结核分枝杆菌临床株的乙胺丁醇耐药性特点及突变分析

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结核分枝杆菌耐药性检测

结核分枝杆菌耐药性检测

二、常用的MTB DST检测方法
(二)探针熔解曲线法
采用多色探针熔解曲线法快速检测MTB对RFP、INH、Sm、EMB和FQs 常见耐药决定区域,简便、快速,闭管检测不会交叉污染或造成实验室 污染,只需1台通用的荧光定量PCR仪,无需繁琐的杂交、显色过程,整 个检测过程只需2~3 h,可较全面地了解耐药基因突变信息,辅助诊断 MDR-TB和pre-XDR-TB(指对FQs或至少1种二线注射类药物耐药);其 缺点是不报告具体的突变类型。
二、常用的MTB DST检测方法
分子DST方法
该方法是基于MTB对抗结核药物耐药分子机制,采用分子生物学技术检 测MTB的耐药基因型。分子DST已成为DR-TB的确诊方法之一,其建立 在基因扩增基础上,快速(2~48 h)、敏感地从MTB分离株或预处理的 临床标本(包括涂阴、培阴的标本)中检出MTB耐药基因突变;分子 DST只在初始阶段需要有较高的生物安全条件,标本消化处理和DNA提 取后标本的传染风险降低。
绝大多数常用的表型DST需要MTB纯培养物,MTB生长慢的特性决定了 该方法需花费较长时间,而且可能因为生长不良或其他微生物污染而导 致结果的不确定性,但该方法可检测多种抗结核药物的耐药性。
二、常用的MTB DST检测方法
(一)传统的DST方法
1.绝对浓度法(absolute concentration method):将1 mg/ml菌悬液用生理 盐水倍比稀释至10^-2 mg/ml,吸取0.1 ml菌液分别接种于含高、低浓度药 液培养基和对照培养基上,置37 ℃培养4周,按下列方式报告菌落生长情 况:分枝杆菌培养阴性(-):斜面无菌落生长;分枝杆菌培养阳性 (+):菌落生长占斜面面积的1/4;分枝杆菌培养阳性(++):菌落生 长占斜面面积的1/2;分枝杆菌培养阳性(+++):菌落生长占斜面面积 的3/4;分枝杆菌培养阳性(++++):菌落生长布满整个斜面;培养基斜 面上菌落数少于20个时,报告菌落数。

临床分离快速生长分枝杆菌的鉴定及对抗结核药物的敏感性分析

临床分离快速生长分枝杆菌的鉴定及对抗结核药物的敏感性分析

临床分离快速生长分枝杆菌的鉴定及对抗结核药物的敏感性分析陈东科;许宏涛【摘要】目的比较不同方法鉴定快速生长分枝杆菌(RGM)的准确性,检测RGM对抗结核药物的敏感性.方法 18株RGM使用DNA微阵列芯片法和基因测序法进行菌株鉴定,用比例法检测对利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇、丙硫异烟胺、对氨基水杨酸、卷曲霉素、氧氟沙星和卡那霉素9种抗结核药物的药物敏感性.结果DNA微阵列芯片法与基因测序结果对偶然分枝杆菌和脓肿分枝杆菌鉴定符合率为100%,对其他菌株的鉴定结果偏差较大.RGM对临床上常用的9种抗结核药物普遍耐药,耐药程度依次为马赛分枝杆菌(9种药物全耐药)、脓肿分枝杆菌(8~9种药物耐药)、新金色分枝杆菌(8种药物耐药)、偶发分枝杆菌(7种药物耐药)、血液分枝杆菌(7种药物耐药)、康赛医院分枝杆菌(6种药物耐药)和富西亚分枝杆菌(4种药物耐药).结论分子诊断技术在临床实验室的应用意义重大.使用抗结核药物治疗RGM感染患者的风险极大,应该按照RGM药敏折点标准进行药敏试验,以指导临床合理用药.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2015(033)010【总页数】3页(P734-736)【关键词】快速生长分枝杆菌;鉴定;抗结核药物;药物敏感性试验【作者】陈东科;许宏涛【作者单位】北京医院检验科,北京100730;北京医院检验科,北京100730【正文语种】中文【中图分类】R446.5非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobactericum,NTM)广泛存在于自然界中,是一种条件致病菌,毒力低于结核分枝杆菌,可以在人体某些部位定植,导致免疫力低下患者的感染。

