特殊染色、免疫组化技术结合用于肿瘤病理诊断中的价值

特殊染色、免疫组化技术结合用于肿瘤病理诊断中的价值陈惠芹
【摘要】目的探讨免疫组化技术结合特殊染色开展肿瘤病理诊断的临床价值.方法选取2016年8月至2017年8月于我院就诊的肿瘤患者70例,所有患者均行常规穿刺活检后确诊,再用PAS特殊染色、网状纤维染色联合免疫组化技术诊断采集到的病理组织,探讨上述技术联合开展肿瘤病理诊断的临床价值.结果免疫组化阳性率92.8％,PAS特殊染色为90.0％,网状纤维染色为91.4％,联合检测为100.0％,比较无明显差异(P>0.05).结论特殊染色联合免疫组化技术病理诊断肿瘤准确率高,有推广价值.
【期刊名称】《中国医药指南》
【年(卷),期】2017(015)034
【总页数】2页(P75-76)
【关键词】PAS特殊染色;网状纤维染色;免疫组化技术;肿瘤病理诊断
【作者】陈惠芹
【作者单位】厦门大学附属第一医院杏林分院病理科,福建厦门 361002
【正文语种】中文
【中图分类】R73
肿瘤为临床常见疾病，近年来人们生活习惯不断改变，饮食结构逐渐调整，不良行为习惯逐渐暴露，导致患病人数越来越多，且呈现出年轻化趋势。

本病早期症状不
典型，确诊后多数为中晚期，导致最佳治疗时机被错过。

临床诊断肿瘤的主要方法为病理诊断，如活检穿刺诊断，此为金标准，虽然可以明确病灶分期与类型等，但该方法具备有创伤性，导致患者痛苦感明显，有较差的依从性，因此临床迫切寻找一种理想的诊断方法。

磁共振、CT为临床常用诊断方法，虽然可以确诊但是有较
高概率导致漏诊或误诊。

近年来临床大量实践证实免疫组化技术病理诊断肿瘤临床价值较高[1-3]，且该技术将抗原修复技术、敏感检测系统及自动免疫染色系统等
充分融合，故而广受临床关注。

另有文献称该技术联合特殊染色病理诊断肿瘤临床价值更高，便于临床制定诊治方案[4]。

基于此选取70例患者，详述特殊染色联合免疫组化技术病理诊断肿瘤的临床价值。

1 资料与方法
1.1 一般资料：选取2016年8月至2017年8月于我院就诊的肿瘤患者70例，
均经影像学检查、手术病理等确诊为恶性肿瘤。

其中男性39例，男性31例，年
龄为36～78岁，平均年龄为（49.2±8.3）岁；肿瘤类型：转移性肿瘤35例，原发性肝癌15例，血管瘤8例，内胆管瘤12例。

1.2 方法：所有患者先行活检穿刺诊断，结合病灶位置与类型开展针对性穿刺活检，于超声引导下开展，将病变组织取出后比较于标准组织，而后使用免疫组化技术联合PAS特殊染色、网状纤维染色：①免疫组化技术：试剂主要有中性福尔马林固
定液、脱水液、透明液、浸蜡液、MaxVisionTM试剂盒、DAB试剂盒。

取组织
块大小2 cm×1.5 cm×（0.2～0.3 cm）。

加固定液固定6～8 h，过度固定可降
低抗原的活性。

经脱水、透明、浸蜡包埋过程，切片厚度为2～3 μm，应用防脱
载玻片。

特殊染色组织只需用普通载玻片。

免疫组化染色处理切片组织，常规切片脱蜡后用柠檬酸抗原修复液高压抗原修复法修复，将配制好的柠檬酸抗原修复液加入压力锅中，放置于电磁炉上大功率加热至沸腾，将切片至于耐高温深色架上，放入已沸修复液中，盖锅盖，扣压力阀，继续加热至压力阀开始喷气，计时2 min，
而后将压力锅移离电磁炉，室温自然冷却。

