弗氏完全佐剂致大鼠急性膝关节炎动物模型制备
_型胶原蛋白与弗氏完全佐剂大鼠关节炎模型的建立和比较
第7卷 第1期 中国实验动物学报 Vol.7No.1 1999年6月 Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica June,1999 型胶原蛋白与弗氏完全佐剂大鼠关节炎模型的建立和比较林 红 贺永怀* 黎 燕* 陆应麟* 沈倍奋*(中国协和医科大学 中国医学科学院药用植物研究所,北京)摘要 目的 对 型胶原蛋白(C -A)和弗氏完全佐剂(A-A)大鼠关节炎模型在大体外观和足部组织病理学切片等方面进行观察比较。
方法 分别采用 型胶原蛋白和弗氏完全佐剂诱导建立大鼠关节炎模型,利用排水法对大鼠足部体积进行测定,并将大鼠后足进行组织病理学切片观察。
结果 从大体外观和足部病理切片上两种大鼠模型均显示出有明显的病变,但C -A大鼠与A-A大鼠比较,滑膜增生及软骨破坏等继发性病变特征更为明显,关节炎持续时间也较长,更接近于人的类风湿性关节炎。
结论 C -A大鼠模型与A-A相比是研究RA较为理想的动物模型。
关键词 类风湿性关节炎 型胶原蛋白大鼠关节炎 弗氏完全佐剂大鼠关节炎类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是以慢性多关节炎症为主要表现的全身性自身免疫性疾病,病因和发病机制尚未完全清楚。
在RA中,滑膜的持续性增生和软骨及骨的破坏是其重要的病理学特征。
RA的动物模型有多种,其中较为经典的是弗氏完全佐剂诱导的大鼠关节炎和 型胶原蛋白诱导的大鼠关节炎模型。
本文将对这两种大鼠关节炎模型的大体外观、足部肿胀程度以及组织病理学观察等方面进行比较研究,以选择更为理想的动物模型。
材料与方法1 实验动物 Wistar大鼠,雌性,4~6周龄,30只,由军事医学科学院动物中心提供。
2 主要试剂 牛源性 型胶原蛋白(C ollagen ,C ,from bovine nasal septum),酸可溶性,美国Sigma公司产品;弗氏不完全佐剂(Freund s Adjuvant Incomplete,FI A)美国Sigma公司产品;卡介苗(BCG)购于北京卫生部生物制品研究所。
弗氏完全佐剂(CFA)诱导的大鼠关节炎模型筛选
弗氏完全佐剂（CFA）诱导的大鼠关节炎模型筛选服务类风湿性关节炎(RA)是一种以关节滑膜炎为特征的自身免疫性疾病，其发病机制十分复杂，迄今尚未完全阐明。
佐剂性关节炎(从)模型此模型是Freund于20世纪50年代创立的，又称福氏佐剂关节炎，福氏佐剂分为完全佐剂(cFA)和不完全佐剂(IFA)。
其机制是结核杆菌致关节炎抗原为65 kD 热休克蛋白(HSP)，RA病人软骨内具有与65kD HSP相似的蛋白多糖桥联蛋白抗原成分，FCA 注入激活T细胞，激活T细胞参与RA发病机制。
原发病变主要表现为致炎局部的炎症反应，续发病变一般于致炎后10—20d出现，约20d达到高峰，病理改变为滑膜下组织炎症，滑膜增生，血管翳形成，软骨破坏。
4周后，关节红肿减退，骨质减少，新骨形成，关节间隙变窄，形成不可逆的关节改变。
从大鼠的关节组织病理学及血中变化与人RA相似。
同时，对其免疫学机制研究发现，此模型存在明显的细胞免疫异常，为一种典型的免疫性炎症模型。
从制作方法简单，可广泛应用于多种动物，便于研究者选择应用。
RA的病因与发病机制目前尚未完全阐明，但随着细胞分子学和免疫学的深入研究，RA 动物模型的建立，发现了细胞因子、TH1／TH2细胞平衡、性激素等在RA的发病中起重要作用。
其中人们已证实TNF-a及IL-lβ在RA进展中起着决定性作用。
TNF-a是机体炎症反应与免疫应答的重要调节因子，能刺激滑膜细胞和软骨细胞合成PGE2和胶原酶，导致关节局部滑膜炎症和软骨组织破坏，TNF-a既能刺激IL-Iβ，IL-6，IL-8的产生，又能刺激其自身的合成，在RA的细胞因子网络中起中心作用；IL-1分为IL-1a和IL-lβ，主要由巨噬细胞分泌，内皮细胞和淋巴细胞也能产生，能诱导一系列全身的炎症反应，包括引起发热和消瘦，合成急性期蛋白，也可对软骨和骨基质代谢产生局部作用。
TNF-a主要导致RA初期的关节肿胀，而软骨的侵蚀则由IL-Iβ介导且和免疫复合物有协同效应。
专题20实验与探究-2023年高考真题和模拟题生物分项汇编(全国通用)(学生版)
专题20 实验与探究2023年高考真题一、单选题1．（2023·北京·统考高考真题）研究者检测了长期注射吗啡的小鼠和注射生理盐水的小鼠伤口愈合情况，结果如图。
由图可以得出的结论是（）A．吗啡减缓伤口愈合B．阿片受体促进伤口愈合C．生理条件下体内也有吗啡产生D．阿片受体与吗啡成瘾有关二、综合题2．（2023·北京·统考高考真题）为了研究城市人工光照对节肢动物群落的影响，研究者在城市森林边缘进行了延长光照时间的实验（此实验中人工光源对植物的影响可以忽略；实验期间，天气等环境因素基本稳定）。
实验持续15天：1～5天，无人工光照；6～10天，每日黄昏后和次日太阳升起前人为增加光照时间；11～15天，无人工光照。
在此期间，每日黄昏前特定时间段，通过多个调查点的装置捕获节肢动物，按食性将其归入三种生态功能团，即植食动物（如蛾类幼虫）、肉食动物（如蜘蛛）和腐食动物（如蚂蚁），结果如图。
(1)动物捕获量直接反映动物的活跃程度。
本研究说明人为增加光照时间会影响节肢动物的活跃程度，依据是：与1～5、11～15天相比，______________。
(2)光是生态系统中的非生物成分。
在本研究中，人工光照最可能作为___________对节肢动物产生影响，从而在生态系统中发挥作用。
(3)增加人工光照会对生物群落结构产生多方面的影响，如：肉食动物在黄昏前活动加强，有限的食物资源导致___________加剧；群落空间结构在___________两个维度发生改变。
(4)有人认为本实验只需进行10天研究即可，没有必要收集11～15天的数据。
相比于10天方案，15天方案除了增加对照组数量以降低随机因素影响外，另一个主要优点是________________。
(5)城市是人类构筑的大型聚集地，在进行城市小型绿地生态景观设计时应__________。
A．不仅满足市民的审美需求，还需考虑对其他生物的影响B．设置严密围栏，防止动物进入和植物扩散C．以整体和平衡的观点进行设计，追求生态系统的可持续发展D．选择长时间景观照明光源时，以有利于植物生长作为唯一标准3．（2023·北京·统考高考真题）自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。
大鼠佐剂性关节炎模型的建立与评价
图 1 致炎组月国窝部淋巴结内淋巴细 胞 透 射 电 镜 照 片 可 见 淋 巴细胞含有丰富的细胞器，细胞线粒体和内质 网 肿 胀，溶 酶 体 增 多 > 6 000
CHEN Bai-song，XU Yu-dong，ZHONG Shu-gi，et al （ Department Of AnatOmy ，Harbin Medical Uniuersity ，Harbin 150086，China）
Abstract：Objective To estabiish adjuvant arthriti（s AA）modeis in rats induced by CFA and take a comprehensive evaiuation . Methods We injected CFA to the ieft foot of rats . The articuiar sweiiing degree was scored，the enzyme-iinked immunoabsorbent assa（y ELISA）was used to detect the contents of the Coiiage !antibody in serum，the transmission eiectron microscope（ TEM）was used to observe the uitramicrostructure of iymphoid node in fossa popiitea and synovium in joint . Results The ievei of the C! antibody in serum of modei group was remarkabiy increased after CFA injected，and it was confirmed typicai pathoiogicai changes of RA by TEM . Conclusion The AA modei is successfuiiy buiit in rats induced by CFA . It provides more satisfactory materiai for the study of the pathogenesis and therapeutic effect of drugs . Key words：CFA；adjuvant arthritis；uitramicrostructure；rats
