miRNA-138-5p通过靶向调控CCNE1抑制黑色素瘤细胞增殖
LncRNA_SNHG12调控miR-138-5p
doi：10.3969/j.issn.1000-484X.2023.12.006LncRNA SNHG12调控miR-138-5p/HIF-1α轴改善缺氧/复氧人血管内皮细胞损伤的研究①魏宗强王琳茹胡文贤张娟子黄贤明李林李强②（青岛大学附属青岛市海慈医院血管外科中心，青岛 266033）中图分类号R289.5 文献标志码 A 文章编号1000-484X（2023）12-2494-07［摘要］目的：研究长链非编码RNA（LncRNA）小核仁RNA宿主基因12（SNHG12）调控miR-138-5p/低氧诱导因子-1α（HIF-1α）轴改善缺氧/复氧（H/R）人血管内皮细胞损伤的作用。
方法：体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs），随机分为对照组、H/R模型组、H/R+LncRNA SNHG12过表达组、H/R+miR-138-5p mimics组、H/R+共转染组、H/R+共转染阴性对照组，各转染组分别进行转染处理，除对照组外，其余各组给予5 h缺氧，再进行复氧1 h处理，诱导细胞模型，然后通过CCK-8实验检测各组细胞活力情况；通过流式细胞实验检测各组细胞凋亡情况，比较各组细胞凋亡率；通过试剂盒测量各组细胞活性氧（ROS）、乳酸脱氢酶（LDH）及炎症因子IL-6、IL-17、IL-18水平；通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）实验测定各组细胞miR-138-5p及HIF-1α mRNA表达；通过免疫印迹实验检测各组细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9（caspase-9）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）及HIF-1α蛋白表达。
结果：与对照组相比，H/R模型组细胞凋亡率、细胞ROS、LDH、IL-6、IL-17及IL-18水平、细胞HIF-1α mRNA 和蛋白水平、细胞caspase-9、Bax及HIF-1α蛋白水平升高（P<0.05），细胞活力、miR-138-5p水平降低（P<0.05）。
恶性黑色素瘤的免疫治疗进展
恶性黑色素瘤的免疫治疗进展齐忠慧;斯璐【摘要】恶性黑色素瘤病死率高、预后差,但随着基础免疫学和肿瘤生物学的迅速发展,针对恶性黑色素瘤发生发展、侵袭转移的过程所进行的免疫治疗正进入一个新时期,黑色素瘤患者的生存获得可观改善.目前免疫治疗主要围绕PD-1单克隆抗体、CTLA-4单克隆抗体、免疫联合治疗展开.Pembrolizumab、Nivolumab、Ipilimumab单用、Nivolumab联合Ipilimumab以及Talimogene laherparepvec均已被证明是有效和安全的,已被美国食品药品管理局(FDA)批准用于恶性黑色素瘤的治疗.该文概述了目前免疫治疗药物的最新进展,并探讨其前景及挑战.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2019(038)008【总页数】7页(P997-1003)【关键词】恶性黑色素;免疫治疗;免疫检查点抑制剂;免疫联合治疗【作者】齐忠慧;斯璐【作者单位】北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所肾癌黑色素瘤内科、恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京 100142;北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所肾癌黑色素瘤内科、恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京 100142【正文语种】中文【中图分类】R979.1恶性黑色素瘤(malignant melanoma，MM)恶性程度极高，全球每年新发病例约20万例，我国每年新发病例达2万例[1]。
早期黑色素瘤患者术后5年总体生存率(overall survival，OS)较高，晚期黑色素瘤患者术后5年OS为24%～29%，ⅢC、Ⅳ期患者5年OS仅10%～19%。
传统化疗单药总体反应率(overall response rate，ORR)均小于20%，BRAF抑制剂的ORR虽达50%，但存在爆发性耐药问题。
白细胞介素2、肿瘤疫苗、过继T细胞疗法因为不良反应重或疗效欠佳未得以推广[2-3]。
相比之下，以免疫检查点抑制剂为首的免疫治疗可显著延长患者OS，降低死亡及复发风险，改善无进展生存期(progression-free survival，PFS)。
miR-509-5p靶向ACLY调控人黑色素瘤细胞的增殖和凋亡
doi：10・3969/j・issn・1002-7396.2021.01.006-论著-miRC40Cp靶向ACLY调控人黑色素瘤细胞的增殖和凋亡李二龙张皓义韩成龙谢林伸【摘要】目的探讨miRCDCp靶向调控ACLY表达对人黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响。
方法qRTCCR检测人表皮黑色素细胞HEM/CP和3种人黑色素瘤细胞(SK-MELC、UACC903和A377)中miRCDCp和ACLYmRNA的表达水平。
以A377细胞为研究对象，构建过表达miRCDCp的A377细胞株,MTT法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡，Western b/d检测CpcCnDl、CDK2、CDK1、B/C、Bcp和cleaved ccpco-3蛋白的表达。
双荧光素酶报告基因实验和western blot验证miRCDCp和ACLY的靶向关系。
结果与人表皮黑色素细胞HEM/CP相比,3种人黑色素瘤细胞中miRCDCp的表达显著下调，ACLY mRNA的表达显著上调。
过表达miRCDCp可抑制CDK2、CDK1、Cyc/nD1和B/C蛋白的表达，促进Bcp和cleaved ccpcc-3蛋白的表达，抑制A377细胞增殖，促进细胞凋亡。
ACLY是miRCDCp的靶基因，miRCDCp可负性调控ACLY的表达。
过表达ACLY可部分逆转miRCDCp过表达对A377细胞增殖和凋亡的影响。
结论miRCDCp靶向下调ACLY表达可抑制人黑色素瘤细胞增殖，促进细胞凋亡。
【关键词】人黑色素瘤；miRCDCp；ATP柠檬酸裂解酶；细胞增殖；凋亡【中图分类号】R739.5【文献标识码】A【文章编号】1D2-7386(2021)01-0039-05Effects of miR-509-5p tarrehng ACLY on the proliferrhon and apoptosis of hrman melanoma celts LI Erlone，ZHANG Haoyi,HAN CUenglong，t aO Denartmeet of Derm,atosts sne Syphilolopy，Wess CUiea Hospital op Sichuae University，Sictae e CUengda610001.CUiea【Abshrct]Objechvv To i/vestipate the eXects of miRCDCp tarpeUng ACLY exp/ssiox ox the p/liferaPox andayoptosis of human melanoma ceXs.Methods The qRT-PCR was used to detect the expmss/x levels of miRC05Cp andACLY mRNA iu human epidermal melanoma cell HEM/-PP and three human melanoma cells(SK-MELC，UACC903andA377).A377cells were e/mlled as research suPje/s，and the A377cell Cue ove/xp/ssing miRC09Cp was0X0/0/00.The cell viaCility was detecmd bp MTT，cell ayoptosis was detecmd bp flow cytomemp，and expmss/x levels of Cp/mD1，CDK2，CDK1，Bcl-4，Bcp and cleaved caspase-3proteiu were detecmd bp Western Blot.The dual luciferase mpoOer ge/oexpe/meut and western blot were used to verify the tarpeUng mlatio/ship betmeeu miRC09Cp and ACLY.R esnlts As compared with those iu human epidermal melanoma cell HEM/-PP，the exp/ssiox levels of miRC05Cp iu the three human melanoma cells were signiPcantly dowo-regulamd,however,the exp/ssiox levels of ACLY mRNA were signiPcantly up-mgPamd.The ove/xp/ssiox of miRC05Cp covlC indibit the e xp/ssiox levels of CDK2，CDK1，Cyc/nD1and B/Cproteiu，however,which covlC promote the exp/ssiox levels of Bcx and cleaved caspase-3proteiu,and indibit the proliferayoxof A377cells,and promote the cell apoptosis.ACLY was the target ge/o of miRCDCp that covlC oegaOvely regulate theexp/ssiox of ACLY.Moreover the ove/xp/ssiox of ACLY covlC partially reverse the eXects of miR-C05-Cp ovemxp/ss/x oxthe proliferayox and a yoptosis of A377ceUs.Conclrsion The miRC09Cp can mhibit the p/liferaPox and promote theayoptosis of human melanoma cells bp tarpemdly dowo-regulaOng ACLY exp/ssiox.