虎杖化学成分研究

[2]　石　钺,石任兵,陆蕴如,等.银翘散抗流感病毒有效部位群中
黄酮类成分研究.中国中药杂志,2001,26(5):320.
[3]　王海燕,杨峻山.牛蒡子化学成分研究.药学学报,1993,28
(12):911.
[4]　Dong2lei Liu,Sui2xu Xu,Wei2fang Wang.A Novel Lignan G lu2
cosides from Forsythia suspense Vahl.Journal of Chinese Phar2 maceutical Science,1998,7(1):49.
[5]　Nishibe S,Okabe K,Tsukamoto H,et al.The Structure of
Forsythiaside Isolated from Forsythia suspense.Chem Pharm
Bull,1982,30(3):1048.
[6]　Nakanishi T,Inada A,Kambayashi K,et al.Flavonoid G lyco2
sides of the Roots of Glycyrrhiz a uralensis.Phytochem,1985, 24(2):339.
[7]　Yahara S,Nishioka I.Flavonoid G lycosides from Licorice.Phy2
tochem,1984,23(9):2108.
[8]　Wagner H,Chari V M,Sonnenbichler J.13C2NMR2Spektren
Natürlich Vorkommender Flavonoide.Tetrahedron Lett,1976,
21:1799.
[9]　梁　鸿,张如意.圆果甘草化学成分的研究.北京医科大学学
报,1992,24(5):399.
[10]　吴立军,李　铣,王素贤,等.13CNMR在黄酮类化合物结构研
究上的应用.沈阳药学院学报,1991,8(3):219.
[11]　于德泉,杨峻山.分析化学手册.第二版.第七分册.核磁共振
波谱分析.北京:化学工业出版社,2000.825.
[12]　王宝　.中成药质量标准与标准物质研究.北京:中国医药科
技出版社,1994.538.
[13]　彭　勇,梁少伟,李文魁,等.国外抗流感病毒研究近况.国外
医学·植物药分册,1999,14(1):7.
Isolation and Elucidation of Chemical Constituents
with Antiviral Action from Yinqiaosan on Influenza Virus
SHI Yue1,SHI Ren2bing2,L IU Bin2,LU Yun2ru2,DU Li2jun1
(1.School of Life Sciences and Engineering,Tsinghua University,Beijing　100084,China;
2.School of Chinese Pharmacology,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing　100029,China)
[Abstract]　Objective:To study the chemical constituents with antiviral action from Y inqiaosan on influenza virus.Method: Constituents were isolated by different kinds of column chromatography and their structures were elucidated with chemical and s pec2 tral methods.R esult:Eleven chemical constituents were isolated and elucidated as arctiin,phillyrin,forsythiaside,liquiritigenin,liquir2 itin,genistein,formononetin,daidzein,glycitrin,3,3′,42tri2omethlellagic acid and chlorogenic acid.Conclusion:G enistein,daidzein, glycitrin and3,3′,42tri2omethlellagic acid were isolated from Y inqiaosan for the first time.
[K ey w ords]　Y inqiaosan;anti2influenza virus;chemical constituents[责任编辑　李　禾]
虎杖化学成分研究(Ⅰ)
刘晓秋1,于黎明2,吴立军1
(1.沈阳药科大学中药学院,辽宁沈阳　110016;2.大连市药品检验所,辽宁大连　116021)
[摘要]　目的:对虎杖化学成分进行研究。

方法:硅胶柱及薄层色谱分离,光谱分析鉴定结构。

结果:分离并鉴定了5个化合物。

结论:其中化合物Ⅱ为首次从该属植物中分离鉴定。

[关键词]　虎杖;化学成分
[中图分类号]　R284.1　[文献标识码]　A　[文章编号]100125302(2003)0120047203
虎杖Polygonum cuspi dat um Sieb.et Zucc.是蓼科蓼属植物,具有祛风利湿,散瘀定痛、止咳化痰等
[收稿日期]　2002203205
[通讯作者]　吴立军　Tel:(024)23907685　E2mail:wulijun-111@ 功效[1]。

虎杖中主要含有蒽醌、二苯乙烯类化合物[2,3]。

我们对虎杖进行了化学成分研究,从中分离鉴定出72羟基242甲氧基252甲基2香豆素(72hy2 droxy242methoxy252methylcoumrin,Ⅰ),5,72二羟基2 1(3H)2异苯并呋喃酮[5,72dihydroxy21(3H)2isoben2
·
7
4
·
zofuranone,Ⅱ],62羟基芦荟大黄素(citreorosein,Ⅲ),大黄素甲醚282O2β2D2葡萄糖苷(physcion282O2β2D2glucoside,Ⅳ),白藜芦醇(resveratrol,Ⅴ)。

