乳酸脱氢酶测乳酸的方法
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,简称LDH)是一种酶,它在乳酸的代谢中起着关键作用。
测量乳酸浓度和LDH活性对于监测细胞代谢和疾病诊断非常重要。
以下是一种常见的用于测定乳酸浓度的方法:
### 酶联免疫吸附法(Enzymatic Assay)
这是一种基于酶催化反应的常规测定方法,包括以下步骤:
1. **样品准备:** 采集血液、细胞培养液或其他液体样品。
必要时,对样品进行适当的处理,以提取乳酸。
2. **试剂准备:** 准备LDH酶联试剂盒,其中包括LDH酶、辅酶、底物和其他必要的试剂。
3. **混合:** 将样品和试剂混合,使LDH与样品中的乳酸反应。
4. **酶催化反应:** LDH催化乳酸与辅酶之间的反应,产生氧化的底物。
5. **测量吸光度:** 使用分光光度计或酶标仪器测量在特定波长下产生的吸光度变化。
吸光度的变化与乳酸浓度成正比。
6. **计算浓度:** 使用标准曲线或浓度计算公式,将吸光度转化为乳酸的浓度。
请注意,具体的操作步骤和使用的试剂可能因不同厂家的试剂盒而异,因此在进行实验时应遵循所选试剂盒的操作手册和说明。
此外,还有其他方法可用于测量乳酸浓度,例如电化学法和核磁共振(NMR)法。
选择适当的方法取决于实验的具体需求和设备的可用性。