应用ABO和STR基因分型技术鉴定混合血样

应用和基因分型技术鉴定混合血样
张旋吴国光喻琼邓志辉苏宇清程良红
摘要目的探讨应用分子生物学方法鉴别混合血液样本的价值方法应用基因分型和基因分型方法检测份血样标本标本的个基因座和基因型结果标本为型血样而标本为标本与另一型或型血的混合样本结论和基因分型等分子生物学技术可为疑难样本的鉴定提供一种简便快速可靠
的方法
关键词混合血型序列特异性引物扩增基因分型复合扩增
中图分类号文献标识码文章编号
血型系统中最常见的表型有四种红细定型均为型送检到本单位希望鉴定标本和
胞膜上的抗原以及血清中的抗体存在一定的标本是否为同一标本及标本是与何种血型的血
规律因此临床上采用正反定型的方法确保血型鉴液混合
定准确无误某医院检验科对某患者的血样标本方法
进行血型鉴定结果反定型为型正定型为血型血清学方法正反定型抗人球蛋白试验型均部分凝集属混合外观现象另单独抽测定参照文献
取该患者的血样标本作血型鉴定正反定型均法测定基因型提取采为型笔者应用复合扩增技术对标本和用快速抽取盒终浓度调节至
标本进行了样本分析现报告如下
材料与方法
血型基因分型引物系美国公司设计合成鉴定特异性引物设计参照已公布的血型基因顺序循环参数采用热启动
材料某医院检验科对某患者的血样标本技术即预温然后
进行血型鉴定结果反定型为型正定型为个循环最后于延伸电泳
型均为部分凝集属混合外观现象另单独
抽取该患者的血样标本
作血型鉴定结果正反采用
确定结果
琼脂糖电泳紫外灯下
表基因分型参数
检测基因或外显子反应混合液缩写受检核苷酸位置产物长度
缺失
缺失
基因分型将上述步骤提取的样本共个基因座及性别基用超纯水稀释倍采用美国公司因座扩增采用型扩增仪按试剂盒说明书试剂盒复合扩增操作扩增产物经型基因分析仪电泳分
析并应用
软件进行基因分型
和自动分析作者单位广东省深圳市输血医学研究所
结果
作者简介张旋
主要从事医学检验工作男安徽六安人副主任技师本科
血型血清学结果
正反定型标本正定为型反定为型
临床输血与检验年月第卷第期
标本正反定型相符为型和四条特异性条带结果为标本直接抗人球蛋白试验自身细胞呈型标本则出现三条特异性条带
结果为型见图
基因分型结果内对照为标本
图出现
血型基因分型电泳图谱
分型结果见表电泳基因峰图谱见图
图电泳基因峰图谱
表个基因座及性别基因座讨论分型结果
基因座标本标本
基因组中具有长度多态性的是广泛存在于人类
序列
基因
座遵循孟德尔遗传规律呈共显性遗传是广泛应
用于法医学个体识别和亲子鉴定的重要遗传标记
系统基因座的分型是目前国内外应用
于个体识别和亲子鉴定的主要技术也是能够较好解决混合样本个体识别问题的技术手段之一
采用荧光法检测基因座纯合子应有个基因峰杂合子有个基因峰观察本实验中标本的
分型结果个等位基因
个
个基因座
基因座中有
出现
个出现
个等位
基因表现为嵌合体这样的结果应考虑两种可能一种是来自不同个体的混合样本或污染样本另一
种是骨髓移植后受者的血液样本而该患者的既往
病史中未做过骨髓移植提示标本为混合样本或增技术判定混合样本的前提下根据及其亚污染样本标本的分型结果符合基因型的突变位点设计出检测方法不但可荧光法检测的一般特点且每个基因座的等位基因以检测基因型而且可以应用于血清学疑难
均包含于标本相应的基因座中提示标本为标标本的鉴定从本次实验结果可知基因分型本与其他血液的混合样本技术克服了以往血型血清学方法的限制为疑难血从血清学试验可以初步确定标本为型型譬如正反定型不符标本的鉴定提供了一种方
标本为型判断这是两个不同的标本但标本便快速和可靠的检测方法
在镜检下出现少量红细胞游离经
参考文献
基因分型在标本中检出四种基因标本中有三种基因而型正常样品的基因分型应该只有肖星甫译美国血库协会技术手册委员会编输血技术手册北京人民卫生出版社
三种基因因此分析标本可能是
型血与或型血的混合样本
有文献报道中国汉族群体中和
四种等位基因的基因频率分别为
如果是标本
型与型血混合根据上述基因频率推断标本
型与型血混合的概率远远大于与
型血混合的概率但
候一平法医常染色体分型中国法医学杂志
是基因反应图谱中并未出现特异性条带
侯光伟姜先华许大勇等荧光标记复合扩增因此标本是标本型与型标本混合的分析混合血样品中国法医学杂志
概率也远远大于标本与型标本混合的概率喻琼基因分型技术首次应用于类孟买型家系基也就是说这个标本很可能是标本与另一型血因的研究罕少疾病杂志
的混合样本收稿日期基于以上的遗传学基础在应用复合扩校对王虹
读者作者编者基金项目课题的来稿须附相关证明材料的通知
部分作者的来稿所涉及的课题获得国家或省部级基金资助文章在本刊发表时可注明其基金项目名
称和项目编号为规范其管理请作者投稿时必须附上相关项目资助情况证明材料复印件份对各项基金项目的文稿一经审稿专家评审合格后我刊将优先快速录用谢谢合作
本刊编辑部
应用ABO 和STR 基因分型技术鉴定混合血样
作者： 作者单位： 刊名： 英文刊名： 年，卷(期)： 被引用次数：
张旋， 吴国光， 喻琼， 邓志辉， 苏宇清， 程良红 518035,广东省深圳市输血医学研究所 临床输血与检验
JOURNAL OF C LINICAL TR ANSFUSION AND LABORATORY MEDICINE 2005,7(1) 1次
肖星甫;美国血库协会技术手册委员会 输血技术手册 1985
2.C hester MA;Martin LO The ABO blood grou p gene: A locus of considerable genetic diversity [外文 期刊] 2001(03)
Procter J;Crawford J;Bunce M A rapid molecular method (polymerase chain reaction with sequence-specific primers) to genotype for ABO blood grou p and secretor status and its potential
for organ transplants [外文期刊] 1998(05)
4.候一平 法医常染色体STR 分型[期刊论文]-中国法医学杂志 2001(01)
5.侯光伟;姜先华;许大勇 荧光标记S TRs 复合扩增分析混合血样品[期刊论文]-中国法医学杂志 2001(01)
6.喻琼 基因分型技术首次应用于类孟买型家系ABO 基因的研究[期刊论文]-罕少疾病杂志 2003(02) 1.安仕萍.闫莉娜 测序技术在人类白细胞抗原基因分型领域的应用进展[期刊论文]-医学综述 2007(15)
本文链接：/Periodical_lcsxyjy200501009.aspx。