直接Coombs试验

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三.直接Coombs试验临床意义
• 自身免疫性溶血性贫血 • 新生儿溶血症 • 溶血性输血反应 • 药物诱发的免疫性溶血性贫血
2021/3/1110Fra bibliotek2021/3/11
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人球蛋白试剂（抗IgG、C3d、IgG/C3d）； 5.轻轻混匀后3000r/min离心15s，轻轻摇动试管，观察结果。
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（三）直接Coombs试验结果判读
阳性结果-出现红细胞凝集，表示红细胞上有 相应抗体存在；
阴性反应-红细胞不凝集，表示红细胞上没有 相应抗体存在。
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• 1945年，英国免疫学家Coombs等人发明的一种能检 测红细胞表面抗体的新试验，故称之Coombs试验， 亦称抗人球蛋白试验。
• 抗人球蛋白试验是抗人球蛋白参与的一种间接血凝 试验，利用抗人球蛋白抗体作为第二抗体起到桥梁 的作用，连接与红细胞表面抗原结合的不完全抗体， 使红细胞凝集。
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•不完全抗体 能够与相应的抗原牢固结合,但因其分子量较小,体积
小,不能起到桥联作用,在一般条件下不出现可见反应。 •Coombs试验用于检测不完全抗体
直接Coombs试验：检查红细胞上有无不完全抗体。 间接Coombs试验：检查血清中有无游离的不完全抗体。
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二.直接Coombs试验
抗人球蛋白试验是抗人球蛋白参与的一种间接血凝试验利用抗人球蛋白抗体作为第二抗体起到桥梁的作用连接与红细胞表面抗原结合的不完全抗体使红细胞凝集
直接Coombs试验
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➢Coombs试验概述 ➢直接Coombs试验原理及方法 ➢直接Coombs试验临床意义
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一.Coombs试验概述
（一）直接Coombs试验基本原理
若红细胞在体内被不完全抗体吸附，由于不 完全抗体分子量小，体积小，不能起到桥联作用 ，仅使红细胞处于致敏状态，在一般条件下不出 现可见反应。加入抗球蛋白试剂，与红细胞上吸 咐的不完全抗体结合，在致敏红细胞之间搭桥， 出现肉眼可见的凝集。
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待检红细 胞
不完全抗体
抗人球蛋白
直接coombs试验原理示意图
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（二）直接Coombs试验方法 1.洗涤红细胞：取50μL受检者全血，以0.9%生理盐水洗涤3次
（1500r/min离心1min）； 2.配制3%-5%红细胞盐水悬液； 3.编号：分别取三个试管，标记为IgG、C3d、IgG/C3d； 4.三管中分别加入50μL3%-5%红细胞盐水悬液，加入两滴相应的抗
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（四）注意事项 1.标本采集后应立即进行试验，延迟试验可使抗体
从细胞上丢失；
2.受检红细胞一定要洗涤充分，否则红细胞悬液中 混杂的血清蛋白会中和抗人球蛋白；
3.直接抗人球蛋白试验在初读结果后，放在室温中 5-10分钟，再次离心观察。这样孵育之后，若红 细胞被C3d致敏时，重新离心观察结果可使阴性结 果转变为阳性结果，而IgG致敏的红细胞在孵育后 反应更弱。