养液内含20mmol/LHEPES 即可达到较好的缓冲能力。
HEPES 优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定pH 值。
Leagene HEPES-BSA 溶液，简称为HA 溶液，属于细胞培养液的成分之一。
其中HEPES 浓度为，BSA 浓度为，不含Ca 2+、Mg 2+，含部分其他盐离子，经过滤除菌处理，多适用于组织细胞原代培养中的清洗、培养。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 剪取组织并消化。
2、 洁净细胞筛过滤，收取滤液，离心，吸去上清。
3、 用HEPES-BSA 溶液重悬沉淀细胞，保存。
按要求进行下游实验。
注意事项：
1、 注意无菌操作，尽量避免污染。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
相关：
编号 名称 CC0060 Storage HEPES-BSA 溶液(HA 溶液) 100ml 4℃
使用说明书 1份 编号 名称 CC0069 HEPES 缓冲盐溶液(2×HeBS) TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。