尖叶假龙胆薄层色谱特征图谱及高效液相指纹图谱的研究
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∗基金项目:内蒙古自治区科技计划项目(２０１８０３００５)
第一作者简介:李玉华ꎬ硕士ꎬ研究方向:药品检验ꎮ Ｔｅｌ:０４７５￣６３８８７２９ꎻＥ￣ｍａｉｌ:ａｍｂａｂｙ＠ ｖｉｐ １６３ ｃｏｍ
２６０
中 国 药 品 标 准 Ｄｒｕｇ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ２０２１ꎬ ２２(３)
叶假龙胆[ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ( Ｍｉｃｈｘ ) Ｈｕｌｔｅｎ] 的干燥
全草ꎮ 样品来源见表 １ꎮ
尖叶假龙胆药材的内在质量ꎬ也未见该药材薄层色
２ 薄层鉴别特征图谱 [６￣８]
文结合尖叶假龙胆的化学成分对其 ＴＬＣ 特征图谱
征图谱
谱( ＴＬＣ) 特征图谱和指纹图谱相关的研究报导ꎮ 本
ＬＩ Ｙｕｈｕａꎬ ＬＩＵ Ｊｉｎｇｊｉｎｇꎬ ＬＩ ＪｉｎｇｑｉｎｇꎬＧＵＡＮ Ｊｉｎｆｅｎｇ
( Ｔｏｎｇｌｉａｏ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌꎬ Ｔｏｎｇｌｉａｏ ０２８０００ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ: Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ( ＴＬＣ) ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ａｎｄ ＨＰＬＣ ｆｉｎ￣
２０１６ ０９ ０８
２０１７ ０８ ２１
２０１７ ０８ ２２
２０１７ ０８ ２２
２０１９ ０８ １６
２０１９ ０８ １６
２０１９ ０８ １８
２０１９ ０８ ２２
贺兰山南寺采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｓｏｕｔｈ Ｔｅｍｐｌｅꎬ Ｈｅｌａｎ Ｍｏｕｎｔａｉｎ)
黑龙江省漠河县特产店购买( Ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍ ｓｐｅｃｉａｌｔｙ ｓｈｏｐ ｉｎ Ｍｏｈｅ Ｃｏｕｎｔｙ Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ)
ｔａｉｎ ＡＱ￣Ｃ１８ 色谱柱(４ ６ ｍｍ × ２５０ ｍｍꎬ５ μｍ) ꎮ
吸取上述两种溶液各 ５ μＬꎬ分别点于同一硅胶 ＧＦ２５４
薄层板上ꎬ以乙酸乙酯￣甲醇￣水(８∶ ２∶ ２) 为展开剂ꎬ展
开ꎬ取出ꎬ晾干ꎬ置紫外灯(２５４ ｎｍ)下检视ꎬ见图 １ꎮ
表 １ １０ 批尖叶假龙胆药材来源
Ｔａｂ １ Ｔｈｅ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ １０ ｂａｔｃｈｅｓ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ
ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ １ ０ｍＬｍｉｎ － １ ꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ ｗａｓ １０ μＬ Ｔｈｅ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ｗｅｒｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｅｄ
ｂｙ ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ ＴＣＭ ( ｖｅｒｓｉｏｎ ２０１２Ａ) ꎮ Ｒｅｓｕｌｔｓ: Ｔｈｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｓｐｏｔｓ ｉｎ ＴＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ
ｄｏｉ:１０ １９７７８ / ｊ ｃｈｐ ２０２１ ０３ ０１３
Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｎ ＴＬＣ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ
ａｎｄ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｔｈｅ ｗｈｏｌｅ ｐｌａｎｔｓ
ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ∗
格
ꎮ 广泛分布于我国东北、山西、河北、内蒙古等
[１]
治疗黄疸型肝炎、头痛ꎬ发热等
[２]
ꎮ 全草入药ꎬ主要
药效成分为双苯吡酮、环烯醚萜、黄酮、三萜类化合
物
[３￣４]
