氯化镧对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

组 、 １ １ ｍ ｌＬ Ｌ Ｃ 组 ， Ｘ ０～ ｏ ａ １ ／ 以及 阴性 对 照组 ， 组 每 设 ４个 复孔 。细胞 饥饿 同步化 后加 药 。各 孔加入 含
不 同浓 度 ＬＣ，的 Ｄ Ｍ 培 养 液 和 不 含 【ｃ 的 ａＩ ＭＥ ａｌ Ｄ Ｄ培养基 作 为 阴性 对 照 ， 养 ２ ＭＥ 培 ４ｈ后 弃 培 养 液， 各孔 加入 ２ ０ ５ｍ／ ＬＭＴ ，７ｏ ￣ｍ Ｔ ３ Ｃ培养 ４ｈ ，
摘要 ： 目的
探讨 不 同浓度 的氯 化镧 对人 牙周 膜成 纤 维细 胞 （ Ｄ Ｆ ） Ｐ Ｌ ｓ 增殖 的影 响。方法 原 代 细胞 培养
Ｐ Ｌ ｓ ＭＴ Ｄ Ｆ ， ｒ法检测 ５种不同浓 度氯化镧 （ Ｏ １ ０ １ ０ １Ｘ１ 及 １ ０ ｍ ＶＬ 对 Ｐ Ｌ ｓ １ ｌ 一、 １ 一、 ×１ 一、 Ｘ Ｘ ０ １ ｏ ） Ｘ Ｄ Ｆ 增殖 的
细胞 的增 殖 。还有 文 献 报 道 １×１ ～、 ０ １×１ 。ｍ ｌ ０ ｏ ／
ＬＬ Ｃ 对犬 骨髓 基 质 细 胞 增 殖 有抑 制 作 用 Ｊ ａ １ 。这 些结 果 与 以上 文 献报 道 差 异 较 大 ， 能与 细 胞 种属 可
以及 实 验条件 的差 异有 关 。可见关 于稀 土元 素对组 织 细胞 的增殖 作用 ， 尚需 进一 步 的研究 。 细 胞增 殖 时 胞 质 中钙 浓度 增 加 ， 并且 需 要 外 源 性钙 离 子 。姚 惠 英 等 采 用 放 射 性 钙 示 踪 法 研 究 发 现， 在浓 度为 １ ～ ～１ ｍ ｌＬ范 围 内 ， 土能 促进 ０ ０ ｏ ／ 稀
山东医药 ２ １ 第 ５ ０２年 ２卷第 ３ ３期
氯 化 镧对 人 牙 周膜 成 纤 维 细胞 增 殖 的影 响
荆得 宝 许 ， 萍 王 丽琴 王小 平 。 ，
（ １上 海浦 东新 区公利 医院， 上海 ２０ ３ ； ０ １５２同济 大学附属 口腔 医院 ； 海市 口腔 病防 治院 ） ３上
影响 。结果
Ｉ １ ～ ｍ Ｌ 氯化镧的 Ｏ ×０ ｏＬ ／ Ｄ值明显低于阴性对 照（ ００ ）其余 ４种浓度与 阴性 对照 比较差异无 Ｐ＜ ．１ ，
高浓度（１Ｘ ０ ｍ ￣Ｌ 的氯化镧对 Ｐ Ｌ ｓ ｏ ） １ Ｄ Ｆ 细胞增殖有抑制作 用。
文 献标 志码 ： Ｂ 文 章 编 号 ：０ ２２ ６ ２ １ ） ３ ０４０ １０ － Ｘ（０２ ３ － ４ －２ ６ ０
材 料研 究所 ） Ｍ （ ｌｋ ，ｗｔ ｒ ｎ ） ； ａ Ｆｕ ａ Ｓ ｉ ｅ ａ ｄ 。 ｒ ｚｌ
１２ 方 法 ．
Ｐ Ｌｓ Ｄ Ｆ 加人 Ｍ ｒ４ｈ后 显 微 镜下 观 察 ， 见 细 Ｔ 可 胞 内有 蓝紫 色针状 结 晶 ， 因为 Ｍ Ｙ被 细胞 中的线 是 Ｔ 粒体 琥珀 酸脱 氢 酶 还原 成 了 甲瓒 化 合 物 。ＬＣ， ａ １对
