术前新辅助化疗及肠内营养对胃癌患者 Akt1、Bcl-2、Bax 蛋白表达的影响

术前新辅助化疗及肠内营养对胃癌患者 Akt1、Bcl-2、Bax
蛋白表达的影响
魏伦收;张娟娟;康玉华;丁春生;索智敏
【摘要】目的：探讨术前新辅助化疗（NAD）及肠内营养（EA）对胃癌患者胃癌组织内 Akt1、Bcl-2、Bax 蛋白影响。

方法选取胃癌患者75例，随机分为对照组25例、NAD 组25例和 NAD+EA 组25例，分别检测干预治疗前后胃癌组织中Akt1、Bcl-2、Bax 蛋白的表达情况。

结果 NAD 组及 NAD+EA 组治疗后 Akt1蛋白含量均较治疗前均显著降低(P<0.05)，NAD 组及 NAD+EA 组治疗后 Akt1蛋白含量均较对照组显著降低(P<0.05)。

NAD 组及 NAD+EA 组治疗后 Bcl-2蛋白含量均较治疗前均显著降低(P<0.05)，Bax 蛋白含量均较治疗前均显著升高(P<0.05)，NAD 组治疗后 Bcl-2蛋白含量较对照组显著降低(P<0.05)，NAD+EA 组治疗后 Bcl-2蛋白含量较对照组显著降低(P<0.01)，NAD 组及 NAD+EA 组治疗后 Bax 蛋白含量均较对照组显著升高(P<0.05)。

结论术前 NAD 结合 EA 能降低胃癌组织内 Akt1、Bcl-2蛋白，提高 Bax 蛋白水平，可能通过改变蛋白含量抑制肿瘤进程。

%Objective To evaluate the effect of of neoadjuvant chemotherapy combined with enteral nutrition on Akt1, Bcl-2, Bax protein in patients with gastric cancer. Methods 75 patients with gastric cancer were randomly divided into the control group (n=25), neoadjuvant chemotherapy group (NAD group, n=25) and neoadjuvant chemotherapy plus enteral nutrition group (NAD+EA group, n=25). The content of Akt1, Bcl-2, Bax protein in gastricancer tissue were detected by westernblot before and after treatment. Results The content of Akt1 were decreased after treatment in NAD group and NAD+EA group than before
treatment(P<0.05). The content of Akt1 were decreased after treatment in NAD group and NAD+EA group than control group (P<0.05). The content of Bcl-2 were decreased after treatment in NAD group and NAD+EA group than before treatment (P<0.05). The content of Bax were increased after treatment in NAD group and NAD+EA group than before treatment
(P<0.05). The content of Bcl-2 were decreased after treatment in NAD group than control group (P<0.05). The content of Bcl-2 were decreased after treatment in NAD+EA group than control group (P<0.01). The content of Bax were increased after treatment in NAD group and NAD+EA group than control group (P<0.05). Conclusion Preoperative neoadjuvant chemotherapy combined with enteral nutrition can decrease the content of Akt1, Bcl-2, increase the Bax protein, the inhibition of tumor procession may realize by changing the protein content.
【期刊名称】《当代医学》
【年(卷),期】2016(022)026
【总页数】2页(P1-2)
【关键词】胃癌;新辅助化疗;Akt1;Bcl-2;Bax
【作者】魏伦收;张娟娟;康玉华;丁春生;索智敏
【作者单位】河南 475000 河南大学附属淮河医院消化内科;河南 475000 河南大学附属淮河医院消化内科;河南 475000 河南大学附属淮河医院消化内科;河南475000 河南大学附属淮河医院消化内科;河南 475000 河南大学附属淮河医院消化内科
【正文语种】中文
新辅助化疗（neoadjuvant chemotheraphy，NAD）是一种治疗胃癌的综合性
疗法，在消化道恶性肿瘤的治疗上，已得到越来越广泛的应用[1]。

营养支持是缓
解胃癌患者营养不良的必要措施。

Akt1又称蛋白激酶B，可调控细胞增值和生长，目前研究发现其在细胞凋亡和糖代谢方面起到重要作用，Akt1基因位点的突变与
肿瘤的发生及生成关系密切[2]。

Bcl-2/Bax的比例也是决定细胞凋亡的关键，当
比例增大时，细胞凋亡受抑制，反之则促进[3]。

本研究对胃癌患者给予NAD及
对应肠内营养（enteral nutrition，EA）支持，观察胃癌组织内Akt1、Bcl-2、Bax蛋白表达变化，以探讨NAD及EA支持对胃癌抑制的机制。

1.1 一般资料选取2013年8月～2014年6月在河南大学附属医院的胃癌患者
75例，随机分成3组，各25例。

对照组：确诊后直接手术；NAD组：NAD后
直接手术；NAD+EA组：为在行术前NAD加用EA支持后再行手术。

所有入组
患者术前均有内镜活检病理，并将活检标本及术后标本存液氮备用。

对照组男15例，女10例，平均年龄（54.4±1.6）岁，中分化13例，低分化12例，TNMⅡ期12例，TNMⅢ期13例；NAD组男18例，女7例，平均年龄（51.4±3.2）岁，中分化11例，低分化14例，TNMⅡ期11例，TNMⅢ期14例；NAD+EA 组男15例，女10例，平均年龄（52.2±1.0）岁，中分化9例，低分化16例，TNMⅡ期13例，TNMⅢ期12例。