不同剂量弗氏完全佐剂对类风湿关节炎模型大鼠复制的影响
论
著 ・ １
不 同剂量弗氏完全佐剂对类风湿关节炎模型大鼠复制的影响
彭传玉 罗 磊 胡 玲 宋小鸽 唐照 亮 吴子建 蔡荣林 郝 峰 胡吴斌
（ 安徽 中医学 院 ，安 徽 合肥 ２ ０ ３ ） ３０ ８
【 摘要 】 目的 观 察不 同剂 量 的 弗氏完 全佐 剂对 类风 湿 关 节炎 （ ｈｕ ｔ ｄａｔ ｉｓ Ａ）模 型 复制 的影 响 ，探 讨 Ｒ 模 型 复制 中弗 氏完 全 Ｒ ｅｍａ ｉ ｈ ｔ ，Ｒ ｏ ｒｒｉ Ａ 佐 剂 的最 佳注射 量 ， 以期 为 Ｒ Ａ的 实验研 究提 供较 好 的模 型 复制 方 法。 法 采 用“ 方 病证 结合 ” 复合 佐 剂性 关 节炎模 型 复制 方 法， 风 、 湿 ” 即“ 寒、 环境 因素 ＋弗 氏完 全佐剂 的模 型复制 方 法 ， 察不 同注射 量 的 弗氏完 全佐 剂对 Ｒ 观 Ａ模 型 复制 的影响 。 果 ０１ Ｌ模 型 复制 组有 自愈 的趋 烧 结 ． ｍ
ｉ ｕｎｅ ｆ ｏｅｒｐｃｔ ａｃｉ ｏｅ ｒ ｌａ ｓ Ａｉｔｅ ｅｔｎ ｃｏ ｕｎｉ ｍ ｌｅ ｄ ｖｎｓＳ ｒ ｉ ｅ ｘｅｍｅｔ ｕｙ ｎ ｅｃ ｏ ｄｌｅｌａ ｓ ｒ ｏｓ ｉ ｍ ｄｌｅ ｉ ｔ ｓｉｅｔ ｎｑａｔｙｃ ｐｅ ｌ ａｊ ａｔ Ｏ ｓｏ ｏ ｄ ｔ ｐｒ ｎ ｌｔ ｌ ｆ ｍ ｉ ｅｆｎ ’ｎ Ｓ ｐ ｃ ｅ Ｒ ｓ ｂ ｊ ｉ ｈ ｔ ｏ ｔｙ ｕ ， ａ ｔｐ ｖ ｅｈ ｅ ｉ ａｓｄ
中图分类号 ：Ｒ ９ ．２ ：１７ － １４（０２ １ ０ ０ － ３ ６１ ８ ９ ２ １）０ － ０ １ ０
Ｅ ｅ ｔ ｆ ｉ ｅｅ ｔ ｒｕ ｄＳ ｏ ｌ ｅＡ ｊ ｖ ｎ ｓ ｎＤｕ ｌ ａ ｎ ｈ ｕ ｔｉ ｒ ｄ ｓ ｔ ｄ ｌ ｆ ｃ ｏ ｆ ｒ ｎ ｅ ｎ ’ Ｃ ｍｐｅ ｄｕ ａ ｔ Ｄ Ｆ ｔ Ｄｏ ｅｏ ｐｉ ｔ ｇ Ｒ ｅ ｍａｏｄ Ａ ｔ ｔ ｃｉ ｈ ｉ Ｒａ Ｍｏ ｅ
影响大鼠佐剂性关节炎中药的研究进展
影响大鼠佐剂性关节炎中药的研究进展目的探讨中药对大鼠佐剂性关节炎影响的研究进展。
方法用氟氏完全佐剂诱导大鼠产生佐剂性关节炎，以关节肿胀度为指标来观察中药对大鼠佐剂性关节炎的影响；结果中药对佐剂性关节炎大鼠的原发性和继发性关节肿胀均有抑制作用，能改善大鼠的全身症状。
结论某些中药对大鼠佐剂性关节炎有拮抗作用。
标签：中药，佐剂性关节炎，大鼠，研究进展前言类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种自身免疫功能障碍性疾病，是以关节病变为主并伴有多系统受累的慢性炎性反应性疾病；主要表现为滑膜增生，关节破坏，功能丧失等。
利用类风湿性关节炎动物模型评价中药药效并探讨其作用机制是寻找新型药物的主要途径。
近年来，国内外针对中药复方和单味药的抗RA 作用已开展了大量的实验研究工作，很多中药的有效组分和作用机制得到初步阐明，新的治疗药物不断涌现[1]。
1.类风湿关节炎的动物模型目前用于研究RA的模型制备方法很多，例如佐剂诱导的关节炎、胶原诱导的关节炎以及蛋白多糖诱导的关节炎[2]、甲基化牛血清白蛋白诱导的关节炎[3]等，这些方法在实验中产生的效果也大体相同。
通过实验证实，佐剂诱导的关节炎病程发展较快，肿胀较明显，肿胀程度到12 d达到峰值，此后肿胀程度开始明显下降，佐剂性关节炎是一种典型的免疫性炎症模型。
佐剂诱发的关节炎动物模型，动物选择一般主要为Wistar 大鼠、SD 大鼠、兔等，雌雄均可。
造模方法为大鼠足趾不皮内注射一定剂量的完全弗氏佐剂，原发性病变表现为足趾及关节部肿胀的急性炎症反应，继发病变一般于至炎后14 ～20 d 左右出现，20 d 达到高峰[4-6]。
梅焕平等[7]以 4 ～6 月龄青紫蓝兔趾部和背部多点皮下注射完全弗氏佐剂诱发兔佐剂关节炎模型，结果致炎第 1 周起注射肢腕部周径明显增加，第 3 周后动物体重显著下降，侧肢周径开始增加，但左右肢周徑差异无统计学意义。
经病理学诊断模型成功率为64%。
类风湿关节炎动物模型的制作及注意要点
抗Ⅱ型胶原单克隆抗体源自8周大的雄性DBA/1J 小鼠CIA 模型，这些抗体混合物注射到模型小鼠的关节腔后可直接作用于Ⅱ型胶原或其他在体内高表达的自身抗原，从而发挥免疫介导作用。该模型的临床症状与CIA和RA很相似，突出特点是能在几天之内迅速发病，关节组织中巨噬细胞和多核型白细胞浸润。该模型很好的体现了外源性抗原抗体刺激体诱导的严重关节损伤。
类风湿关节炎动物模型的制作及注意要点
（一）佐剂诱导型（AA）
AA 早由Freund 于20 世纪50 年代创立，又称弗氏佐剂关节炎，介导溶剂分为完全佐剂（CF模型在T细胞相关致炎通路的药物筛选上发挥着重要的作用。
（二）胶原诱导型（CIA）
CIA 模型是由Trentham等于1977年*建立的实验性关节炎动物模型。通过皮下注射Ⅱ型胶原和等量CFA 的混合液来建造，来源于鸡、小牛和大鼠的Ⅱ型胶原均能引起关节炎症。CIA 是MHC 相关型，以T/B淋巴细胞介导的关节炎症侵蚀为主要特征。
炎症模型的研究进展
炎症模型的研究进展【摘要】炎症是临床疾病当中最为常见的病理过程，具有血管系统的活体组织对各种损伤所发生的以防御反应，即表现为红、肿、热、痛。
可发生于任何组织和任何部位。
但随着社会的发展，有很多新药物也被应用在炎症反应中，可如今的抗炎药物在炎症反应中有着很多不稳定的因素，而导致一些副作用。
因此，寻找安全有效的抗炎药物也仍是需解决的问题，如何选择合适的动物模型来初步评价抗炎药物的效果及其作用机制也成为共同关注的问题。
根据炎症发病的原因可分为感染性炎症、无菌性炎症 (非特异性炎症 ) 及变态反应性炎症。
感染性炎症是用病毒、细菌或细菌产物造成的炎症; 无菌性炎症是用某种致炎因子于动物体内或体外引起炎症或其某个阶段的细胞组织反应; 变态反应性炎症是多种变态反应的最终表现[1]。
因此, 根据炎症的发病制作的不同，动物模型也大体分为以下几种。
【关键词】模型探讨 ;炎症模型 ;致炎药物1.非特异性炎症模型非特异性炎症反应是以局部血管扩张、毛细血管通透性增加为特征的急性期阶段; 以血小板黏附、白细胞和巨噬细胞浸润为特征的亚急性阶段; 以组织增生、纤维化和肉芽屏障形成为特征的慢性增殖期[1]。
根据模拟炎症不同时期的病理表现来制作动物炎症模型。
1.1毛细血管通透性增高动物模型：属早期急性炎症时期，诱导毛细血管通透性升高，会使血浆蛋白从毛细血管壁渗出，引起组织水肿。
根据渗出部位的不同还可有皮肤毛细血管通透性增高和腹腔毛细血管通透性增高。
实验当中致炎物有二甲苯、冰醋酸、乙酸、组胺等。
王宇翎等［2］在白花蛇舌草总黄酮抗炎及抗菌作用实验中，用100％二甲苯0.03ml诱导的小鼠耳肿胀和0.6%醋酸0.2ml/只造模小鼠模型成功。
高雨嫣等［3］在六灵解毒丸对急性咽炎的治疗实验中用100%二甲苯40μＬ所致小鼠耳肿胀和0.6％冰乙酸0.2ml/只造模、所致的小鼠腹腔毛细血管通透性显著升高。
刘晋华等［4］在鼻炎口服液抗炎作用的实验中用新鲜配制的0.01ml/L磷酸组胺溶液每侧50μl滴鼻，成功诱发大鼠毛细血管通透性增高。
两种佐剂制备CIA 大鼠模型的效果比较
