杆菌肽锌HPLC测定 - 360文档中心

HPLC—MS／MS法测定海水中杆菌肽的残留量

我国已明确将杆菌肽列为渔业禁用药物，但
收稿日期：２０１３— ０４—２３
谱纯（美国Ｔｅｄｉａ公司）；实验用水为Ｍｉｌｌｉ —Ｑ
资助项目：福建省省属公益类科研院所基本科研专项（２０１１Ｒ１００３— ５）．作者简介：罗方方（１９８５一），女，硕士，研究方向：食品安全与检测．Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｚｘｄｌｆｕ２００７＠ｙａｈｏｏ．ｃｎ通讯作者：吴成业（１９５３一），男，研究员，主要从事水产品加工利用研究，Ｅ—ｍａｉｌ：ｗｃｙ＠ｆｊｓｃｓ．ａｃ．ｃｎ
制和杀灭鱼体和水体中的病原微生物，还可以促
进鱼体生长，降低饲料系数ｊ。但近几年人们研究发现，杆菌肽锌对水环境有严重的破坏作用，在杀灭病原微生物的同时，还会杀灭水环境中有益微生物，破坏了水体微环境的生态平衡，造成水质恶化＿４Ｊ，此外杆菌肽在水环境中的残
ＨＰＬＣ—ＭＳ／ＭＳ法测定海水中杆菌肽的残留量
罗方方，钱卓真，林荣晓，吴成业
（福建省水产研究所，福建厦门３６１０１３）
摘要：建立了海水中杆菌肽残留检测的液相色谱串联质谱法（ＨＰＬＣ —ＭＳ／ＭＳ）。在对水中杆菌肽提

杆菌肽锌预混剂质量标准

附件1杆菌肽锌预混剂质量标准杆菌肽锌预混剂Ganjuntaixin YuhunjiBacitracin zinc premix本品为杆菌肽发酵液与锌盐反应后的喷雾干燥物与碳酸钙等辅料配制而成。

含杆菌肽锌按杆菌肽计，应为标示量的90.0%～110.0%。

【鉴别】 (1) 取本品约0.4g ，加磷酸盐缓冲液（pH6.0）-吡啶-5mol/L 盐酸溶液（31:9:20）的混合液10ml ，充分搅拌15分钟，滤过，取滤液，加0.1%茚三酮的水饱和正丁醇溶液1ml 与吡啶0.5ml ，加水1ml ，置水浴中加热5分钟，即显深紫色。

(2) 在组分与相关肽项下记录的色谱图中，供试品溶液杆菌肽B1、B2、B3和A 峰的保留时间应与杆菌肽锌标准品溶液相应四个峰的保留时间一致。

【检查】粒度本品应全部通过二号筛。

组分与相关肽取本品适量（约相当于6000杆菌肽单位），置50ml 量瓶中，加4%乙二胺四乙酸二钠溶液(用氢氧化钠试液调节pH 值至7.0)稀释至刻度，磁力搅拌30分钟，离心5分钟，取上清液滤过，取续滤液作为供试品溶液；取杆菌肽锌标准品适量，用上述4%乙二胺四乙酸二钠溶液溶解并稀释制成每1ml 中约含120杆菌肽单位的溶液，作为鉴别用标准品溶液。

照高效液相色谱法（附录36页）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钾3.48g ，加水100ml 使溶解，用2.72%磷酸二氢钾溶液调节pH 值至6.0）-乙腈（26:12:4:2）为流动相；柱温为30℃；检测波长为254nm ；流速为每分钟1 ml 。

峰谷比Hp/Hv 应≥1.2（Hp 为基线以上到杆菌肽B1峰顶的高度，Hv 为基线以上到杆菌肽B1和B2峰之间的曲线最低点的高度）。

精密量取供试品溶液与标准品溶液各20μl ，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图至杆菌肽A 峰保留时间的3倍（以杆菌肽A 的保留时间15分～25分钟为宜；如有必要，可保持甲醇和乙腈比例不变，调整流动相中水与磷酸盐缓冲液的比例）。