ꎬ具有保肝、降糖、抗炎等药理活性ꎮ 文献资料
显示ꎬ对尖叶假龙胆药材的研究多集中于化学成份
与药理作用方面
[５]
ꎬ而对其内在质量控制方面的研
究甚少ꎮ 目前为止ꎬ还没有有效的质量标准来控制
ｗａｓ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ０ ９００ꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｖｅｒａｌｌ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｗａｓ ｇｏｏｄ Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ: Ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ＴＬＣ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｈｒｏ￣
ｍａｔｏｇｒａｍｓ ａｎｄ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｍｅｔｈｏｄ ａｒｅ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ Ｔｈｅｙ ｃａｎ ｂｅ ａｐｐｌｉｅｄ ｆｏｒ ｍｏｒｅ
序号
１
２
３
４
５
６
７
８
９
１０
采收时间( ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ)
采收地点( ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｐｌａｃｅ)
２０１６ ０８ ０７
呼伦贝尔市根河采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｇｅｎ Ｒｉｖｅｒ ｉｎ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
２０１６ ０９ １０
阿拉善盟蒙医院购买( Ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍ Ａｌｘａ Ｌｅａｇｕｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ)
ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａꎻ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍꎻ ＴＬＣꎻ ＨＰＬＣꎻ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ
尖叶假龙胆[ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ( Ｍｉｃｈｘ ) Ｈｕｌｔｅｎ]
较好ꎮ 结论:所建立的 ＴＬＣ 鉴别方法和 ＨＰＬＣ 指纹图谱分析模式ꎬ稳定可靠ꎬ可为尖叶假龙胆药材的质量控
制提供参考ꎮ
关键词:尖叶假龙胆ꎻ指纹图谱ꎻ薄层色谱ꎻ高效液相色谱ꎻ质量控制
中图分类号:Ｒ ９２１ ２ 文献标识码:Ａ 文章编号:１００９ － ３６５６(２０２１)０３ － ０２５９ － ０６
供试品溶液 ５ μＬꎬ分别点于同一硅胶 Ｇ 薄层板上ꎬ
２０１５ 年版四部通则 ０５０２) 试验ꎬ吸取上述两种溶液
干ꎬ 喷 以 ５％ 三 氯 化 铝 乙 醇 溶 液ꎬ 置 紫 外 光 灯
液ꎬ作为对照品溶液ꎮ 照薄层色谱法( « 中国药典»
各 ５ μＬꎬ点于同一硅胶 ＧＦ２５４ 薄层板上ꎬ以三氯甲
ｗａｓ ｗｅｌｌ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｎｄ ｈａｄ ｔｈｅ ｇｏｏｄ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｗｉｔｈ １０ ｃｏｍ￣
ｍｏｎ ｐｅａｋｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｔｈｅ ｔｗｏ ｐｅａｋｓ ｏｆ ｓｗｅｒｔｉａｍａｒｉｎ ａｎｄ ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ Ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｉｅｓ ｏｆ １０ ｂａｔｃｈｅｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅｓ
呼伦贝尔市根河金河林场购买( Ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍ Ｊｉｎｈｅ Ｆｏｒｅｓｔ Ｆａｒｍꎬ Ｇｅｎｇｈｅꎬ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