[收稿日期]2019-06-05 修回日期2021-09-01[基金项目]安徽省高校自然科学研究重点项目(KJ2014A157);安徽省自然科学基金项目(11040606M163);安徽级质量工程项目(201810367017,201810367104)[作者单位]蚌埠医学院1.人体解剖学教研室,2.临床医学院,3.组织学与胚胎学教研室,安徽蚌埠233030[作者简介]郭 帅(1991-),男,硕士研究生.[通讯作者]陈传好,硕士研究生导师,教授.E⁃mail:cch711124@[文章编号]1000⁃2200(2022)03⁃0281⁃04㊃基础医学㊃两种佐剂制备CIA 大鼠模型的效果比较郭 帅1,褚小磊1,沈 桐2,李 季2,王浩淼2,朱毛妮2,朱盼盼2,陈一航2,吕樵岚2,胡玲莉2,田亚兰2,王元元3,陈传好1[摘要]目的:比较不完全弗氏佐剂(incomplete Freund′s adjuvant,IFA)和完全弗氏佐剂(complete Freund′s adjuvant,CFA)分别与牛Ⅱ型胶原蛋白(calf Ⅱcollagen,CⅡ)构建的胶原诱导的类风湿性关节炎(collagen⁃induced rheumatoid arthritis,CIA)大鼠模型的效果㊂方法:选取30只8周龄SD 大鼠,随机分为0.9%氯化钠溶液组(对照组)㊁IFA +CⅡ组和CFA +CⅡ组,每组10只㊂将IFA /CFA 与CⅡ以等体积混匀,分别从鼠尾根部进行皮内注射,在第0天和第7天每只鼠分别注射200μL 和100μL㊂采用相同方法注射0.9%氯化钠溶液作为对照组㊂从初次免疫开始,每7天记录1次关节炎指数(arthritis index,AI)分值㊂在第14天分别从3组中取5只大鼠获取踝关节,做HE 染色并观察病理学变化㊂结果:造模第0天和第7天,3组AI 值为0;初次免疫后第14天,IFA +CⅡ组和CFA +CⅡ组的AI 均值分别为(6.5±0.5)和(7.4±0.4),2组差异有统计学意义(P <0.01);造模后第21天,IFA +CⅡ组和CFA +CⅡ组的AI 均值分别为(8.8±0.5)和(7.8±0.8),2组差异有统计学意义(P <0.01);造模后第14天和第21天,2组差异比较均无统计学意义(P >0.05)㊂踝关节HE 染色结果发现,IFA +CⅡ组踝关节软骨表面粗糙不平,轻微破坏;关节腔内可见炎性细胞浸润㊂CFA +CⅡ组关节软骨破坏明显,呈锯齿状,有明显的血管翳和大量的炎性细胞浸润㊂结论:使用IFA +C Ⅱ和CFA +C Ⅱ均可制备RA 模型,IFA +C Ⅱ的炎症反应较轻,为制备RA 模型的首选方案㊂[关键词]类风湿性关节炎;弗氏佐剂;牛Ⅱ型胶原蛋白;大鼠[中图法分类号]R 684.3 [文献标志码]A DOI :10.13898/ki.issn.1000⁃2200.2022.03.001Effect comparison of two adjuvants in the preparation of rat CIA modelGUO Shuai 1,CHU Xiao⁃lei 1,SHEN Tong 2,LI Ji 2,WANG Hao⁃miao 2,ZHU Mao⁃ni 2,ZHU Pan⁃pan 2,CHEN Yi⁃hang 2,LÜQiao⁃lan 2,HU Ling⁃li 2,TIAN Ya⁃lan 2,WANG Yuan⁃yuan 3,CHEN Chuan⁃hao 1(1.Department of Human Anatomy ,2.School of Clinical Medicine ,3.Department of Histologyand Embryology ,Bengbu Medical College ,Bengbu Anhui 233030,China )[Abstract ]Objective :To compare the effects of incomplete Freund′s adjuvant (IFA)and complete Freund′s adjuvant (CFA)combined with calf Ⅱcollagen(CⅡ)in establishing the collagen⁃induced rheumatoid arthritis(CIA)rat model.Methods :Thirty SD rats aged 8weeks were randomly divided into the 0.9%sodium chloride solution group(control group),IFA +CⅡgroup and CFA +C Ⅱgroup(10rats in each group).The IFA /CFA and CⅡwere blerding in equal volume,and intradermally injected into the root of rat tail.The 200μL and 100μL mixture were injected into rats in the model group on day 0and day 7,respectively.The same volume of 0.9%sodium chloride solution was injected into rats in the control group using the same method.The scores of arthritis index(AI)in three groups were recorded every 7days from the initial immunization.HE staining was performed in ankle joints of 5rats from three groups on day 14to observe the pathological changes.Results :On day 0and day 7after modeling,the AI values in three groups were 0.On day 14after initial immunization,the AI values in IFA +CⅡgroup and CFA +CⅡgroup were(6.5±0.5)and(7.4±0.4),respectively,and the difference of which was statistically significant(P <0.01).On day 21after modeling,the AI values in IFA +CⅡgroup and CFA +CⅡgroup were(8.8±0.5)and(7.8±0.8),respectively,and the difference of which was statistically significant(P <0.01).But the difference of AI values in IFA +CⅡgroup and CFA +CⅡgroup were not statistically significant on day 14and day 21after modeling (P >0.05).The results of HE staining of the ankle joint showed that the cartilage surface in ankle joint in the IFA +CⅡgroup was rough and slightly damaged,and inflammatory cell infiltration was observed in the articular cavity.In CFA +CⅡgroup,the articular cartilage was obviously damaged,presented saw tooth shape,and had obvious pannus and a large amount of inflammatory cell infiltration.Conclusions :Both IFA +CⅡand CFA +CⅡcan be used to prepare RA model,and the inflammatory response of IFA +CⅡis slight,which is the preferred methodfor preparing RA model.[Key words ]rheumatoid arthritis;Freund′s adjuvant;calf Ⅱcollagen;rat 类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是由免疫㊁内分泌㊁感染㊁遗传㊁环境等多因素参与的全身性自身免疫性疾病,以关节滑膜炎症为特征,具有持久㊁反复发作的特性,通常引起关节软骨及骨质的破坏,最终导致关节畸形及功能障碍[1-2]㊂目前对于RA的病因与病理机制尚未确切明了,也无特效治疗手段㊂在研究RA的过程中,需要有效的RA动物模型[3-4],动物模型是研究该疾病的致病机制且用于药物新疗法测试的研究工具[5-6]㊂目前,已经建立了关节炎模型,包括CIA㊁佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)㊁降植烷诱导的关节炎(pristane⁃induced arthritis,PIA)等[4,7]㊂但制备RA 模型的方法,尚缺乏相对统一的标准㊂在研究RA 时,常选择不完全弗氏佐剂(incomplete Freund′s adjuvant,IFA)和完全弗氏佐剂(complete Freund′s adjuvant,CFA)分别与牛Ⅱ型胶原蛋白(calfⅡcollagen,CⅡ)混合乳化,制备胶原诱导性关节炎(CIA)模型[8-10]㊂两种方案在制备RA模型时,对关节的滑膜层㊁关节软骨的影响程度是否有差异,目前尚未见报道㊂本研究采用两种方案制备CIA模型,比较两种造模方案对关节损害的程度㊂1 