配置间沉降菌测试方法
洁净室沉降菌测试标准操作规程
洁净室沉降菌测试标准操作规程1、菌落:细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。
通常用个数表示。
2、测试方法:沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经48小时以上培养，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室的洁净度。
3、所用的仪器和设备1)高压消毒锅:使用时参照文件GZ-ZL-SOP-066-00进行操作。
2)恒温培养箱:必须定期对培养箱的温度计进行检定。
3)培养皿:一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。
使用前将培养皿置于121?湿热灭菌20分钟。
4、培养基:普通营养琼脂培养基。
将培养基加热熔化，冷却至约45?在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15m1。
待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入30,35?恒温培养箱中培养数小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2,8?的环境中存放。
5、测试步骤1)采样方法:将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上盖后倒置。
2)培养，时间不少于48小时。
每批培养基应有对照试验，检查培养基本身是否污染，可每批选定3只培养皿作对照培养。
3)菌落计数:用肉眼直接计数，然后用5,10倍放大镜检查，有否遗漏。
若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。
6、注意事项1)测试用具要做灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。
2)采取一切措施防止人为对样本的污染。
3)对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。
4)由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。
5)采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。
静脉用药调配中心 培训测试题(答案版)
静脉用药调配中心培训测试题（答案版）一、填空题（每空2分，共60分）1.根据《二、三级综合医院药学部门基本标准（试行）》规定，静脉用药调配中心（室）配置量为每日调配3001袋(瓶)以上，每增加500袋(瓶)则调配中心面积递增 30㎡。
2.危害药品包括肿瘤化疗药物和细胞毒药物。
3.根据管理规定要求，肠外营养液、危害药品静脉用药应当实行集中调配供应。
4.PIVAS总体区域设计布局应保证洁净区、辅助工作区和生活区的划分，不同区域之间的人流和物流出入走向合理。
5.PIVAS各功能室的洁净级别要求：一次更衣室、洗衣洁具间为十万级；层流操作台、生物安全柜为百级。
二次更衣室、加药混合调配操作间为万级；6.在静脉用药配置药师贴签摆药时，应当采取双人核对制度，并签名或盖签章。
7.静脉用药调配中心药库应具备确保药品与物料储存要求的温湿度条件，库房相对湿度 40％～65％；常温区温度 10℃～30℃，阴凉区温度不高于20℃，冷藏区温度 2℃～8℃。
8.药库中药品使用应遵循先产先用、先进先用、近期先用和按批号发药使用的原则。
9.医药工业洁净厂房中，不同空气洁净度等级的医药洁净室之间或洁净室与非洁净室之间空气静压差不应小于 5 Pa 。
10.医药洁净室（区）应有相应照度，其中主要工作室一般照明照度值宜为300lx 。
11.医药用注射用水输送管道系统应采用循环方式。
12.在使用洁净操作台进行药品调配时，每天在操作开始前，提前启动层流操作台循环风机和紫外线灯，30 分钟后关闭紫外灯，再使用 75%乙醇擦拭工作区域的顶部、两侧及台面，顺序应当从上到下、从里向外。
每天操作结束后，应当彻底清场，先用常水清洁，再用 75%乙醇擦拭消毒。
13.生物安全柜每月应当做一次沉降菌监测，方法：将培养皿打开，放置在操作台上半小时（时间），封盖后进行细菌培养，菌落计数。
二、不定项选择题（每小题3分，共计18分）1.现行的《静脉用药集中调配质量管理规范》是由卫生部于何时发布的【 A 】A. 2010年4月20日B. 2010年6月1日C．2011年4月20日 D. 2011年6月1日2.根据《二、三级综合医院药学部门基本标准（试行）》规定，静脉用药调配中心（室）配置量为每日调配1000-2000袋(瓶)，调配中心面积应为：【 C 】A.100㎡-150㎡ B. 150㎡-300㎡C.300㎡-500㎡D. 500㎡-650㎡3.PIVAS洁净区应当设有温、湿度、气压等监测设备和通风换气设施，保持【 A 】A.温度18℃～26℃，相对湿度40％～65%B.温度16℃～24℃，相对湿度40％～65%C.温度18℃～26℃，相对湿度30％～50%D.温度16℃～24℃，相对湿度30％～50%4.静脉用药调配中心（室）地面消毒剂可选用哪些【 ABD 】A.甲酚皂溶液B. 季铵类阳离子表面活性剂C. 醛类消毒剂D. 次氯酸钠5.Ⅱ级B2型生物安全柜的性能特点包括【 ACDE 】A.维持工作台开口的最小平均风速为0.5m/sB.经HEPA过滤后的大部分污染的垂直气流，通过专用风道过滤后排入大气C.安全柜中排出的气体不进入垂直气流的循环过程D.也成为“全排”型E.所有污染的风道和静压箱应保持负压6.根据《静脉用药集中调配质量管理规范》要求，静脉用药调配中心应配备下列哪种设备供肠外营养液和普通输液静脉用药调配使用【 B 】A.生物安全柜 B水平层流洁净台C. 垂直层流洁净台D. 非单向流洁净操作台三、判断题（每小题2分，共计8分）1.静脉用药集中调配是药品调剂的一部分。
沉降菌测试方法范文
沉降菌测试方法范文沉降菌测试方法，也称为沉降法菌落计数法或霉菌菌落计数法，是一种用于测定液体或固体样品中微生物总数的方法。
它是通过将待测样品稀释后，将其均匀涂布在富营养培养基上，然后在适宜的条件下培养并计数菌落数量来进行的。
