配制合成培养液d me m时操作步骤
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配制合成培养液d me m时操作步骤配制DMEM培养基过滤前和过滤后的NaHCO3,双抗体可以添加,也可以不加,最好能加入浆液过滤,在好的或,见细胞和血清浓度,不同,不同的细胞需要的同时,冻存细胞需要培养基血清含...
配制DMEM培养基过滤前和过滤后的NaHCO3,双抗体可以添加,也可以不加,Z好能加入浆液过滤,在好的或,见细胞和血清浓度,不同,不同的细胞需要的同时,冻存细胞需要培养基血清含量较高,一般为20%-30%。
此外,包装后的培养基和血清过滤,除了被用于一瓶,其他存储在-20度,或一部分,如谷氨酰胺易降解。
配制DMEM培养基可以先用Z后的体积是2/3的水溶解配制,包装袋也需要清洗。
2G完全溶解的碳酸氢钠此外,加双抗后,定容至终体积。
过滤到零下20摄氏度保存。
添加血清的时候。
根据我的经验,配制DMEM培养基正常血清没有过滤,双抗体不需要过滤,可添加在前面(如果需要的话,除非双反)培养基的罕见的内容,否则就不需要在零下20摄氏度保存,培养两周跑出去不在4存储任何问题。
另外,我不同意与冷冻细胞明显高于血清,没有根据。
在ATCC细胞冻存的描述看,我很少使用血清,一般10%二甲基亚砜+90%和冷冻液配方血清中是Z常用的。
冻存存活率极高的细胞。
(当然,冷冻也是非常重要的存储过程)
配制DMEM培养基时血清不必要过滤,但我认为双反应进行过滤,毕竟,是不是很麻烦。
同时对细胞冷冻血清添加量存在着一定的问题,
Z重要的是冷冻程序,如离心速度不太大,有二甲基亚砜的量不能超过10%,这是非常重要的。
配制DMEM培养基除了DMEM粉末直接加入,也应按照说明书添加碳酸氢钠适量,它是关于2G,pH值可能远大于你所需要的pH值,再加入适量HEPES,约2.38g,pH满意度,根据需要添加双抗,过滤,分装。
如果数量不多,储存超过20度,必要时添加血清,血清是不需要消毒。