杆菌肽锌预混剂锌含量测定探讨

１材料与方法
型）。１ｍｇ／ｍＬ锌标准储备液（购于国家钢铁测试中
心）；１０％杆菌肽锌预混剂（批号：Ｐ１２０５０３、１２０５０４、
Ｐ１２０５０５）、１５％杆菌肽锌预混剂（批号：Ｐ１２０５４７、
学术研究
杆菌肽锌预温剂锌含量测定探讨
姚荣英，余德照，周臣飞，季朝金（绿康生化股份有限公司福建南平３５３４００）摘要：本文参照欧洲药典与中国兽药典杆菌肽锌的锌测定内容，首次建立了杆菌肽锌预混剂的锌测定
滴定管、搅拌器、台式低速自动平衡离心（ＴＤＺ４一ＷＳ
肽。杆菌肽是一种多异构体组成的多肽复合物，生
产菌主要是地衣芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌，其作用主要抑制革兰氏阳性菌的生长。锌与杆菌肽络合，有利于增加杆菌肽的稳定性，因此锌对本品的质量稳定性至关重要。本文参照欧洲药典与中国兽药典收录的杆菌肽锌（原料药）、ＨＧ２９３４ — ２０００饲料级硫酸锌的锌测定方法，首次建立操作方便、快捷的杆菌肽锌预混剂的锌测定方法，并对方法的线性、精密度、准确度进行了验证。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，ｗｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅａｓｓａｙｍｅｔｈｏｄｃｉｎｚｉｎｃｐｒｅｍｉｘ，ｒｅｆｅｒｔｏｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｖｅ

杆菌肽锌检验SOP

GMP管理文件一、目的：建立杆菌肽锌检验的标准操作规程，保证正确操作。

二、依据：《中国兽药典》（2000年版一部）。

三、适用范围：适用于杆菌肽锌的检验。

四、责任者：QC检验员五、正文：1．质量标准：（见杆菌肽锌质量标准）。

2．试剂：2.01 氢氧化钙 2.02 盐酸2.031mol/L醋酸溶液 2.040.2%二甲酚橙指示液2.05六亚甲基四胺 2.06乙二胺四醋酸二钠滴定液（0.01mol/L）3．仪器与用具3.01电子天平 3.02 抑菌圈测量仪4．操作步骤：4.1 性状本品为淡黄色或淡棕黄色粉末；无臭，味苦。

本品在吡啶中易溶，在水、甲醇、丙酮、氯仿或乙醚中几乎不溶。

4.2. 鉴别：4.2.1取本品约0.5mg，加0.1%茚三酮的水饱和正丁醇溶液1ml与吡啶0.5ml，加水1ml，置水浴中加热5分钟，即显深紫色。

4.2.2 以上两项均呈正反应，则判定该项合格。

4.3 检查4.3.1干燥失重取本品，以五氧化二磷为干燥剂，在60℃减压干燥至恒重，减失重量不得过6.0%（见干燥失重检查法标准操作规程），则判定该项合格。

计算公式如下：干燥失重%=(W1－W2)/(W1－W)×100%式中：W1为瓶+供试品的重量（g）； W为瓶+供试品恒重的重量（g）；2为瓶恒重的重量（g）。

W4.3.2砷盐取本品1.0g,加氢氧化钙1.0g,混合,加水少量,搅拌均匀,干燥后,先用小火灼烧使炭化,再在500～600℃炽灼使完全灰化,放冷,加盐酸5ml与不23ml使溶解,依法检查(见砷盐检查法标准操作规程),应符合规定(0.0002%)。

4.3.3锌盐取本品约0.3g，精密称定，先用小火灼烧使炭化，再在550℃炽灼使完全灰化，取灰化后的残留物，加1mol/L醋酸溶液3ml使溶解，加水50ml及新配制的0.2%二甲酚橙指示液数滴，再加六亚甲基四胺约0.5g，至溶液呈稳定的紫红色后，再加过量的六亚甲基四胺 1.5g，用乙二胺四醋酸二钠滴定液（0.01mol/L）滴定，至溶液由紫红色变为黄色。

饲料中添加杆菌肽锌对断奶仔猪的增重效果

养殖与饲料2017年第8期摘要为研究饲料中添加杆菌肽锌对断奶仔猪的增重效果，选择90头断奶仔猪随机均分为试验组A 、试验组B 和对照组C ，在试验组A 饲料中添加杆菌肽锌10mg/kg ，试验组B 饲料中添加杆菌肽锌30mg/kg ，对照组正常饲喂，测定仔猪的日增重及饲料转化率。

