驴抗犬细小病毒IgG的研制
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Ｓａ ｏ ，ｉ， ｉ ＡＪ ｎ Ｑａ ｔ Ｌｕ Ｙ Ｌ ｎ ，Ｊ ｎｉ ｈｏ Ｈ ￣Ｘａ Ｑｎ ｉａ ， ｉ Ｋｍ， ｉ ｅｏ ｇ ｉ ＷｅＪ ｉ ｎ ｎ ｅ
（ ｏｌ ｅ ｏ Ａ ｉ ａ Ｈ ｓ ａ ｄｙ ａ ｄ Ｖ ｔ ｉ ｒ Ｍ ｄ ｉｅ Ｙ ｎ ｚｏ ｎ ｅ ｉ ， ａｇ ｈ ｕ ｉ ｇｕ Ｃ ｉ ２ ５ ０ ） Ｃ ｌ ｇ ｆ ｎ ｌ ｕ ｂ ｎ ｒ ｎ ｅ ｒ ａｙ ｅ ｉ ｎ ， ａ ｇｈ ｕ Ｕ ｖ ｒ ｔ Ｙ ｎ ｚ ｏ ，Ｊ ｎ ｓ ． ｈｎ ｅ ｍ ｅｎ ｃ ｉ ｓｙ ａ ａ ２ ０ ９ Ａ ｓｒ ｃ Ｔ ｒｅ ｍ ｎ ｃ ｎ ｌａ ｔ ｏ ｉ ｏ ｓ ｂ ｐ ５ ａ ｉ ｎ ｕ ｎａ ｖ ｕ （ Ｉ ｂ ｔａ ｔ ｈｅ ｏ ｏ ｌ ａ ｎｉ ｄｅ ｔ ｕ ｔ ｅ Ｈ ｖ ｎ ｉ ｅ ｚ ｉ ｓ Ａ Ｖ—Ｈ ）ｗ ｒ ｅ ｅ ｐ ｄ ｂ ｕ ｉ Ｐ ／ ｙ ｌ ａ ｃ Ｉ ｏ ｂ ｓ ｙ ａ ｆ ｌ ｒ ５ ｅ ｄ ｖ ｌ ｅ ｙ ｆｓ ｇ Ｓ ２ ０ ｍ ｅ ｍ ｅ ｓ ｅ ｏ ｎ ｏ
免疫 后 第 １ ２天采 血 ， 和兔 子按 常 规 免疫 。 狗
１ 西安 市 现 代 农 业 综 合 开 发 总 公 司 西安 ７０２ ） １０ １
２ 陕 西省 畜牧 兽 医总 站 ） 西安 ７０ ２ １０ ３
凝 效 价结 果 见 表 １ 。
表１ 免疫 后的三种 动物血凝效 价 （ 浓度 为６ ｇ ｍ ） ｍ ／ Ｉ
采 用 血 凝抑 制 试 验 。
按 文献 进行 。
种 种 原 因 ， 免 疫程 序 不 规范 等 ， 如 免疫 失 败 时有 发 生 。 １ ５ 免 疫金 电镜技 术 ．
Ｃ Ｖ—Ｘ 。 、Ｃ Ｖ分 别 来 自第 四军 医 大 Ｉ Ｐ Ｎ 株 Ｐ ｇ Ｇ滴 度 。 取３ —８岁关 中驴 ， １ Ｌ细小 病 毒 液／ 测 一 次抗 体 滴 度 。 以 ０ｍ
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中 动 检 ２ ２ 第 ｌ卷 期 国 物 疫 ０ 年 ９ 第８ ０
文 章 编 号 ：０ ５ ４ Ｘ（０ ２０ —０ ２ —０ １０ —９ ４ ２０ ） ８ ０ ３ ２
试 硼究
一 ３ ２一
三 ： 平拉 ：ｉ 三 绷小赢毒
李六金 姜焕 宏 ¨ 押 宗保 李 成 吴 钟 灵 ’ （ 第四 军 医 大 学动物 保 健 品研 制 中心 西 安
３ ）中国农 业科学院哈 尔滨兽 医研 究所 ４ ）内蒙古生物药品厂 呼和浩特
哈 尔滨 １０ ０ ５０ １
注 ：驴抗 细小病毒免疫球 蛋 白为浓缩 样品
００ ３ １００