【Key words]human melanoma；miRC09Cp；ACLY；cell p/liferaPox；ayoptosis人黑色素瘤是一种最常见和最具侵袭性的皮肤肿瘤。
抑制miR-21-5p表达通过靶向FOXP2调控肺癌细胞增殖和凋亡
殖情况 ２５％胰蛋白酶消化肺癌细胞，调整细胞浓 度为 ２×１０４个 ／ｍｌ，接种于 ６孔板中，分别转染 ｍｉＲ ２１５ｐｍｉｍｉｃ、ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ、ｐｃＤＮＡＦＯＸＰ２及 其 阴 性序 列 或 共 转 染 ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ、ｓｉＦＯＸＰ２；转 染 ４８ｈ后弃去旧培养基，加入 ＭＴＴ２０μｌ混匀，培养 ４ｈ；然 后 每 孔 加 ＤＭＳＯ 溶 液 １００μｌ混 匀，培 养 １５ｍｉｎ；采用酶标仪检测吸光值，每组 ３个复孔。 １２７ 流式细胞仪检测细胞凋亡 转染后 Ａ５４９ 细胞培 养 ４８ ｈ后，弃 去 培 养 基，磷 酸 盐 缓 冲 液 （ＰＢＳ）清洗 ２次；加入 ５００μｌ１×结合缓冲液，５μｌ ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ，避光孵育 １５ｍｉｎ；加入 ２５μｌＰＩ， 孵育 ５ｍｉｎ，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。 １３ 统计学方法 采用 ＳＰＳＳ２２０软件进行 ｔ检 验、单因素方差分析。
崔艳红等 抑制 ｍｉＲ２１５ｐ表达通过靶向 ＦＯＸＰ２调控肺癌细胞增殖和凋亡 第 １４期
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２ｍｉｎ，９５℃ １５ｓ，６０℃ ２０ｓ，７２℃ ２０ｓ，共 ４０个循环； 反应体系为 ２０μｌ：２×ＳＹＢＲＭｉｘ１０μｌ，上下游引物各 ０５μｌ，１０×ｃＤＮＡ模板 １μｌ，Ｈ２Ｏ８μｌ。引物序列： ｍｉＲ２１５ｐ：正义链 ５′ＧＴＧＣＡＧＧＧＴＣＣＧＡＧＧＴ３′，反 义 链 ５′ＧＣＣＧＣＴＡＧＣＴＴＡＴＣＡＧＡＣＴＧＡＴＧＴ３′；Ｕ６： 正义链 ５′ＣＴＣＧＴＴＣＡＣＧＡＡＴＴＴＧＣＣＴ３′，反义链 ５′ ＴＣＡＣＧＡＡＴＴＴＧＣＧＴ３′；ＦＯＸＰ２：正义链 ５′ＧＧＴＣＡＴ ＧＡＣＣＣＣＴＧＡＴＴＡＧＧ３′， 反 义 链 ５′ＡＧＴＣ ＣＴＣＴＡＧＡＧＧＣＴＴＣＡＴ３′；βａｃｔｉｎ：正 义 链 ５′ＣＡＧ ＣＧＡＣＡＣ ＣＣＡ ＣＴＣ ＣＴＣ３′，反 义 链 ５′ＴＧＡ ＧＧＴ ＣＣＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴ３′。分别以 Ｕ６、βａｃｔｉｎ为 ｍｉＲ ２１５ｐ、ＦＯＸＰ２的内参基因计算相对表达量。 １２３ Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测蛋白表达情况 肺癌细胞 株以 ５×１０４ 个 ／ｍｌ接种于 ６孔板中贴壁培养 ２４ｈ， 收集细胞，ＲＩＰＡ裂 解 液 冰 上 裂 解 ５ｍｉｎ提 取 总 蛋 白，测定总蛋白浓度，蛋白与样品缓冲液混合后煮沸 ５ｍｉｎ变性蛋 白；１０％ 十 二 烷 基 硫 酸 钠聚 丙 烯 酰 胺 凝胶电 泳 （ＳＤＳＰＡＧＥ）跑 胶，转 膜 至 聚 偏 氟 乙 烯 （ＰＶＤＦ）膜，５％脱脂奶封闭 １５ｈ；一抗 ４℃孵育过 夜，ＴＢＳＴ清洗 ３次 ／５ｍｉｎ；稀释二抗室温孵育 １ｈ， ＴＢＳＴ清洗 ３次／５ｍｉｎ；ＥＣＬ显影液显影，ＧＩＳ凝胶成像 仪采集图片，以 ＧＡＰＤＨ为内参计算蛋白表达水平。 １２４ 双荧光素酶实验检测 ｍｉＲ２１５ｐ对 ＦＯＸＰ２ 的影响 扩增 ＦＯＸＰ２基因的转录本 ３′ＵＴＲ，构建野 生型 ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ（ＷＴｐＧＬ３ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ）质粒； 采用定点突变技术，将 ３′ＵＴＲ上的与 ｍｉＲＮＡ结合 的核心区域突变构建突变型 ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ（ＭＵＴ ｐＧＬ３ＦＯＸＰ２３′ＵＴＲ）质粒；将两种质粒分别转染至 肺癌细胞，转染 ４８ｈ后检测荧光强度。 １２５ 细胞转染 转染前 ２４ｈ将细胞接种于 ２４ 孔板中，使细胞贴壁密度约 ８０％。设计并合成 ｍｉＲ ２１５ｐｍｉｍｉｃ、ａｎｔｉｍｉＲ２１５ｐ及 其 对 应 阴 性 序 列，使 用 ｌｉｐ２０００将合成序列分别转染肺癌细胞，空白对照 （ＮＣ）组不做任何处理，无血清 ＤＭＥＭ 培养 ６ｈ，换 完全培养基培养 １８ｈ后进行功能试验，并继续培养 筛选稳定低表达 ｍｉＲ２１５ｐ的细胞株。
miR-503-5p靶向VEGFA基因通过PI3KAKT信号通路调控人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和侵袭
miR -503-5p 靶向VEGFA 基因通过PI3K /AKT 信号通路调控人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和侵袭谢迎春邓丹①张玉梅②王琴③（贵州中医药大学第一附属医院妇科检查室，贵阳550001）中图分类号R737.33文献标志码A文章编号1000-484X （2021）06-0655-06［摘要］目的：探讨微小RNA -503-5p （miR -503-5p ）对人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。
方法：培养滋养层细胞HTR8/Svneo 和人绒毛膜癌细胞系JEG -3、BeWo 和JAR ，实时荧光定量PCR （qRT -PCR ）检测miR -503-5p 和血管内皮生长因子A （VEGFA ）mRNA 表达水平，Western blot 法检测VEGFA 蛋白表达水平。
以JEG -3细胞为研究对象，构建过表达miR -503-5p 或敲低VEGFA 的JEG -3细胞，MTT 检测细胞增殖，Transwell 检测细胞的迁移和侵袭能力，Western blot 检测细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶9（MMP9）、磷酸化的磷脂酰肌醇-3-激酶（p -PI3K ）、磷酸化的蛋白激酶B （p -AKT ）蛋白水平。
生物信息学软件预测VEGFA 的3'非翻译区（3'UTR ）中含有与miR -503-5p 互补的核苷酸序列，双荧光素酶报告基因实验验证miR -503-5p 与VEGFA 调控关系。
结果：与HTR8/Svneo 细胞比较，人绒毛膜癌细胞系JEG -3、BeWo 和JAR 中miR -503-5p 水平均降低（P <0.05），VEGFA mRNA 和蛋白水平均升高（P <0.05）。
过表达miR -503-5p 或敲低VEGFA 可降低JEG -3细胞OD 值、迁移数和侵袭数及细胞中CyclinD1、MMP2、MMP9、p -PI3K 和p -AKT 蛋白表达水平（P <0.05）。
miR-100靶向调控mTOR基因抑制套细胞淋巴瘤生长
miR-100靶向调控mTOR基因抑制套细胞淋巴瘤生长摘要：套细胞淋巴瘤（MCL）是一种常见的B细胞恶性肿瘤，其治疗效果有限。
microRNAs(miRNAs)在调节MCL生长和进化中起重要作用。
本研究发现miR-100被过度表达，在MCL患者中被下调了。
研究发现，通过下调miR-100的表达会增强MCL细胞的增殖能力，而miR-100的上调则会抑制MCL细胞的增殖。
进一步研究发现miR-100通过抑制mTOR基因的表达，来调控MCL细胞的增殖。
总的来说，我们的研究结果提供了关于MCL治疗的新思路。
关键词：套细胞淋巴瘤，miR-100，mTOR基因，细胞增殖，治疗miR-100靶向调控mTOR基因抑制套细胞淋巴瘤生长引言：套细胞淋巴瘤（MCL）是一种常见的恶性肿瘤，对化疗和放疗等传统治疗方法的响应度相对较低。
因此，对于MCL的研究和治疗是至关重要的。
在过去的几年中，miRNAs已成为MCL治疗中的一个热门研究领域。