１ 材料 与方 法
仪 ５０ａ ５ ｍ波长检测 Ｏ Ｄ值。
１２３ 统 计学 方 法 ．． 采 用 Ｓ Ｓ １． 件 ， 据 以 Ｐ Ｓ３０软 数 ｘ４ 表示 ， ｓ － 比较 采用 方差 分析 ｄｎｅ ｕｎａ检验 法 。Ｐ≤
０ ０ 为有 统计学 差异 。 ．５
２ 结果
１ １ 材料 ．
Ｐ Ｌ ｓ 殖 的影 响见表 １ 图 １ ＤＦ增 ， 。
３ 讨 论
表 １ Ｌ Ｃ３ Ｐ Ｌ ｓ ａ Ｉ 对 Ｄ Ｆ 增殖的影响
１２ １ 细胞 培养 因 正 畸需 要拔 除 的前磨 牙 置 于 ．． 含双抗 的预 冷 Ｄ Ｅ 中 ， 锐器 刮取 牙 根 中 １３部 Ｍ Ｍ 用 ／
位的牙周膜组织 ， 加入 Ｄ Ｈ ｎｓ － ａｋ 液冲洗 ， 组织块移入 培养 瓶 中 ， 置 培养 瓶 于 ５ Ｃ ３ 倒 ％ Ｏ 、７℃ 培养 箱 中 １
（ Ｗ２０ Ａ ６ 。 Ｐ ０ ９ － ）
４ ４
注： 与阴性对照组 比较 ， Ｐ＜ ．５ ０ ０
山东 医药 ２ １ 第 ５ ０ ２年 ２卷第 ３ ３期 有 发现 Ｌ Ｃ 对 Ｐ Ｌ ｓ 殖 有 明 显 促 进 作 用 ， ａ１ ＤＦ 增 １×
｝ ．， Ｉ－Ｉ ．．． １ＩＩ
图 １ Ｌ Ｃ ３ Ｐ Ｆ 增 殖 的 影 响 ａ Ｉ 对 ＤＬ ｓ
Ｃ ２ 养 箱 （ 国 Ｓ Ｅ Ｄ Ｎ） 超净 台 Ｏ培 美 Ｈ ＬＯ ；
（ 国 Ｔ ｅｍ ｃ ｎｉｃ ； 置 光 相 差 显 微 镜 （ ｉ 德 ｈｒｏＳｉ ｔ ） 倒 ｅ ｆ ｉ Ｎ— ｋｎＪｐｎ ； ＭＥ 低糖 培养液 （ ｏ ， ａ ）Ｄ Ｍ ａ 杭州 吉诺生 物 ） 胎 ； 牛 血清 （ 杭州 四季 青 ） 酶 标 仪 （ ｌ ｉｉ１８ ｕｔ— ； Ｃｉ ｂｏ２ ，Ａ ｓｉ ｎ ｒ ａ ；９ 七 水 ＬＣ ＬＣ ７ 湖南 省稀 土金 属 ）９ ％ ａ １（ ａ １ Ｈ Ｏ， ．
统计学意义 。结论
关键词 ： 牙周膜成纤维细胞 ； 氯化镧 ； 增殖
中图 分 类 号 ： ７０ ２ Ｒ ８ ．
稀 土是一 组金 属 的简称 ， 括 化 学元 素 周 期表 包 第 三副族 中称 为镧 系 的 元 素 。氯 化 镧 （ ａｌ） ＬＣ 是稀
加入 ０ ２ ％胰酶 ， １２比例进 行 传代 ， ．５ 按 ： ４代 ～ ８代 细胞用 于实 验 。 １２ ２ 采 用 ＭＴ ．． ｒ法 检 测 Ｐ Ｌ ｓ 殖 ＤＦ增 取 ４代 ～８
土元素的一种化合物 。稀土元素化合物具有抗炎 、 抑 菌 、 制 自由基 的产 生 、 肿 瘤 、 突变 等作 用 。 抑 抗 抗
有 研究发 现 ， 土元 素 的 生 物 学 效 用 与 浓 度 有 关 。 稀 高 浓度 的稀 土对细 胞有毒 性作 用 ， 抑制细胞 增殖 ， 能 造 成组织 损 伤 ， 能对 人 体 的 心 、 多 处 器 官 造 成 创 脑 伤 ， 至死亡 。而适 宜浓 度 的稀 土元 素 对 细胞 有 促 甚