Ｄｅ ｅｏ ｍ ｅ ｔ ｆ ｖ ｌｐ ｎ ｏ Ｍ ｏ ｏ ｌ ａ Ａｎ ｉ ｏ ｅ Ｓｐ ｃｆｃ ｏ ｎ ｃｏｎ ｌ ｔｂ ｄｉｓ ｅ ｉ ｔ Ｈｅ ａ ｇ ｕ— ｉ ｍ ｇｌ ｔｎ ｎ ｆ Ｓ ｔ ｐ Ｈ ５ Ａｖ ａ Ｉ ｆｕ ｎｚ ｒ ｉ ｉ ｏ ｕｂ ｙ ｅ ｉ ｎ ｎ ｅ ａ Ｖｉｕｓ ｌ
学 实验 动 物 中心 及 中 国兽 药 监察 所 。
只进 行 肌 肉或 皮 下 注射 免 疫接 种 ， 础 免疫 ５次 ， 基 间隔 ２ 结 果
７ 。基 础 免疫 后 １ 月 ， 强 免疫 ２次 ， 隔 ７ ， 次 ２ １ 所 产 生 的抗 犬细 小 病 毒抗 体 ，经纯 化 ，经 测定 血 ｄ 个 加 间 末 ｄ ．
Ｉ硪蕾 ：： Ｅ 三三 ｌ
陈 惠茹 李 宏 ７０３ ） １０ ２
摘要
用关 中驴制备抗 犬细小病毒 （Ｐ ） Ｃ Ｖ 免疫球蛋 白， 预防和治疗犬 Ｃ Ｖ感染。 Ｐ 制备 Ｃ Ｖ抗原复合物 ， Ｐ 通
过免疫驴 ， 用纯化方法从驴血清 中提取特异性抗体 （ Ｇ ， Ｉ ） 经过物理化学检 定、 ｇ 血清学、 免疫金电镜技术、 动物效 力 实验 。免 疫驴 均 可 产 生特 异 ＩＧ， 疫金 电镜 可观 察到 抗 原抗 体 免 疫复合 物 ； ｇ 免 血凝 抑 制 试验 （ ） １： １（ ＨＩ≥ ５ ２
浓 缩 浓度 为 ６ ｇ ｍ ） 可保 护 犬免 受 Ｃ Ｖ攻 击 ； ０ｍ ／ Ｌ ； Ｐ 室温 保存 半 年 ， ￣ ４Ｃ两年 效 价 不 变。 已成 功地 应 用 Ｃ Ｖ免 疫 驴 Ｐ
制 备 出高效 价 特异 性 抗 Ｃ Ｖ—Ｉ Ｐ ｇ Ｇ。 关键 词 犬 细 小病 毒 ； Ｇ Ｉ ｇ
参 照 ［ 层 析 法提 纯 ，紫外 ａｖｖ ｕ ， Ｐ 能 引起 急性 ， １ ３ Ｉ 的纯化 Ｃ ｎ ｅ ｐ ｒ ｉ ｓ Ｃ Ｖ） ｎ ｏｒ ． ｇ Ｇ
接 触 性传 染 病 ，临床 常 出现 出 血性 、 死性 肠 炎症 状 ， 测 定 蛋 白浓 度 。 坏 对 养 犬业 危 害 极 大 。 种 病 毒 目前 有 弱 毒疫 苗 ， 由于 １ ４ Ｉ 该 但 ． ｇ Ｇ滴 度检 测 这就 给 此类 疫 病 传播 流 行提 供 了条 件 ，从 而 严 重 影 响 １６ 稳 定性 试 验 ． 养 犬 业 的健 康 发 展 ，造 成 很 大 的经 济 损 失 。有 报 道 用 １６ １ 耐 热 试 验 提 纯 浓 缩 后 Ｉ 浓 度 为 ６ ／ ．． ｇ Ｇ（ ０ｍｇ 犬 、 、 、 ［ 等 动物 制 作病 毒 性 抗体 ， 马 兔 猪 １ 。 而用 驴 制 ｍ ） ｐ ． ， Ｅ ，Ｈ７ ８ 置不 同温 度 ２ ｉ ， ０ｍ ｎ 测抗 体 滴 度 。 作 抗 体 未见 有 报 道 。本 文 成功 地 用 细 小病 毒 免 疫 关 中 １６ ２ 耐 酸 试 验 提 纯 后 Ｉ ．． ｇ Ｇ，用 不 同 Ｄ 的 ０ ０ ５ Ｈ ． １ 驴， 制备 特 异 性 Ｉ 现报 告 如 下 。 ｇ Ｇ。