以下是沉降菌测试方法的详细步骤：材料准备：1.培养基：选择适合菌落生长和明显可见的适宜富营养培养基，如琼脂培养基。
2.空气采样器：使用空气采样器采集空气中的微生物样本。
3.灭菌工具：包括火焰灭菌器、灭菌锅等。
4.精密量筒：用于稀释待测样品。
步骤：1.预处理样品：a.若待测样品为液体，则需要首先将其充分混匀。
b.若待测样品为固体，则需要将其用适宜的方法制备成液体悬浮液，以保证样品中微生物的均匀分布。
2.稀释样品：a.确定合适的稀释倍数，选择合适的容器，并在其中加入适量的培养基。
b.使用精密量筒将待测样品稀释至合适的浓度。
通常情况下，稀释倍数应为10的指数倍数，如10^-1、10^-2等。
3.涂布样品：a.取一支已灭菌的玻璃棒或镊子，沾取一定量的稀释后的样品。
b.将沾有样品的玻璃棒或镊子均匀涂布在琼脂培养基的表面，确保涂布均匀、无气泡和交叉污染。
4.培养样品：a.将琼脂培养基培养皿倒置，放入已灭菌的培养皿，并将其封闭。
b.将培养皿置于适当的温度和湿度条件下，一般为28-37摄氏度。
c.培养时间一般为24-48小时，根据不同微生物种类和培养基的要求可进行相应调整。
5.菌落计数：a.取出培养好的琼脂培养基培养皿，记录上面出现的菌落数量。
b.对于数目较多的菌落，可以进行随机选择部分区域进行计数，然后乘以相应倍数估算总菌落数量。
整个过程中，需注意严格的灭菌操作以及防止交叉污染的发生。
计数结果应及时记录并进行统计分析。
沉降菌监测规程
1.范围适用于本公司生产洁净区的沉降菌的测定和环境的验证2. 质量指标：根据《GBT16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》进行；洁净度级别技术要求（沉降菌个数）100，000级≤10个/皿10000级≤3个/皿3. 测试方法3.1 本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净区的洁净度。
3.2 培养皿一般采用90c m×15mm规格的培养皿。
3.3 恒温培养箱必须对培养箱的温度计进行鉴定4. 测试步骤4.1将已制备好的培养皿按采样点放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中。
4.2静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上；动态测试时，培养皿暴露时间为不大于4h.4.3全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。
4.4采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配置的培养皿经采样后。
在30℃～35℃培养箱中培养，时间不少于2d；采用沙氏培养基（SAD）配置的培养皿采样后，在20℃～25℃培养箱中培养，时间不少于5d.4.5每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。
可每批选定3只培养皿作对照培养。
4.6菌落计数4.6.1若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可以辨时仍以2个或2个以上菌落计数。
4.7注意事项4.7.1测试用具要作灭菌处理。
以确保测试的可靠性、正确性。
4.7.2采取一切措施防止人为对样本的污染。
5. 测试规则5.1 沉降菌测试前，被测试的洁净区的温度、静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内；温度和相对湿度的测试，温度在18℃～26℃，相对湿度在45﹪～65﹪为宜。
5.2 测试状态静态和动态两种状态均可进行测试。
静态测试时，室内测试人员不得多于2人。
沉降菌测试前，被测试的洁净区已经过消毒5.3沉降菌菌落数计算5.4采样点数量及其布置5.4.1.1采样点的位置5.4.1.2采样点布置及放置平皿数应按5.4.1采样点：100000级≤20m2洁净区应布置2个采样点；10000级≤20m2洁净区应布置2个采样点；带：·的为布点位置5.4.2 平皿数：100000级≤20m2洁净区每个采样点应放置2个平皿；10000级≤20m2洁净区每个采样点应放置2个平皿；5.4.3平均菌落数的计算：5.4.4记录监测结果。
沉降菌检测操作规程
沉降菌检测操作规程受控状态文件编号 ZHSS03—09—01版环境监测沉降菌检测操作规程(试行本)编制:审核:批准:发布日期: 实施日期:北京京中宏塞思生物技术有限公司北京中宏赛思生物技术有限公司受控状态沉降菌检测操作规程文件编号 ZHSS03—09—01版1. 目的规范检测人员对有洁净要求的洁净区域的沉降菌指标进行检测的操作方法的行为。
2. 范围适用于本工厂内洁净生产车间、微生物实验室和百级工作台等洁净区域。
3. 职责质量控制负责人、微生物检验员对本标准的实施负责。
4. 检测方法4.1 检测依据引用标准《医药工业洁净厂房设计规范》标准号 GB50457—2008执行标准《医药工业洁净室(区)沉降菌的检测方法》标准号 GB/T1629—20104.2 仪器设备立式压力蒸汽灭菌器、恒温培养箱、百级工作台4.3 玻璃仪器Φ90mm培养皿、三角烧杯4.3 检测药品大豆酪蛋白琼脂、纯化水4.4 培养基制备4.4.1 将大豆酪蛋白琼脂按照比例加水配置，并加热溶解。
4.4.2 将溶解后的培养基置于立式蒸汽压力灭菌器中，121?灭菌20min。
4.4.3 将灭菌合格的培养基，冷却至60?左右，移入百级工作台，以每皿约20ml 的量分装在平皿中，待凝固备用。
4.5 采样4.5.1 测试前培养皿表面严格消毒。
4.5.2 将制备好的培养皿按照采样布点图的位置放好，然后由里到外逐个打开，使培养基表面完全暴露在空气中。
4.5.3 静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上;动态监测时，培养皿暴露时间不大于4h。
4.5.4 全部采样结束，将培养皿倒置于恒温培养箱中进行培养。
4.6 培养:采用大豆酪蛋白琼脂培养基采样结束后，在30?~35?培养箱中培养不少于2d。
4.7 每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否有污染。
每批做3个对照培养。
4.8 菌落计数4.8.1 用肉眼对培养皿上所有的菌落计数，然后用5~10倍放大镜检查，是否有遗漏。
沉降菌测试方法..