试验表明，适量的杆菌肽锌可以有效提高断奶仔猪日增重和饲料转化率，降低养殖场饲养成本，提高经济效益。

关键词断奶仔猪；杆菌肽锌；日增重；饲料转化率饲料中添加杆菌肽锌对断奶仔猪的增重效果王生梅青海省西宁市畜牧兽医站，青海西宁810003收稿日期：2017-05-31王生梅，女，1983年生，初级兽医师。

生猪生产中，断奶仔猪因其机体消化系统发育不健全，会出现食欲减退、饲料利用率低和生长缓慢等问题，严重影响养殖场经济效益。

杆菌肽锌是一种较为成熟的抗病促生长饲料添加剂，能够降低饲养成本，且代谢安全性良好；杆菌肽锌分解产物大部分经粪便排出体外，粪便中的杆菌肽锌在堆肥中可以快速分解；杆菌肽锌及其分解物都没有毒性，对环境不会造成污染，对动物生长发育没有不良影响。

1试验前准备选择有较高标准化程度的养猪场，布局设计科学、合理，基础设施良好，生产管理科学、防疫条件健全；选用的猪舍要严格消毒灭菌，试验猪群应做好驱虫工作，采用0.3%过氧乙酸带猪喷雾消毒，并将试验称重工具、试验用饲料以及数据记录材料等准备好。

2材料与方法1）选用国外某品牌的杆菌肽锌添加剂，其为粉末状呈淡棕黄色或淡黄色，味苦、有异味，干燥状态下极其稳定，该产品在吡啶中易溶，在乙醚中较难溶，在氯仿、丙酮、甲醇以及水中难溶；试验用饲料选自具有良好加工设备的饲料厂，能够满足本次试验需要。

试验用日粮配方和营养水平如下：粗蛋白（18.7%）、消化能（13.2%）、某预混料（1.0%）、食盐（0.3%）、磷酸氢钙（1.4%）、石粉（1.0%）、麸皮（13.3%）、豆粕（28.6%）、玉米（54.4%）。

对杆菌肽锌含量测定中若干问题的探讨

[6]　平其能主编.现代药剂学[M].北京:中国医药科技出版社,1998,274～310.[7]　陆彬主编.药物新剂型与新技术[M].北京:人民卫生出版社,1998,1～22.[8]　中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典注释[S].北京:人民卫生出版社,1995,950.Preparation and in Vitro Dissolution of Enrofloxacin Solid DispersionsW U Jun-w ei,ZENG Zhong-liang,ZENG Zi-jian,HE Jun,HE Xian-lian(S ichuan I nstitute of A nimal H usbandry and V ete rinary M ed icine,Chongqing402460,China)Abstract:T o improve the disso lution of enroflox acin,enro flo xacin so lid dispersio ns were pr epared using co ev aporation method w ith PEG6000and Urea as carrier s,and its disso lution characteristics w er e studied in sim ulated gastr ic juice.In PEG6000-enroflox acin solid dispersio n,enrofloxacin existed as fine cr ystalline.In vitro disso lution results sho wed that the higher carriers-enroflox acin ratio the faster drug dissolution.Statistical analy sis show ed sig nificant difference betw een the dissolutio n o f the drug and the so lid dispersion.PEG-6000is potent in improving the solubility and dissolution of enro flox acin and has the po tential fo r practical use.Key words:enr oflo xacin;so lid dispersion;PEG6000;dissolution对杆菌肽锌含量测定中若干问题的探讨朱力军1,　郑　洁2(1.中国兽药监察所,北京　100081;2.中国农业大学99级实习生)[收稿日期]1999-07-20　[文献标识码]A　[文章编号]1002-1280(2000)-02-0021-03　[中图分类号]S859.79+6[摘　要]　为了摸清杆菌肽锌不同测定方法和不同溶剂对测量结果的影响,对现行的几种测定方法进行了比较,采用不同溶剂溶解杆菌肽锌并改变其用量。