材料与方法1.1 实验动物 SD大鼠30只[8周龄,雌性,SPF 级,体质量(200±30)g]购买于蚌埠医学院实验动物中心㊂所有大鼠于同一环境(25℃)给予自由饮食㊂1.2 主要试剂 CⅡ(Chondrex20022);CFA (Chondrex7001);IFA(Chondrex7002);均为10mg㊂1.3 建立RA关节炎模型 将30只大鼠随机分为3组:0.9%氯化钠溶液组(对照组),IFA+CⅡ模型组,CFA+CⅡ模型组,每组10只㊂将CFA/IFA与C Ⅱ型胶原,以等体积在4℃(冰浴)无菌条件下混匀乳化;配制成质量浓度为1mg/mL的乳液㊂从大鼠尾根部开始,在多个位置,分少量多次皮内注射混悬乳液200μL;于初次免疫后7d注射100μL,以加强免疫㊂对照组在相同时间点注射等量的0.9%氯化钠溶液㊂1.4 关节炎评分 在初次免疫后第7㊁14㊁21天,参照David D Brand关节炎指数(AI)评价标准[8],对3组大鼠AI进行评价并记录分值(见表1)㊂对每肢足趾单独评分,将四肢评分相加作为关节炎评分,每只大鼠最高为16分㊂由3名实验者完成,以平均值作为AI评分㊂AI总分≥4分判定为造模成功㊂1.5 大鼠踝关节获取 在造模后第14天,每组取出5只大鼠麻醉处死,获取踝关节,并使用10%甲醛固定,用于HE染色㊂表1 AI评分标准等级关节表现特征0没有红斑和肿胀的迹象1红斑和轻度肿胀仅限于跗骨或踝关节2红斑和中度肿胀,从踝关节延伸至跖关节3红斑和重度肿胀,从跖关节延伸至脚趾4红斑和严重肿胀包括脚踝,脚面和足趾;或四肢强直1.6 HE染色 踝关节在甲醛中固定14d→HNO3 (10%)脱钙48h→流水冲洗过夜→乙醇逐级脱水→二甲苯透明→石蜡包埋㊁切片→常规HE染色㊂在光镜下观测RA模型大鼠踝关节的病理学变化㊂1.7 统计学方法 采用方差分析和q检验㊂2 结果2.1 一般情况观察 造模后,大鼠双后肢足爪第9天未见明显改变,第10天出现急性肿胀,呈对称性,第14天明显不能负重,直至实验结束㊂与对照组相比,模型组大鼠饮食减少;毛发光泽度下降,干枯容易脱落;精神状态欠佳,活动减少且行动迟缓㊂另外,对照组尾巴注射部位无点状感染,毛发正常㊂模型组在注射部位有点状感染,尾部略增粗,质地一般或者有一定硬度且注射部位形成小溃疡,多数可以结痂自愈;但IFA+CⅡ组注射部位出现感染的数量较CFA+CⅡ组明显减少㊂2.2 AI评分 在造模后第7天,3组AI值均为0㊂在14d时,两模型组AI值升高,IFA+CⅡ组和CFA +CⅡ组AI值比较差异有统计学意义(P<0.01);在21d时,AI值继续升高,IFA+CⅡ组和CFA+C Ⅱ组AI值比较差异有统计学意义(P<0.01)㊂在14d和21d,两模型组之间AI值差异无统计学意义(P>0.05)㊂对照组在造模后14d和21d的AI值均为0(见表2)㊂表2 3组大鼠在不同时间点AI值的变化趋势分组n7d14d21d F P MS组内对照组10000 IFA+CⅡ组100 6.5±0.58.8±0.5416.60<0.010.500 CFA+CⅡ组1007.4±0.47.8±0.8321.56<0.010.600F 346.88368.47P <0.01<0.01MS组内 0.4700.6302.3 3组大鼠在造模后第14天踝关节病理学变化 对照组踝关节腔内,关节软骨表面光滑且完整,关节软骨及软骨下骨质无破坏,关节间隙正常;且未见滑膜增生和血管翳形成(见图2)㊂IFA +CⅡ组踝关节滑膜软骨连续但关节软骨表面粗糙不平(见图3A);踝关节腔内可见少量血管翳㊁炎性细胞浸润,关节软骨轻微破坏(见图3B)㊂CFA +CⅡ组关节软骨明显破坏㊁不连续不完整且呈锯齿状(见图3C);形成明显的血管翳,滑膜细胞增生明显,排列紊乱,见大量的炎性细胞浸润(见图3D)㊂3 讨论 CIA 模型在临床症状和病理学特点及免疫学方面与RA 相似[11],一直是研究RA 的经典模型[4,8]㊂CIA 是一种用同源或异源性Ⅱ型胶原免疫动物而引发的一种慢性㊁多发性关节炎㊂通常在尾根部皮内注射佐剂乳化的CⅡ诱导动物,注射后可发生关节炎㊂许多研究者使用RA 模型进行转基因及免疫治疗等研究[10],佐剂的种类可能影响CIA 模型的病变情况,导致实验误差加大,从而影响结果的可靠性㊂本研究使用IFA 和CFA 分别与等体积CⅡ乳化制备RA 大鼠模型㊂比较大鼠一般情况㊁发病情况和病理学改变㊂从一般情况上看IFA +CⅡ组发病时感染较少,在造模后14d,2组大鼠AI 评分均超过4分,说明RA 大鼠模型制备成功㊂随着时间的延长,在造模后21d,2组的AI 值变化不大㊂在模型成功率上两模型组均为80%,这与大多数研究者的结果相似[12-13]㊂在造模后14d,2组踝关节HE 染色结果发现,模型组均可见炎性细胞㊁血管翳增生等㊂这一现象的可能机制为CⅡ可以诱导B 细胞产生特异性抗体;抗体沉积于关节部位,协同CⅡ激活补体系统,诱发炎症㊂这一炎症反应不断刺激滑膜组织,形成血管翳[11]㊂这些血管翳引起关节软骨破坏,最终导致RA 的发生[14]㊂IFA +C Ⅱ组比CFA +CⅡ组炎症反应稍轻,提示免疫反应较弱㊂而且IFA +CⅡ组在对关节软骨的破坏程度㊁炎症细胞的增多程度㊁血管翳的增生程度和浸润程度明显比CFA +CⅡ组轻㊂使用IFA +CⅡ制备RA 模型有利于减小实验误差,真实反映RA 的病变情况,保证RA 相关研究结果的可靠性㊂由于在造模后21d,模型组的AI 值变化不大,为此本课题组仅观察了造模后14d 的病理学变化㊂为了深入了解IFA +CⅡ造模的优越性,本课题组下一步实验将检测炎性因子肿瘤坏死因子α㊁白细胞介素1β和白细胞介素17在RA 中的表达变化,这将为RA 研究提供更为可靠的实验基础㊂综上所述,在制备大鼠RA 模型过程中,使用IFA +CⅡ和CFA +CⅡ有相似的病理学特点,并且IFA +CⅡ对动物的不良反应明显低于CFA +CⅡ㊂因此,IFA +CⅡ可作为制备CIA 模型的首选方案,以保障实验结果的可靠性㊂[参考文献][1] SMOLEN JS,ALETAHA D,MCINNES IB.Rheumatoid arthritis [J].Lancet,2016,388(10055):2023.[2] MCINNES IB,SCHETT G.Pathogenetic insights from the treatmentof rheumatoid arthritis[J].Lancet,2017,389(10086):2328.[3] 周夏娟,应旭旻.Ⅱ型胶原蛋白与弗氏佐剂诱导关节炎小鼠模型的建立[J].中国老年学杂志,2017,37(15):3689.[4] BENDELE A.Animal models of rheumatoid arthritis [J ].J Musculoskelet Neuronal Interact,2001,1(4):377.[5] TRENTHAM DE,TOWNES AS,KANG AH.Autoimmunity to typeⅡcollagen an experimental model of arthritis [J].J Exp Med,2017,146(3):857.[6] SHEN HB,HUO ZJ,BAI YJ,et al .Protective effect of norcantharidin on collagen⁃induced arthritis rats[J].Chin J IntegrMed,2018,24(4):278.[7] NIETO FR,CLARK AK,GRIST J,et al .Calcitonin gene⁃relatedpeptide⁃expressing sensory neurons and spinal microglial reactivity contribute to pain states in collagen⁃induced arthritis[J].Arthritis Rheumatol,2015,67(6):1668.[8] BRAND DD,LATHAM KA,ROSLONIEC EF.Collagen⁃inducedarthritis[J].Nat Protoc,2007,2(5):1269.[收稿日期]2020-08-11 [修回日期]2021-02-20[作者单位]湖北医药学院附属医院十堰市太和医院肿瘤科,湖北十堰442000[作者简介]梁 猛(1981-),男,主治医师.