沉降菌测试方法1、把ф90m m×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。
2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。
3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。
制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。
4、采样时，一般在100级层流罩中放置3个培养皿，在100000级，10000级按面积大小一般放2个培养皿。
打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33℃—1.5m左右。
5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10倍放大镜检查是否遗漏，若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。
6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。
被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。
7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室内测试人员不得多于2人。
测试时间对单向流100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始，对非单向流，100000级以上净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。
8、平均菌落数计算：M 1+M 2+M 3平均菌落数=.........21nMn M M ++ n —培养皿总数M 1—1号培养皿菌落数M 2—2号培养皿菌落数M n —n 号培养皿菌落数用平均菌落数判断洁净空气中微生物。
洁净室内平均菌落数必须低于所选定的评定标准，（100级≤1个；10000级≤3个；100000级≤10个）。
若某洁净室内平均菌落数超过标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。
洁净室沉降菌测试方法
文件编号
版号
A.0
洁净室(区)沉降菌检验方法
页次
生效日期
2020/01/02
1．目的
制订洁净室(区)沉降菌检验方法，对从事测试的工作人员进行培训指导，规范检验方法及操作。
2．适用范围
本方法适用于洁净室(区)或无菌区域（包括超净工作台）沉降菌的检测和环境的验证。
3.职责
质检部对本规程实施负责。
注：如采用其他规格的平皿，可适当增减培养基的量，使之在平皿中形成至少2mm厚的琼脂层。
4.6.1.3制备好的培养基平皿如需存放后使用，应标记名称、制备日期等，存放在2℃～8℃环境下，1周内使用有效。
4.6.1.4使用前应仔细检查每个培养皿的质量，培养基及培养皿有变质、破损或污染的不能使用。
4.6.2测试步骤
≥1000～＜2000
≥2000
2～3
4
8
16
40
80
160
400
800
2
2
2
4
10
20
40
100
200
2
2
2
2
3
6
13
32
63
注：表中的面积，对于100级的净化工作台，指的是送风口面积；对于10 000级，100 000级的非单向流洁净室，指的是房间面积。
b. 在满足最少监测点数的同时，还宜满足最少培养皿数：
4.6测试步骤
4.6.1制培养皿（平板）
4.6.1.1培养基配制：按瓶签上的《用法》进行配制。以下配制量为1000ml。
a.称量：称取瓶签上《用法》标示的大豆酪蛋白琼脂（TSA）培养基粉末的量，倒入1000ml烧杯中。
b.溶解：在装有大豆酪蛋白琼脂（TSA）培养基粉末的烧杯中加入蒸馏水1000ml，搅拌均匀后，加热煮沸至完全溶解。
洁净室(区)沉降菌检测标准操作规程
洁净室(区)沉降菌检测标准操作规程目的制定标准的洁净室（区）沉降菌的测试方法，指导沉降菌的测试工作。
范围适用于洁净室（区）沉降菌的测定和验证。
责任QC微生物室检验员负责洁净室（区）沉降菌的测试，QC主管和QA部门负责对测试的数据进行统计分析。
程序1.定义1.1.菌落：微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简称CFU。
1.2.沉降菌：通过自然沉降原理收集在空气中的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数。
1.3.动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态设备在指定的方式下进行，并且有指定的人员按照规范操作的状态。
2.测试方法2.1.测试过程2.1.1.设备和培养基：恒温培养箱、购买预灌装TSA平皿或者自制TSA平皿。
2.2.测试条件2.2.1.洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18~26℃，相对湿度在45%~65%为宜）。
2.2.2.风速、压差应在合格范围内。
2.2.3.动态测试。
2.3.测试方法2.3.1.将准备好的培养皿按采样点要求放置或放在沉降架上（约1.0m）。