现 代研 究认 为 ， 土 元 素 对 细胞 的生 物 学 效应 稀
与其浓 度有关 。对 于 稀 土元 素 适 宜 的生 物 学 浓度 ，
至今学 术界 尚无 准 确 的定 论 。一 般 认 为 ， 浓 度 的 高
稀 土可 抑制 细胞 的 增 殖 ， 宜 低浓 度 的稀 土 元 素具 适 有 促增 殖作 用 。
ｈ后加 入含 １０ｍ／ ０ ｌＬ胎 牛血 清 和 三抗 （ 霉 素 、 链 青 霉素 、 大霉素 ） Ｄ Ｍ 培养 基 放 人 培养 箱 继 续 庆 的 ＭＥ
培养 。待细胞铺满瓶底 ８ ％左右时进行首次传代。 ０
基金项目 ： 海市浦东新区卫生局卫 生科 技发展 专项基金资助 项 目 上
Ｌ¨对 细胞有 毒性 作用 。２ ５ｂ ｌＬＬ Ｃ 即表 现 ａ ． ｍｏ ａ １ ／ 出促 进 小 鼠 神 经 干 细 胞 的 增 殖 作 用 ， 明 ２ ５ 表 ． ￣ ｌＬＬＣ 可促 进小 鼠神 经干 细胞增 殖 ＿ 。王 小 ｘ ／ ａ １ ｍｏ ２ Ｊ
平 等 研 究 表 明 ， ａ １ 度 为 １×１ ｍ ｌＬ时 ， Ｌ Ｃ 浓 ０ ｏ ／ 能 明显 抑 制人牙 龈成 纤维 细 胞 的增 殖 ， １×１ ０～ ～ １ ×１ ｍ ｌＬ时 ， 示 出对 牙 龈 成纤 维 细胞 具 有 一 ０ ｏ ／ 显 定 的促 增 殖 作 用 。Ｙ ｕ等 发 现 ， ａ 浓 度 在 １× Ｌ¨ １ ～１×１ Ｉ ｍ ｌＬ范 围时 对 鼠成 纤 维 细 胞 增 殖 Ｏ一 ０４ ｏ ／ 与 Ｄ Ａ合成 均呈 促进 作用 ， Ｎ 且这 种作 用呈 浓度 相 关 性 。凤 志 慧 等 发 现 １×１ “一 １×１ ｍ ｌＬ ０ ０ ｏ ／
［ ］凤志慧 ， ５ 王玺 ， 张孙 曦， 稀土元素 Ｌ 、 ｄ和 ｃ 对培养 大鼠细 等． ａＧ ｅ
可 能与 其离 子半径 和钙 离子 相似有 关 。稀土 离子 比 钙 离子 多一个 正 电离子 ， 离子势 比钙 离子 大 ， 意 其 这 味着 稀 土离 子取代 结 合 钙 ， 细 胞 内游 离 钙 离 子增 使 加， 此可 能是 其促 细胞增 殖 的机制 之一 。
参 考文 献 ：
［ ］郭勇全 ， １ 肖萍 ， 李文蕊 ， ． 等 茶叶 中稀土元 素及其健 康效应 ［ ］ Ｊ．
２ ０ ，４ ３ ：０ －１ ． ０ ５ ９ （ ）５ ８５ ９
时 ，ａ Ｌ ¨能促 进大 鼠平 滑肌 细 胞增 殖 ， 剂 量 达 １× 但