呼伦贝尔市根河市满归镇采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｍａｎｇｕｉ ｔｏｗｎ Ｇｅｎｈｅꎬ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
呼伦贝尔市根河阿龙山采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ａ ｌｏｎｇ Ｍｏｕｎｔａｉｎꎬ Ｇｅｎ Ｒｉｖｅｒꎬ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
ｇｅｒｐｒｉｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｔｈｅ ｗｈｏｌｅ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ Ｍｅｔｈｏｄｓ: Ｔｈｒｅｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ＴＬＣ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ａｄｏｐｔｅｄ ｔｏ
ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｔｈｉｎ￣ｌａｙｅｒ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ Ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ｗｅｒｅ
摘要 目的: 建立尖叶假龙胆药材特征图谱及高效液相( ＨＰＬＣ) 指纹图谱ꎮ 方法:采用 ３ 种薄层色谱( ＴＬＣ)
法ꎬ建立尖叶假龙胆薄层特征图谱ꎮ 采用 ＨＰＬＣ 法ꎬ 建立尖叶假龙胆的指纹图 谱ꎬ 色 谱 柱 为 ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ
ＡＱ￣Ｃ１８ (４ ６ ｍｍ × ２５０ ｍｍꎬ５ μｍ) ꎬ流动相为甲醇￣水ꎬ梯度洗脱ꎬ流速为 １ ０ ｍＬｍｉｎ － １ ꎬ检测波长 ２５４ ｎｍꎬ柱
中 国 药 品 标 准 Ｄｒｕｇ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ２０２１ꎬ ２２(３)
２５９
尖叶假龙胆薄层色谱特征图谱及高效液相指纹图谱的研究 ∗
李玉华ꎬ 刘晶晶ꎬ 李景清ꎬ 关金凤
( 通辽市食品药品检验所ꎬ 通辽 ０２８０００)
取药材 １０ 批ꎬ研细ꎬ取粉末 ０ ５ ｇꎬ加甲醇５ ｍＬꎬ
中 国 药 品 标 准 Ｄｒｕｇ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ２０２１ꎬ ２２(３)
２６１
墩果酸对照品ꎬ用甲醇制成每 １ ｍＬ 含 ０ ３ ｍｇ 的溶
和高效液相色谱( ＨＰＬＣ) 特征指纹图谱进行较为全
面的研究ꎬ将有效填补尖叶假龙胆质量标准研究的
空白ꎬ同时为尖叶假龙胆药材质量标准的提升提供
科学依据ꎮ
２ １ 环烯醚萜类成分( 龙胆苦苷和獐芽菜苦苷) 特
取 １０ 批药材ꎬ研细ꎬ取粉末 ０ ５ ｇꎬ加甲醇 ５ ｍＬꎬ
超声(功率 ２５０ Ｗꎬ频率 ５０ Ｈｚ) 处理 ２０ ｍｉｎꎬ滤过ꎬ滤
温 ３０ ℃ ꎬ进样量为 １０ μＬꎮ 以« 中药色谱指纹图谱相似度评价系统(２０１２Ａ 版) » 进行相似度评价ꎮ 结果:所
建立的 ＴＬＣ 法ꎬ斑点清晰ꎬ分离度良好ꎻ建立的尖叶假龙胆药材的 ＨＰＬＣ 指纹图谱ꎬ确定了 １０ 个共有峰ꎬ指认
了獐牙菜苦苷和龙胆苦苷两个成份ꎬ１０ 批不同产地的尖叶假龙胆药材指纹图谱相似度 > ０ ９００ꎬ整体相似度
呼伦贝尔市金河林业局达赖沟采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｄａｌａｉｇｏｕꎬ Ｊｉｎｈｅ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｂｕｒｅａｕ ｉｎ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
呼伦贝尔市根河城郊采药人购买( Ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍ ｓｕｂｕｒｂ ｏｆ Ｇｅｎｇｈｅ ｉｎ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
贺兰山南寺采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｓｏｕｔｈ Ｔｅｍｐｌｅ Ｈｅｌａｎ Ｍｏｕｎｔａｉｎ)
从图 １ 中可以看出ꎬ供试品色谱中ꎬ在与对照品
苷成份ꎮ
龙胆苦苷和獐芽菜苦苷色谱相应的位置处ꎬ显相同
２ ２ 三萜类成分( 齐墩果酸) 的特征图谱
好的鉴别出尖叶假龙胆药材中龙胆苦苷和獐芽菜苦
超声处理 ２０ ｍｉｎꎬ滤过ꎬ滤液作为供试品溶液ꎮ 取齐
颜色斑点ꎬＲｆ 值在 ０ ６５ 左右ꎬ表明该实验条件能很
液作为供试品溶液ꎮ 另取对照品龙胆苦苷、獐芽菜苦
苷ꎬ用甲醇溶解配制成每 １ ｍＬ 含 ０ ２ ｍｇ 的溶液ꎬ作