将采样台面取样位置或采样辅助设施表面消毒，打开培养皿，将培养皿盖置于已消毒位置，将培养皿置于培养皿盖上，使培养基表面充分暴露后，将培养皿盖盖上后倒置。
2.3.2.在每一只培养皿上标记好具体的取样位置及取样日期，将所有培养皿在QC微生物室进行培养观察。
2.4.培养观察计数2.4.1.全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养，在20~25℃培养箱中培养3天，30~35℃培养箱中培养2天后观察计数。
2.4.2.每批培养基应有阴性对照试验，检验培养基本身是否污染。
可每次选定2只培养皿作对照培养。
2.5.计算2.5.1.平均菌落数M= M1＋M2＋…MNNM1＝1号培养皿菌落数M2＝2号培养皿菌落数Mn＝n号培养皿菌落数n＝培养皿总数2.5.2.结果判定2.5.2.1.最终结果采用平均值。
沉降菌检测操作规程
沉降菌检测操作规程
《沉降菌检测操作规程》
一、目的
为了保障食品安全，防止沉降菌污染食品，特制定本操作规程。
二、适用范围
本规程适用于对食品中沉降菌的检测工作。
三、检测仪器和试剂
1. 采用适用于沉降菌检测的培养基和培养皿。
2. 采用适用于沉降菌检测的显微镜和显微镜镜片。
四、检测操作步骤
1. 取一定量的食品样品，按照相应比例加入适量的生理盐水中，并进行均匀搅拌。
2. 取适量预处理后的样品液，分别加入培养基中的培养皿，并进行培养。
3. 观察培养皿，记录沉降菌的形态特征和数量。
4. 如果需要进一步分析，使用显微镜观察沉降菌的细胞形态和结构。
五、结果判定
根据检测结果，判断食品样品是否含有沉降菌，并确定其数量和种类。
六、记录和报告
1. 对检测操作进行详细记录，包括样品处理、培养条件、观察结果等。
2. 根据检测结果，制作检测报告，并按照规定提交相关部门。
七、注意事项
1. 操作人员应按照操作规程进行操作，严格遵守操作规范和安全操作规定。
2. 显微镜等实验仪器要定期检查和维护，以确保检测的准确性和可靠性。
3. 培养基的制备和保存要符合相关要求，避免影响检测结果。
通过严格按照《沉降菌检测操作规程》进行操作，可以保障沉降菌检测的准确性和可靠性，为保障食品安全提供了重要的技术支持。
沉降菌的测试方法
沉降菌：用标准提及的方法收集到的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。
测试方法：本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿（一般多采用90mm直径硼硅酸玻璃培养皿，俗称沉降碟），经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。
人员职责：洁净室的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的穿戴方式，外面的衣服不能带进100000以上的区域。
测试步骤：1、测试前培养皿表面必须严格消毒。
2、将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿，使培养基表面暴露在空气中。
3、静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上；动态测试时，培养皿暴露时间不大于4h。
4、全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。
5、采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配置的培养皿经采样后，在30℃~35℃培养箱中培养，时间不少于2d。
6、每批培养基应有对照试验，试验培养基本身是否污染。
可每批选定三只培养皿作对照培养。
注意事项：1、测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。
2、采取一切措施防止人为对样本的污染。
3、对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。
4、由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并注意细菌菌落和培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。
5、采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。
测试条件：测试之前，要对洁净室相关参数进行预先测试，参数包括：1、温度和相对湿度的测试。
2、室内送风量或风速的测试或压差的测试。
3、高效过滤器的泄露测试。
测试状态：静态和动态均可进行测试。
静态测试时，室内测试人员不得多于2人。
沉降菌测试前，被测洁净室由使用者决定是否需要预先消毒。
食品化妆品药品净化车间环境检测计划(浮游菌,沉降菌,悬浮粒子,压差)
净化车间浮游菌检测记录
沉降菌
沉降菌②：≤20 CFU/30min
每周
净化车间沉降菌检测记录
实验室
（洁净区）
悬浮粒子
≥0.5μm，粒子数≤3500000个/m3
每周
净化车间悬浮粒子检测记录
≥5μm，粒子数≤20000个/m3
每周
浮游菌
≤500CFU/m3
每周
净化车间浮游菌检测记录
沉降菌
沉降菌②：≤15 CFU/30min
每周
《GB/T 16293 医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》