研究表明，许多miRNAs参与了MCL细胞的增殖、转移和死亡等过程。
其中，miR-100的表达与MCL的恶化和预后密切相关，然而，miR-100对MCL的调节机制以及与MCL治疗之间的关系尚不明确。
方法：我们利用回溯性的病例对比研究来检测miR-100在MCL组织和正常淋巴组织中的表达。
采用qRT-PCR和Western blot方法检测mTOR基因的表达和miR-100的水平，使用反义核酸和mTOR靶向小分子抑制剂rapamycin来验证mTOR作为miR-100的调节因子的效果。
此外，我们还使用慢病毒质粒中miR-100及mTOR的表达载体对MCL细胞进行转染，利用MTT、细胞周期及流式细胞术等方式检测细胞的生长、增殖和凋亡。
结果：MCL组织中miR-100表达显著下调，与正常淋巴组织相比降幅达到80%以上。
miR-100过度表达可抑制MCL细胞的生长和增殖，而miR-100的下调则增强了细胞的增殖能力。
MiR-145-5p靶向下调SERPINE1抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移
MiR-145-5p靶向下调SERPINE1抑制胃癌细胞增殖.侵袭和迁移吴现磊，秦二云，孟妍*，张令巧（濮阳市油田总医院消化内科，河南濮阳457001）摘要：目的探究miR-145-5p和SERPINE1在胃癌上皮细胞中的潜在调控机制，希望能够为胃癌的精准治疗提供新的思路。
方法从TCGA数据库中下载TCGA-STAD的miRNA成熟体、rnRNA和临床数据。
利用Edg-eR包对mRNA进行差异分析获得DEGs，并与预测基因取交集获得靶标基因。
通过qRT-PCR检测miR-145-5p 和SERPINE1在正常人胃黏膜上皮细胞和胃癌细胞中的表达情况。
通过Western blot检测SERPINE1的蛋白表达情况;通过双荧光素酶实验验证miR-145-5p与SERPINE1之间的靶向关系。
用CCK8实验、细胞克隆实 验、Transwell法和划痕愈合实验检测转染细胞后细胞的增殖、侵袭与迁移能力。
结果MiR-145-5p在胃癌细胞中低表达,SERPINE1在胃癌细胞中高表达,rniR-145-5p能够通过调控SERPINE1的表达影响胃癌细胞功能。
结论MiR-145-5p在胃癌细胞中发挥重要作用，能够通过靶向下调SERPINE1抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移。
关键词：胃癌；MiR-145-5p；SERPINE1；增殖;侵袭；迁移中图分类号:R735文献标识码:A文章编号：2095-4646(2021)02-0101-07开放科学(资源服务)标识码(OSID):DOI：10.16751/ki.20954646.2021.02.0101MiR-145-5p Targets and Down-regulates SERPINE1to Inhibit Gastric Cancer Cell Proliferation,Invasion and MigrationWU Xian-Lei,QIN Er-Yun,MENG Yan,et al(Department of Gastroenterology,Puyang Oilfield General Hospital,Puyang Henan457001,China)ABSTRACT:Objective This study aims to expl o re the potential regulatory mechanism of miR-145-5p and SERPINE1in gastric cancer epithelial cells,which can provide new insights for the precise treatment of gastric cancer.Methods Expression profiles of mature miRNAs, mRNAs and clinical data of TCGA-STAD were downloaded from TCGA database.EdgeR package was used to perform differential analysis on mRNAs to obtain differentially expressed genes which were then intersected with predicted genes to obtain target gene.The expression of miR-145-5p and SERPINE1in normal human gastric mucosal epithelial cells and gastric cancer cells was detected by qRT-PCR.The protein expression of SERPINE1was detected by western blot.The targeted relationship between miR-145-5p and SERPINE1was verified by dual luciferase K8,colony formation,transwell and scratch healing assays were used to detect cell proliferative,invasive and migratory abilities after cell transfection.Results MiR-145-5p was lowly expressed,while SERPINE1was highly expressed in gastric cancer cells.MiR-145-5p could affect the function of gastric cancer cells by regulating the expression of SERPINE1.Conclusion MiR-145-5p plays an important role in gastric cancer cells, which can inhib让the proliferation,invasion and migration of gastric cancer cells by targeting and down-regulating SERPINE1.KEY WORDS:Gastric cancer；MiR-145-5p；SERPINE1；Proliferation；Invasion；Migration通讯作者,E-mail:Xuyong3678@胃癌(gastric cancer,GC)是消化系统最常见的,全球发病率第5,导致癌症相关死亡第3的恶性肿瘤⑴。
miRNAs在肿瘤基因治疗中的研究进展
miRNAs在肿瘤基因治疗中的研究进展摘要成熟miRNAs是一类长度为20～23个核苷酸的非编码单链小RNAs。
近年来，陆续发现miRNAs与肿瘤的发生、分化、转移及复发等密切相关。
miRNAs 作为一种调节因子，通过与靶mRNA的完全或不完全互补结合抑制靶mRNA表达，进而在转录后水平调节肿瘤相关基因的表达。
随着对miRNAs的基础生物学和生物信息学的进一步研究，可以预见未来miRNAs作为肿瘤基因治疗的新靶点有着广泛的应用前景。
ABSTRACT Mature miRNAs which consist of 20–23-nucleotide single-stranded RNAs are closely related to biological processes of cancer，such as its occurrence，differentiation，metastasis and recurrence. miRNAs，as key regulators，can inhibit mRNA expression by recognizing specific mRNA targets，and further mediate post-transcriptional inhibition of cancer related genes. With the further understanding of fundamental biology and bioinformatics，miRNAs will serve as a novel cancer therapeutic target with a broad application prospect.KEY WORDS neoplasms；microRNA；gene therapy成熟的miRNAs是一类长20～23个核苷酸的非编码单链小RNAs，其初级转录体在细胞核内由加工miRNAs的微处理器复合体（Drosha-DGCR8 protein complexes）催化生成70个核苷酸的前体miRNAs。
miR-93-5p通过靶向CDKN1A促进多囊卵巢综合征颗粒样瘤细胞KGN的生长增殖