多肽含量检测方法

多肽含量检测方法一、紫外分光光度法。

这可是个挺常用的方法呢。

多肽在特定波长下有吸收峰哦。

就像是多肽在紫外光下会展现出自己独特的“小秘密”。

一般来说，在280nm左右，很多多肽会有吸收。

我们可以根据这个吸收值，再结合已知的标准曲线来计算多肽的含量。

不过呢，这个方法也有点小脾气，要是溶液里有其他在这个波长下也有吸收的物质，就可能会干扰检测结果啦，就像一场小捣乱。

二、高效液相色谱法（HPLC）这个方法就比较高大上啦。

它能把多肽和其他杂质很好地分离开来。

把样品注入到色谱柱里，就像让多肽们在一个超级赛道里赛跑，不同的多肽因为自身的性质，跑的速度不一样，最后就被分开啦。

然后通过检测每个峰的面积或者高度，再和标准品比较，就能知道多肽的含量喽。

这种方法准确性很高呢，就像一个超精准的小管家，能把多肽的含量算得明明白白。

不过呢，仪器比较贵，操作也需要一定的技术，不是随随便便就能上手的。

三、凯氏定氮法。

这个方法有点像从“氮”这个角度来抓住多肽的小尾巴。

因为多肽里含有氮元素嘛。

通过一系列复杂的化学反应，把样品里的氮都转化成氨，然后再测定氨的含量，从而推算出多肽的含量。

但是呢，这个方法不是很特异，因为除了多肽，其他含氮的物质也会被检测到，就像有时候会认错人一样，所以结果可能会有点小偏差。

四、双缩脲法。

双缩脲法也挺有趣的。

它是利用多肽分子中的肽键和铜离子发生反应，产生一种紫色的络合物。

根据这个紫色的深浅来判断多肽的含量。

这个方法比较简单，不需要啥特别高级的仪器，就像一个朴素的小能手。

不过呢，它的灵敏度不是特别高，如果多肽含量比较低的话，可能就测不太准啦。

高效液相色谱法测定杆菌肽的含量

高效液相色谱法测定杆菌肽的含量
宋如;彭敬梅;张健;杜晓霞;韩静
【期刊名称】《河北化工》
【年(卷),期】2009(32)9
【摘要】建立杆菌肽含量的HPLC测定方法.使用C18色谱柱,以甲醇+乙腈:水+磷酸盐缓冲液(pH=6.0)=63:37为流动相,检测波长为254 nm,流速1.0m/L/min,进样量100μL,峰面积归一法计算.结果显示杆菌肽峰面积RSD为1.2%,峰分离度
≥1.2:确定了杆菌肽A的最小检测限为0.000 4mg/mL,最小定量限为0.000 8 mg/mL.该方法简便、准确、耐用性好.
【总页数】2页(P70-71)
【作者】宋如;彭敬梅;张健;杜晓霞;韩静
【作者单位】华北制药华胜有限公司,河北石家庄052160;华北制药华胜有限公司,河北石家庄052160;华北制药华胜有限公司,河北石家庄052160;华北制药华胜有限公司,河北石家庄052160;邯郸市环境保护局,河北邯郸056002
【正文语种】中文
【中图分类】O657.7+2
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定发酵液中杆菌肽A [J], 张玉明;倪志华;李琳;李宝库
2.原子吸收分光光度法测定杆菌肽锌预混剂的锌含量 [J], 余德照;姚荣英;周臣飞;季朝金
3.牛奶中粘菌素和杆菌肽残留的固相萃取超高效液相色谱-串联质谱法测定 [J], 刘琪;孙雷;张骊
4.高效液相色谱-荧光法或超高效液相色谱-四极杆/轨道阱质谱法测定抑郁症小鼠海马中5-羟色胺和相关的2种物质含量的比较 [J], 王丽; 朱军; 环飞; 程洁; 吴倩
5.高效液相色谱和超高效液相色谱法测定乳制品中三聚氰胺含量的对比 [J], 冯小丽
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杆菌肽锌产品中挥发性杂质来源考察与研究

杆菌肽锌产品中挥发性杂质来源考察与研究赵建强;韩静【摘要】采用GC方法,对杆菌肽锌生产过程中可能产生的挥发性杂质开展系统的考察和分析研究,并结合细菌类微生物代谢过程,查明了杆菌肽锌产品中挥发性杂质来源的主要途径及变化趋势,为进一步开展杆菌肽锌挥发性杂质残留安全性评价提供了数据支持。