净化车间浮游菌检测记录
沉降菌
沉降菌②：≤15 CFU /30min
每周
《GB/T 16294 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》
净化车间沉降菌检测记录
静压差
相对于准洁净≥5pa
每周
《化妆品生产质量监督管理规范》
温度
18~26℃
每天
净化车间环境检测计划
车间功能区
监测项目
监测指标
检测频率
检测方法和依据
检测记录
灌装间
（洁净区10万级）
悬浮粒子
≥0.5μm，粒子数≤3500000个/m3
每周
《GB/T 16292 医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法》
净化车间悬浮粒子检测记录
≥5μm，粒子数≤20000个/m3
每周
浮游菌
≤500 CFU /m3
每周
净化车间沉降菌检测记录
净化区工作台面
菌落总数
≤20CFU/立方厘米
生产前
工作台面检验报告
操作工手检测
菌落总数
≤300CFU/只手
食品厂微生物沉降涂抹操作步骤
食品厂微生物沉降涂抹操作步骤参考标准GB/T 16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法GB 15979-2002 一次性使用卫生用品卫生标准涂抹操作（菌落总数、大肠菌群）一、配制药品：生理盐水（试管中+棉签）或直接采购无菌涂抹棒、PCA培养基、VRB A培养基二、培养基灭菌：PCA------121℃，15分钟；VRBA-----无需灭菌，煮沸即可；生理盐水---121℃，15分钟。
注：灭菌后的生理盐水需冷却彻底后才可以进行涂抹操作三、涂抹操作：a.取待测物（人员手部、操作案板、工器具表面等）涂抹面积为5*5cm2；b.涂抹后将与手部接触的棉签棒的部分折掉；c.检样作出2-3个稀释度1mL（原液）→无菌平皿中（10-1），2板菌落总数，2板大肠菌群=4板→9ml灭菌生理盐水中（10-2），2板菌落总数，2板大肠菌群=4板于10-2试管中吸取1ml，加入9ml灭菌生理盐水中（10-3），2板菌落总数，2板大肠菌群=4板注：菌落倒入配置后灭菌的PCA，15-20mL，大肠倒入配制后灭菌的VRBA，15-20mL。
d.培养：待琼脂凝固后放入培养箱中，平皿倒置（除霉菌PDA外，其余平皿均倒置培养），36±1℃，大肠培养24小时，菌落培养48小时。
e.查板计数：于N+1天，查大肠结果，N+2天，查菌落结果。
沉降菌（菌落总数、霉菌）一、配制培养基：PCA、PDA；二、倒板：按照计划沉降点数，计算所需培养基及倒板的数量，PCA约20mL/板，PD A不得少于20mL/板（培养时间长，琼脂少就干了）；三、沉降：车间在30m2以上者，于东、西、南、北（距墙1m处）、中五点；小于3 0m2者，于一条对角线里、中、外三点，高度均在1.5m处采样，打开平皿盖，使平板在空气中暴露5 min（操作时，周围不得有人员走动，防止结果不准）；四、收板：将手部用75%酒精消毒后再收板，切忌触碰到平板内琼脂五、培养：PCA,36±1℃,培养48小时;PDA,28℃,培养5天；六、查板计数：于N+2天，查菌落结果，N+5天，查霉菌结果。
沉降菌静态检测标准
沉降菌静态检测标准沉降菌静态检测是一项重要的微生物检测方法，它可以用于评估水质、食品、药品等领域中的微生物污染情况。
本文将介绍沉降菌静态检测的标准方法，以及在实际操作中需要注意的事项。
首先，进行沉降菌静态检测前，需要准备好所需的实验器材和试剂。
常见的实验器材包括培养皿、移液器、灭菌好氧培养皿等，而试剂则包括生理盐水、琼脂、消毒液等。
在准备实验器材和试剂时，需要确保其干净、无菌，以避免对实验结果造成干扰。
接下来，进行样品的处理和分装。
将待检样品按照要求进行处理，然后进行适当稀释，并分装到培养皿中。
在分装样品时，需要注意避免空气污染，尽量避免培养皿内有气泡和液体溅出。
然后，进行沉降菌的培养和计数。
将分装好的样品培养在适宜的温度下，培养时间一般为24-48小时。
培养结束后，观察培养皿上的菌落情况，并进行计数。
在进行计数时，需要注意避免重复计数同一菌落，以保证结果的准确性。
最后，进行数据的统计和分析。
将得到的菌落计数数据进行统计和分析，得出沉降菌的数量和种类。
根据实验要求和标准，对结果进行评价，判断样品是否符合规定的标准要求。
在进行沉降菌静态检测时，需要注意以下几点，首先，严格遵守实验操作规程，确保实验过程的准确性和可靠性；其次，注意实验环境的清洁和无菌，避免外界环境对实验结果的干扰；最后，对实验结果进行准确的记录和分析，及时发现问题并进行处理。
总之，沉降菌静态检测是一项重要的微生物检测方法，通过严格按照标准操作，可以得到准确可靠的检测结果，为保障水质、食品、药品等领域的安全提供重要的数据支持。
希望本文所介绍的沉降菌静态检测标准方法能够对相关人员有所帮助，提高检测工作的准确性和可靠性。
配置间沉降菌测试方法
配液洁净室沉降菌空气采样及检测方法1、净化系统在开启状态，房间清洁并擦拭消毒后，紫外线照射30分钟，关闭紫外线后30分钟，无人使用条件下开始采样。
2、测试人员穿着洁净服，戴口罩，手消毒或戴手套。
动作要轻，避免产生污染干扰。
3、取直径90mm×15mm无菌普通培养液平板培养皿，编号备用。