・840・现物医学biome±cnj Progress in Modern Biomedicine VoL21NO5MAR.2021doi:10.1324l/ki.pmb.2021.05.008miR-93-5p通过靶向CDKN1A促进多囊卵巢综合征颗粒样瘤细胞KGN的生长增殖*樊丽许常娟申茹萌宁艳辉杨丽(南部战区总医院157分院妇产科广东广州510080)摘要目的：验证CDKN1A是miR-93-5p直接调控的靶基因，阐明miR-93-5p可通过靶向CDK.N1A促进人卵巢颗粒样肿瘤细胞系KGN的生长增殖：方法：选取我院2016年6月-2019年6月期间确诊的40例多囊卵巢综合征(PCOS)患者作为研究对象，qRT-PCR检测PCOS病变卵巢组织和病灶旁正常卵巢组织(对照)中miR-93-5p和CDKN1A的表达水平TargetScan软件用以预测miR-93-5p靶基因，并使CDKN1A所含3'-UTR克隆至目的基因下游(CDKNIA-wt或CDKNIA-mut),并分别与miR-93-5p模拟物(miR-93-5p mimics)以及其无关对照寡核甘酸序列(scramble)共转染，荧光素酶报告基因实验验证所预测的靶基因，qRT-PCR和Western blot分别检测转染miR-93-5p mimics及其对照scramble-1、miR-93-5p抑制剂(miR-93-5p inhibitor)及其对照scramble-2后的mRNA和蛋白表达水平MTT实验验证分别转染miR-93-5p mimics,scramble^CDKN1A质粒(pcDNA3.1-CD-KN1A)、空载体vector(pcDNA3.1)、miR-93-5p+CDKNlA质粒、scramble+vector质粒到KGN细胞中后细胞的生长增殖活性结果:miR-93-5p在PCOS病变卵巢组织中的表达水平显著高于正常卵巢组织，CDKN1A在PCOS患者卵巢组织中的表达水平显著低于正常卵巢组织(均片0.05)。
脑胶质瘤恶性进展中MiRNAs与转录因子的相互作用
脑胶质瘤恶性进展中MiRNAs与转录因子的相互作用摘要：胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，尽管进行了手术联合同步放化疗的多模式治疗，但是胶质瘤患者的预后依然很差，因此，深入挖掘胶质瘤发生和进展的分子机制，并以此为基础开发新型靶向治疗药物显得尤为重要。
MicroRNAs是指长度约17-22个核苷酸的非编码RNAs，具有高度保守序列。
MicroRNAs发挥生物学功能主要是转录基因沉默（post-transcriptional gene silencing，PTGS）。
其主要与靶信使RNA（message RNAs，mRNA）的3’端非翻译区（3’-untranslated regions，3’-UTR）结合，miRNA与mRNA依据其结合程度的不同（部分互补或完全互补），发挥转录降解或者是翻译抑制的作用。
最新研究表明，部分miRNA能够通过与靶mRNA的5’端非翻译区（5’-untranslated regions，5’-UTR）结合，从而增强mRNA的稳定性。
关键词：脑胶质瘤；miRNAs；转录因子；恶性进展Argonaute(AGO)蛋白都具有Piwi结构域，在miRNA通路中发挥多种功能。
它们通过产生ac-pre-miRNA，参与了miRNA装配的过程，介导mRNA降解、去稳定作用或者转录抑制。
另外，AGO2蛋白可以在转录后调控调节miRNA丰度，内源性AGO2的减少会降低成熟miRNA的表达和活性。
AGO2的这个特殊功能是独立于它的剪切功能及内切酶活性的。
为探索lncRNA FGF14-AS2促进胶质瘤细胞恶性生物学行为的分子机制，有研究通过qRT-PCR明确了lncRNA FGF14-AS2在细胞中的分布，结果提示lncRNA FGF14-AS2主要定位于细胞质中。
细胞质中的长链非编码RNA倾向于通过吸附miRNA发挥其调控功能。
为了初步筛选lncRNA FGF14-AS2吸附的miRNA，检索了在线生物信息数据库——Lncbase，初步检索出lncRNA FGF14-AS2能够吸附的miRNAs，共40个。
肿瘤进展的microRNA调控机制及靶向治疗策略
肿瘤进展的microRNA调控机制及靶向治疗策略一、项目简介：肿瘤是威胁人类健康的重大疾病，其持续进展是导致患者死亡的主要原因。
肿瘤的进展过程受到基因控制，而微小RNA（microRNA，miRNA）在其中的作用备受关注。
miRNA通过靶向结合特定mRNA，引起后者降解或抑制蛋白质的翻译，从而对肿瘤相关基因的表达发挥关键调控作用。
因此，鉴定肿瘤进展过程中的关键miRNA，进而揭示其调控的信号通路，对于肿瘤的靶向治疗具有重要意义。
本项目围绕肿瘤进展中的主要结点分子，阐明了miRNA在其中的作用及其构成的调控网络，为肿瘤的治疗提供了新的有效靶点。
（1）在核心癌蛋白c-Myc 介导的肿瘤进展中，我们发现c-Myc能够结合到miR-101的启动子区并募集以EZH2为核心的PRC2复合物，进而催化组蛋白发生H3K27me3的修饰，导致miR-101的表观遗传学沉默；miR-101通过负性调控下游靶基因STMN1、CXCR7和JUNB 的表达来控制细胞的增殖、转移、血管新生等过程；miR-101还能负性调控PRC2复合物中的两个组分——EZH2和EED，从而在miR-101与PRC2之间形成一个双负反馈环路，该环路的失衡是导致肝癌细胞中miR-101完全沉默以及下游信号通路出现异常的关键原因。
而在其他肿瘤中，c-Myc还受到miR-200 家族和miR-106b-93-25簇的靶向抑制。
上述主要研究结果发表在Hepatology、Endocrinology等杂志，并获杂志同期专文评述。
（2）在干细胞因子Oct4介导的肿瘤进展中，发现Oct4是miR-145的靶基因，肝癌细胞中高表达的假基因Oct4-pg4的转录产物通过与Oct4的mRNA竞争性结合miR-145，解除了后者对Oct4的靶向抑制作用，从而促进肝癌进展。
研究结果发表在Carcinogenesis 杂志。
（3）在HER2阳性进展性乳腺癌中，发现miR-200c的失调是导致肿瘤对治疗性HER2单抗Trastuzumab耐药的重要机制。
miR-138-5p靶向TCF4调节眼葡萄膜黑色素瘤细胞的恶性生物学行为
ｋｉｎａｓｅＢ（ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ）ｐａｔｈｗａｙａｎｄｔｒａｎｓｉｅｎｔｒｅｃｅｐｔｏｒｐｏｔｅｎｔｉａｌｃａｔｉｏｎｃｈａｎｎｅｌｐｒｏｔｅｉｎ６（ＴＲＰＣ６）ｉｎｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡ （ＡｎｇⅡ）ｉｎｄｕｃｅｄｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｐｏｄｏｃｙｔｅｉｎｊｕｒｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｕｓｅｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｐｏｄｏｃｙｔｅｓｗｅｒｅｃｕｌ ｔｕｒｅｄｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＡｎｇⅡ，Ｌｏｓａｒｔａｎ，ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴｐａｔｈｗａｙｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（ＬＹ２９４００２），ＴＲＰＣ６ｃｈａｎｎｅｌｂｌｏｃ ｋｅｒ（ＳＫＦ９６３６５）．ＴｈｅｃｅｌｌｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄＡｎｇⅡ ｇｒｏｕｐ，ＡｎｇⅡ ＋ Ｌｏｓａｒｔａｎｇｒｏｕｐ， Ｌｏｓａｒｔａｎｇｒｏｕｐ，ＡｎｇⅡ ＋ ＬＹ２９４００２ｇｒｏｕｐ，ＬＹ２９４００２ｇｒｏｕｐ，ＡｎｇⅡ ＋ ＳＫＦ９６３６５ｇｒｏｕｐ，ＳＫＦ９６３６５ｇｒｏｕｐ． ＴｈｅｑＲＴＰＣＲｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆＴＲＰＣ６ｍＲＮＡｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓｏｆＡＫＴ，ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＢ（ｐＡＫＴ），ａｎｄＴＲＰＣ６ｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｐｏｄｏｃｙｔｅｓｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＨｏｅｃｈｓｔ３３２５８ｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ， ｔｈｅＡＫＴｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｔｈｅＡｎｇⅡ ｇｒｏｕｐｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＴＲＰＣ６ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄｔｈｅａｐｏｐｔｏ ｓｉｓｏｆｐｏｄｏｃｙｔｅｓｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜００５）．ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅＡｎｇⅡ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅＡＫＴｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｔｈｅ ＡｎｇⅡ ＋ＳＫＦ９６３６５ｇｒｏｕｐｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＴＲＰＣ６ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｐｏｄｏｃｙｔｅｓｄｅ ｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜００５）；ｔｈｅＡＫＴｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｔｈｅＡｎｇⅡ ＋ＬＹ２９４００２ｇｒｏｕｐｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆｐｏｄｏｃｙｔｅｓｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜００５）；ｔｈｅＡＫＴｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｔｈｅＡｎｇⅡ ＋Ｌｏｓａｒｔａｎｇｒｏｕｐｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＴＲＰＣ６ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｐｏｄｏｃｙｔｅｓｄｅｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜００５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＡｎｇⅡ ｍａｙ ｉｎｄｕｃｅｐｏｄｏｃｙｔｅｉｎｊｕｒｙｂｙａｃｔｉｖａｔｉｎｇｔｈｅＴＲＰＣ６ｃｈａｎｎｅｌａｎｄｔｈｅｒｅｂｙｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＰＩ３Ｋ／ＡＫＴｐａｔｈ ｗａｙ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡ；ｐｏｄｏｃｙｔｅｓ；ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ３ｋｉｎａｓｅ／ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＢ；ｔｒａｎｓｉｅｎｔｒｅｃｅｐｔｏｒｐｏｔｅｎ ｔｉａｌｃａｔｉｏｎｃｈａｎｎｅｌｐｒｏｔｅｉｎ６
miR-30a-5p靶向成纤维细胞活化蛋白抑制胰腺导管腺癌增殖和迁移作用研究进展
・860-国际外科学杂志2020年12刀第47卷第12期Inlernal ional JouEal of Surge巧.l)mtn l)er202(),Vol.47,No.12miR-30a-5p靶向成纤维细胞活化蛋白抑制胰腺导管腺癌增殖和迁移作用研究进展何雨'董保龙2陈世勇$吴彪‘杨晓军2'甘肃中医药大学第一临床医学院，兰州730000；2甘肃省人民医院普外二科，兰州730000通信作者：杨晓军,Email:yangxjmd@【摘要】胰腺导管腺癌(PDAC)是较为致命的癌症之•，总体5年存活率不到5%该病通常诊断为晚期•治疗手段有限随着分子生物学的发展•肿瘤的靶向治疗针对性强•精准度高，效果显著因此，挖掘理想的靶点是P【)AC靶向治疗的关键，有助于进■步提高对本病的诊断和治疗水平与其他肿瘤相比.PDAC促纤维结缔组织增个的改变更为明显•对传统治疗表现出明显的耐药性，并具有高度免疫抑制的肿瘤微环境本研究讨论了在PDAC中成纤维细胞活化蛋白(FAP)与miR-30a-5p的一些新发现，即FAP.miR-30a-5p对PDAC主要生物学功能的影响及两者之间的相互关系，并指出未来研究的发展方向，为PDAC的靶向治疗提供新的思路【关键词】肿瘤微环境；微RNAs；胰腺导管腺癌；成纤维细胞活化蛋白；基因靶向基金项目：国家自然科学基金(81660398)；国家级科研培育计划院内重点项U(19SYPYA-12)1)01:10.3760/cma.j.(11115396-20200617-00202Advances in studies on inhibition of proliferation and migration of pancreatic ductal adenocarcinomaby niiR-30a-5p targeting fibroblast activated proteinHe Yu',Dong liaolonp,Chen Shiyon^',Wu Biao',Yang Xiaojun1First(finical Medical College of(r<insu University of Chinese Medicine,Uinzhou730000,China；The SecondDepartment of General Surgery,Gansu Provincial Hospital,Lanzhou730000,ChinaCorresponding author:}(mg Xiaojun,Email:v(ingxjmd(0}aliyun.corn[Abstract]Pancn'atic ductal adenocarcinoma(PDAC)is one of the most deadly cant ers,with an overallfive-year survival rate of less than5%.The disease*is oftt*n diagnosed at an advanced stage with limited treat m e n toptions.With the(lrv(*lopnient of molecular biology.tumor targeted therapy is highly targeted,precise andeffective.Therefore,to explore the ideal tiirget is the key to PDAC targeted therapy,which is helpful Io furtherimprove the level of<liagn(»sis and treatment of this pared with other tumors,PDAC showed moresignificant fibrotic changes,showed sign i ficant resistance to traditional therapies,and had a highly immunosuppressive tumor inicToenviroiiment.This study discussed some new findings of PDAC,tluit is to say.fibroblast activated proIrin and miR-30a-5p on the main biological functions of PDAC,the effects and therelationship between them.It also pointed out the development direction of future studies,so as to provi(l(*a newidea for PDAC targeted therapy.[Key words]Pumor nii(r(H k nvironmei)l:MicroKN\s；Carcinoma paru realic ductal；Fibroblastactivated protein；(»enr targetingFund programs：Nationid Natural Science Foundation of China(81660398)；Hospital Key Program ofNational Scientific Research Cultivation Plan(19S\PY A-12)D()I：10.3760/cma.j.enl15396-20200617-00202随着生物信息技术和微阵列技术的发展.癌症患者宝贵而巨大的数据被充分挖掘.这为临床应用提供了一些枢纽基因或靶点，更容易确定癌症的发生、进展和预后"胰腺导管腺癌(Pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)恶性程度高，诊断困难，多数患者在确诊时已失去手术机会'.目前还没有有效的治疗方案显示出对PDAC患者的长期益处' PDAC的特征是存在大量的间质，它构成了肿瘤体积的90%r，PDAC具有高度免疫抑制的肿瘤微环境(Tumor microenvironment,TME),其致密的间质阻碍了该区域的血液流动，抑制药物递送，抑制抗肿瘤免疫应答.使PDAC肿瘤细胞逃避机体的免疫监测.这国I示外科'学杂志2020年12月第47卷第12期International Journal of Surgery,December2020,Vol.47,No.12・861・有利于癌症的进展⑷。
miR-205-5p靶向CDKN1C调节滋养层细胞生物学行为的研究
-274-J Shax4i Meb Univ,Dec2020,VS51No2mib-205-5p靶向CDKN1C调节滋养层细胞生物学行为的研究曹文超，张青林*(首都医科大学附属北京妇产医院麻醉科，北京200262通讯作者,EAiURqh/*************)摘要：目的探究miR-605Ap靶向细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子1C(cyhin-UepenXent kinase inhibitor1C,CDKN1C)在调节滋养层细胞生物学行为中的作用。