其中Ⅱ为首次从该属植物中鉴定的化合物。

1　实验材料与仪器
虎杖饮片购自沈阳市中药饮片厂,由沈阳药科大学孙启时教授鉴定为P.cuspi dat um。

Yanaco MP2S3显微熔点测定仪(未校正);Bruker IFS255型红外分光光度计;Bruker ARX2300型核磁共振仪。

薄层层析用硅胶H(10～40μm),柱层析用硅胶(200～300目)均为青岛海洋化工厂生产。

层析用试剂均为分析纯。

2　提取分离
取虎杖2kg用适量水提取3次,浓缩提取液,加乙醇沉淀,过滤。

滤液回收乙醇后,依次用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。

乙酸乙酯萃取物经过反复柱层析,制备薄层等方法,分离得到5个化合物。

3　结构鉴定
化合物Ⅰ　白色结晶(氯仿2甲醇),mp298～300℃(分解),紫外灯(254nm)下显蓝色荧光, G ibb’s反应阴性。

异羟肟酸铁反应阳性。

1H2NMR (300.13MHz,DMSO2d6)δ:2.53(3H,s,52CH3), 3.92(3H,s,42OCH3),5.59(1H,s,H23),6.57,6.54 (2H,d,H26,H28);13C2NMR(75.47MHz,DMSO2 d6):161.82(C22),86.78(C23),169.44(C24), 138.28(C25),116.06(C26),160.43(C27),100.54 (C28),156.20(C28a),106.15(C24a),56.60(42 OCH3),23.08(52CH3)。

以上理化常数、1H2NMR 谱数据与文献[2]中报道的72羟基242甲氧基252甲基香豆素(72hydroxy242methoxy252methylcoumrin)基本一致,13C2NMR谱数据与结构相符。

化合物Ⅱ　白色针晶(氯仿2丙酮),mp239～240℃,紫外灯(254nm)下蓝紫色荧光。

1H2NMR (300.13MHz,DMSO2d6)δ:5.10(2H,s,H23),6.28 (1H,br s,H26),6.33(1H,br s,H24),10.37(1H,s, 52OH),10.45(1H,s,72OH)。

13C2NMR(75.47 MHz,DMSO2d6)δ:168.60(C21),68.21(C23), 100.25(C24),151.57(C24a),164.64(C25),102.32 (C26),158.23(C27),102.95(C27a)。

以上数据与文献[4]中报道的5,72二羟基(3H)2异苯并呋喃酮[5, 72dihydroxy21(3H)2isobenzofuranone]一致。

该化合物为首次从本属植物中鉴定。

首次用2D2NMR确定了文献中未明确归属的氢信号。

数据见表1。

表1　化合物Ⅱ的13C2NMR,1H2NMR及HMBC数据
No.13C2NMR1H2NMR H2MBC 1168.63　H23
368.21 5.10H24
3a151.59　H23
4100.20 6.331)H23,H26,52OH
5164.71　H26,52OH
6102.32 6.281)H24,52OH,72OH
7158.33　72OH,H26
7a102.89　H23,H26,72OH
52OH　10.371)C24,C26
72OH　10.451)C26,C27
注:1)为文献[4]中未明确归属的氢信号
化合物Ⅲ　橙色针晶(氯仿2丙酮),mp278～279℃,紫外灯下显橙色荧光,三氯化铁2铁氰化钾显蓝色。

1H2NMR(300.13MHz,DMSO2d6)δ:7.22 (1H,br s,H22),7.61(1H,br s,H24),7.10(1H,br s, H25),6.57(1H,brs,H27),4.60(2H,s,2CH2OH): 13C2NMR(75.47MHz,DMSO2d
6
)δ:161.35(C21), 120.65(C22),152.74(C23),116.95(C24),132.78 (C24a),113.93(C25),164.37(C26),107.81(C27), 165.54(C28),189.58(C29),181.22(C210),108.74 (C28a),108.85(C29a),135.00(C210a),61.91(32 CH2OH)。

以上理化常数、1H2NMR谱数据与文献[2]中报道62羟基芦荟大黄素(citreorosein)一致, 13C2NMR谱数据与结构相符。

化合物Ⅳ　黄色针晶(氯仿2甲醇),mp230～232℃,紫外灯(254nm)下显橙红色荧光。

1H2NMR (300.13MHz,DMSO2d6)δ:7.48(1H,brs,H24), 7.36(1H,d,J=2.5Hz,H25),7.19(1H,d,J=2.5 Hz,H27),7.16(1H,br s,H22),5.14(1H,d,J=7.5 Hz,H21′),2.41(3H,s,32CH3),3.96(3H,s,62 OCH3);13C2NMR(75.47MHz,DMSO2d6)δ:161.66 (C21),125.14(C22),147.06(C23),119.30(C24), 132.07(C24a),106.59(C25),164.72(C26),107.51 (C27),160.68(C28),114.49(C28a),186.41(C29), 114.41(C29a),181.84(C210),136.34(C210a), 21.33(32CH3),56.04(C2OCH3),100.93(C21′), 73.29(C22′),77.46(C23′),69.89(C24′),76.55(C2 5′),60.84(C26′)。