按照《全国临床检验操作规程》[1]对分枝杆菌的要求,常规实验室不具备大部分的鉴定试剂,因此生化鉴定在常规实验室难以开展,也不能鉴定到种的水平。

NTM病具有与结核病临床表现相似的全身中毒症状和局部损害表现,主要侵犯肺,可被误诊为结核病,临床常用抗结核药物进行治疗。

肺结核患者结核菌培养结果分析报告

肺结核患者结核菌培养结果分析报告

肺结核患者结核菌培养结果分析报告肺结核是一种由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的传染性疾病,在全球范围内仍然是一种重要的公共卫生问题。

结核菌培养是一项重要的实验室检测手段,可用于检测患者体内是否存在结核菌,以及对药物敏感性的测试。

根据您提供的病例,我们对肺结核患者的结核菌培养结果进行了分析与报告。

1. 临床信息:患者姓名:XXX性别:XX年龄:XX岁症状:咳嗽、咳痰、低热等2. 结核菌培养结果:该患者从痰液样本中分离出结核菌,并进行了进一步的鉴定与分析。

2.1 结核菌鉴定:基于酸杀菌-结合染色法和PCR等技术手段,我们鉴定出分离的菌株为结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis),这进一步确认了患者肺部感染的确为肺结核。

2.2 抗生素药敏试验:为确定该菌株对常用抗结核药物的敏感性,我们进行了抗生素药敏试验。

结果如下:- 吡嗪酰胺(Pyrazinamide):敏感- 乙胺丁醇(Ethambutol):敏感- 异烟肼(Isoniazid):抗药- 利福平(Rifampicin):敏感- 布司他丁(Bedaquiline):敏感2.3 结核菌的分类与毒力测定:通过进一步的分类与毒力测定,我们将该分离菌株确定为XX亚型。

该亚型在我国较为常见,且带有一定的毒力。

3. 分析与讨论:根据上述结果,我们发现该患者的结核菌对异烟肼具有抗药性,可能需要调整治疗方案。

同时,该菌株对其他常用的抗结核药物均敏感,因此可以选择其他药物进行治疗。

布司他丁作为一种新型抗结核药物,对该菌株也显示出敏感性,可以考虑在治疗方案中引入。

此外,根据分类与毒力测定的结果显示该菌株为XX亚型,了解病原菌株的亚型信息有助于研究该病原菌的传播途径与流行情况。

4. 结论:根据肺结核患者的结核菌培养结果分析,我们确定了菌株的鉴定与抗生素药敏性,为患者的治疗方案提供了参考。

异烟肼抗药性的发现提示需要更改治疗方案,并可考虑使用其他药物,例如布司他丁。

结核分枝杆菌(MTB)异质性耐药研究进展

结核分枝杆菌(MTB)异质性耐药研究进展

结核分枝杆菌(MTB)异质性耐药研究进展柳清云;孙刚;高谦【摘要】异质性耐药,是指在同一样本中同时存在耐药菌和敏感菌的现象,这体现了细菌群体从部分耐药向完全耐药转变的过程.研究异质性耐药对于认识耐药结核病的发展过程,以及评估治疗方案和指导临床用药具有重要的意义.本文对结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,MTB)异质性耐药的产生及其对临床的影响进行了综述.%Hetero-resistance is the coexistence of both sensitive and resistant bacteria in the same specimen,which indicates the transition from partially resistant to fully resistant bacterium population. Studying hetero-resistance is of great significance in understanding the genesis of drug-resistant tuberculosis,accessing the treatment schedule,and guiding the prescription of drugs. In this article,we summarized recent progresses on hereto-resistance of Mycobacterium tuberculosis (MTB).【期刊名称】《复旦学报(医学版)》【年(卷),期】2013(040)001【总页数】4页(P1-4)【关键词】结核分枝杆菌(MTB);异质性耐药;耐药结核病【作者】柳清云;孙刚;高谦【作者单位】复旦大学上海医学院生物医学研究院-医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032;复旦大学上海医学院生物医学研究院-医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032;复旦大学上海医学院生物医学研究院-医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室上海200032【正文语种】中文【中图分类】R378.91+120世纪40年代以来,链霉素、异烟肼、利福平等抗结核药物的广泛使用,使结核病的发病率和死亡率一度大幅下降[1]。