PBS冲洗2×3 min，加入Glypican-3抗体，室温孵育60 min，PBS冲洗3×4 min，除去PBS液滴加1滴即用型MaxVisionTM试剂，室温孵育15 min后PBS冲洗3×3 min，除去PBS液滴加DAB显色液，显微镜下观察3 min，水洗，水冲返蓝，酒精透明，用树胶封固。

同时开展特殊染色处理，二甲苯脱蜡至水处理切片组织，分别行PAS特殊染色、网状纤维染色。

1.3 判定标准：免疫组化技术处理后用GLypican-3判定结果，阳性标准为染色成棕黄色。

特殊染色阳性标准按照阳性细胞数目与染色强度之乘积，前者＜1%为0分，1%～9%为1分，10%～33%为2分，34%～66%为3分，＞66%为4分；后者主要依据阳性细胞染色强度，无为0分，弱为1分，中等强度为2分，强着色为3分。

得出乘积后按照如下标准判定：0分为阴性，1～4分为1+，5～8分为2+，9～12分为3+[5]。

1.4 统计学方法：应用软件SPSS19.0对上述数据开展统计学分析，[n（%）]表示计数资料，卡方检验开展样本率比较，差异有统计学意义用P＜0.05表示。

2 结果
两种方法诊断结果比较及联合诊断阳性率分析，见表1。

表1 两种方法诊断结果比较及联合诊断阳性率分析（n=70）诊断方法阳性例数阳性率(%)免疫组化 65 92.8特殊染色 PAS特殊染色 2 2网状纤维染色 64 91.4免疫组化联合特殊染色 70 100.0
3 讨论
免疫组化技术类似于特殊染色与电镜观察，在诊断疑难病例时该技术应用广泛。

免疫组化染色对肿瘤患者开展病理诊断的基础在于HE切片，需前面细致观察HE切片后结合抗体条件与实验室实际需求筛查实验期间所需抗体，以准确诊断。

在光镜缺乏的情况下需深入观察HE切片以了解肿瘤组织，若仅依靠免疫组化技术病理诊
断肿瘤则可能导致误诊。

在判定结果时要基于细胞形态学，但不能忽视临床医师的工作经验。

比如在诊断淋巴瘤时强调免疫组化、临床资料及形态学特征的融合，免疫组化技术的使用目的在于补充形态学价值，但无法取代形态学作用，一般而言免疫组化主要是用来明确细胞来源及分化程度，而临床诊断肿瘤的重要指标为形态学[6-7]。

在实验室病理诊断期间还要合理选择抗体，一般实验室抗体主要有上皮类、软组织类、神经内分泌细胞类、淋巴细胞类等抗体，在选择时要尽量节约成本，结合实际要求合理选择。

人体肿瘤类型较多且形态各异，结合肿瘤大小与形态有上皮样细胞、多形性肿瘤细胞、大细胞、梭形细胞等类型，因此在选择抗体时还需与肿瘤类型相结合。

在判定诊断结果时要注意的是各种抗体均可能出现异样表达现象，因此要结合影像学检查、临床症状及医师经验等合理诊断。

本组结果表明免疫组化诊断阳性率为92.8%，阳性率较高，但还是存在无法明确判断肿瘤具体病理状况的现象，
为提高诊断准确率临床还会与特殊染色联合使用。

如网状纤维染色，机体各个器官组织中均存在网状纤维，通过染色可对病变组织网状纤维疏密、数量、粗细及是否塌陷、断裂等变化予以观察，有利于临床判断疾病程度、性质及发展情况，还有利于评估治疗转归[8]。

本组结果表明PAS特殊染色为2.0%，网状纤维染色为
91.4%，联合检测为100.0%，说明特殊染色联合免疫组化技术病理诊断肿瘤准确率高，有推广价值。

参考文献
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