[文章编号]1000⁃2200(2022)03⁃0284⁃05㊃基础医学㊃XIAP 基因对TNF⁃α诱导的鼻咽癌细胞凋亡及VEGF 和COX⁃2表达的机制研究梁 猛[摘要]目的:探讨X 连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因对肿瘤坏死因子α(TNF⁃α)诱导的鼻咽癌细胞凋亡及血管内皮生长因子(VEGF)和环氧化酶⁃2(COX⁃2)表达的影响㊂方法:将人鼻咽癌5⁃8F 细胞分为空白组㊁TNF⁃α组(10ng /mL 的外源性TNF⁃α处理5⁃8F 细胞12h)㊁si⁃XIAP 组(si⁃XIAP 转染5⁃8F 细胞48h)和TNF⁃α+si⁃XIAP(si⁃XIAP 转染5⁃8F 细胞48h 后,使用10ng /mL 的外源性TNF⁃α处理细胞12h)㊂Western blotting 检测XIAP㊁VEGF㊁COX⁃2㊁Cleaved caspase3㊁Bax㊁NF⁃κB p65和Ikkβ蛋白表达;MTT 法及流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡率㊂结果:转染si⁃XIAP 的5⁃8F 细胞XIAP 表达明显低于空白组(P <0.01)㊂TNF⁃α组和si⁃XIAP 组细胞活力低于空白组(P <0.05),细胞凋亡率及Cleaved caspase3和Bax 表达均高于空白组(P <0.05)㊂TNF⁃α组VEGF㊁COX⁃2㊁NF⁃κB p65和Ikkβ表达均高于空白组(P <0.05)㊂si⁃XIAP 组VEGF㊁COX⁃2㊁NF⁃κBp65和Ikkβ表达均低于空白组(P <0.05)㊂TNF⁃α+si⁃XIAP 组细胞活力低于TNF⁃α组和si⁃XIAP 组(P <0.05);VEGF㊁COX⁃2㊁NF⁃κB p65和Ikkβ表达均低于TNF⁃α组㊁高于si⁃XIAP 组(P <0.05);细胞凋亡率及Cleaved caspase3和Bax 表达均高于TNF⁃α组和si⁃XIAP 组(P <0.05)㊂结论:下调XIAP 基因表达增强TNF⁃α诱导的鼻咽癌5⁃8F 细胞凋亡及降低VEGF 和COX⁃2表达,机制与抑制NF⁃κB 信号通路有关㊂[关键词]鼻咽肿瘤;X 连锁凋亡抑制蛋白;肿瘤坏死因子α;细胞凋亡[中图法分类号]R 739.6 [文献标志码]A DOI :10.13898/ki.issn.1000⁃2200.2022.03.002Study on the mechanism of XIAP gene on TNF⁃α⁃induced apoptosis and expression of VEGF and COX⁃2in nasopharyngeal carcinoma cellsLIANG Meng(Department of Oncology ,Shiyan Taihe Hospital Affiliated to Hubei Medical College ,Shiyan Hubei 442000,China )[Abstract ]Objective :To investigate the effect of X⁃linked inhibitor of apoptosis protein(XIAP)gene on the tumor necrosis factor⁃α(TNF⁃α)⁃induced apoptosis,and expression of vascular endothelial growth factor (VEGF )and cyclooxygenase⁃2(COX⁃2)in nasopharyngeal carcinoma cells.Methods :Human nasopharyngeal carcinoma 5⁃8F cells were divided into blank group,TNF⁃αgroup (cells treated with 10ng /mL exogenous TNF⁃αfor 12h),si⁃XIAP group(cells transfected with si⁃XIAP for 48h)and TNF⁃α+si⁃XIAP(cells transfected with si⁃XIAP for 48h,then treated with 10ng /mL exogenous TNF⁃αfor 12h).Western blotting was used to detect the protein expression of XIAP,VEGF,COX⁃2,Cleaved caspase3,Bax,NF⁃κB p65and Ikkβ.MTT assay and flow cytometry were used to detect cell viability and apoptosis rate.Results :The expression of XIAP in 5⁃8F cells transfected with si⁃XIAP was significantly lower than that in blank group(P <0.01).The cell viability inTNF⁃αgroup and si⁃XIAP group was lower than that in blank group(P <0.05),and the apoptosis rate and the expression of Cleaved caspase3and Bax were higher than those in blankgroup(P <0.05).The expressions of VEGF,COX⁃2,NF⁃κB[9] MCNAMEE K,WILLIAMS R,SEED M.Animal models ofrheumatoid arthritis:how informative are they?[J ].Eur JPharmacol,2015,759:278.[10] ASQUITH DL,MILLER AM,MCINNES IB,et al .Animal models of rheumatoid arthritis[J].Eur J Immunol,2009,39(8):2040.[11] IKI C'MM,FLEGAR D,KOVA C ˇI C ˇN,et al .Increased chemotaxis and activity of circulatory myeloid progenitor cells may contribute to enhanced osteoclastogenesis and bone loss in the C57BL /6mouse model of collagen⁃induced arthritis [J ].Clin ExpImmunol,2016,186(3):321.[12] SONG HP,LI X,YU R,et al .Phenotypic characterization of typeⅡcollagen⁃induced arthritis in Wistar rats[J].Exp Ther Med,2015,10(4):1483.[13] 丁子桐,熊海霞,高琴琴,等.胶原诱导性关节炎病/证模型大鼠血清细胞因子表达谱的初步研究[J].中国比较医学杂志,2019,29(4):28.[14] CHEN YJ,CHANG WA,WU LY,et al .Systematic analysis ofdifferential expression profile in rheumatoid arthritis chondrocytes using next⁃generation sequencing and bioinformatics approaches [J].Int J Med Sci,2018,15(11):1129.(本文编辑 刘畅)。
不同浓度的完全弗氏佐剂影响大鼠疼痛行为的观察
不同浓度的完全弗氏佐剂影响大鼠疼痛行为的观察目的：观察脚掌注射不同浓度完全弗氏佐剂（complete Freund’s adjuvant，CFA）产生的不同强度的伤害刺激对大鼠痛感受和痛情绪反应程度的影响。
方法：福尔马林诱导的条件性位置回避（conditioned place avoidance，CPA）的行为测试近来被用于评估痛情绪反应。
本实验采用另一种炎性致痛物质CFA在大鼠的脚掌皮下注射使之产生持续性炎性痛，诱导大鼠产生条件性位置回避（conditioned place avoidance，C-CPA）反应。
根据在大鼠的脚掌皮下注射不同浓度的CFA将大鼠分为正常（Naive）组，生理盐水（NS）组，1/5 CFA组，1/3 CFA组，1/2 CFA组，之后分别检测各组大鼠的热缩足潜伏期（paw withdrawal latency，PWL）和C-CPA反应。
