实验四胶体金试纸条检测技术PPT

（HAuCl4 ） 的水溶胶 ， 氯金酸在还原剂的作 用下 ， 聚合成特定大小的金颗粒 ， 并由于静 电作用成为一种稳定的胶体状态。
➢胶体金的质量判定标准
√质量好的胶体金： 溶液呈红色 ，胶体金颗粒为球 形 ，大小均一 ，无棱角。
√质量差的胶体金： 溶液呈紫色 ，大小不一 ，形状
各异。
□胶体金标记的原理： 胶体金在碱性条件下带 负电荷 ， 与蛋白质分子的正电荷基团藉静电 吸引而形成牢固结合。
□胶体金标记技术（ Immunogold labeling technique） 是以胶体金作为示踪标记物应 用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。
二 、胶体金试纸条诊断技术的原理
以硝酸纤维素膜为载体 ， 利用了微孔膜 的毛细血管作用 ， 滴加在膜条一端的液体慢 慢向另一端渗移 ， 通过抗原抗体结合 ， 并利 用胶体金呈现颜色（红色） 反应 ， 检测抗原/ 抗体。
□结果易于判定： 阴 、 阳性呈色很明显 ， 肉眼 很容易判断。
□特异性好： 因为该技术大多用单克隆抗体标 记 ， 这决定了它具有很好的特异性。
胶体金快速诊断技术的应用
□病毒性疾病： 传染性法氏囊病 、禽流感、 新城疫 、犬细小病毒 、猪瘟等。
□寄生虫疾病： 血吸虫病 、旋毛虫病 、囊虫 病 、恙虫病。
□细菌性疾病： 霍乱弧菌 、类鼻疽。
H5亚型AIV尿 囊液阳性结果
阴性对照
H5A IV细胞 毒阳性结果 阴性对照
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➢最常用的是双抗夹心法检测抗原
测定
□测定时将试纸条下端浸入液体 标本中 ， 下端吸免疫金复合物复溶， 并带动其向膜条渗移。
测定
□若标本中有待测特异抗原 ， 即 可与免疫金复合物中的抗体结 合 ， 此抗原抗体复合物流至测 试区即被固相抗体捕获 ，在膜 上显出红色反应线条（T） 。
测定
□过剩的免疫金复合物继续前行， 至参照区与固相抗小鼠IgG结合 （免疫金复合物中的单克隆抗 体为小鼠IgG） ，而显出红色质 控线条（R） 。
测定
□ 阴性标本则无反应线条 ， 而仅显示质控线条。
· 胶体金快速诊断技术的特点
□简捷快速： 操作简单 ， 一般只要5- 10min 就 会出结果 ， 而其它方法如ELISA需要1-2h， PCR 需要时间更长。
实验四 胶体金试纸条诊断技术
一、简 介
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层 析技术研制而成 ， 该技术是90年代初在免疫 渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免 疫学检测技术 ， 最先用于人绒毛膜促性腺激 素（HCG） 的测定和乙型肝炎病毒表面抗原 （HBsAg） 等检测。
□ 胶 体 金 （ Colloidal gold） 是 氯 金 酸