性病的化验方式以及临床意义·1
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性病的化验方式以及临床意义
梅毒血清学试验
梅毒是性病中常见的慢性全身性的传染病。
机体受到梅毒螺旋体(TP,学名密螺旋体)感染后血清中产生两种主要抗体:一种是非特异性抗体即反应素;另一种是特异性抗体。
目前常用的试验有:
(1)灭活血清反应素试验(USR)。
一般此试验用于梅毒的诊断筛选及流行病学调查。
(2)快速血浆反应素试验(RPR)。
此种试验也可作为梅毒的辅助诊断。
(3)荧光密螺旋体血凝试验(FTA-ABS)。
此试验检测梅毒特异性抗体。
(4)密螺旋体抗体血凝试验(TPHA)。
这个试验检测梅毒特异性抗体,是梅毒确诊试验。
参考值: 凝集法、血凝法:阴性
临床意义:
(1)阳性反应:主要见于梅毒病(TPHA可确诊)。
感染梅素1至2周反应素试验即可有76%以上呈阳性反应,继发期阳性率达95-100%,晚期阳性率约70-95%,隐性患者的阳性率也可达70-80%。
特异性抗体检测在原发期约85-90%的患者呈阳性反应,继发期。
晚期以及隐性患者的阳性率都高达95-100%。
(2)假阳性反应:反应素试验可有假阳性反应,见于瘤型麻风、疟疾、系统性红斑狼疮、硬皮病、雅司病、回归热、钩端螺旋体病、血吸虫病、包虫病、旋毛虫病、支原体肺炎、传染性单核细胞增多症、结核病等疾病。
淋病实验室检查
按患病的具体情况,正确地选择取材部位,规范地进行取材。
脓性分泌物通常取自尿道口、宫颈口、阴道(幼儿)、尿道旁腺和前庭大腺的开口部和眼等。
此外,尿液(男)、血液、关节液和脓疤内容物中,也都可能含有淋菌(DGI)。
目前在临床上仍以涂片镜检和培养为主。
基因检验技术(PCR法)主要在有条件的单位进行。
l.涂片镜检:可见中性分叶核粒细胞内(或与之紧相连)的革兰阴性双球菌。
对有典型尿道炎症状的男性,诊断价值较大,敏感性和特异性均达90%以上。
对无症状或症状轻者,尤其是妇女,阳性率低,检验结果仅供参考。
2.淋菌培养:把标本接种干适当的培养基中,在二氧化碳孵箱内孵育。
根据菌群的形态和氧化酶试验、糖发酵试验等生化反应,进行鉴定。
可进一步做药敏试验。
3.直接荧光抗体染色技术:较敏感、快速,但有个别假阳性。
4.协同凝集试验:方法简便、快速。
二聚合酶链反应(PCR)技术:检测淋菌DNA,敏感性和特异性均高,但要求严格控制试验条件,避免出现错误结果。
前列腺液检查
1. 前列腺液细胞计数:
化验介绍: 正常人的前列腺液中可见到少量的上皮细胞,也可见到少量的白细胞
(多为单核细胞)
参考值: 直接涂片法:白细胞<10/HP,红细胞<5/HP
临床意义: 前列腺液中白细胞数增高或有大量脓细胞时,就应考虑发生了前列腺癌、淋病、结核病或存在在非特异性前列腺感染等疾患。
2. 前列腺液细菌培养:
参考值: 阴性(无细菌)
临床意义: 细菌培养检查可找到致病菌,以葡萄球菌最为多见,其次为链球菌,淋病双球菌也可发现。
在患前列腺结核时,还可发现结核杆菌。
阴道分泌物及阴道细胞学检查
阴道分泌物及阴道细胞学检查
1. 阴道清洁度检查
2. 阴道清洁度的判断
3. 阴道脱落细胞学检查巴氏分级
4. 阴道脱落巴氏分级标准
微生物学检查
【临床意义】引起阴道感染的原虫有阴道毛滴虫,可致滴虫性阴道炎;真菌有白色假丝酵母菌(白色念珠菌),偶有阴道纤毛菌、放线菌,可致霉菌性阴道炎;细菌有淋病奈瑟菌,可致淋病,阴道加德纳菌可致加德纳性阴道病;衣原体有泌尿生殖道沙眼衣原体,致急性阴道炎和宫颈炎;病毒有单纯疱疹病毒、人巨细胞病毒、人乳头状病毒,均可致生殖道感染,前二种病毒可在孕期感染胎儿,后一种病毒可致宫颈
癌。
艾滋病抗体检测(HIV-Ab)
艾滋病,即获得性免疫缺陷综合症(AIDS),是由于感染了人获得性免疫缺陷病毒(HIV)所引起的。