【期刊名称】《生物化工》【年(卷),期】2018(004)006【总页数】3页(P110-112)【关键词】杆菌肽锌;微生物;挥发性杂质【作者】赵建强;韩静【作者单位】[1]沈阳药科大学,辽宁沈阳117004;[2]华北制药华胜有限公司,河北石家庄052160;[1]沈阳药科大学,辽宁沈阳117004;【正文语种】中文【中图分类】S859.79杆菌肽锌（Bacitracin Zinc）属于多肽类抗生素，是杆菌肽A、B1、B2、B3的锌盐混合。

杆菌肽锌是由地衣芽孢杆菌经生物发酵获得的代谢物，经GC检测证实：杆菌肽锌中除了含有工艺当中引入的有机溶剂外，还残留多个其他挥发性杂质。

多篇文献报道过微生物发酵过程可产生挥发性杂质，其中梁华正[1]采用质谱对微生物挥发性代谢产物进行过研究。

通过GC-MS，确证了杆菌肽锌产品中残留的主要挥发性杂质，其中主要包括甲醇（RRT 0.44）、乙醇（RRT 0.50）、丙酮（RRT 0.56）、2-丁酮（RRT 0.77）、二甲基丁腈（RRT 1.38）等。

本文结合细菌类微生物代谢特征，从培养基引入、微生物代谢产物以及产品降解等方面，系统的考察分析了杆菌肽锌产品中挥发性杂质的主要来源。

1 材料和方法1.1 试验试剂和仪器发酵用培养基、各步中间体和成品均由华北制药华胜有限公司提供，分析用试剂均为分析纯。

主要仪器：分析天平（万分之一）、安捷伦GC色谱仪（Agilent，DB-5毛细管柱）。

1.2 试验方法确定某批发酵罐，从发酵培养基准备开始，取混合后的培养基，用GC色谱仪进行检测。

按照生产要求在培养基内接入地衣芽孢杆菌，经发酵培养获得发酵液，放至过滤进行酸化、过滤等预处理得到中间体1，再经提取、纯化、精制、结晶及干燥等工艺过程，分别获得中间体2、中间体3、中间体4、中间体5及最终杆菌肽锌成品。

饲料中杆菌肽锌含量测定

饲料中杆菌肽锌含量测定步骤1.标准品溶液的制备称取适量杆菌肽锌标准品于50ml容量瓶中，加入适量提取剂超声溶解后用提取剂稀释至刻度，制成每毫升含50ppm杆菌肽的标准溶液。

2.测试溶液的制备2.1饲料样品的粉碎将饲料样品用小型粉碎机粉碎至手感无粗颗粒，收集粉碎后样品混匀后采用四分法分装样品，取其中一份样品用于测定，其余样品封存。

2.2饲料提取称取5g饲料样品于50ml的塑料烧杯中，用刻度吸管移取10ml提取剂加入烧杯中，放入磁力搅拌芯后用封口膜封住杯口，把烧杯置在磁力搅拌器上搅拌30min 后，5000r/min离心5min,取离心液。

加5ml提取剂于离心管中再提取一次后用5000r/min离心5min,把两次离心液混匀备用。

2.3杆菌肽的萃取2.3.1萃取柱的活化：先用5ml甲醇分两次添加于萃取柱中，待甲醇全部流出后用5ml水分两次添加于萃取柱中，待水全流出也就完成活化过程。

2.3.2上样溶液的制备：把2.2的离心混合液与水按1:2的比例混匀。

2.3.3上样：把上样溶液分次添加到萃取柱中，控制适当流速。

2.3.4淋洗：待所添加的溶液全部流出后，用5ml甲醇水（20%）分两次添加到萃取柱中。

2.3.5洗脱：待淋洗液全部流出后，用移液枪吸取1ml甲醇添加到萃取柱中，解吸萃取柱上吸附的杆菌肽，收集洗脱液摇匀后用于HPLC测定。

2.3.6标准溶液同法处理。

3.含量测定3.1液相色谱参数检测波长：254nm 色谱柱：月旭C8 4.6mm×250mm 5um流速：1.0ml/min进样量：20ul柱温：30℃3.2流动相组成A+B=29：71混匀后用稀氢氧化钠溶液调节溶液pH=6.83.3测定依次进样标准溶液、测试溶液于HPLC分析。