方法双荧光素酶报告检测miRA05Ap与CDKN1C的靶向关系。
滋养层细胞系HTRA/kVnec细胞分为NC组、miRA05Ap mimic组、miRA05Ap inhibitor组、CDKN1C组和miRA05Ap mimic+CDKN1C组。
qRT-CCR及Western blot检测Bo4、Bh-2及TGF-pl的表达。
Western blot检测上皮间质转化相关因子Vimentin^N-raPde/n及EAaPSerm的表达,MTT检测细胞增殖情况,TmuweU检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞的凋亡情况。
结果CDKN1C 被证实为miRA05Ap的靶基因。
qRTACR及Western blot检测发现，与NC组比较,miR-605Ap inhibitor组和CDKN1C组BhA 和TGF-p1表达上升,Bu表达下降,Vimeiix和NAUhe/n的蛋白水平表达上升,EAUhe/n表达下降(均P<0.05)，细胞的增殖与侵袭能力上升，凋亡率下降(均P<0.05) o与NC组比较,miRA05Ap mimic组中VimenUn和N-cUhe/n的蛋白水平表达下调，EAUhe/n表达上调,细胞的增殖、侵袭能力削弱,细胞凋亡增加(均P<0.05)。
相对于miRA05Ap mimic组,miR-605-5p mimiv+CDKNlC组细胞增殖和侵袭增加，凋亡减少，提示过表达miRA05Ap的作用能够被CDKN1C过表达逆转。
miR-7-5p通过靶向抑制EGFR表达减弱人非小细胞肺癌的增殖和侵袭能力
miR-7-5p通过靶向抑制EGFR表达减弱人非小细胞肺癌的增殖和侵袭能力胡洪林【摘要】Objective To investigate the effect of miR-7-5p on the proliferation and invasion of human non-small cell lung cancer cells by regulating the expression of EGFR. Methods EGFR was a downstream target gene of miR-7-5p by dual luciferase reporter assay. Human non-small cell lung cancer cell line NCI-H1975 was transfected with miR-7-5p and negative control(miR-N.C),then RT-RCR and western blot were used to detect the expression of EGFR in mRNA and protein level. It used MTS cell proliferation assay,cell cycle assay and Trans-well invasion as-say to detect the proliferation and invasion of NCI-H1975 cells. Results Compared with the control group, miR-7-5p significantly decreased the luciferase activity of EGFR(70.6% vs 100%,χ2=28.3,P<0.01),and EGFR mR-NA level and protein level decreased 78.9% and 71.4% in NCI-H1975 cells, respectively. On the third day after miR-7-5p treatment,the proliferation of NCI-H1975 cells decreased about 32.6% (χ2=27.1,P<0.05) compared with the control group. The cell cycle experiments showed that the percentage of S decreased significantly(19.2% vs 32.7%, χ2=5.2,P<0.05),and the proportion of G0/G1 phase increased significantly(67.8% vs 55.1%,χ2=2.9,P<0.05) compared with the negative control group. miR-7-5p inhibited the invasion ability of NCI-H1975 cells about 47.3%. Conclusion MiR-7-5 suppresses the proliferation and invasion of human non-small cell lungcancer by inhibiting the expression of EGFR.%目的探讨miR-7-5p是否通过调控EGFR的表达而影响人非小细胞肺癌细胞体外增殖和侵袭能力.方法通过双荧光素酶报告证明EGFR为miR-7-5p的下游靶基因,miR-7-5p及其阴性对照(miR-N. C.)转染人非小细胞肺癌细胞株NCI-H1975,观察细胞中EGFR的mRNA水平和蛋白水平的表达变化;然后通过MTS细胞增殖实验、细胞周期实验和Trans-well 侵袭实验,观察NCI-H1975细胞体外增殖和侵袭能力的变化.结果与对照组相比,miR-7-5p可显著降低荧光素酶的表达活性(70.6% vs100%,χ2=28.3,P<0.01).miR-7-5p靶向作用EGFR可使NCI-H1975细胞中mRNA表达水平较对照下调78.9%(χ2=114.9,P<0.05),而蛋白水平则下调了71.4%(χ2=113.3,P<0.05).miR-7-5p处理后第3天,NCI-H1975细胞的增殖能力比对照组细胞降低了32.6%(χ2=27.1,P<0.05).而细胞周期实验表明与阴性对照相比,miR-7-5p处理组的NCI-H1975细胞,其S期所占比例显著下调(19.2% vs 32.7%,χ2=5.2,P<0.05),而G0/G1期所占比例则显著增加(67.8% vs55.1%,χ2=2.9,P<0.05).相比对照组,miR-7-5p可将NCI-H1975细胞的侵袭能力下调约47.3%(χ2=48.9,P<0.05).结论 MiR-7-5主要是通过靶向抑制EGFR表达减弱人非小细胞肺癌的增殖和侵袭能力.【期刊名称】《临床肺科杂志》【年(卷),期】2018(023)006【总页数】5页(P1005-1009)【关键词】非小细胞肺癌;miR-7-5p;EGFR;增殖【作者】胡洪林【作者单位】610072 四川成都,四川省人民医院肿瘤科【正文语种】中文肺癌中约85%患者为非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer，NSCLC)[1]，随着人口老龄化增加，65岁以上的老龄肺癌患者占比超过2/3，因此在一些国家，NSCLC被当做老年疾病对待[2]。
MiR-744-5p通过靶向CCND1抑制肾透明细胞癌细胞的增殖、侵袭和迁移
肾细胞癌的发病率在泌尿系统恶性肿瘤中排第3，但致死率却高居第1位［1］。
肾透明细胞癌（ccRCC ）是肾细胞癌最常见的病理类型，约占70%［2］。
许多ccRCC 患者在首次确诊时就已经出现了转移［3］。
由于ccRCC 对放疗和化疗不敏感，导致患者预后较差［4］。
因此，明确其发生的分子生物学机制，并寻找新的治疗靶点，是目前亟待解决的问题。
MicroRNA(miRNA)是一种非编码RNA ，具有高度保守性，长度一般在19~25个核苷酸［5］。
miRNA 通过与mRNA 的3'-UTR 结合来调控基因的表达，从而调控对蛋白质的翻译或降解［6,7］。
miRNA 的异常表达在多种肿瘤的发生和进展中起着关键性的作用［8］。
据文献报道，miR-744-5p 参与调控了多种肿瘤的进展，如肝细胞癌、恶性胶质瘤、垂体腺瘤等［9-11］。
然而，miR-744-5p 在ccRCC 中的作用尚未有研究报道，本研究旨在探讨miR-744-5p 在ccRCC 中的作用及其机制，从而为ccRCC 的临床诊断和靶向治疗提供新思路。
1材料和方法1.1组织标本、细胞系及主要材料组织标本：65对ccRCC 组织及配对的癌旁组织来MiR-744-5p inhibits the proliferation,invasion,and migration of clear-cell renal cell carcinoma cells by targeting CCND1LEI Kunyang 1,XIE Wenjie 1,SUN Ting 1,LIU Yifu 1,WANG Xu 21Department of Urology,2Department of Pathology,First Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang 330006,China摘要：目的探讨miR-744-5p/CCND1轴在肾透明细胞癌(ccRCC)中的作用及机制。
miR-138-5p调控SIRT1抑制结肠癌细胞增殖及迁移的研究
miR-138-5p调控SIRT1抑制结肠癌细胞增殖及迁移的研究罗云春;胡军;许俊【期刊名称】《巴楚医学》【年(卷),期】2022(5)3【摘要】[CX2][HTK]目的[CX]:探讨miR-138-5p对结肠癌细胞增殖及迁移能力的影响及其作用机制。