大约人在感染HIV后2-3个月,血清中出现HIV抗体,而且抗体可以长期存在。
参考值: 酶联免疫吸附试验(ELISA)阴性免疫荧光测定(IFA):阴性蛋白印迹试验(WB):阴性
临床意义: 人体受到免疫缺损病毒(HIV)感染后,试验呈阳性反应,如男性同性恋、静脉药瘾者(吸毒者)、血友病患者、艾滋病人的配偶。
个别献血员中也有阳性反应的报告。
注:目前艾滋病检查正在发展一种不依赖抗体的检测疗法,如聚合酶链反应(PCR),它可用于检测人体各种组织和细胞内的HTV基因,此检测最适合于HIV 感染的早期检测和诊断。
梅毒相关检测方法
1、暗视野显微镜检
暗视野显微镜检查是一种检查梅毒螺旋体的方法。
暗视野,顾名思义即是显微镜下没有明亮的光线,它便于检查苍白的螺旋体。
这是一种病原体检查,对早期梅毒的诊断有十分重要的意义。
早期皮肤粘膜损害(一期、二期霉疮)可查到苍白螺旋体。
一期梅毒苍白螺旋体多在硬下疳的硬结、溃疡的分泌物和渗出液中存在,肿大的淋巴结穿刺也可检出。
二期梅毒苍白螺旋体可在全身血液和组织中检出,但以皮肤检出率最高。
早期先天性梅毒,可以通过皮肤或粘膜损害处刮片发现梅毒苍白螺旋体。
最近,通过羊膜穿刺术获得孕妇的羊水,以其作暗视野显微镜观察,对先天性梅毒有诊断价值。
2、梅毒血清学检测
梅毒血清学检查对于诊断二期、三期梅毒,以及判定梅毒的发展和痊愈,判断药物的疗效都有十分重要的意义。
梅毒血清学检查包括非梅毒螺旋体血清学试验和梅毒螺旋体血清学试验。
前者常用于临床筛选及判定治疗的效果,抽血后1小时即可出结果,费用也低廉。
后者主要是用于判定试验,但是它不能判定治疗效果,一旦患有梅毒,这一试验将终身阳性。
(1)非梅毒螺旋体血清试验这类试验的抗原分为心磷脂、卵磷脂和胆固醇的混悬液,用来检测抗心磷脂抗体。
由于这些试验具有相同的标准化抗原,所以敏感性相似。
常用的有三种:①性病研究实验室玻片试验(VDRL);②血清不加热的反应素玻片试验(USR);③快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)。
可用作临床筛选,并可作定量,用于疗效观察。
(2)梅毒螺旋体血清试验包括有:①荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS);
②梅毒螺旋体血凝试验(TPHA);③梅毒螺旋体制动试验(TPI)等。
这类试验特异性高,主要用于诊断试验。
3、梅毒螺旋体IgM抗体检测
梅毒螺旋体IgM抗体检测是近年来才有的新的诊断梅毒的方法。
IgM抗体是一种免疫球蛋白,用它来诊断梅毒具有敏感性高,能早期诊断,能判定胎儿是否感染梅毒螺旋体等优点。
特异性IgM类抗体的产生是感染梅毒和其他细菌或病毒后机体首先出现的体液免疫应答,一般在感染的早期呈阳性,随着疾病发展而增加,IgG抗体随后才慢慢上升。
经有效治疗后IgM抗体消失,IgG抗体则持续存在,TP-IgM阳性的一期梅毒病人经过青霉素治疗后,约2~4周TP-IgM消失。
二期梅毒TP-IgM阳性病人经过青霉素治疗后,2~8个月之内IgM消失。
此外,TP-IgM的检测对诊断新生儿的先天性梅毒意义很大,因为IgM抗体分子较大,其母体IgM抗体不能通过胎盘,如果TP-IgM阳性则表示婴儿已被感染。
4、分子生物学检测
近年来分子生物学发展迅速,PCR技术广泛用于临床,所谓PCR即多聚酶链式反应,即从选择的材料扩增选择的螺旋体DNA序列,从而使经选择的螺旋体DNA 拷贝数量增加,能够便于用特异性探针来进行检测,以提高诊断率。
但是,这种
实验方法,要求有条件绝对好的实验室和技术一流的技师,而我国目前很少有这样高水平的实验室。
不然有了污染,你放入的是梅毒螺旋体,经过DNA扩增后出现了大肠杆菌,让你哭笑不得。
