BVDV非结构蛋白NS4B的结构分析及其蛋白表达与鉴定

BVDV非结构蛋白NS4B的结构分析及其蛋白表达与鉴定
柳凯月;董亚尊;吴双双;马一瑄;刘鸿雁;王北艳;于立权;宋佰芬;马金柱
【期刊名称】《黑龙江八一农垦大学学报》
【年(卷),期】2024(36)1
【摘要】NS4B是牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的非结
构蛋白,为研究BVDV在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,对ns4b进行了结构分析、表达载体构建及蛋白表达。

采用Prot-Param、TExpasy和SignalP-4.1等软件分析NS4B蛋白的氨基酸组成、疏水性和空间结构。

根据Genebank上公布的BVDVns4b基因序列设计引物,利用PCR方法获得ns4b基因片段,连接到
p3×Flag-CMV10表达载体上,构建重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,经双酶切与
测序鉴定正确后,将p3×FlagCMV10-ns4b转染到HEK-293T细胞中,利用Western blot检测NS4B蛋白的表达。

结果表明BVDV NS4B蛋白分子量为38.4 kDa,不存在信号肽,有49个磷酸化位点和6个糖基化位点,是一种主要由α-螺旋和无规则卷曲结构组成的疏水性稳定蛋白。

成功构建了重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,并且p3×Flag-CMV10-ns4b在HEK-293T细胞中成功表达,为今后研究
NS4B蛋白在BVDV感染宿主细胞及其免疫逃逸机制奠定了基础。

【总页数】8页(P69-76)
【作者】柳凯月;董亚尊;吴双双;马一瑄;刘鸿雁;王北艳;于立权;宋佰芬;马金柱
【作者单位】黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院;中国农业大学动物医学院【正文语种】中文
【中图分类】S852.653
【相关文献】
1.丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4B基因酵母表达载体的构建及表达
2.登革2型病毒非结构蛋白NS4B的原核表达、纯化及多克隆抗体制备
3.登革2型病毒非结构蛋白NS4B及其突变体的真核表达与鉴定
4.DNA微点阵分析丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4B对信号传导相关基因表达的影响
5.牦牛源BVDV非结构蛋白NS5A的原核表达及抗原表位分析
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