4、采样方法：①普药间及抗化间每月各抽取一个操作台进行监测（1-14为采样点，15为对照点），在洁净间、二更和一更各选取两点（距地面0.8m～1.5m），监测结果取平均值；②将培养皿按采样点布置图逐个放置，然后按编号从小到大的顺序逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中，沉降30min后，盖上平板盖后倒置收起；15号打开后立即封盖，作为空白对照；③收取培养皿时与放置时顺序相反，从大到小依次收取；④将采样平板送至检验科。
5、注意事项：①采样时，采样者应站在采样口的下风侧，并尽量少走动；②拿开平板盖时，手部不能穿越平板上空，将平板盖搭放在培养皿边上不重叠。
6、结果的评定：①每个测点的沉降菌平均菌落数必须低于所选定评定标准中的界限；②在静态监测时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，应重新采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合；③洁净室沉降菌技术要求如下：采样点布置图洁净间、一更、二更采样点布置图物表和手表微生物采样方法一、物体表面采样方法：用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，连续采样4个，取一支无菌棉拭子在10ml采样液的试管内浸湿，于管壁上挤压一下，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次（从下向上5次，从左向右5次），并随之转棉拭子，然后以无菌操作方式将采样的棉拭子头剪断并落入采样试管内，立即送检。
门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。
二、手部表面采样方法：监测对象采取五指并拢姿势，操作者将无菌棉拭子蘸采样液挤干，在被采手指屈面自手指根到指尖往返涂擦2次直到采完全手，每只手采样面积约计30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子。
静脉用药配置中心洁净区沉降菌测试方案
****医院静脉用药配置中心洁净区沉降菌测试方案范围适用于****医院静配中心洁净室和洁净区，无菌室或局部空气净化区域（包括洁净工作台）沉降菌测试和环境的验证。
引用文件《GB/T 16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》测试方法1 方法提要：本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适应的条件下让其繁殖到可见菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此评定洁净室（区）的洁净度。
2 仪器2.1 培养皿培养基2.2.1培养皿一般采用90mm*15mm规格的培养皿，由医院检验科提供。
2.2.2培养基大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA），由医院检验科制备并提供3 测试步骤3.1普通药物调配间：1.清洁调配间的所有卫生，全部工作人员离场。
2.启动调配间的净化系统自净30min，记录温度、相对湿度、风速、静压差。
开启9台水平层流洁净台紫外灯30min后，关闭紫外灯，启动水平层流洁净台的通风系统10min，记录温度、相对湿度、风速、静压差值。
3.将培养皿按采样顺序依次置于水平层流洁净台的α（如：图二），调配间的1st、2ed、3rd、4th、5th，二更室的1st、2ed、3rd，一更室的1st、2ed、3rd，清洁间的1st、2ed、3rd （如：图一），距地面0.8~1m。
4.依次打开水平层流洁净台、调配间、一更室、二更室、清洁间的培养皿盖，使培养基充分暴露0.5h。
5.依次盖上水平层流洁净台、调配间、二更室、一更室、清洁间的培养皿盖，回收培养皿。
6.将培养皿送到检验科，待检。
3.2抗生素配药间：1.清洁调配间及winnas机器人的卫生，全部工作人员离场。
2.启动调配间的净化系统，自净30min，记录温度、湿度、风速、静压差值。
开启A2型生物安全柜，winnas（1）、（2）机器人紫外灯30min，启动A2型生物安全柜及winnas机器人通风系统30min，记录风速、静压差、温度、湿度值。
PIVAS静脉配制中心卫生学监测
空气消毒后，应关闭门窗，无人员走动，静止 30分钟后采样，采样过程禁止无关人员进入。
物体表面消毒后采样，避免再次污染.
加强紫外线灯管的保养，及时更换过期及不合 格灯管。
进行细菌培养前，当日提前到细菌培养室，领 取后对培养皿进行认真筛查，淘汰有质量问题 的培养皿，避免此类情况发生。
01
每季度一次
二更空气监测 （３月、６月、９ 月、１２月）
02
每半年一次
一更空气监测 （６月、１２月）
监测项目
空气监测 物表监测 医护人员手监测 成品输液质量
空气监测
空气监测是连续测定不同洁净级别区域空气中微生 物和尘埃粒子数量，评估空气质量，以保证洁净的 环境状况。
空气中微生物监测
• 按六步洗手法进行快速手消，自然干燥后采 样
• 采样方法 • 被检者五指并拢，将浸有采样液的湿润棉拭
子在手指曲面从指根到指尖往返涂擦各2次， 涂擦一只手（面积约30cm2）,涂擦过程中同 时转动棉拭子，投入装有采样液的试管中， 及时送检 • 注意事项 • 取样前，禁止接触75%乙醇等消毒剂，否则会 造成假阴性结果。 • 一定要完全干燥后采样，防止有消毒剂残留。
► 采样次数：通常每个采样点采样一次。 ► 采样结果检测：全部采样结束后，应将
全部培养皿和试管送至检验科完成，检 测报告。