一些小诊所常常赶时髦,挂个PCR实验室的牌子,吃喝拉撒在一起,只能是自欺欺人。
其实诊断梅毒不一定要作PCR,作一般的抽血化验即可。
5、脑脊液检查
晚期梅毒患者,当出现神经症状,经过驱梅治疗无效,应作脑脊液检查。
这一检查对神经梅毒的诊断、治疗及预后的判断均有帮助。
检查项目应包括:细胞计数、总蛋白测定、VDRL试验及胶体金试验。
性病微生物检查
1)淋病奈氏菌(淋病双球菌)检查淋病奈氏菌为革兰氏阴性双球菌,呈肾形或成双排列,似脑膜炎球菌。
尿道或子官分泌物涂片,进行革兰氏染色或美兰染色,在镜下观察,急性病人脓汁标本可见淋球菌位于白细胞内,慢性病人淋球菌则多在细胞外。
发现淋球菌对诊断淋病有重要意义。
(2)梅毒螺旋体检查初期梅素患者的病灶硬下疳的组织渗出液涂片在暗视野显微镜或相差显微镜下观察,如果看到具有活泼运动力的密螺旋体或有光亮的纤细螺旋体,结合临床症状可判断为梅毒螺旋体,其镀银染色为棕黑色,姬姆萨染色呈红色。
这一检查结合梅毒血清学试验对诊断梅毒病有重要意义。
(3)艾滋病病毒检查利用艾滋病病毒具有逆转录酶的特点,可直接自病人标本中分离艾滋病的病毒。
首先从受感染患者血液中提取淋巴细胞,培养于含T 淋巴细胞生长素的培养液中,用植物血凝素刺激使之发生母细胞化,成熟后检查培养上清液中的逆转录酶。
如果阳性,多为艾滋病现症患者。
尖锐湿疣HPV的DNA检测
尖锐湿疣(CA)病情顽固,极易复发。
过去的研究一直认为HPV是严格的亲上皮病毒。
但有人研究发现血液中能检出HPVDNA。
尖锐湿疣在HPV感染的病程中可能存在病毒血症,可能是易感部位CA复发或其他部位出现CA病变的病毒来源。
为此有关人员对30例CA患者外周血中HPVDNA进行了检测。
方法:采用聚合酶链反应(PCR)检测30例CA患者皮损和外周血中的HPVDNA,20例正常人外周血作对照。
采用限制性内切酶RsaⅠ、PstⅠ对HPV 做分型鉴定。
选取1例皮损与外周血均为阳性的PCR产物进行测序。
结果:30例CA患者皮损均检出HPVDNA,血浆中未检测到HPVDNA,有8例外周血单一核细胞(PBMC)中检测到HPVDNA(阳性率为26.7%),20例正常人对照为阴性。
两组阳性率经χ2校正检验χ2=4.52,P<0.05,差异有显著性。
酶切和测序结果显示,PBMC中的HPV型别与其皮损处的型别有一致性。
结论:CA患者在HPV感染的病程中可能存在病毒血症,这可能是CA易于复发的原因之一。
本研究结果提示,病毒在局部大量繁殖有可能破坏局部基底膜带,通过真皮血管入血。
此外,在PBMC中检测到HPV提示,该病可能有性传
播以外的途径经血行传播的可能。
性病微生物检查
1)淋病奈氏菌(淋病双球菌)检查淋病奈氏菌为革兰氏阴性双球菌,呈肾形或成双排列,似脑膜炎球菌。
尿道或子官分泌物涂片,进行革兰氏染色或美兰染色,在镜下观察,急性病人脓汁标本可见淋球菌位于白细胞内,慢性病人淋球菌则多在细胞外。
发现淋球菌对诊断淋病有重要意义。
(2)梅毒螺旋体检查初期梅素患者的病灶硬下疳的组织渗出液涂片在暗视野显微镜或相差显微镜下观察,如果看到具有活泼运动力的密螺旋体或有光亮的纤细螺旋体,结合临床症状可判断为梅毒螺旋体,其镀银染色为棕黑色,姬姆萨染色呈红色。
这一检查结合梅毒血清学试验对诊断梅毒病有重要意义。
(3)艾滋病病毒检查利用艾滋病病毒具有逆转录酶的特点,可直接自病人标本中分离艾滋病的病毒。
首先从受感染患者血液中提取淋巴细胞,培养于含T 淋巴细胞生长素的培养液中,用植物血凝素刺激使之发生母细胞化,成熟后检查培养上清液中的逆转录酶。
如果阳性,多为艾滋病现症患者。
分泌物的涂片检查
分泌物的涂片检查是临床上常用的方法,它简便,易于操作,对实验室的要求不高,而且可作为诊断的依据,尤其对男性淋病其阳性率很高,达到90%左右,也就是说绝大多数男性淋病患者可用分泌物涂片的方法作出明确的诊断。