为对照品溶液ꎮ 照薄层色谱法(« 中华人民共和国药
典»简称«中国药典»２０１５ 年版四部通则 ０５０２) 试验ꎬ
１ 仪器及试药
１ １ 仪器
Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＬＣ￣２０ＡＴ 高 效 液 相 色 谱 仪ꎬ ＩｎｅｒｔＳｕｓ￣
１ ２ 试药
Ｍｏｅｎｃｈ ) 植物ꎬ别名苦龙胆ꎬ蒙药名为阿古特￣其其
９８ ３％ ) 、 龙 胆 苦 苷 ( 批 号: １１０７７０￣２０１９１８ 含 量
地ꎬ具有清热利湿、退黄的功效ꎬ在蒙、藏医学中用于
９８ ２％ ) ꎬ均由中国食品药品检定研究院提供ꎻ水为
为 龙 胆 科 ( Ｇｅｎｔｉａｎａｎｃｅａｅ ) 假 龙 胆 属 ( Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ
ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ Ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｉｎ ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ ＡＱ￣Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎ(４ ６ ｍｍ × ２５０ ｍｍꎬ５ μｍ) ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ
ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ ａｎｄ ｗａｔｅｒ. Ｔｈｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ｓｅｔ ａｔ ２５４ ｎｍꎬ ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ３０℃ ꎬ ｔｈｅ
对照品獐牙菜苦苷( 批号: １１０７８５￣２０１４０４ 含量
９７ １％ ) 、齐 墩 果 酸 ( 批 号 为: １１０７０９￣２０１２０６ 含 量
高纯水ꎬ甲醇为色谱纯ꎬ其他试剂均为分析纯ꎮ １０
பைடு நூலகம்
批尖叶假龙胆药材ꎬ均为本所自采并鉴定为龙胆科
( Ｇｅｎｔｉａｎａｎｃｅａｅ) 假龙胆属( Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ Ｍｏｅｎｃｈ ) 尖
第一作者简介:李玉华ꎬ硕士ꎬ研究方向:药品检验ꎮ Ｔｅｌ:０４７５￣６３８８７２９ꎻＥ￣ｍａｉｌ:ａｍｂａｂｙ＠ ｖｉｐ １６３ ｃｏｍ
２６０
中 国 药 品 标 准 Ｄｒｕｇ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ２０２１ꎬ ２２(３)
叶假龙胆[ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ( Ｍｉｃｈｘ ) Ｈｕｌｔｅｎ] 的干燥
全草ꎮ 样品来源见表 １ꎮ
尖叶假龙胆药材的内在质量ꎬ也未见该药材薄层色
２ 薄层鉴别特征图谱 [６￣８]
文结合尖叶假龙胆的化学成分对其 ＴＬＣ 特征图谱
征图谱
谱( ＴＬＣ) 特征图谱和指纹图谱相关的研究报导ꎮ 本
ＬＩ Ｙｕｈｕａꎬ ＬＩＵ Ｊｉｎｇｊｉｎｇꎬ ＬＩ ＪｉｎｇｑｉｎｇꎬＧＵＡＮ Ｊｉｎｆｅｎｇ
( Ｔｏｎｇｌｉａｏ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌꎬ Ｔｏｎｇｌｉａｏ ０２８０００ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ: Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ( ＴＬＣ) ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ａｎｄ ＨＰＬＣ ｆｉｎ￣
２０１６ ０９ ０８
２０１７ ０８ ２１
２０１７ ０８ ２２
２０１７ ０８ ２２
２０１９ ０８ １６
２０１９ ０８ １６
２０１９ ０８ １８
２０１９ ０８ ２２
贺兰山南寺采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｓｏｕｔｈ Ｔｅｍｐｌｅꎬ Ｈｅｌａｎ Ｍｏｕｎｔａｉｎ)
黑龙江省漠河县特产店购买( Ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍ ｓｐｅｃｉａｌｔｙ ｓｈｏｐ ｉｎ Ｍｏｈｅ Ｃｏｕｎｔｙ Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ)
ｔａｉｎ ＡＱ￣Ｃ１８ 色谱柱(４ ６ ｍｍ × ２５０ ｍｍꎬ５ μｍ) ꎮ
吸取上述两种溶液各 ５ μＬꎬ分别点于同一硅胶 ＧＦ２５４
薄层板上ꎬ以乙酸乙酯￣甲醇￣水(８∶ ２∶ ２) 为展开剂ꎬ展