► 检测结果判定：若超过评定标准，应重
复进行两次采样检测，两次检测结果都 合格时，才能评定为符合。
► 记录归档。
细菌培养不合格原因分析及整 改措施
不合格原因分析
未掌握环境卫
手套指尖监测
• 时机 • 完成调配离开调配环境后立即取样 • 培养皿 • 接触琼脂培养皿 • 取样方法 • 调配人员以双手指尖接触琼脂，并在
医院静脉用药调配中心净化配置室清洁消毒方法及效果对比分析
医院静脉用药调配中心净化配置室清洁消毒方法及效果对比分析杨文超;秦涛;张晓霞;张允文;张玮【摘要】目的：比较三氯异氰尿酸消毒剂和过氧乙酸消毒液2种消毒剂的消毒效果，保证静脉用药调配中心净化配置室的洁净度要求。
方法选择三氯异氰尿酸消毒剂和过氧乙酸消毒液2种消毒剂对静脉用药调配中心净化配置室交替消毒，并进行沉降菌监测。
结果过氧乙酸消毒液的消毒效果优于三氯异氰尿酸消毒剂，它对细菌的消灭更彻底，效果更好，并且每15 d交替使用一次消毒剂的方案，更有利于保证静脉用药调配中心净化配置室的洁净度。
结论只有使用高效的清洁消毒方法，提供优质安全的输液配置环境，才能保证成品输液安全无污染，降低静脉药物配置过程中的污染风险，有效提高医院的静脉药物治疗水平，更好地为患者服务。
【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】3页(P317-319)【关键词】静脉用药调配中心;净化配置室;消毒;监测【作者】杨文超;秦涛;张晓霞;张允文;张玮【作者单位】西安交通大学医学院第一附属医院，西安 710061;西安交通大学医学院第一附属医院，西安 710061;西安交通大学医学院第一附属医院，西安710061;西安交通大学医学院第一附属医院，西安 710061;西安交通大学医学院第一附属医院，西安 710061【正文语种】中文【中图分类】R95静脉用药调配中心(pharmacy intravenous admixture services,PIVAS)指医疗机构药学部门根据医师处方或用药医嘱，经药师进行适宜性审核，由药学专业技术人员按照无菌操作要求，在洁净环境下对静脉用药物进行加药混合调配，使其成为可供临床直接静脉输注使用的成品输液的专用场所[1]。
它是集临床应用与科研于一体，并最大程度地保证患者用药安全、合理和开展临床药学服务的重要场所[2]。
我院静脉用药调配中心是按照澳大利亚静脉输液配置标准于2007年7月成立的，是西北地区最早、规模最大的静脉用药调配中心，按要求分别设置审核区、排药区、药品去外包装区、净化配置室、核对区、更衣区、清洗区等功能区[3]，所有功能区域符合2010年卫生部《静脉用药集中调配质量管理规范》的要求。
静脉用药调配中心洁净区管理制度
静脉用药调配中心洁净区管理制度之老阳三干创作一、静配中心洁净区域的人员管理1.静配中心人员每年必须进行一次健康体检，患有传染病者需要调离该工作岗位。
2.抗菌药物配置间与普配药物配置间工作人员相对固定，一个季度或半年调换一次，选任2位工作人员分别协助抗菌药物配置间、细胞毒药物配置间与普配药物配置间环境卫生管理，不定期进行检查评定，发现问题及时解决，不留卫生死角，杜绝平安隐患，包管静脉用药集中调配环境的质量。
二、洁净区人流与物流的管理静配中心有严格的人流通道管理，非洁净区域工作人员严禁入内。
严格控制观赏人员，因工作需要进入静配中心的，在各区域应当更换各区域的工作鞋、工作帽、工作服，在中心工作人员的带领下进行观赏，一次观赏人员不成超出5人，每位进入人员应当严格按六步洗手法洗手，而且随手关门。
进入十万级洁净区规程(一更)：⑴.换下普通工作服和工作鞋，按六步手清洁消毒法消毒手并烘干；⑵.穿好指定服装并戴好发帽、口罩。
进入万级洁净区规程(二更)：⑴.更换洁净区专用鞋、洁净隔离服；⑵手消毒，戴一次性手套。
离开洁净区规程：⑴.临时外出：在二更室脱下洁净隔离服及帽子、口罩整齐放置，一次性手套丢入污物桶内；在一更室应当更换工作服和工作鞋；⑵.重新进入洁净区时，必须按以上更衣规定程序进入洁净区；⑶.当日调配结束时，脱下的洁净区专用鞋、洁净隔离服进行惯例消毒，每周至少清洗2次；一次性口罩、手套一并丢入污物桶。
静配中心有严格的物流通道管理，洁净区域所需要的一切物品和排好的待调配药品必须从物流的进仓口传入，调配好的成品输液和 1其余相关用物必须从物流的出仓口传出。
洁净区域严禁同时开启人流与物流通道的两扇门。
三、洁净区域的环境管理1.洁净区域的清洁、消毒洁净区域的清洁卫生工作全程采取湿式清扫，每天调配操纵结束后，按惯例进行生物平安柜、层流操纵台、辅助用具、房间、地面的清洁、消毒处理。
严格按清洁、消毒程序，即首先用惯例的清水纱布擦拭，再用干燥的清洁纱布擦干水分，最后用75%酒精喷湿清洁的纱布进行生物平安柜和层流操纵台的消毒。
静脉用药调配中心(室)净化操作台使用规范
静脉用药调配中心(室)净化操作台使用规范一、水平层流洁净台标准操作规程水平层流洁净台可以创造局部百级的洁净环境，但是当工作人员在工作区域进行操作时，层流空气就会产生紊流，而非保持原有的层流状态。
层流台内操作所使用的物品(如输液、安薇、注射器等)都不是无菌的，层流台本身也不是灭菌柜，如果在气流的上游发生污染，则下游必受污染，就如同河流的上下游一般。
正确了解层流台内气流的走向并合理利用、标准的无菌调配技术、规范的层流台空间物品摆放原则、确保操作人员在最洁净的气流下进行静脉药物的调配就成为静脉用药调配中心中药物调配安全的关键。
水平层流洁净台标准操作规程如下。