3.4计算以有效峰3为计算含量基准。

计算公式：MV A V u m A X s s ⨯⨯⨯⨯⨯⨯=40标标样洗脱样注：X-----------饲料中杆菌肽的含量，单位ppm ； A 样----------测试溶液中有效峰3的峰面积； A 标----------标准溶液中有效峰3的峰面积； m s -----------标准品的质量，单位mg ； u s -----------杆菌肽锌纯品的效价，单位u/mg ； V 样洗脱--------饲料样品的洗脱体积，单位ml ； V 标----------标准品的稀释体积，单位ml ； M-----------饲料的质量，单位g ；40----------每毫克杆菌肽标准品的活性，单位u/mg ；附：一、试液、溶液的配制方法①磷酸盐缓冲液（pH=6.0）：称取1.5g 磷酸氢二钾和8.5g 磷酸二氢钾,溶解于1升水中。

高效液相色谱法测定发酵液中杆菌肽A

高效液相色谱法测定发酵液中杆菌肽A张玉明;倪志华;李琳;李宝库【摘要】提出了高效液相色谱法测定发酵液中杆菌肽A含量的方法。

地衣芽孢杆菌发酵液经离心得到杆菌肽A的粗提液。

所得粗提液再经三氯乙酸提取，离心分离。

取上清液用BeckmanC1s色谱柱分离，用乙腈和磷酸二氢钾缓冲溶液以不同体积比混合为流动相梯度洗脱，在220 nm波长处进行测定。

杆菌肽A的质量浓度在1.0～15.0 g·L-1范围内与其峰面积呈线性关系，检出限(3S/N)为0.08 g·L-1。

在7.37 g·L-1和11.01 g·L-1两个添加水平做回收试验，平均回收率分别为98.1％和97.4％。

%HPLC was applied to the determination of bacitracin A in fermentation liquor. The crude extract obtained by centrifuging fermentation liquor of bacillus licheniformis, was extracted with trichloroacetic acid. After centrifugation, the supernatant was separated by gradient elution on Bechman C18 column with mixtures of acetonitrile and potassium dihydrogen phosphate buffer solution in various ratios as mobile phase. Wavelength of 220 nm was chosen for UV-detection for bacitracin A. Linear relationship between values of peak area and mass concentration of bacitracin A was obtained in the range of 1.0-15.0 g ? L-1, with detection limit (3S/N) of 0. 08 g ? L-1. Test for recovery was made by addition of bacitracin A standard at two concentration levels of 7. 37 and 11. 01 g ? L-1 , values of average recovery obtained were 98.1% and 97.4%, respectively.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2011(047)005【总页数】3页(P592-594)【关键词】高效液相色谱法；杆菌肽A；地衣芽孢杆菌；发酵液【作者】张玉明;倪志华;李琳;李宝库【作者单位】河北大学生命科学学院，保定,071002;河北大学生命科学学院，保定,071002;河北大学生命科学学院，保定,071002;河北大学药学院，保定,071002【正文语种】中文【中图分类】O652.63杆菌肽是目前应用广泛的畜禽专用抗生素饲料添加剂,对多种革兰氏阳性病原菌、放线菌以及部分革兰氏阴性菌均有较强抑制作用[12]。

杆菌肽脂质体的制备及其药物含量测定

杆菌肽脂质体的制备及其药物含量测定目的制备杆菌肽脂质体，并采用HPLC法测定杆菌肽脂质体中杆菌肽含量和包封率。

方法用薄膜分散法将杆菌肽制备成杆菌肽脂质体；色谱条件：色谱柱为Diamonsil-C18色谱柱（150mm×4.6mm，5?m）；流动相为pH 6.0的磷酸盐缓冲液-甲醇（60∶40）；柱温为25℃；检测波长为254nm；流速为1mL/min。

采用低温离心法分离杆菌肽脂质体中的游离药物。

结果所制备的杆菌肽脂质体的平均包封率为87.94%（RSD 1.12%，n=5）；在本色谱条件下，杆菌肽在0.061～1.83?g范围内与峰面积积分值的线性关系良好（R2=0.9997），平均回收率为99.68%～101.38%。