开ꎬ取出ꎬ晾干ꎬ置紫外灯(２５４ ｎｍ)下检视ꎬ见图 １ꎮ
表 １ １０ 批尖叶假龙胆药材来源
Ｔａｂ １ Ｔｈｅ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ １０ ｂａｔｃｈｅｓ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ
ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ １ ０ｍＬｍｉｎ － １ ꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ ｗａｓ １０ μＬ Ｔｈｅ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ｗｅｒｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ａｎｄ ｅｖａｌｕａｔｅｄ
ｂｙ ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ ＴＣＭ ( ｖｅｒｓｉｏｎ ２０１２Ａ) ꎮ Ｒｅｓｕｌｔｓ: Ｔｈｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｓｐｏｔｓ ｉｎ ＴＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ
ｄｏｉ:１０ １９７７８ / ｊ ｃｈｐ ２０２１ ０３ ０１３
Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｎ ＴＬＣ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ
ａｎｄ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｔｈｅ ｗｈｏｌｅ ｐｌａｎｔｓ
ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ∗
格
ꎮ 广泛分布于我国东北、山西、河北、内蒙古等
[１]
治疗黄疸型肝炎、头痛ꎬ发热等
[２]
ꎮ 全草入药ꎬ主要
药效成分为双苯吡酮、环烯醚萜、黄酮、三萜类化合
物
[３￣４]
ꎬ具有保肝、降糖、抗炎等药理活性ꎮ 文献资料
显示ꎬ对尖叶假龙胆药材的研究多集中于化学成份
与药理作用方面
[５]
ꎬ而对其内在质量控制方面的研
究甚少ꎮ 目前为止ꎬ还没有有效的质量标准来控制
ｗａｓ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ０ ９００ꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｏｖｅｒａｌｌ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｗａｓ ｇｏｏｄ Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ: Ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ＴＬＣ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｈｒｏ￣
ｍａｔｏｇｒａｍｓ ａｎｄ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｍｅｔｈｏｄ ａｒｅ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ Ｔｈｅｙ ｃａｎ ｂｅ ａｐｐｌｉｅｄ ｆｏｒ ｍｏｒｅ
序号
１
２
３
４
５
６
７
８
９
１０
采收时间( ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ)
采收地点( ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｐｌａｃｅ)
２０１６ ０８ ０７
呼伦贝尔市根河采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｇｅｎ Ｒｉｖｅｒ ｉｎ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
２０１６ ０９ １０
阿拉善盟蒙医院购买( Ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍ Ａｌｘａ Ｌｅａｇｕｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ)
ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａꎻ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍꎻ ＴＬＣꎻ ＨＰＬＣꎻ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ
尖叶假龙胆[ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ( Ｍｉｃｈｘ ) Ｈｕｌｔｅｎ]
较好ꎮ 结论:所建立的 ＴＬＣ 鉴别方法和 ＨＰＬＣ 指纹图谱分析模式ꎬ稳定可靠ꎬ可为尖叶假龙胆药材的质量控
制提供参考ꎮ
关键词:尖叶假龙胆ꎻ指纹图谱ꎻ薄层色谱ꎻ高效液相色谱ꎻ质量控制
中图分类号:Ｒ ９２１ ２ 文献标识码:Ａ 文章编号:１００９ － ３６５６(２０２１)０３ － ０２５９ － ０６
供试品溶液 ５ μＬꎬ分别点于同一硅胶 Ｇ 薄层板上ꎬ
２０１５ 年版四部通则 ０５０２) 试验ꎬ吸取上述两种溶液
干ꎬ 喷 以 ５％ 三 氯 化 铝 乙 醇 溶 液ꎬ 置 紫 外 光 灯
液ꎬ作为对照品溶液ꎮ 照薄层色谱法( « 中国药典»
各 ５ μＬꎬ点于同一硅胶 ＧＦ２５４ 薄层板上ꎬ以三氯甲
ｗａｓ ｗｅｌｌ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｎｄ ｈａｄ ｔｈｅ ｇｏｏｄ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｗｉｔｈ １０ ｃｏｍ￣
ｍｏｎ ｐｅａｋｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｔｈｅ ｔｗｏ ｐｅａｋｓ ｏｆ ｓｗｅｒｔｉａｍａｒｉｎ ａｎｄ ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｏｓｉｄｅ Ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｉｅｓ ｏｆ １０ ｂａｔｃｈｅｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅｓ
呼伦贝尔市根河金河林场购买( Ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍ Ｊｉｎｈｅ Ｆｏｒｅｓｔ Ｆａｒｍꎬ Ｇｅｎｇｈｅꎬ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
呼伦贝尔市根河市满归镇采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｍａｎｇｕｉ ｔｏｗｎ Ｇｅｎｈｅꎬ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
呼伦贝尔市根河阿龙山采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ａ ｌｏｎｇ Ｍｏｕｎｔａｉｎꎬ Ｇｅｎ Ｒｉｖｅｒꎬ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
ｇｅｒｐｒｉｎｔ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ ｔｈｅ ｗｈｏｌｅ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ Ｍｅｔｈｏｄｓ: Ｔｈｒｅｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ＴＬＣ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ａｄｏｐｔｅｄ ｔｏ
ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｔｈｉｎ￣ｌａｙｅｒ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ ｏｆ Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ ａｃｕｔａ Ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ｗｅｒｅ
摘要 目的: 建立尖叶假龙胆药材特征图谱及高效液相( ＨＰＬＣ) 指纹图谱ꎮ 方法:采用 ３ 种薄层色谱( ＴＬＣ)
法ꎬ建立尖叶假龙胆薄层特征图谱ꎮ 采用 ＨＰＬＣ 法ꎬ 建立尖叶假龙胆的指纹图 谱ꎬ 色 谱 柱 为 ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ
ＡＱ￣Ｃ１８ (４ ６ ｍｍ × ２５０ ｍｍꎬ５ μｍ) ꎬ流动相为甲醇￣水ꎬ梯度洗脱ꎬ流速为 １ ０ ｍＬｍｉｎ － １ ꎬ检测波长 ２５４ ｎｍꎬ柱
中 国 药 品 标 准 Ｄｒｕｇ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ２０２１ꎬ ２２(３)
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尖叶假龙胆薄层色谱特征图谱及高效液相指纹图谱的研究 ∗
李玉华ꎬ 刘晶晶ꎬ 李景清ꎬ 关金凤
( 通辽市食品药品检验所ꎬ 通辽 ０２８０００)