(1)物品在水平层流洁净台内的正确放置和操作是保证层流台正常工作和成品质量的重要因素。
(2)PIVAS中水平层流洁净台只能用于调配对工作人员无伤害的药物，如电解质、全肠道外营养液等。
(3)水平层流洁净台的摆放位置应位于洁净间内的高效送风口正下方，洁净间内的空气经高效过滤器过滤后直接被水平层流洁净台吸人，再经过一层高效过滤器过滤后送至水平层流洁净台的工作区域。
这样，层流洁净台内的气流是经过两层高效过滤后达到最佳的净化状态的空气，同时大大降低了水平层流洁净台高效过滤器的损耗。
(4)从水平层流洁净台送出的空气经过高效过滤器过滤，可将直径为0.3□ιιι以上的微粒99.99%的过滤，同时确保空气的流向和流速。
(5)水平层流洁净台进行调配工作前，至少提前半小时启动机器，以保证实现其工作区域内的百级环境。
(6)使用时应将水平层流洁净台工作区域划分为3个部分,分别为：①内区，为最靠近高效过滤器的10~15cm的区域，为最洁净区域，可用来放置已打开的安甑、已开包装的无菌物体,已经过消毒的小件物品；②工作区，为工作台的中央区域，所有的调配操作应在此区域内完成；③外区，为从操作台外缘往内15~20cπι的区域，可用来放置未拆除外包装的注射器、未经过消毒的小件物品。
(7)每天在操作开始前，应先用75%乙醇仔细擦拭工作区域的内部的顶部、两侧及台面，顺序为从上到下，从里到外。
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配液洁净室沉降菌空气采样及检测方法
1、净化系统在开启状态，房间清洁并擦拭消毒后，紫外线照射30分钟，关闭紫外线后30分钟，无人使用条件下开始采样。
2、测试人员穿着洁净服，戴口罩，手消毒或戴手套。
动作要轻，避免产生污染干扰。
3、取直径90mm×15mm无菌普通培养液平板培养皿，编号备用。
4、采样方法：
①普药间及抗化间每月各抽取一个操作台进行监测（1-14为采样点，15为对照点），在洁净间、二更和一更各选取两点（距地面0.8m～
1.5m），监测结果取平均值；
②将培养皿按采样点布置图逐个放置，然后按编号从小到大的顺序逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中，沉降30min后，盖上平板盖后倒置收起；15号打开后立即封盖，作为空白对照；
③收取培养皿时与放置时顺序相反，从大到小依次收取；
④将采样平板送至检验科。
5、注意事项：
①采样时，采样者应站在采样口的下风侧，并尽量少走动；
②拿开平板盖时，手部不能穿越平板上空，将平板盖搭放在培养皿边上不重叠。
6、结果的评定：
①每个测点的沉降菌平均菌落数必须低于所选定评定标准中的界限；
②在静态监测时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，应重
新采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合；
③洁净室沉降菌技术要求如下：
采样点布置图
洁净间、一更、二更采样点布置图
物表和手表微生物采样方法
一、物体表面采样方法：
用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积
≥100cm2，连续采样4个，取一支无菌棉拭子在10ml采样液的试管内浸湿，于管壁上挤压一下，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次（从下向上5次，从左向右5次），并随之转棉拭子，然后以无菌操作方式将采样的棉拭子头剪断并落入采样试管内，立即送检。
门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。
二、手部表面采样方法：
监测对象采取五指并拢姿势，操作者将无菌棉拭子蘸采样液挤干，在被采手指屈面自手指根到指尖往返涂擦2次直到采完全手，每只手采样面积约计30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子。
然后以无菌操作方式将采样的棉拭子头剪断并落入采样试管内，立即送检。
物体表面和医务人员的手卫生标准
细胞毒药物破损和溢出应急预案
1.发生细胞毒药物破损和溢出时，如直接接触皮肤，应立即用肥皂或者清水清洗被污染的皮肤，溢出地点应隔离并有明确标记。
2.取出溢出包，穿戴好个人防护用品，包括手套、鞋套、眼罩或者防溅眼镜。
如果是可能产生气雾或气化的细胞毒性药物溢出，必须佩戴防护面罩。
3.液体药物必须使用吸收性的织物吸收掉，可轻轻将垫子覆盖在溢出的液体药物之上。
4.粉状药物用湿垫子或毛巾将药物除去，可轻轻将湿的吸收垫子或湿毛巾覆盖在药物之上，防止药物进入空气中去。
5.将所有的被污染的物品放入溢出包中备有的密封的细胞毒废物垃圾袋中。
6.当药物安全被除去以后，被污染的地方必须先用清水冲洗，再用清洁剂清洗三遍，清洗范围应由小到大进行。
清洁剂必须彻底用清水冲洗干净。
7.所有用来清洁药物的物品必须放置在一次性密封细胞毒废物垃圾袋中，再套一层细胞毒废物垃圾袋；所有防护用品应丢置在外层垃圾袋中。
外层垃圾袋封口后放置于细胞毒废物专用一次性防刺容器中。
8.记录以下信息：药品名称、大概的溢出量、溢出如何发生、处理溢出的过程、暴露于溢出环境中的人员等，并填写“不良事件报告表”。
细胞毒药物破损和溢出处理流程
备注：溢出包用物
防护服1、鞋套1、乳胶手套2、防溅眼罩1、防护面罩1、塑料背面吸收毛巾2、一次性海绵2、利器盒1、专用垃圾袋2、标记牌1.。