１ 材 料 和方 法 １１ 病 毒 ． １ ２ 免疫 ． ｍ ｌＬ ｒ —Ｈ １ 释成 １ ｇ ｍ ， ３ ℃孵 育 ０—６ 。 ｏ ｉ ／ Ｔｓ Ｃ稀 ／ Ｌ置 ７ ｍ ｈ 每 小 时取 出 １ ， 即用 ２ ｏ／ ｒ 管 立 ｍ ｌＬＴｉ ｓ中和 至 ｐ ． ， Ｈ ７ ０ 测 １ ６ ３ 纯 化 浓缩 后 的 ＩＧ， ．． ｇ 放室 温 及 ４Ｃ， ３个 月检 ￣ 每
（ ｏｌ ｅ ｏ Ａ ｉ ａ Ｈ ｓ ａ ｄｙ ａ ｄ Ｖ ｔ ｉ ｒ Ｍ ｄ ｉｅ Ｙ ｎ ｚｏ ｎ ｅ ｉ ， ａｇ ｈ ｕ ｉ ｇｕ Ｃ ｉ ２ ５ ０ ） Ｃ ｌ ｇ ｆ ｎ ｌ ｕ ｂ ｎ ｒ ｎ ｅ ｒ ａｙ ｅ ｉ ｎ ， ａ ｇｈ ｕ Ｕ ｖ ｒ ｔ Ｙ ｎ ｚ ｏ ，Ｊ ｎ ｓ ． ｈｎ ｅ ｍ ｅｎ ｃ ｉ ｓｙ ａ ａ ２ ０ ９ Ａ ｓｒ ｃ Ｔ ｒｅ ｍ ｎ ｃ ｎ ｌａ ｔ ｏ ｉ ｏ ｓ ｂ ｐ ５ ａ ｉ ｎ ｕ ｎａ ｖ ｕ （ Ｉ ｂ ｔａ ｔ ｈｅ ｏ ｏ ｌ ａ ｎｉ ｄｅ ｔ ｕ ｔ ｅ Ｈ ｖ ｎ ｉ ｅ ｚ ｉ ｓ Ａ Ｖ—Ｈ ）ｗ ｒ ｅ ｅ ｐ ｄ ｂ ｕ ｉ Ｐ ／ ｙ ｌ ａ ｃ Ｉ ｏ ｂ ｓ ｙ ａ ｆ ｌ ｒ ５ ｅ ｄ ｖ ｌ ｅ ｙ ｆｓ ｇ Ｓ ２ ０ ｍ ｅ ｍ ｅ ｓ ｅ ｏ ｎ ｏ
免疫 后 第 １ ２天采 血 ， 和兔 子按 常 规 免疫 。 狗
１ 西安 市 现 代 农 业 综 合 开 发 总 公 司 西安 ７０２ ） １０ １
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凝 效 价结 果 见 表 １ 。
表１ 免疫 后的三种 动物血凝效 价 （ 浓度 为６ ｇ ｍ ） ｍ ／ Ｉ
采 用 血 凝抑 制 试 验 。
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种 种 原 因 ， 免 疫程 序 不 规范 等 ， 如 免疫 失 败 时有 发 生 。 １ ５ 免 疫金 电镜技 术 ．
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中 动 检 ２ ２ 第 ｌ卷 期 国 物 疫 ０ 年 ９ 第８ ０
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３ ）中国农 业科学院哈 尔滨兽 医研 究所 ４ ）内蒙古生物药品厂 呼和浩特
哈 尔滨 １０ ０ ５０ １
注 ：驴抗 细小病毒免疫球 蛋 白为浓缩 样品
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学 实验 动 物 中心 及 中 国兽 药 监察 所 。