噬菌体法检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性的研究

噬菌体法检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性的研究

6 2・ 7
临床 内科 杂 志 2 1 00年 1 第 2 0月 7卷 第 1 0期
JCi t Me , coe 2 1 , o,7 N .0 l I e n n m d O t r 0 0 V l2 , o 1 b

论著 ・
噬菌 体 法 检测 结 核 分枝 杆 菌 乙胺 丁醇 耐药 性 的研究
建立噬菌体 生物扩增 法 ( h B法 ) Pa 快速 测定 乙胺 丁醇耐药 性 的实验 体系 , 探
讨 Pa h B法在测定结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性的应用价值 。方法
分离 结 核 分 枝 杆 菌 耐 药 性 , 与 B c/ L R D药 敏 试 验 结 果 相 比较 , 耐 药 性 测 定 结 果 不 一 致 并 aT A E T3 对
吴俐 健 张 含 玉 陈 述 元 王 笑歌
[ O ]0 36 /.s .0 19 5 .0 0 1 .0 D I1 .9 9ji n 10 - 7 2 1 .00 7 s 0
应用 P a hB法测 定 15株临床 1
[ 中图分类号] 5 1 R 2
[ 摘要 ] but l e it nc i t m o r ssa e n M yc ba t ram t e c o i o cei ub r ulss W U n.zHANG Han u .CHEN y
S un ne a e or f l t o i l C iaMei l nvnq,hnag 103 ,hn h y , 1 fut o f i e hs t h d a U i i S eyn 1o 2 C ia a t . h fa a d p a o n i f c e [ src] Obet e T e u hg m l e i oi l sa ( h B o rpddt t n Abt t a jci ost pp aea pi dbo g a yasy P a )f ai ee i v i f l cl r co

苏州市结核病乙胺丁醇耐药情况分析

苏州市结核病乙胺丁醇耐药情况分析

c y T N e ̄ n ,H N Xn .u l ,U Xn , N i0 n , N u- ni WUMe n i A GP iu l s E igha Y il WA GXa l WA GX e eg , i t n f 一
S o ho Unv ri Su h u 21 007. i a o c w ie st y, z o 5 n
i h l — r g r ss n a e rsn u n 0 0 ~2 1 wa e p c iey 1 . n t e mu t d e it tc s s a i g d r g 2 1 i u a i i 01 s r s e tv l 2 3% a d 6 . n 1 6% .wh c a r f u d y h g e h n t t ih w s p oo n l ih rt a ha
t n s d a n s d a h f l td i f ci u o p tlo o c o n v ri n S z o . eho s F o S p e e 0 o Ma 01 i t i g o e tt e a f i e n e t sh s ia f s o h w u ie st i u h u M t d r m e t mb r2 08 t y 2 e ia o y l,t e h t p fc i ia s l ts f m h o p tlwe e d mo sr t d a d t e hee h mb t lr ssa c f c b ce i m u e c l ssf m h a y e o ln c lioa e o t e h s i r e n tae n h n t t a u o e i n e o r a t My o a tru t b r u o i r t e p — o t n s w sa ay e y d u e s t e t s. s l I e tt t mb t lr ssa c a e wa 0 7 i t a n l z d b r g s n ii e t Re u t e v s ’ oa eha u o —e itn e r t s 1 . % a d t e eh mb tlr ssa c a e h l n h t a uo ・ e itn e c s s o c p e e c n a e o 6 % i he mu t- r g r s s n u ec lss h o a t a u o —e it n e r t n t e c n a e o c p e c u i d a p r e t g f5 .1 n t l d e it t b r u o i .T e t tleh mb tlr ssa c a e a d i p re tg c u i d i u a t s

世界卫生组织《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录(第2版)》解读

世界卫生组织《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录(第2版)》解读

录-包含高质量$全面的表型耐药相关基因突变列表 行了更细致分层'其根据MN! 对不同药敏试验
及其置信度分级%%%&"但纳入菌株的地理区域代表性 方法的认可程度"将表型药敏试验数据分为7个层
较差"且有关新药和再利用药物耐药相关基因突变 级"前2个层级为使用MN!推荐试验方法得到的
的数据非常有限'因此"MN!于(&(2年修订并发 数据集!MN! 数据集#'第%层级包括根据最新
序的耐药结核病分子诊断技术%%&&'新一代靶向测 #:@5>+,?-5:"SIT##或欧洲核苷酸档案馆数据库
序技术可以通过对临床标本直接检测"实现对十几
的同步更新 !*E>5/A,:SE4.A5?-FAC>4G-PA"*SC#
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种抗结核药物耐药性的快速判定"但基于目前对部 可以获取更多公开数据'因此"第(版,目录-纳入
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初、复治患者结核分枝杆菌临床分离株对抗结核药物耐药性的分析