结果：1/3 CFA组和1/2 CFA组匹配后热缩足潜伏期与匹配前比较，均明显减小，即痛阈下降，且两组匹配前与匹配后的差值与生理盐水组相比，差异均有统计学意义（P＜0.05）；1/3 CFA组的下降值小于1/2 CFA组（P＜0.05）；1/2 CFA组在匹配后痛侧停留的时间明显缩短，且回避分数与生理盐水组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论：CFA所诱导的PWL 反应和CPA反应的程度与CFA的注射浓度有关，从行为上证实大鼠痛情绪与痛感受的产生存在不同的机制。
慢性疼痛是一个世界性的医疗难题，它既是与大多数疾病相伴生的临床症状，同时本身也是一种疾病[1]。
患者除了遭受疼痛造成的肉体伤害之外，其导致的心理、精神伤害和社会并发症也成了一个重大的负担[2-3]。
国际疼痛协会对疼痛的最新定义为“疼痛是一种与组织损伤或潜在的组织损伤相关的感觉、情感、认知和社会维度的痛苦体验”[4]。
这一定义将疼痛分为感觉、情感、认知和社会四个维度，其中痛感觉主要感受疼痛刺激的性质、位置、强度等，痛情绪则指伤害性刺激引起的焦虑、恐惧、厌恶等情绪反应[5]。
通痹外敷散对大鼠弗氏完全佐剂性膝关节炎的实验研究
通痹外敷散对大鼠弗氏完全佐剂性膝关节炎的实验研究邹佩霞;李莉;刘兴林;陈德森【摘要】Objective:To observe effect of Tongbi Application Powder on Freund’s adjuvant knee arthritis in rats and its mecha-nism.Methods:Rats were randomly divided into model group and treatment group, sc.injected Freund’s adjuvant 0.1ml into right knee, then measured interleukin-1 beta (IL-1 β), hyaluronic acid (HA) before surgery,1wk, 2wk, 3wk after surgery;measured volume below the right toe.Results:After wk2 , treatment group had lower IL-1 beta and higher HA levels, significantly different compared with that before treatment and model group ( P<0.05) .The treatment group’s extent of foot swelling and dura-tion was significantly better than that of model group, ( P<0.05) .Conclusion:Tongbi Application Powder is e ffective for treating Freund’s adjuvant arthritis in rats, the effect may be induced by inhibiting IL-1 βsynthesis and increasing HA level.%目的：观察中药通痹外敷散对弗氏完全佐剂性大鼠急性关节炎的影响，探讨其作用机制。
动物模型之关节炎模型的选择与建模实验要点肿胀大鼠胶原
动物模型之关节炎模型的选择与建模实验要点肿胀⼤⿏胶原 模型 关节炎是社会⽣活中常见的⼀种⾃⾝免疫性疾病，其发病机制复杂，病程长久且难治愈，是各⼤科研机构和药企研究的热门，在研究过程中常常需要符合临床的动物模型，今天⼩⾍就跟⼤家分享⼏种常⽤于评价治疗关节炎的动物模型。
⼀、佐剂诱导的⼤⿏关节炎模型（AIA）[1] 动物：SD⼤⿏、Wistar⼤⿏ 试剂：完全弗⽒佐剂（CFA）、液体⽯蜡 步骤：⼀⼈抓取⼤⿏，⼀⼈于⼤⿏后⾜或尾根部⽪内注射0.1mL CFA即可建⽴佐剂诱导的关节炎模型。
特点：SD⼤⿏造模成功率略低于Wistar⼤⿏，SD⼤⿏体重变化较⼤，测量⾜趾肿胀时会有⼤⿏本⾝原因产⽣较⼤误差。
本模型中T细胞较为活跃，早期会产⽣⼤量的炎症因⼦，例如：TNF-α、IL-17、IFN等，后期会有⼤量的IL-4、TGF-β等产⽣。
⼆、胶原诱导的⼤⿏关节炎模型（CIA）[1] 动物：SD⼤⿏、Wistar⼤⿏、Lewis⼤⿏ 试剂：II型胶原、不完全弗⽒佐剂（IFA） 步骤：胶原与不完全弗⽒佐剂（IFA）⾼速混匀乳化，⼤⿏⿇醉后尾根部⽪内注射0.4mL混匀的乳化胶原进⾏初次免疫，⼀周后再次进⾏免疫，⼆次免疫3-7天内即可得到模型。
特点：SD⼤⿏存在与AIA模型类似的缺点，体重增长过快影响动物实验结果，模型持续时间较短。
所选动物多在180±20g左右，7-8周龄，另外此模型⼤多⽤雌性动物进⾏造模。
在以上三种⼤⿏品系中，雌性Lewis模型最为稳定，评价化合物药效较为真实可靠，且该模型持续时间可长达50-60天。
本模型主要是Th细胞介导。
三、胶原诱导的⼩⿏关节炎模型（CIA）[2] 动物：DBA/1、B10Q、B10G、NFR/N、C57BL/6 试剂：完全弗⽒佐剂（CFA）、II型胶原（鸡、⽜、猪来源） 步骤：胶原乳化后，尾根部⽪内注射，21天后进⾏⼆次免疫（当然也可根据需要单次改⾼剂量胶原诱导）。
大鼠佐剂性关节炎模型表现特征及评价指标_李培培
①本文为安徽省自然科学基金（No．11040606M195）、安徽省青年基金（2010SQRL079；2010SQRL067）和安徽省教育厅基金（KJ2010B406；KJ2010B398）作者简介：李培培（1986年－），女，在读硕士，主要从事抗炎免疫药理学方面的研究，E-mail ：lpp1204@126．com ；通讯作者及指导教师：张玲玲（1972年－），女，医学博士，副教授，硕士生导师，主要从事抗炎免疫药理学方面的研究，E-mail ：llzhang@ahmu．edu．cn ；魏伟（1960年－），男，医学博士，教授，博士生导师，主要从事抗炎免疫药理学方面的研究，E-mail ：wwei@ahmu．edu．cn 。
doi ：10．3969/j．issn．1000-484X．2012．05．017大鼠佐剂性关节炎模型表现特征及评价指标①李培培解国雄宋珊珊黄蓓吴育晶汪庆童常艳张运芳周爱武刘丽华张玲玲魏伟（安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药理学教育部重点实验室抗炎免疫药物安徽省工程技术研究中心，合肥230032）中国图书分类号R392．12文献标识码A文章编号1000-484X （2012）05-0453-05［摘要］目的：描述大鼠佐剂性关节炎（Adjuvant-induced arthritis ，AA ）临床表现主要指标的评价方法。
方法：完全弗氏佐剂免疫SD 大鼠诱导AA 模型，进行全身及关节炎指数评分、计算关节肿胀数、测定足爪肿胀度、进行足爪X 线摄片、踝关节病理检查及评分。
结果：大鼠免疫后11天（d11）出现足爪红肿，全身及关节炎指数评分和关节肿胀数增加。
炎症高峰期在免疫后d19 d28。
大鼠出现活动障碍，可见耳朵、鼻和尾根部“关节炎”结节。
X 线可见关节软组织肿胀、骨密度降低、骨侵蚀病灶以及关节间隙狭窄甚至消失。
踝关节病理见滑膜组织增生，炎细胞浸润，血管翳出现等。
结论：大鼠AA 是兼有局部关节炎症和全身表现的类风湿性关节炎动物模型。
CRP在剂性关节炎模型大鼠血清中的实验研究
CRP在佐剂性关节炎模型大鼠血浆中的实验研究周忠宏(山东省临沂市人民医院药剂科,山东临沂276000)摘要:目的研究CRP在成功建立佐剂性关节炎大鼠模型的预测作用方法40只Wista雄性大鼠随机取30只予完全福氏佐剂0.1ml左后足跖皮下注射，余下10只为正常对照组（A组），于注射后15天检测CRP，比较造模成功组（B组，23只）造模不成功组（C组，7只）及A组之间CRP水平结果B组CRP水平明显升高，两两比较B组与A、C组之间p＜0.01，A组与C组比较p＞0.05 结论血浆CRP对佐剂性关节炎大鼠造模成功与否可能有预测价值关键词C-反应蛋白；佐剂性关节炎Experimentral Study of C-reactive Protein in Plasma of Adjuvant Arthritis ModelIn RatsZHOU Zhong-hong(Pharmaceutical preparation section of Linyi People’s Hospital,Linyi,Shandong 276000,China) Absract:Objective To study the value of c-reactive protein(CRP) in the prediction for the successful model of adjuvant arthritis in rats.Methods