结论本HPLC法简单，准确可靠，可用于杆菌肽脂质体中杆菌肽含量及其包封率的测定。

[Abstract] Objective To prepare bacitracin liposom，and to determine bacitracin content and entrapment efficiency of the liposome using HPLC method. Methods The bacitracin liposome was prepared by film dispersion method；The chromatographic conditions were Column：Diamonsil-C18 column（150mm×4.6mm，5?m）；mobile phase：pH 6.0 phosphate buffer：methanol （60∶40）；column temperature：25℃；detection wavelength：254nm；flow rate：1mL/min.Refrigerated centrifugation using bacitracin liposomes free drug. Results The mean encapsulation efficiency of the bacitraci liposome was 87.94%（RSD 1.12%，n=5）；In the chromatographic conditions bacitracin and accessories and a good separation of the solvent peak，bacitracin at 0.061-1.83?g range had a good linear relationship （R2=0.9997），recovery was 99.68%-101.38%. Conclusion The HPLC method is simple，accurate and reliable，can be used to determine bacitracin content and entrapment efficiency of the bacitracin liposom.[Key words] Bacitracin liposome；Content determination；Entrapment efficiency；High-performance liquid chromatography桿菌肽的结构是由12个氨基酸组成的含有噻唑环的多肽复合体，主要用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌等敏感菌所致的皮肤软组织及眼部感染。

杆菌肽锌微生物限度检查方法的建立

杆菌肽锌微生物限度检查方法的建立薛兰;梁梅;鞠加学;郎风敏【摘要】目的建立杆菌肽锌菌落计数检验方法.方法采用薄膜过滤法对杆菌肽锌进行菌落数测定.结果实验表明以0.1％蛋白胨水和EDTA的混合溶液为稀释液,0.1％蛋白胨水溶液为冲洗液的薄膜过滤法为菌落计数方法.结论操作步骤简单,检验结果准确,是有效可行的检验方法.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2011(036)011【总页数】3页(P878-880)【关键词】杆菌肽锌;菌落数;薄膜过滤法【作者】薛兰;梁梅;鞠加学;郎风敏【作者单位】华北制药华胜有限公司,石家庄052160;华北制药华胜有限公司,石家庄052160;华北制药华胜有限公司,石家庄052160;华北制药华胜有限公司,石家庄052160【正文语种】中文【中图分类】R927.1杆菌肽锌为多肽类抗生素，能够有效抑制革兰阳性菌和部分革兰阴性菌。

在该原料药微生物项目质量控制中，菌落数检查为主要的控制指标。

由于其为非水溶性产品，给菌落数检查增加了难度，建立准确可行的菌落数检验方法非常必要。

杆菌肽锌及菌落计数方法在中国药典中没有收载，其原料药的检验方法多参考欧洲药典和美国药典。

微生物项目检验中菌落数的测定方法也没有现成的方法可以借鉴。

由于其为非水溶性的产品，稀释液的选择成为建立检验方法的关键点和难点，本文围绕稀释液选择和检验方法可靠性展开，最终建立了杆菌肽锌菌落数检验方法。

1 材料与方法1.1 材料上海一恒LRH-250型生化培养箱；苏净集团SW-CJ型净化工作台；青岛海尔SC-182A冰箱；PALL公司的微孔滤膜，孔径0.45μm，直径47mm。

杆菌肽锌原料药3批，批号为I10001、I10002、I10003，华北制药华胜有限公司生产。

蛋白胨，EDTA都为分析纯；水为纯化水。

培养基为营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基。

菌种为金黄色葡萄球菌，菌号CMCC(B)26003；大肠埃希菌，菌号CMCC(B)44102；枯草芽孢杆菌，菌号CMCC(B)63501；白色念珠菌，菌号CMCC(F)98001；黑曲霉，菌号CMCC(F) 98003。