取药材 １０ 批ꎬ研细ꎬ取粉末 ０ ５ ｇꎬ加甲醇５ ｍＬꎬ
中 国 药 品 标 准 Ｄｒｕｇ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ２０２１ꎬ ２２(３)
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墩果酸对照品ꎬ用甲醇制成每 １ ｍＬ 含 ０ ３ ｍｇ 的溶
和高效液相色谱( ＨＰＬＣ) 特征指纹图谱进行较为全
面的研究ꎬ将有效填补尖叶假龙胆质量标准研究的
空白ꎬ同时为尖叶假龙胆药材质量标准的提升提供
科学依据ꎮ
２ １ 环烯醚萜类成分( 龙胆苦苷和獐芽菜苦苷) 特
取 １０ 批药材ꎬ研细ꎬ取粉末 ０ ５ ｇꎬ加甲醇 ５ ｍＬꎬ
超声(功率 ２５０ Ｗꎬ频率 ５０ Ｈｚ) 处理 ２０ ｍｉｎꎬ滤过ꎬ滤
温 ３０ ℃ ꎬ进样量为 １０ μＬꎮ 以« 中药色谱指纹图谱相似度评价系统(２０１２Ａ 版) » 进行相似度评价ꎮ 结果:所
建立的 ＴＬＣ 法ꎬ斑点清晰ꎬ分离度良好ꎻ建立的尖叶假龙胆药材的 ＨＰＬＣ 指纹图谱ꎬ确定了 １０ 个共有峰ꎬ指认
了獐牙菜苦苷和龙胆苦苷两个成份ꎬ１０ 批不同产地的尖叶假龙胆药材指纹图谱相似度 > ０ ９００ꎬ整体相似度
呼伦贝尔市金河林业局达赖沟采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｄａｌａｉｇｏｕꎬ Ｊｉｎｈｅ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｂｕｒｅａｕ ｉｎ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
呼伦贝尔市根河城郊采药人购买( Ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍ ｓｕｂｕｒｂ ｏｆ Ｇｅｎｇｈｅ ｉｎ Ｈｕｌｕｎ Ｂｕｉｒ)
贺兰山南寺采集( Ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｓｏｕｔｈ Ｔｅｍｐｌｅ Ｈｅｌａｎ Ｍｏｕｎｔａｉｎ)
从图 １ 中可以看出ꎬ供试品色谱中ꎬ在与对照品
苷成份ꎮ
龙胆苦苷和獐芽菜苦苷色谱相应的位置处ꎬ显相同
２ ２ 三萜类成分( 齐墩果酸) 的特征图谱
好的鉴别出尖叶假龙胆药材中龙胆苦苷和獐芽菜苦
超声处理 ２０ ｍｉｎꎬ滤过ꎬ滤液作为供试品溶液ꎮ 取齐
颜色斑点ꎬＲｆ 值在 ０ ６５ 左右ꎬ表明该实验条件能很
液作为供试品溶液ꎮ 另取对照品龙胆苦苷、獐芽菜苦
苷ꎬ用甲醇溶解配制成每 １ ｍＬ 含 ０ ２ ｍｇ 的溶液ꎬ作
为对照品溶液ꎮ 照薄层色谱法(« 中华人民共和国药
典»简称«中国药典»２０１５ 年版四部通则 ０５０２) 试验ꎬ
１ 仪器及试药
１ １ 仪器
Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＬＣ￣２０ＡＴ 高 效 液 相 色 谱 仪ꎬ ＩｎｅｒｔＳｕｓ￣
１ ２ 试药
Ｍｏｅｎｃｈ ) 植物ꎬ别名苦龙胆ꎬ蒙药名为阿古特￣其其
９８ ３％ ) 、 龙 胆 苦 苷 ( 批 号: １１０７７０￣２０１９１８ 含 量
地ꎬ具有清热利湿、退黄的功效ꎬ在蒙、藏医学中用于
９８ ２％ ) ꎬ均由中国食品药品检定研究院提供ꎻ水为
为 龙 胆 科 ( Ｇｅｎｔｉａｎａｎｃｅａｅ ) 假 龙 胆 属 ( Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ
ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ Ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｉｎ ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ ＡＱ￣Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎ(４ ６ ｍｍ × ２５０ ｍｍꎬ５ μｍ) ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ
ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ ａｎｄ ｗａｔｅｒ. Ｔｈｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ｓｅｔ ａｔ ２５４ ｎｍꎬ ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ３０℃ ꎬ ｔｈｅ
对照品獐牙菜苦苷( 批号: １１０７８５￣２０１４０４ 含量
９７ １％ ) 、齐 墩 果 酸 ( 批 号 为: １１０７０９￣２０１２０６ 含 量
高纯水ꎬ甲醇为色谱纯ꎬ其他试剂均为分析纯ꎮ １０
பைடு நூலகம்
批尖叶假龙胆药材ꎬ均为本所自采并鉴定为龙胆科
( Ｇｅｎｔｉａｎａｎｃｅａｅ) 假龙胆属( Ｇｅｎｔｉａｎｅｌｌａ Ｍｏｅｎｃｈ ) 尖