There were 40 Wista male rats.10 rats were randomly taken as control group(A group),Left metavoix pedis of 30 rats were injected with 0.1ml Freud’s Complete Adjuvant.After 15 days plasma CRP were detected.23 rats who had been successfully modeled were assigned into B group,the rest of 30 rats were assigned intoC group.The levels of CRP between A、B、C group were estimated.Results The levels of CRP stepup in B group,compared with A、C group p＜0.01,A group compared with C group p＞0.05.Conclusion Plasma CRP probably has predictive value in the successful model of adjuvant arthritis in rats.Key words C-reactive Protein(CRP); adjuvant arthritis类风湿性关节炎（RA）的动物模型有多种[1，2]，福氏完全佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎（Adjuvant Arthritis，AA）是最为经典最为常用的RA实验模型。
胶原诱导的关节炎和佐剂诱导的关节炎大鼠模型的制备
胶原诱导的关节炎和佐剂诱导的关节炎大鼠模型的制备李沙;傅颖媛;尧荣凤;涂丽娜;张海荣【期刊名称】《南昌大学学报（医学版）》【年(卷),期】2009(049)012【摘要】目的制备实用性的胶原诱导的关节炎(CIA)和佐剂诱导的关节炎(AA)动物模型.方法采用牛Ⅱ型胶原蛋白溶于0.5 mol/L醋酸中,加入等量弗氏不完全佐剂混匀乳化配成牛Ⅱ型胶原蛋白乳剂和灭活卡介苗溶于弗氏不完全佐剂中配成弗氏完全佐剂分别足跖皮内免疫Wistar大鼠,第21天加强免疫,利用YLS-7B足趾容积测量仪测量大鼠足部体积,利用PLANMECA TNTRAX线摄片机对大鼠足部拍摄,然后进行大鼠后足的近端趾间和跖趾关节病理观察.结果 CIA加强组和AA高剂量组大鼠免疫足出现明显的红肿,且肿胀足体积与正常对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01);X线和病理HE染色结果亦显示,关节组织呈现关节间隙狭窄、滑膜纤维组织增生、软骨及骨的破坏等病变.结论经改进的CIA和AA大鼠模型呈现典型的关节病变的特征,可为进一步研究人类类风湿性关节炎的发病机制和新药研发提供良好实用性动物模型.【总页数】6页(P17-19,26,封2,封3)【作者】李沙;傅颖媛;尧荣凤;涂丽娜;张海荣【作者单位】南昌大学,医学院免疫学教研室,南昌,330006;南昌大学,医学院免疫学教研室,南昌,330006;南昌大学,医学院免疫学教研室,南昌,330006;南昌大学,医学院免疫学教研室,南昌,330006;南昌大学,附属口腔医院放射科,南昌,330006【正文语种】中文【中图分类】R392.31;R-332【相关文献】1.大鼠胶原诱导性关节炎模型的制备及评价 [J], 石磊;李小峰;王彩虹;张莉芸;马丽辉;国华;杨艳;刘燕;周丽2.胶原诱导性和佐剂性大鼠关节炎模型的比较 [J], 潘磊;杜文喜;卢建华3.胶原诱导型大鼠类风湿关节炎模型的制备 [J], 陈彩娥;崔向军;郑可;王琴4.胶原诱导性类风湿关节炎大鼠模型制备及早期表现评价 [J], 苏云龙; 王雪梅5.胶原诱导性类风湿关节炎大鼠模型制备及早期表现评价 [J], 苏云龙;王雪梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Ⅱ型胶原蛋白与弗氏完全佐剂大鼠关节炎模型的建立和比较
Ⅱ型胶原蛋白与弗氏完全佐剂大鼠关节炎模型的建立和比较林红;贺永怀;黎燕;陆应麟;沈倍奋【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】1999(007)001【摘要】目的对Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ-A)和弗氏完全佐剂(A-A)大鼠关节炎模型在大体外观和足部组织病理学切片等方面进行观察比较.方法分别采用Ⅱ型胶原蛋白和弗氏完全佐剂诱导建立大鼠关节炎模型,利用排水法对大鼠足部体积进行测定,并将大鼠后足进行组织病理学切片观察.结果从大体外观和足部病理切片上两种大鼠模型均显示出有明显的病变,但CⅡ-A大鼠与A-A大鼠比较,滑膜增生及软骨破坏等继发性病变特征更为明显,关节炎持续时间也较长,更接近于人的类风湿性关节炎.结论CⅡ-A大鼠模型与A-A相比是研究RA较为理想的动物模型.【总页数】6页(P1-6)【作者】林红;贺永怀;黎燕;陆应麟;沈倍奋【作者单位】中国协和医科大学,中国医学科学院药用植物研究所,北京;军事医学科学院基础医学研究所;军事医学科学院基础医学研究所;军事医学科学院基础医学研究所;军事医学科学院基础医学研究所【正文语种】中文【中图分类】Q95【相关文献】1.Ⅱ型胶原蛋白与弗氏佐剂诱导关节炎小鼠模型的建立 [J], 周夏娟;应旭旻2.弗氏完全佐剂致大鼠急性膝关节炎动物模型制备 [J], 陈德森;李莉;吴胜英;彭吉霞;李贤玉3.不同剂量弗氏完全佐剂对类风湿关节炎模型大鼠复制的影响 [J], 彭传玉;罗磊;胡玲;宋小鸽;唐照亮;吴子建;蔡荣林;郝峰;胡吴斌4.骨髓间充质干细胞来源的外泌体对弗氏完全佐剂诱导类风湿性关节炎大鼠的治疗作用 [J], 范爱玉;谢卫勇;骆芳茗;范爱霞5.改良弗氏完全佐剂制备大鼠类风湿性关节炎模型 [J], 马玉琛;段斐;孟明;郭晓燕;寇素茹;马幼敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
完全弗氏佐剂诱导大鼠慢性骨盆疼痛综合征炎性痛模型的制备
完全弗氏佐剂诱导大鼠慢性骨盆疼痛综合征炎性痛模型的制备徐畅;吴晓玲;程凯;李娜【期刊名称】《中国应用生理学杂志》【年(卷),期】2022(38)1【摘要】目的:建立大鼠慢性骨盆疼痛综合征(CPPS)炎性痛模型并进行评价,为CPPS炎症引起的慢性骨盆疼痛的外周及中枢机制研究提供可靠的动物模型。
方法:将60只SD雄性大鼠随机分成空白组,假手术组和模型组,每组20只。
采用向大鼠前列腺腹侧叶注射完全弗氏佐剂(CFA)的方法制备CPPS炎性痛模型。
术后观察大鼠一般情况变化;分别于造模后7 d,14 d,21 d,28 d,35 d测定大鼠足底和阴囊热刺激疼痛阈值;取材后前列腺组织称重计算前列腺指数;显微镜下观察大鼠前列腺组织病理变化并用半定量法评价前列腺组织损伤程度,以评价模型是否成功。
结果:模型成功17只,成模率为85%。
与空白组和假手术组比较,造模后大鼠的活动度、毛发光泽度降低,排尿量增加。
足底和阴囊热刺激疼痛阈值显著降低并可稳定维持1个月以上(P<0.01)。
前列腺湿重和前列腺指数均显著性提高(P<0.01)。
前列腺组织肉眼可见明显水肿,与周围组织粘连严重;镜下可见腺腔萎缩,间质内大量炎性细胞浸润。
结论:利用向大鼠前列腺腹侧叶注射CFA的方法,可成功复制CPPS炎性痛模型,这将为后续CPPS发病机制的研究,特别是疼痛行为与潜在炎症和神经损伤之间的机制联系提供有价值的工具。
【总页数】5页(P6-10)【作者】徐畅;吴晓玲;程凯;李娜【作者单位】北京中医药大学针灸推拿学院【正文语种】中文【中图分类】R-3【相关文献】1.抗炎口服液对改良弗氏完全佐剂诱导性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的影响2.前扣带皮层区域磷酸激酶Czeta在弗氏完全佐剂致炎性痛大鼠情绪反应中的作用3.花青素对完全弗氏佐剂诱导慢性炎性痛的镇痛作用及其机制4.改良弗氏完全佐剂制备大鼠类风湿性关节炎模型5.电针缓解完全弗氏佐剂诱导的炎性痛及对前扣带皮层脑区HMGB1/TLR4信号通路的调控作用因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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１ ０ ０ ％， 肿胀百分率明显高于醋酸组 ， 造模第 ７ 、 １ ４天关节积 液检查显示 Ｉ Ｌ一１ Ｂ明显升高 ， ＨＡ含量降低 ， 与造模前及对 照组 、 醋酸
