生化技术名词解释

生化技术名词解释
生化技术名词解释自我整理
1.酶活性：酶催化某些化学反应的能力。

2、酶活力单位：每分钟催化生成一微摩尔产生所需要的酶量为一个酶活力单位。

3、
酶的比活力：每毫克酶蛋白所含有的酶活力单位娄，是酶制剂纯度的一个指标4、回收率：纯化过程中酶活性的收率
5.纯化位数：指纯化后的酶比活性与纯化前的酶比活性之比
6、沉淀：是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程，可以有选择性的沉淀杂质或
有效成分。

7.可逆沉淀：在沉淀过程中，活性组分的结构和性质没有改变。

在适当的条件下，它
们可以重新溶解形成溶液。

8、不可逆沉淀：在强烈沉淀条件下，不仅破坏了蛋白质胶体溶液的稳定性，而且也
破坏了蛋白质的结构和性质，产生的蛋白质沉淀物不可能再重新溶解于水溶液。

加热沉淀、强酸碱沉淀、重金属盐沉淀、生物碱沉淀。

（沉淀物一般是杂质）
9.盐析：向溶液中加入中性盐以沉淀生物大分子的过程。

10、层析技术：亦称色谱技术，是一种物理的分离方法。

是利用混合物中各组分的物
理化学性质的差别，使各组分以不同程度分布在两个相中，其中一个相为固定的(称为固
定相)，另一个相则流过此固定相(称为流动相)并使各组分以不同速度移动，从而达到分离。

11.色谱柱：带有固定相的管（玻璃管或不锈钢管）称为色谱柱
12、固定相：层析的一个基质，可以是固体物质（如吸附剂，凝胶，离子交换剂等），也可以是液体物质（如固定在硅胶或纤维素上的溶液），这些基质能与待分离的化合物进
行可逆的吸附，溶解，交换等作用。

13.流动相：在色谱过程中，液体、气体或超临界流体推动待分离物质在固定相上向
一个方向移动。

14、层析:当流动相中样品混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用，由于各组
分在性质和结构上的差异，与固定相相互作用的类型、强弱也有差异，因此在同一推动力
的作用下，不同组分在固定相滞留时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定相中流出。

15.操作容量（交换容量）：当组分与基质（固定相）的反应在一定条件下达到平衡时，基质上存在的饱和容量。

（值越高，基质对物质的亲和力越强。

）
16、分配系数：在一定条件下，某种组分在固定相和流动相中含量（浓度）的比值。

用k表示。

K=固定相溶质浓度/流动相溶质浓度=CS/cm
凝胶层析，分配系数实质上表示某个组分在内水体积和在外水体积中的浓度分配关系。

17.迁移率（特定移位值）：在一定条件下，一个组件在固定相中移动的距离与移动
相自身在同一时间移动的距离之比。

以RF表示。

K↑→射频↓
18、vt＝vo＋vi＋vg
vo体积：外部水指凝胶柱中凝胶颗粒周围的空间体积，即凝胶颗粒之间的液体流动相体积。

也就是说，柱外凝胶颗粒外水相的体积。

它可以通过测量完全膨胀的大分子物质的
洗脱体积来确定，例如分子量为200万的蓝色葡聚糖-2000，所有类型的凝胶都会被堵塞。

vi：内水体积，是指凝胶颗粒中孔穴的体积，固定相体积就是指内水体积。

即凝胶颗
粒内部所含水相体积。

可用硫酸铵、n-乙酰酪氨酸乙酯或其它与凝胶无吸附力的小分子物
质测定。

VG：基质体积指凝胶颗粒的实际骨架体积。

也就是凝胶本身的体积。

Vt：床的体积是
凝胶柱能容纳的总体积。

πr2h.Ve：洗脱体积是指洗脱样品中某一组分所需的洗脱液体积，即从加入样品到组分出现最大浓度峰时的体积。

首先洗脱大分子，ve值和KAV值较小；当洗脱小分子时，ve值较大，KAV值也较大。

对于完全排斥的大分子，ve=VO，KAV=0；对于
完全渗透的小分子，ve=VT，KAV=1。

一般KAV值在0-1之间，例如，KAV值大于1，这意
味着一些物质吸附在凝胶上，ve>vt。

19、塔板理论：假定：
1）托盘之间的不连续性；2）塔盘间无分子扩散；
3）组分在各塔板内两相间的分配瞬间达至平衡，达一次平衡所需柱长为理论塔板高
度h；
4）组件在所有托盘上的分配系数相同；
5）流动相以不连续方式加入，即以一个一个的塔板体积加入。

当塔板数n较小时，组分在塔中的分布平衡较小，曲线呈峰形，但不对称；当托盘数n>50时，峰值形状接近正态分布。

理论塔板数：
结果表明，理论塔板高度h越小，理论塔板数N越多，色谱峰越窄，柱效率越高。

分
离度大，提高了柱效率
20、速率理论：
U是流动相的线速度；a、 B和C是常数，其中a-分别代表涡流扩散系数；B——分子扩散系数；
c―传质阻力系数（包括液相和固相传质阻力系数）。

20.吸附柱色谱法：这是一种色谱法，使用固体吸附剂作为固定相，有机溶剂或缓冲液作为流动相来分离混合物，因为吸附剂对不同物质的吸附能力不同
21、薄层层析：以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相，按纸层析操作进行展层的一种层析方法
22.聚酰胺薄膜色谱法：聚酰胺在极性物质上的吸附是由于与分离物质形成氢键。