[CX2][HTK]方法[CX]:RT-PCR检测结肠癌组织和细胞系中miR-138-5p的表达,分析其表达水平与结肠癌患者临床病理参数的相关性。
建立miR-138-5p过表达的结肠癌细胞系,CCK-8法检测各组细胞增殖活性,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力。
生物信息学预测miR-138-5p可能的靶基因,并采用双荧光素酶实验进行验证。
Western blot法检测沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白的表达,进一步过表达SIRT1,观察细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。
[CX2][HTK]结果[CX]:miR-138-5p在结肠癌组织和SW480细胞系中表达均显著下调(均P<0.05),且其表达水平与患者的肿瘤浸润深度、TNM分期和淋巴结转移显著相关。
过表达miR-138-5p可显著降低结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05)。
miR-138-5p可抑制SIRT1野生型质粒荧光素酶的活性(P<0.05),且过表达miR-138-5p可有效降低SIRT1 mRNA和蛋白的表达(均P<0.05)。
过表达SIRT1可部分逆转miR-138-5p对SW480细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用(均P<0.05)。
[CX2][HTK]结论[CX]:miR-138-5p通过靶向作用SIRT1抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并影响结肠癌患者的肿瘤进展程度。
【总页数】7页(P45-51)【作者】罗云春;胡军;许俊【作者单位】三峡大学第一临床医学院[宜昌市中心人民医院]肛肠科【正文语种】中文【中图分类】R735.35【相关文献】1.miR-1197负调控Smad3抑制结肠癌细胞SW620的增殖、侵袭、迁移能力及S期细胞周期的聚集相关研究2.miR-138-5p通过靶向SETD6基因调控Raf/MEK/ERK通路抑制肝癌细胞迁移、侵袭的分子机制3.毛钩藤碱调控IL-6/STAT3信号通路抑制结肠癌细胞增殖、迁移及诱导细胞凋亡的体外实验4.LncRNA TUG1靶向miR-138-5p调控胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭5.miR-138-5p靶向调控程序性死亡配体-1对肺腺癌细胞的增殖、迁移和上皮间质转化的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
miR-139-5p在小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义
miR-139-5p在小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义刘换新;张国祥;郭琳琅;唐松山【摘要】目的：探讨 miR-139-5p 在小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义，阐明 miR-139-5p 在小细胞肺癌发生发展中的作用。
方法：采用细胞生长、凋亡及周期实验检测 miR-139-5p 的生物学功能；实时荧光定量 PCR法检测50例小细胞肺癌患者癌组织及癌旁正常组织中 miR-139-5p 的表达，结合临床资料分析其在临床中的作用。
结果：miR-139-5p 在小细胞肺癌组织中的表达水平低于正常肺组织（P ＜0.01）；转染 miR-139-5p mimics 后能够明显上调细胞中 miR-139-5p 的表达，差异有统计学意义（P ＜0.01）。
与对照组比较，上调 miR-139-5p 的表达后细胞的增殖能力降低（P ＜0.01），G1期细胞明显增多（P ＜0.05），细胞周期发生 G0／G1期阻滞。
单因素分析，miR-139-5p 的表达与患者的性别和年龄无关（P ＞0.05），miR-139-5p 在局限期（LD）患者中的表达较广泛期（ED）患者低，两者的 miR-139-5p 表达率比较差异有统计学意义（χ2＝10.546，P ＝0.001）；miR-139-5p 在耐药患者中的表达较化疗敏感患者增高（χ2＝7.025，P ＝0.008）。
miR-139-5p 在存活患者中的表达较死亡患者降低（χ2＝7.697，P ＝0.006）；Cox 回归分析，疾病分期和 miR-139-5p 的表达可作为小细胞肺癌独立的预后因子。
结论：miR-139-5p 通过抑制细胞增殖、促进细胞凋亡及诱导细胞周期阻滞参与调节小细胞肺癌发生发展，可作为评估小细胞肺癌患者临床预后的靶基因。
%Objective:To explore the expression of miR-139-5p in small cell lung cancer (SCLC)tissue and its clinical significance, and to clarify the role of miR-139-5p in the occurrence and development of SCLC. Methods:The biological function of miR-139-5p was examined by cell growth,apoptosis and cell cycle analysis. The expressions of miR-139-5p in 50 cases of cancer tissue and paracarcinoma normal tissue were examined by bined with the clinical data,the role of miR-139-5p in clinic was anzlyzed.Results:The expression level of miR-139-5p in SCLC tumor tissue was lower than that in normal lung tissue (P <0.01).The expression level of miR-139-5p in the cells was un-regulated significantly after transferred miR-139-5p mimics (P <0.01).Compared with control group,the proliferation abilitiy of cells was reduced after up-regulating the expression of miR-139-5p (P < 0.01),the number of cells at G1 phase was increased (P < 0.05),and the cells were arrested at G0/G1 phase.The miR-139-5p expression was not associated with gender and age (P > 0.05).The expression level of miR-139-5p in the patient at LD stage was lower than that of the patients at ED stage (P <0.01).The expression level of miR-139-5p in the resistant patients was higher than that of the patients sensitive to chemotherappy (P <0.01).The expression level of miR-139-5p in the survival patients was lower than that in the death patients (P <0.01).Cox regression analysis indicated that miR-139-5p expression and disease stage were the independent prognostic factors forSCLC.Conclusion:miR-139-5p in participates in the occurrence and development of SCLC by inhibiting the cell proliferation,promoting apoptosis and inducing the cell cycle arrest;it may be used as a target gene to evaluate the prognosis of SCLC patients.【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》【年(卷),期】2016(042)005【总页数】7页(P942-948)【关键词】癌,小细胞肺;实时荧光定量聚合酶链式反应;miR-139-5p【作者】刘换新;张国祥;郭琳琅;唐松山【作者单位】武警广东总队医院病理科，广东广州 510507;武警广东总队医院病理科，广东广州 510507;南方医科大学附属珠江医院病理科，广东广州 510282;广东药学院生化与分子生物学教研室，广东广州 510006【正文语种】中文【中图分类】R734.2小细胞肺癌是肺癌的一种病理学分类，占肺癌的15%～20%，其治疗方案一般为化疗和放疗联合方案，由于其转移快，极易产生化疗耐药，故常导致治疗失败[1-2]。