组 比较 ， 差异有统计学意义 （ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） 。佐 剂 组 膝 关 节 病 理 切 片 镜 检 炎 性 反 应 明 显 ， 关节腔 有大量 渗出液 ， 软 骨表面粗糙 ， 滑 膜 增 生、 粘连、 肥厚 ， 与典 型 的 膝关 节炎 临床 病理 学 改 变相 符 。 结 论 弗 氏 完 全佐 剂 可 成 功 建 立 大 鼠急 性 膝 关 节 炎 动 物 模 型 且 优 于
ｔ ｈ ｅ ｉ ｆ ｒ ｓ ｔ ｄ ａ ｙ（ ｄ ） ， ３ ｄ ， ７ ｄ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ ｔ ｈ ｅ ｒ ｉ ｇ ｈ ｔ ｋ ｎ ｅ ｅ ｊ ｏ ｉ ｎ ｔ ｃ ａ ｖ ｉ ｔ ｙ ｉ ｎ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｓ ａ ｌ ｉ ｎ ｅ ， ａ ｃ ｅ ｔ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ａ ｎ ｄ Ｆ ｒ ｅ ｕ ｎ ｄ ｓ ｃ ｏ ｍ ｐ ｌ ｅ ｔ ｅ ｄ ａ ｄ ｊ ｕ ｖ ａ ｎ ｔ ０ ． ５ ｍＬ ／ ｄ ． Ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｌ ｅ ｕ ｋ ｉ ｎ 一１ ｂ ｅ ｔ ａ（ Ｉ Ｌ一１ Ｂ ）ｉ ｎ ｋ ｎ ｅ ｅ ｊ ｏ ｉ ｎ ｔ ｌ ｆ ｕ ｉ ｄ ｗ ａ ｓ ｍｅ ａ ｓ ｕ ｒ ｅ ｄ ｂ ｙ ｅ ｎ ｚ ｙ ｍ ｅ— ｌ ｉ ｎ ｋ ｅ ｄ ｉ ｍ ｍ ｕ ｎ ｏ ｓ ｏ ｒ ｂ ｅ ｎ ｔ ａ ｓ ｓ ａ ｙ （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） ， ａ ｎ ｄ ｈ ｙ ａ ｌ ｕ ｒ ｏ ｎ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ （ ＨＡ ）ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｗ ａ ｓ ｍ ｅ ａ ｓ ｕ ｒ ｅ ｄ ｂ ｙ ｂ ｉ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ｉ ｎ ７ ａ ｎ ｄ １ ４ ｄ ａ ｙ ｓ ｏ ｆ ｐ ｏ ｓ ｔ ｏ ｐ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ．Ｔ ｈ ｅ ｖ ｏ ｌ ｕ ｍ ｅ ｏ ｆ ｉ ｆ ｇ ｈ ｔ ｋ ｎ ｅ ｅ ｊ ｏ ｉ ｎ ｔ ａ ｎ ｄ ｂ ｅ ｌ ｏ ｗ ｐ ａ ｔ ｒ ｓ ｗ ａ ｓ ｍｅ ａ ｓ —
Hale Waihona Puke ａ １ ． Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｏ ｆ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｆ ｕ ｎ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ， Ｈ ｕ ｂ ｅ ｉ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｆ ｏ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ， Ｈ ｕ ｂ ｅ ｉ ４ ４ ２ ０ ０ ０， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
醋酸法 ， 更 符 合 临 床 急 性 膝 关节 炎病 理 生 理特 征 。
关 键 词 大 鼠 膝 关 节 炎 白细 胞 介 素 一１ ｐ 透明质酸
文 献标 识码 Ａ
膝 关 节 肿 胀 百 分 率
ＤＯＩ １ ０ ． １ １ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ３ 。 ５ ａ ８ ｘ． ２ ｏ １ ５ ． ０ ８ ． ０ ４ ４
为对照组 、 醋酸组 、 佐 剂组 ， 分 别 于 第 １、 ３ 、 ７天经 右膝 关 节 腔 内 注 射 生 理 盐 水 、 醋 酸 及 弗 氏完 全 佐 剂 ０ ． ５ ｍ ｌ ／ ｄ ， 并于造 模前 、 造 模 后７ 、 １ ４天分 别 采 用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法 测 定 膝 关 节 腔 积 液 中 自细 胞 介 素 一１ ｐ （ Ｉ Ｌ一１ ｐ ） 、 透 明质 酸 （ Ｈ Ａ） 含量 ； 测 量 右 膝 关 节 及 以下 部 位 的 体积 ， 并 计 算 各 组 动 物 膝 关 节 肿 胀 百 分 率 。于 ｌ ４天 处 死 动 物 取 膝 关 节 滑 膜 组 织 做 病 理 学 镜 检 。结 果 造 模 后 对 照 组 关 节 无 肿 胀 现象 ， 醋 酸 组 大 鼠右 膝 关 节 及 其 周 围肿 胀 ， 舔 足跛行 ， 模 型 成功 率为 ８ ０ ％； 佐 剂 组僵 硬肿 胀等 症状 更加 明显 ， 模 型 成 功 率 达
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｃ ｏ ｐ ｙ ｔ ｈ ｅ ａ ｎ ｉ ｍａ ｌ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ｏ ｆ ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｌ ｒ ａ ｔ ｓ ｉ ｎ ａ ｃ ｃ ｏ ｒ ｄ ａ ｎ ｃ ｅ ｗｉ ｔ ｈ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ａ ｃ ｕ ｔ ｅ ｋ ｎ ｅ ｅ ａ ｒ ｔ ｈ ｒ ｉ ｔ ｉ ｓ ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｐ ｈ ｙ ｓ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ — ｉ ｃ ａ ｌ ｃ ｈ ａ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｓ ｔ ｉ ｃ ｓ ．Ｍ ｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ Ｔ ｈ ｉ ｒ ｔ ｙ ｒ ａ ｔ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｒ ａ ｎ ｄ ｏ ｍｅ ｙ ｄ ｉ ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｏ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ，ａ ｃ ｅ ｔ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ，ａ ｄ ｊ ｕ ｖ ａ ｎ ｔ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ，ｒ ｅ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｌ ｙ ．Ｏｎ
・
论
看 ・
Ｊ Ｍ ｅ ｄ Ｒ ｅ ｓ ， Ａ ｕ ｇ ２ ０ １ ５ ， Ｖ ｏ １ ． ４ ４ Ｎ ｏ ． ８
弗 氏 完 全 佐 剂 致 大 鼠 急 性 膝 关 节 炎 动 物 模 型 制 备
陈德 森 李 莉 吴胜 英 彭 吉霞 李 贤玉
摘 要 目的 复 制 符 合 临 床 急 性 膝 关 节 炎 病 理 生 理 特 征 的 实 验 性 大 鼠急 性 膝 关 节 炎 动 物 模 型 。 方 法 ３ ０只 大 鼠 随 机 分
中 图分 类 号 Ｑ９ ５—３ ３
Ａ ｎ ｉ ｍａ ｌ Ｍｏ ｄ ｅ ｌ Ｐ ｒ ｅ ｐ ａ ｒ ａ ｉ ｔ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｒａ ｔ ｓ Ａｃ ｕ ｔ ｅ Ｋｎ ｅ ｅ Ａｒ ｔ ｈ ｒ ｉ ｔ ｉ ｓ Ｉ ｎ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ ｂ ｙ Ｆ ｒ ｅ ｕ ｎ ｄ ｓ Ｃｏ ｍｐ ｌ ｅ ｔ ｅ Ａｄ ｊ ｕ ｖ ａ ｎ ｔ ． Ｃ ｈ ｅ ｎ Ｄｅ ｓ ｅ ｎ，Ｌ ｉ Ｌ ｉ ，Ｗｕ Ｓ ｈ ｅ ｎ ｙ ｉ ｎ ｇ， ｅ ｔ