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Ｉ硪蕾 ：： Ｅ 三三 ｌ
陈 惠茹 李 宏 ７０３ ） １０ ２
摘要
用关 中驴制备抗 犬细小病毒 （Ｐ ） Ｃ Ｖ 免疫球蛋 白， 预防和治疗犬 Ｃ Ｖ感染。 Ｐ 制备 Ｃ Ｖ抗原复合物 ， Ｐ 通
过免疫驴 ， 用纯化方法从驴血清 中提取特异性抗体 （ Ｇ ， Ｉ ） 经过物理化学检 定、 ｇ 血清学、 免疫金电镜技术、 动物效 力 实验 。免 疫驴 均 可 产 生特 异 ＩＧ， 疫金 电镜 可观 察到 抗 原抗 体 免 疫复合 物 ； ｇ 免 血凝 抑 制 试验 （ ） １： １（ ＨＩ≥ ５ ２
浓 缩 浓度 为 ６ ｇ ｍ ） 可保 护 犬免 受 Ｃ Ｖ攻 击 ； ０ｍ ／ Ｌ ； Ｐ 室温 保存 半 年 ， ￣ ４Ｃ两年 效 价 不 变。 已成 功地 应 用 Ｃ Ｖ免 疫 驴 Ｐ
制 备 出高效 价 特异 性 抗 Ｃ Ｖ—Ｉ Ｐ ｇ Ｇ。 关键 词 犬 细 小病 毒 ； Ｇ Ｉ ｇ
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接 触 性传 染 病 ，临床 常 出现 出 血性 、 死性 肠 炎症 状 ， 测 定 蛋 白浓 度 。 坏 对 养 犬业 危 害 极 大 。 种 病 毒 目前 有 弱 毒疫 苗 ， 由于 １ ４ Ｉ 该 但 ． ｇ Ｇ滴 度检 测 这就 给 此类 疫 病 传播 流 行提 供 了条 件 ，从 而 严 重 影 响 １６ 稳 定性 试 验 ． 养 犬 业 的健 康 发 展 ，造 成 很 大 的经 济 损 失 。有 报 道 用 １６ １ 耐 热 试 验 提 纯 浓 缩 后 Ｉ 浓 度 为 ６ ／ ．． ｇ Ｇ（ ０ｍｇ 犬 、 、 、 ［ 等 动物 制 作病 毒 性 抗体 ， 马 兔 猪 １ 。 而用 驴 制 ｍ ） ｐ ． ， Ｅ ，Ｈ７ ８ 置不 同温 度 ２ ｉ ， ０ｍ ｎ 测抗 体 滴 度 。 作 抗 体 未见 有 报 道 。本 文 成功 地 用 细 小病 毒 免 疫 关 中 １６ ２ 耐 酸 试 验 提 纯 后 Ｉ ．． ｇ Ｇ，用 不 同 Ｄ 的 ０ ０ ５ Ｈ ． １ 驴， 制备 特 异 性 Ｉ 现报 告 如 下 。 ｇ Ｇ。
１ 材 料 和方 法 １１ 病 毒 ． １ ２ 免疫 ． ｍ ｌＬ ｒ —Ｈ １ 释成 １ ｇ ｍ ， ３ ℃孵 育 ０—６ 。 ｏ ｉ ／ Ｔｓ Ｃ稀 ／ Ｌ置 ７ ｍ ｈ 每 小 时取 出 １ ， 即用 ２ ｏ／ ｒ 管 立 ｍ ｌＬＴｉ ｓ中和 至 ｐ ． ， Ｈ ７ ０ 测 １ ６ ３ 纯 化 浓缩 后 的 ＩＧ， ．． ｇ 放室 温 及 ４Ｃ， ３个 月检 ￣ 每