miR-21-5p靶向PIK3R1调控IκBa-MMP12-MMP14信号通路抑制泌乳素瘤的侵袭进展
miR-21-5p靶向PIK3R1调控IκBa-MMP12-MMP14信号通路抑制泌乳素瘤的侵袭进展摘要：miR-21-5p是一种非编码RNA，在多种肿瘤中高表达，可以促进细胞的增殖、侵袭和转移。
PIK3R1是一种miR-21-5p 的靶向基因，它参与PI3K/AKT信号通路，是许多肿瘤的重要促进因子。
在本研究中，我们发现miR-21-5p通过靶向PIK3R1抑制了泌乳素瘤细胞的侵袭和转移能力。
同时，miR-21-5p还通过调控IκBa/MMP12/MMP14信号通路抑制了泌乳素瘤的侵袭进展。
这个发现表明miR-21-5p/PIK3R1/IκBa/MMP12/MMP14信号通路在泌乳素瘤的发生和发展中具有重要的作用，可以作为治疗和预后评估的潜在靶点。
关键词：miR-21-5p，PIK3R1，泌乳素瘤，侵袭，转移，信号通路引言：泌乳素瘤是一种常见的乳腺良性肿瘤，多数情况下不需要治疗。
然而，在一些情况下，泌乳素瘤可以通过侵袭和转移引起乳腺癌的发生和转移。
因此，探究泌乳素瘤的侵袭机制并发现有效的治疗靶点具有重要的临床意义。
材料和方法：在本研究中，我们通过qRT-PCR和Western blotting分析了miR-21-5p和PIK3R1在泌乳素瘤和正常乳腺组织中的表达水平。
同时，我们使用细胞迁移和侵袭试验探究了miR-21-5p和PIK3R1对泌乳素瘤侵袭和转移的影响。
最后，我们通过Western blotting分析了miR-21-5p对IκBa/MMP12/MMP14信号通路的调控作用。
结果：我们发现miR-21-5p在泌乳素瘤组织中高表达，而PIK3R1在泌乳素瘤组织中低表达。
miR-21-5p高表达显著降低了泌乳素瘤细胞的迁移和侵袭能力，而PIK3R1的上调则显著增加了泌乳素瘤的侵袭和转移。
此外，我们发现miR-21-5p通过调控IκBa/MMP12/MMP14信号通路抑制了泌乳素瘤的侵袭进展。
miR-125a-5p在消化及呼吸系统肿瘤中表达水平及在肿瘤发生发展的作用
miR-125a-5p在消化及呼吸系统肿瘤中表达水平及在肿瘤发生发展的作用MicroRNA(miRNA)一种成熟的、小的、非编码的、单链、高度保守的内源性RNAs，通过与靶信使RNA(mRNA)3'端的非翻译区(3'UTR，untranslated regions)，近乎完全互补结合在转录后水平使其降解，或者与之不完全互补结合在翻译水平抑制蛋白合成，从而抑制靶蛋白编码基因的翻译及表达。
到目前为止，人们已经发现了几百种miRNA。
在人类的所有基因谱中，miRNA具有多种生物学功能，调控多种生物学过程，参与细胞的发育、代谢、分化、增殖、自噬和凋亡等。
越来越多的研究表明: miR-125家族在很多实体肿瘤中发挥抑癌基因功能，因靶基因的不同，miR-125a的表达水平不一致。
在不同肿瘤中表达程度亦不相同，提示miR-125a在不同肿瘤的发生发展过程中可能发挥不同的作用。
在多种实体肿瘤中检测到miR-125a的表达减少，如乳腺癌、肺癌、卵巢癌以及胶质母细胞瘤。
miR-125a与肿瘤细胞的生长、分化及转移存在密切的关系，但在不同的癌组织中存在上调或下调不一致表达的现象。
目前，对于miR-125a研究多集中miR-125a-5p,为明确其在肿瘤发生发展中的作用，探寻肿瘤治疗的新靶点提供理论依据，寻求肿瘤诊断及预后判断新的生物标志物。
1. miR-125a-5p在胰腺癌中的表达水平及促进癌细胞恶性转化作用胰腺癌发病隐匿，早期诊断率低，大约95％的胰腺癌患者在明确诊断时己进入中晚期，是导致其高死亡率的主要原因。
因此急需寻找一种可以用于胰腺癌早期诊断的标志。
最新的研究结果显示，循环miRNAs尤其是外周血中的miRNAs稳定表达，其表达谱在疾病状态下出现异常改变，可能成为潜在的疾病检测评估指标及治疗靶点。
贾丛伟等人研究发现， 4个胰腺癌细胞系miR-125a-5p的表达均高于癌旁正常组织，下调miR-125a-5p的表达水平可抑制Pane-1、MIA PaCa-2两个细胞系的生长及增殖能力。
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空军 医学 杂志 ２ ０ １ ７ 年８ 月 第３ ３ 卷 第４ 期 Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｊ ｏ ｕ ｎａ ｒ ｌ ｏ ｆ Ａ ｉ ｒ Ｆ ｏ ｒ ｃ ｅ ，Ｖ ｏ １ ． ３ ３ ，Ｎ ｏ ． ４ ，Ａ ｕ ｇ ｕ ｓ ｔ ，２ ０ １ ７
・２ ３ ７・
●
论著 ・ 普通 医学
ｍｉ Ｒ ＮＡ一 １ ３ ８ － ５ ｐ 转 染后黑色素 瘤 细胞 的增殖 ； Ｒｅ ａ ｌ ｔ ｉ ｍｅ Ｐ ＣＲ检ｉ ￣ １ ］ ｍｉ Ｒ ＮＡ一 １ ３ ８ — ５ ｐ 转 染后其 靶 基 因ＣＣＮＥ１ ｍＲＮＡ水平 的
变化； Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ｂ ｌ ｏ ｔ 检￣ ］ Ｉ ｍｉ ＲＮＡ－ １ ３ ８ － ５ ｐ 转染 后ＣＣＮＥ１ 蛋 白水平 的变化 ； Ｌ ｕ ｃ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｓ ｅ Ｒ ｅ ｐ ｏ ｒ ｔ ｅ ｒ 试验 检￣ ｍｉ ＲＮＡ－ １ ３ ８ ． ５ ｐ
●
ｍｉ ＲＮＡ一１ ３ ８ —５ ｐ 通 过 靶 向调 控 Ｃ Ｃ ＮＥ １ 抑 制
里 色 素瘤 细 胞 增 殖
、、、
乔
丽 ，杨志 勇，李新技 ，刘 雯
［ 摘 要 ］ 目的 研 究 ｍｉ ＲＮＡ一 １ ３ ８ — ５ Ｐ 在 黑 色 素 瘤 细 胞 增 殖 中的 作用 及 其 发 挥 作用 的机 制 。方 法 Ｍ ＴＴ 法 检 测
Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄｓ Ｍ ＴＴ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ｗａ ｓ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｏ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｍｅ ｌ ａ ｎ ｏ ｍａ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ａ ｔｅ ｆ ｒ ｍｉ ＲＮＡ一 １ ３ ８ － ５ ｐ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｒｅ ａ ｌ － ｔ ｉ ｍｅ Ｐ ＣＲ ｗａ ｓ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｔ ｈ ｅ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｅ ｓ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｔ ａ ｒ ｇ ｅ ｔ ｇ ｅ ｎ ｅ ＣＣＮＥ１ ｍ ＲＮＡ ａ ｔｅ ｆ ｒ ｍｉ ＲＮＡ－ １ ３ ８ — ５ ｐ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ ｗａ ｓ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ
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ｍｉ ＲＮＡ・ １ ３ ８ － ５ ｐ 可以 降 低细 胞 中Ｃ ＣＮＥ１ 的ｍＲＮＡ￣ Ｈ 蛋白水平 。 共转 染ｍｉ ＲＮＡ一 １ ３ ８ — ５ ｐ ￣ Ｉ ］ Ｃ ＣＮＥ１ 可 以部 分 消除 ｍｉ ＲＮＡ－
１ ３ ８ — ５ ｐ 对 黑色素 瘤 细胞 增殖 的 影 响。结 论 ｍｉ ＲＮＡ一 １ ３ ８ — ５ ｐ 通 过其 靶 基 因ＣＣ ＮＥ１ 在黑色 素瘤 细胞 的增 殖 中发 挥 了重要 的 作用 ， ｍｉ ＲＮＡ一 １ ３ ８ — ５ ｐ 在 黑色素 瘤细胞 中可能作 为一 个关键 的药 物靶 点 。 ［ 关 键词］ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ＲＮＡ； 黑色素瘤； Ｃ Ｃ ＮＥ１ ； 增殖
［ 中图分类号】 Ｒ ７ ３ ９ ． ５
［ 文献标识码］ Ａ
［ 文章编 号］ ２ ０ ９ ５ — ３ ４ ０ ２（ ２ ０ １ ７ ） ０ ４ — ２ ３ ７ — ０ ５
ｍｉ ＲＮＡ－ １ ３ ８— ５ ｐ ｉ ｎ ｈｉ ｂ ｉ ｔ ｓ ｍｅ ｌ ａ ｎ ｏ ｍａ ｃ ｅ ｌ ｌ ｐｒ ｏ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｂ ｙ ｔ ａ ｒ ｇ ｅ ｔ ｉ ｎ ｇ ＣＣＮＥ１
对 ＣＣＮＥ１ ３ ’ 非翻译区 （ ３ ’ ＵＴＲ） 及其 突 变的 影 响 ； ＭＴ Ｔ法检 测 共转 染ｍｉ Ｒ ＮＡ一 １ ３ ８ － ５ ｐ ￣ ｌ ｌ ＣＣＮＥ１ 对黑 色素瘤 细胞 增殖 的
影 响 。结果 过表 达 ｍｉ ＲＮＡ一 １ ３ ８ — ５ ｐ 可 抑制 黑色素瘤 细 胞的 增殖 。 ＣＣ ＮＥ１ 是ｍｉ ＲＮＡ一 １ ３ ８ － ５ ｐ 的一 个功 能性 靶 基因 ， 转染