辽宁省本溪市2014年度女性艾滋病病毒感染者感染情况分析

辽宁省本溪市2014年度女性艾滋病病毒感染者感染情况分析
目的：分析辽宁省本溪市2014年度女性艾滋病病毒感染者感染情况。

方法：对本溪市60份艾滋病确证样品进行检验。

结果：2014年度，本溪市60份艾滋病确证样品中女性待复查样品11份，在这11份中，共检测出阳性样品5份、阴性样品4份、不确定样品2份。

结论：检测部门可为艾滋病的防制工作提供可靠、及时的检测数据，这对艾滋病的早发现、早控制起着非常重要的作用。

标签：艾滋病；慢性传染病；HIV；潜伏期
艾滋病，作为一种人人畏惧的慢性传染病，经研究发现起源于非洲，由移民带入美国。

1981年6月5日，美国疾病预防控制中心报道了5例艾滋病病人的病例报告，当时对该疾病的病原学还不清楚，直到一年后这种疾病才被命名为“艾滋病”，是由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的后天免疫缺陷病。

1985年，我国发现第一例输入病例，一名在中国旅游的外国籍人士。

HIV感染者的病程较长，常常要经过数年、甚至长达10年或更长的潜伏期后才会发展成艾滋病病人，最后病人常常因为各种机会性感染或各种恶性肿瘤导致全身衰竭而死亡。

本溪市自2004年发现首例艾滋病病毒感染者以来，这10年间艾滋病感染者的数量都在呈现逐年上升的趋势，也符合国际国内的流行趋势，本溪市疾病预防控制中心作为各类传染病防治的第一线机构，也掌握了艾滋病的流行和感染率第一手资料。

现将我中心检验科的工作流程说明如下：
1 材料与方法
1.1 样品来源：全市各医院、献血机构、自愿咨询机构初筛待复核样品。

1.2 实验试剂：人类免疫缺陷病毒（HIV1+2型）抗体检测试剂盒（免疫印迹法）（MP生物医学亚太私人有限公司）。

1.3 仪器设备：全自动蛋白印迹仪（AUTOBLOT SYSTEM20）（MP生物医学亚太私人有限公司）
1.4 检测方法：《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》WS293-2008；《全国艾滋病检测技术规范》（2009年修订版）。

2 检验程序
艾滋病确认实验（过夜法）：
2.1 首先是试剂配置准备，将试剂盒从冰箱中取出，使试剂盒各组分的温度恢复到室温。

准备其他器具、滴管和加样器。

稀释洗膜缓冲液配制，将1体积的浓缩洗膜缓冲液（20*）加19体积的蒸馏水中，充分混匀。

封闭缓冲液每次使用前新鲜配制，1体积的浓缩储存缓冲液加入到9体积的蒸馏水中，充分混匀，每
20ml稀释储存缓冲液中加入1g封闭粉，充分混匀、溶解。

正确地将管道连接至各试剂瓶，确认泵压力垫已被锁定在正确的位置。

2.2 准备工作完成后，打开仪器开关。

显示器屏幕有“准备运行新的检测READY FOR A NEW TEST YES OR NO”提示，按“YES”键进入检测程序选择；“运行试验RUN ASSAY”用“YES/NO”键选择“过夜法LONG”检测程序，按“ENTER”键确认；“泵压力垫是否锁定在正确位置PUMP PADS IN PLACE”检查仪器后背泵压力垫是否锁定在正确位置，按“YES”键确认；“管路插入对应瓶子中PUT TUBES IN BOTTLE S”废液管道与废液瓶连结完好，按“ENTER”键确认；“灌注管路PRIME PUMPS”灌注管道（在运行检测前必须将液体引入管道），按“YES”键开始；提示灌注管道1～6号，每个管道有“再次灌注泵X管路PRIME PUMP X TUBE AGAIN”按下“YES”键直到管路中出现液体未知，以此类推，注意过夜法第一天只灌注管道“1 .洗膜液、2.蒸馏水、5.封闭液”，其余管道一律选择“NO”跳过；“条带总数STRIP COUNT”用“YES/NO”键选择检测条带数，按“ENTER”键确认；“开始试验START ASSAY”开始检测，按“YES”键开始；“放好板槽LOAD TRAY”将孵育板放到平台上，按“ENTER”键确认；“关闭盖子CLOSE TRAY COVER”关上仪器挡板，按“ENTER”键确认；“加入条带ADD STRIPS NOW”打开仪器挡板，用镊子小心取出需要的试剂膜条，有号码的一端向上，分别放入孵育板槽内。

包括一条强阳性对照、一条弱阳性对照和一条阴性对照，按“ENTER”键确认；“样本准备SAMPLE PREPARED”准备检测样品，按“YES”键；“加入样本SANPLE INSTALLED”加样，包括一条强阳性对照、一条弱阳性对照和一条阴性对照，完成后按“YES”键，仪器自动完成当天实验，耗时“20小时”。

2.3 第二天需要准备好酶结合物及底物，在时间还剩余1小时左右按“暂停PAUSE”键暂停选择“2.PRIME PUMPS”，冲洗管道“
3.底物液、
4.酶结合物”，然后让实验继续自动运行，直到实验完全结束。

待实验完全结束后，冲洗管道和放开压力泵并关闭电源。

3 结果分析
2014年度，本溪市疾病预防控制中心共检测艾滋病确证样品60份，其中女性待复查样品11份，在这11份中，共检测出阳性样品5份、阴性样品4份、不确定样品2份。

在2份有代表性的不确定样品中，其中一份第一次检测不确定结果为：单独“P24”蛋白阳性，之后未再次送检，另一份样品第一次不确定结果为：“gp160、P24”蛋白阳性，3个月后再次采血第二次检测结果为：“gp160、gp120、P66、P24、P17”蛋白阳性，蛋白条带有明显进展，符合阳性诊断标准，判定为阳性，分析该患者可能为新近感染者，在窗口期内部分艾滋病病毒蛋白未达到被检测最小量。

4 总结
随着艾滋病流行范围和规模的不断扩大，早发现、早控制就越发重要。

本溪市艾滋病总体流行情况虽说不是很严重，但也以很快的速度在逐年递增，尤其是女性感染者比例在增加，这不但要求我们疾控艾滋病防制和健康教育部门加强宣
传和干预工作，更要求我们检测部门要不断开拓创新新的检测方法和新的技术，为艾滋病的防制工作提供可靠、及时的检测数据。

参考文献
[1]魏民.HIV实验室检测研究进展和发展趋势[J].国外医学（病毒学分册），2003，10（3）.
[2]徐克沂，王瑛.同时检测HIV抗体及p24抗原快速诊断试剂的研制[J].中华实验和临床病毒学杂志，2002，16（4）.
[3]沈霞.艾滋病的实验室诊断[J].中华检验医学杂志，2003，26（5）.
[4]冯晓英.吸毒人群尿液血液标本HIV？Ⅰ抗体ELISA检测对比分析[J].中国性病艾滋病防治，2003，9（3）.
[5]曹韵贞.我国艾滋病的现状[J].中国抗感染化疗杂志，2002，2（2）.。