选择合适的分层显影剂，使分离物在聚酰胺膜表面吸附、解吸、再吸附、再解吸，从而使分离物分离，达到分离目的。

23、疏水层析：是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立起来的层析技术。

24.离子交换色谱法：以离子交换器为固定相，在可逆交换过程中，根据流动相中的组分离子与交换器上的平衡离子之间的结合力差进行分离的色谱法
25、交联度：每种交联剂在基质中占的百分数
26，吸水或膨胀：例如，葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶：g25，阿拉伯后面的G数字代表凝胶吸水率（毫升水/克干胶）乘以10。

27、交换容量：离子交换剂能提供交换离子的量，它反映离子交换剂与溶液中离子进行交换的能力。

28.凝胶过滤：使用一些化学惰性多孔网络结构材料（多孔凝胶填料）作为介质，可以根据分子量分离和纯化分离出的混合物。

29、分组分离是指将样品混合物按分子量大小分成两组，一组分子量较大，另一组分子量较小。

例如蛋白样品的脱盐或蛋白、核酸溶液去除小分子杂质，以及一些注射剂去除大分子热源物质等等。

30.部分分离是指分离一组具有相似分子量的组分。

31.分配系数和各种体积
对于某一型号的凝胶，在一定的分子量范围内，各个组分的kav与其分子量的对数成线性关系：kav＝－blgmw＋c（其中b、c为常数，mw表示物质的分子量。

）
Ve和KAV也有线性关系：Ve=-b'lgmw+C'（其中b'和C'是常数）排除极限：不能进入凝胶颗粒孔的最小分子的分子量。

例如，sephadexg-50的排除限制为30000。

这表明分子
量大于30000的分子将直接从凝胶颗粒中去除。

33、分级分离范围：表示一种凝胶适用的分离范围，对于分子量在这个范围内的分子，用这种凝胶可以得到较好的线性分离。

例如，Sephadex G-75对球形蛋白质的分离范围为3000-70000，这意味着分子量在该
范围内的球形蛋白质可以通过Sephadex G-75更好地分离。

34、吸水率是指1g干的凝胶吸收水的体积或者重量，但它不包括颗粒间吸附的水份。

35、床体积是指1g干的凝胶吸水后的最终体积。

36、亲和层析（affinitychromotography）：利用生物大分子和固定相表面存在某种特异性吸附而进行
选择性分离的一种生物大分子分离的层析方法。

37.聚焦层析成像：基于等电点聚焦法开发。

它是一种基于蛋白质等电点差异和离子
交换技术的高容量色谱法，可分离数百毫克蛋白质样品。

该方法不仅具有聚焦性能，而且
具有样品集中、分辨率高等优点
38、聚焦效应：蛋白质按其等电点在ph梯度环境中进行排列的过程。

39、多缓冲交
换剂：也是一种离子交换剂，带有多种电荷基团的配体载体偶联而制成的。

40、多缓冲剂：是一系列等电点既相异又相近的具有多胺基，多羧基的脂肪链化合物构成的
41.气相色谱法：使用气体作为流动相。

待测样品转化为气体后，进入色谱分离柱顶部，待测样品（气体）进入色谱分离柱，用惰性气体（指与待测样品不反应的气体，仅起
携带气化样品的作用，也称载气）进行分离。

42、色谱流出曲线：由检测器输出的电信号强度对时间作图，所得曲线。

43、色谱峰：色谱流出曲线上的突起部分
44.死时间：从进样到固定相未吸附或溶解的物质进入色谱柱的最大值的时间。

它与
柱的空隙体积成正比。

流动相平均线速ū：ū=l/t0r
45.保留时间：样品从进样到柱出现峰值后的时间。

46.校正保留时间：组件的保留时
间减去停滞时间tr'=tr-t0r
47、死体积：色谱柱在填充后，柱管内固定相颗粒间所剩留的空间、色谱仪中管路和
连
接头空间和探测器空间之和。

可由死时间与色谱柱出口的载气流速fco（cm3min-1）计算。

v0r=t0rfco（气相）48、保留体积：从进样开始到被测组分在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相的体积：
vr=trfco
49.校正保留体积：成分的保留体积减去死体积。

虚拟现实？=Vr-v0r=tr'fco50，相
对保留值：组分2的校正保留值与组分1的校正保留值之比。

r2,1=tr2'/tr1'=vr2'/vr1'？
51.面积宽度：
1.标准偏差?：即0.607倍峰高处色谱峰宽的一半。

2.半峰宽W1/2：即对应于半峰高的峰宽。

它与标准偏差之间的关系为：W1/2=2.354？
3.峰底宽度W：即基线色谱峰两侧拐点切线截距之间的距离。

它的标准差是多少？W=4？
52、分离度(r)：相邻两组合色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽总和之半的比值。

r=2(tr2-tr1)/（w1+w2）
R值越大，两个相邻组件的分离越好。

53.电泳技术：根据各种带电粒子在电场中的迁移速度来分离物质的一种实验技术。

54、dna印记：一种将电泳分离的dna片段转移到固相支持物上用探针与靶dna进行
杂交的技术,又称southern杂交。

55.单克隆抗体：由产生抗体的细胞和骨髓瘤细胞通过无性繁殖融合形成的杂交a细
胞群产生。

因此，其免疫球蛋白属于同一类型，质地纯正。

而且，它针对某一抗原决定簇，因此具有很强的特异性和一致的亲和力。