各组年龄及性别组间两两比较，差异无统计
学意义。

1.2 方法
1.2.1 新辅助化疗第1天静脉滴注奥沙利铂（130mg/ m2）；第1～14天，口服卡培他滨（1000mg/m2），2次/d。

进行2个疗程后行手术治疗。

1.2.2 肠内营养采用高脂低糖、含ω-3脂肪酸且热量供给为62.76～83.68kJ/（kg·d）的营养标准供给。

其他2组自然进食。

1.3 检测方法
1.3.1 试剂兔抗人AKt1单克隆抗体，Bcl-2、Bax、兔抗人多克隆抗体，SABC试剂盒，DAB显色试剂盒均由武汉博士德生物工程有限公司提供。

1.3.2 药品注射用奥沙利铂（齐鲁制药有限公司，批号：20130216）；卡培他滨片（上海罗氏制药有限公司，批号：20121208）。

1.3.3 Western blot检测AKt1蛋白的表达术后剪取适量（30～80mg）胃癌组织,加入约500μL RIPA蛋白裂解液和5μL PMSF蛋白保护液，4℃、12000r/min离心15min后取上清液，测定其中蛋白浓度。

行电泳分离，低温转膜后在TBST溶液中常温封闭4h，然后加入兔抗人AKt1单克隆抗体（1∶10000稀释）和小鼠抗人β-action单克隆抗体（1∶10000稀释），4℃孵育过夜，显影，定影。

蛋白的相对表达量用灰度值表示，采用Quantity One软件分析。

1.3.4 Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白的表达术后剪取适量（30～80mg）胃癌组织,加入约500μL RIPA蛋白裂解液和5μL PMSF蛋白保护液，4℃、
12000r/min离心15min后取上清液，测定Bcl-2、Bax蛋白浓度。

具体操作步骤严格按照说明书进行。

蛋白的相对表达量用灰度值表示，采用Quantity One软件分析。

1.4 统计学方法采用SPSS14.0统计软件进行数据分析，计量资料采用“x±s”表示，组间比较采用t检验；计数资料用例数（n）表示，计数资料组间率（%）的比较采用χ2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 各组治疗前后Akt1蛋白含量表达比较 NAD组及NAD+EA组治疗后Akt1蛋白含量均较治疗前均显著降低（P＜0.05），NAD组及NAD+EA组治疗后Akt1蛋白含量均较对照组显著降低（P＜0.05）。

见表1。

2.2 各组治疗前后Bcl-2/Bax蛋白含量表达比较 NAD组及NAD+EA组治疗后Bcl-2蛋白含量均较治疗前均显著降低（P＜0.05），Bax蛋白含量均较治疗前均
显著升高（P＜0.05），NAD组治疗后Bcl-2蛋白含量较对照组显著降低（P＜
0.05），NAD+EA组治疗后Bcl-2蛋白含量较对照组显著降低（P＜0.01），NAD组及NAD+EA组治疗后Bax蛋白含量均较对照组显著升高（P＜0.05）。

见表2。

胃癌患者手术前常存在营养不良，影响肿瘤术后的预后及总体疗效；因此，术前给予EA，纠正营养不良以更利于治疗进行。

但单一的营养支持又可能促进癌细胞的
增殖，引发术后复发或转移[4]。

NAD在杀灭癌细胞同时，会使患者出现消化道不良反应，影响预后。

所以在术前给予EA同时加入NAD，既可以达到抑制癌细胞
的作用，又可以供给机体足够的营养，作为胃癌综合治疗的一种手段，有利于延长患者生存期，提高生活质量，降低手术风险及术后并发症[5]。

Akt又称蛋白激酶B，Akt1是其三个分型之一，Akt通过磷酸化caspase-9前体，发挥抗凋亡作用，从而促进细胞生长、存活及肿瘤生成[6-7]，Bcl-2/Bax的比例
也是决定细胞凋亡的关键[8]，当比例增大时，细胞凋亡受抑制，反之则促进。

Bcl-2是一种跨膜蛋白，存在于线粒体膜,改变膜的通透性抑制细胞色素C释放实
现抑制凋亡作用[9-10]。

本研究结果显示，NAD组及NAD+EA组治疗后Akt1蛋白含量均较治疗前、对
照组显著降低（P＜0.05）。

NAD组及NAD+EA组治疗后Bcl-2蛋白含量均较治疗前均显著降低（P＜0.05），Bax蛋白含量均较治疗前均显著升高（P＜0.05），NAD组及NAD+EA治疗后Bcl-2蛋白含量均较治疗前、对照组显著降低（P＜0.05），NAD组及NAD+EA组治疗后Bax蛋白含量均较对照前显著升高（P＜0.05），提示使用NAD+EA均可能通过降低Akt1、Bcl-2蛋白，提高Bax蛋白，抑制抗凋亡作用，促进肿瘤细胞凋亡实现抑制抗肿瘤作用，进而达到了治疗效果。

【相关文献】
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[2] 程玉,李春辉,刘海旺,等.Akt1信号通路在胃癌组织中的表达及意义[J].广东医学,2015,36(4):560-562.
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[8] 冯俊伟，张志勇，王爱军，等.结直肠癌组织中TAZ表达与Bcl-2、Bax、Caspase-3的关系及临床意义[J].中国老年学杂志，2014,34(19): 5419-5420.
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