高压液相色谱技术分离制备杆菌肽各组分的研究

高压液相色谱技术分离制备杆菌肽各组分的研究仲伟潭;宋盼;彭亮;郭月玲;王崔岩;张雪霞【摘要】目的开发制备型高压液相色谱分离杆菌肽各组分的方法.方法根据杆菌肽各组分化学结构性质,采用纳微UnisilC1s柱,通过改变流动相pH和流动相配比,以及不同的上样量,探索杆菌肽各组分分离的方法.收集分离得到的不同组分,经脱盐-冷冻干燥,得到相应杆菌肽组分冻干粉.结果纳微Unisil C18柱可以用于杆菌肽各组分的分离,流动相配比为甲醇(A)∶[1.54‰乙酸铵水溶液(乙酸调pH至5.0)-乙腈(9∶1,V/V)] (B)=9.0∶ 11.0(V/V),总流速40 mL· min-1,上样量200mg,检测波长为254 nm.制备得到的杆菌肽各组分纯度均大于95％.结论该方法上样量大,稳定性好,收集到的各组分纯度高,为杆菌肽各组分的分离制备提供了借鉴.%Objective To develop the separation and preparation method of bacitracin components by preparative HPLC.Methods The appropriate separation method was determined through the pH of mobile phase,the ratio of mobile phase,and the loading quantity of sample by using nanomicro Unisil C1s.Freeze-dried powders of bacitracin components were obtained by desalination and freeze drying of the collected solution.Results Nanomicro Unisil C1s chromatographic column could be used for separation.The ratio of mobile phase was A∶ B =9.0∶11.0 (V/V) [A was methanol and B consisted of 1.54‰ amm onium acetate solution (pH adjusted to 5.0)-acetonitrile (9∶ 1,V/V)].The flow rate was 40 mL · min-1 and the sample load was 200 mg.The wavelength was 254 nm.The purities of bacitracin components were all above 95％.Conclusions The method is of great loading quantity of sample,good stability,and high purity of theprepared components.It provides reference for the separation and preparation of bacitracin components.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2018(022)003【总页数】4页(P422-425)【关键词】杆菌肽各组分;分离制备;制备型高压液相【作者】仲伟潭;宋盼;彭亮;郭月玲;王崔岩;张雪霞【作者单位】微生物药物国家工程研究中心、河北省工业微生物代谢工程技术研究中心、华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北石家庄050015;微生物药物国家工程研究中心、河北省工业微生物代谢工程技术研究中心、华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北石家庄050015;微生物药物国家工程研究中心、河北省工业微生物代谢工程技术研究中心、华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北石家庄050015;微生物药物国家工程研究中心、河北省工业微生物代谢工程技术研究中心、华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北石家庄050015;微生物药物国家工程研究中心、河北省工业微生物代谢工程技术研究中心、华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北石家庄050015;微生物药物国家工程研究中心、河北省工业微生物代谢工程技术研究中心、华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北石家庄050015【正文语种】中文杆菌肽是多肽类抗生素，1943年被美国Johnson第一次发现，可以从枯草杆菌和地衣芽胞杆菌发酵液中提取分离制得[1]。

原子吸收分光光度法测定杆菌肽锌预混剂的锌含量

原子吸收分光光度法测定杆菌肽锌预混剂的锌含量余德照;姚荣英;周臣飞;季朝金【期刊名称】《中国动物保健》【年(卷),期】2014(000)002【摘要】本文阐述利用锌元素的特征谱线（锌原子从基态到激发态在213.8 nm 处有最大吸收），创建了原子吸收法测定杆菌肽锌预混剂中锌的含量，并对方法进行了验证。

结果表明，该方法在锌离子浓度为0.25～1.00μg/mL的范围内，浓度与吸光度之间具有良好的线性关系，回归方程为y=0.401x+0.0437相关系数r=0.9975，且精密度高、平均回收率为100.1% RSD=2.0%。

%This paper presents the determination of zinc content in bacitracin zinc premix with atomic absorption (AAS) method. This method was established on the basis of characteristic spectral line of Zn (the maximum ab-sorption of Zn is obtained at 213.8 nm) and had been validated. It demonstrated that the good linearity between concentrations and absorptions was appeared when the range of concentrations is 0.25~1.00μg/mL;the corre-lation coefficient r was 0.9975 calculated with the formulay=0.401x+0.0437;precision was demonstrated and the recovery was 100.1%and the RSD was 2.0%.【总页数】3页(P26-28)【作者】余德照;姚荣英;周臣飞;季朝金【作者单位】绿康生化股份有限公司福建南平353400;绿康生化股份有限公司福建南平353400;绿康生化股份有限公司福建南平353400;绿康生化股份有限公司福建南平353400【正文语种】中文【相关文献】1.仔猪日粮添加杆菌肽锌——粘杆菌素预混剂用量的研究 [J], 梁国庆;零汉益2.杆菌肽锌预混剂生产制服染菌 [J], 李德培;崔玉柱3.杆菌肽锌预混剂锌含量测定探讨 [J], 姚荣英;余德照;周臣飞;季朝金4.杆菌肽锌预混剂饲喂育肥羊效果分析 [J], 蔡洪波5.杆菌肽锌预混剂饲喂育肥羊效果分析． [J], 蔡洪波;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。