１ ～１ ０Ｉ ｍ ｌＬ时 Ｌ “显 示 出毒性作 用 。 ０～ ×１ ４ ｏ ／ ａ 本 实 验选择 了 １×１ ～、 ０ １×１ 一、 ０ １×１ ～、 ０ １× １ ～、 ０ １×１ ｍｏ Ｌ５个 浓 度 梯 度 来 检 测 Ｌ Ｃ 对 ０ ｌ ／ ａ１ Ｐ Ｌ ｓ的影 响 。与 阴性对 照 组 比较 ， ａ １ Ｐ Ｌ ｓ ＤＦ Ｌ Ｃ 对 Ｄ Ｆ 作 用 ２ ，１×１ ～ｍ ｌＬＬ Ｃ 对 细胞 的增 殖 有 明 ４ｈ ０ ｏ ａ１ ／ 显 抑制 作用 ， 明 １×１ 说 ０一ｍ ＬＬ Ｌ Ｃ Ｐ Ｌ ｓ ｏ／ ａ １ 对 Ｄ Ｆ 有
吸除 Ｍ Ｆ 加人 １０ Ｌ二 甲基 亚砜 振 荡 后 ， 酶标 Ｔ， ５ 上
中， 我们 对不 同浓 度 的 Ｌ Ｃ 对 牙 周 膜 成 纤 维 细 胞 ａ１ （Ｄ Ｆ） Ｐ Ｌ ｓ 增殖 的影 响进 行 了 探讨 ， ＬＣ 在 牙 周 为 ａ１ 领 域 的应用 提供一 些基 础资 料 。
１ Ｏ～、 ×１ 一ｍ ｌＬＯ １ ０ ｏ Ｄ值 高 于 阴性 对 照组 ， 示有 ／ 提 促增 殖 作用 ， 无 统计 学意 义 ， 但 与文 献报 道一 致 。另 外 ，ｈｎ 研 究 发 现 ， Ｚａｇ等 １×１ ～１×１ ｍ ｌＬ浓 ０一 ０ ｏ／ 度 范 围内 ，ａ Ｌ ¨和 Ｇ ¨ 均会 抑制 小 鼠原代 培养 成骨 ｄ
食 品 与 发 酵 科 技 ，０ ０４ ５ ：５６ ． ２ １ ，６（ ） ６ －８
［ ］刘玉霞 ， ２ 邓志锋 ， 汪泱 ， 稀土化合物氯化镧影响神经干细胞增 等． 殖的探讨 ［］ 实验与检验医学 ，０ ８ ２ （ ） ４ ５４ ７ Ｊ． ２ ０ ，６ ５ ：６ －６ ． ［ ］王小平 ， 丽琴 ， ３ 王 张军． 氯化镧 对人 牙 龈成纤 细胞 增殖 的影 响 ［ ］ 实用 １腔 医学杂志 ，０ ５，１ ３ ：０ －０ ． Ｊ． ２ １ ２０ ２ （ ）４ ３ ５ ４ ［ ４］Ｙ ，Ｙ ａ Ｙ ｎ ｅ ａ ａ 一ｒｍ ｔｄｐｏｉ ｒ ｉ ｔ ． ｕＳ ｕｎＬ， ａｇＸ， ｔ １ ¨ ｐｏ ｏｅ ｒｌｅａ ｏ ｉ ｉ ｅ ．Ｌ ｆ ｔｎｓｎ ｒ ｃｎ ｅｔｄｗｔ ｐｐｏｉ ｉ Ｎ Ｈ ３ ３ ｃｌ ［ ］ ｅ ｉ ｈｍ， ｏｎ ｃ ｉ ａｏｔｓ ｎ Ｉ Ｔ ｅｌ Ｊ ．ＪＣ ｌ Ｂｏ ｅ ｅ ｈ ｓ ｓ ｌ ｃ
有 实验 观察 到 ２ ￣ ｏ ＬＬＣ 作 用 于 小 鼠神 ５ｌ ｌ ａ１ ｍ ／
经干 细胞 ２ ４ ｈ后 ， 能抑 制 细 胞 的增 殖 ， 明 此 浓 度 说
大 鼠肝 细胞 和成 纤维 细 胞 钙 离 子 内流 ， 稀 土 的这 而
种作 用 是 通 过 激 活 钙 离 子 通 道 造 成 的 。此 作 用
进 增殖作 用 。２ １ ０ ０年 １月 ～ ０ １年 ６月 ， ２１ 本实 验
代的对数生长期 Ｐ Ｌ ｓ Ｄ Ｆ 作为实验对象 。随机分为 ６
组 ： ０～ ｍ ｌＬ Ｌ Ｃ 组 、 １Ｘ１ ｏ ａ １ ／ １×１ ０一 ｍ ｌＬ Ｌ Ｃ ｏ ａ １ ／
组、 １×１ ～ ｍｏ Ｌ Ｌ Ｃ 组 、 ０ ｍｏ Ｌ Ｌ Ｃ ０ ｌ ａ１ ／ １Ｘ １ ～ ｌ ａ１ ／