该化合物为大黄素甲醚282O2β2 D2葡萄糖苷(physcion282O2β2D2glucoside)。

首次应用2D2NMR技术确定了蒽醌苷中糖和取代基的连接位置,并对文献[4]中未明确归属的碳信号进行了
·
8
4
·
确切归属,纠正了文献中归属错误的碳信号。

具体数据见表2。

表2　化合物Ⅳ的13C2NMR,1H2NMR及H2MBC数据No.13C2NMR1H2NMR H2MBC
1161.662)　H22,12OH
2124.157.16H24,32CH3,12OH
3147.06　32CH3
4119.307.48H22,32CH3
4a132.071)
5106.597.36H27
6164.72　H25,H27,62OCH3
7107.517.19H25
8160.682)　H27,H2G lu21′
8a114.491)　H25,H27
9186.41
9a114.491)　H22,H24,12OH
10181.84　H24,H25
10a136.341)　H25
12OH　13.01　
32CH321.33 2.41H22,H24
62OCH356.04 3.96　
G lu21′100.931) 5.14　
G lu22′73.291)
G lu23′77.461)
G lu24′69.891)
G lu25′76.551)
G lu26′60.841)
注:1)为文献中未明确归属的碳信号　2)为文献中归属错误的碳信号
化合物Ⅴ　白色针晶(氯仿2丙酮),mp256～257℃,紫外灯(254nm)下显紫蓝色荧光。

1H2NMR (300.13MHz,DMSO2d6)δ:9.56(1H,s,C24’2OH), 9.20(2H,s,32OH,52OH),7.39(2H,d,J=8.5Hz, H22’,H26’),6.74(2H,d,J=8.5Hz,H23’,H25’),6.93 (1H,d,J=16.3Hz,乙烯H2β),6.80(1H,d,J= 16.3Hz,乙烯H2α),6.38(2H,d,J=2.0Hz,H22, H26),6.11(1H,t,H24):13C2NMR(75.47MHz, DMSO2d6)δ:126.35(C2α),128.58(C2β),139.97(C2 1),104.99(C22,C26),159.21(C23,C25),102.46 (C24),128.77(C21’),128.58(C22’,C26’),116.22(C2 3’,C25’),157.92(C24’)。

以上数据与文献[5]中报道的白藜芦醇(resveratrol)一致。

[参考文献]
[1]　中国药典.一部.2000.167.
[2]　Y oshiyu K i K imura,Mitsugi K ozawa,K imiye Baba,et al.New
Constituents of Roots of Polygonum cuspi dat um.Planta Med, 1983,48(3):164.
[3]　朱廷儒,王素贤,裴月湖,等.中药虎杖抗菌活性成分研究.中草
药,1985,16(3):21.
[4]　Talapatra Bani,Monoj K,Roy,et al.Structures of Two New
Phthalides from A naphali dis contorta Hook f.Indian J Chem, 1980,19B:927.
[5]　Mannila Erkki,Talvitive Antti Erkki K olehmainen.Anti2
leukaemic Compounds Derived from Stilbens in Picea abies
bark.Phytochemistry,1993,33(4):813.
[责任编辑　李　禾]
高效液相色谱法测定不同产地葛根中葛根素、
大豆苷及大豆苷元的含量
金文姗,谈钰元,陈有根,王　妍
(北京裕科植物中间体开发有限公司,北京　100007)
[摘要]　目的:建立同时测定葛根中葛根素、大豆苷及大豆苷元的含量测定方法。

方法:选用SYMMETR Y2 C18色谱柱(3.9mm×150mm,5μm),甲醇21%醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,紫外检测波长为250nm,HPLC法。

结果:平均回收率分别为101.7%,100.7%,101.7%(n=3),RSD分别为0.43%,0.82%,1.50%(n=3)。

结论:本法简便,准确,快速;适用于含葛根素、大豆苷及大豆苷元的葛根药材及制剂的质量控制。

[关键词]　二极管阵列高效液相色谱法;梯度洗脱;葛根素;大豆苷;大豆苷元;野葛
[中图分类号]　R282;R284.1　[文献标识码]　A　[文章编号]100125302(2003)0120049203
[收稿日期]　2002212210
[通讯作者]　Tel:(010)64052858　Fax:(010)64052855 E2mail:jinwenshan@
葛根为豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.) Ohwi或甘葛藤P.thomsonii Behth.的干燥根。

用于外感发热头痛、颈强等。

现代研究证实,葛根中的
·
9
4
·。