初、复治患者结核分枝杆菌临床分离株对抗结核药物耐药性的分析

初、复治患者结核分枝杆菌临床分离株对抗结核药物耐药性的分析郑扬;赵雁林【摘要】目的了解专科医院初复治患者的结核分枝杆菌耐药率及耐药谱.方法研究随机选取了来自首都医科大学附属北京胸科医院的500株涂片阳性的初复治肺结核患者痰标本,分离培养后对15种抗结核药物包括利福平异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(Sm)、乙胺丁醇(EMB)、括吡嗪酰胺(PZA)、阿米卡星(Am)、卡那霉素(Km)、卷曲霉素(Cm)、氧氟沙星(Ofx)、左氧氟沙星(Lfx)、莫西沙星(Mfx)、对氨基水杨酸(PAS)、丙硫异烟胺(Pto)、利奈唑胺(Lzd)、乙硫异烟胺(Eto)通过MEGIT 960进行药物敏感试验.结果实验纳入的500例结核分枝杆菌样本,菌种鉴定结果显示71株为NTM,另外有12株培养污染.其余417例菌株进行4种一线抗结核药物(包括INH、RFP、Sm、EMB)的耐药表型实验,耐药率为47.2%(95%CI:42.5%~52.0%),MDR耐药率为28.2% (95% CI:24.4%~33.1%).复治病例的总耐药率和MDR耐药率的病例发生率均显著高于初治患者(P =0.000).417株结核分枝杆菌在完成4种一线抗结核耐药表型实验后,采用数字表法按照一定比例筛选了全敏感和耐药株共150例,进行后续11种抗结核药物(包括PZA、Am、Km、Cm、Ofx、Lfx、Mfx、PAS、Pto、Lzd、Eto)的耐药表型实验,5例发生污染,剩余145例结核分枝杆菌对PZA、Am、Km、Cm、Ofx、Lfx、Mfx的复治患者耐药率均显著高于初治患者(P<0.05),对于PAS、Pto、Lzd、Eto 4种药物,初复治患者间差异无统计学意义(P>0.05).结论本研究发现初复治患者结核分枝杆菌耐药率较高,应进一步加强结核病患者管理.%Objective To investigate the incidence of drug resistance among new and retreatment TB patients from special hospital.Methods Totally 500 smear positive TB patients from June 2013 toDecember 2014 in Beijing Chest Hospital were enrolled.Phenotypic susceptibilities to cultured isolates were analyzed in 15 anti tuberculosis drugs by MGIT 960,include Isoniazid (INH),Rifampicin (RFP),Streptomycin (STR),Ethambuto (EMB),Kanamycin (Km),Amikacin (Am),Capreomycin (Cm),Ofloxacin (Ofx),Levofloxacin (Lfx),Moxifloxacin (Mfx),Paza-aminosalicylate (PAS),Protionamide (Pto),Linezolid (Lzd),Ethionamide (Eto),Pyrazinamide (PZA).Results A total of 500 TB cases were enrolled.71 samples among these were NTM infection and 12 samples were contaminted.The rest of 417 of cases infected with Mycobacteriuma,and the rate of drug resistance was 47.2% (192/417) and the MDR rate was 28.2% (120/417).The retreatment was significantly higher than that of the new in any drug resistance rate and MDR rate (P =0.000).100 of the retreatment isolates and 50 of the new isolates with Mycobacteriuma were selected to do the drug susceptibility test in 11 subsequent anti tuberculosis drugs(include:PZA,Am,Km,Cm,Ofx,Lfx,Mfx,PAS,Pto,Lzd,Eto).Five cases were contaminated,and in the rest of the cases,48 was the new and 97was the retreatment.The rate of the drug resistance to PZA,Am,Km,Cm,Ofx,Lfx,Mfx for the retreatment were significantly higher than the new (P < 0.05).The rate of drug resistance to PAS,Pto,Lzd and Eto for the new and reteartment were no markedly differential in statistics.Conclusion This study further confirmed the rate of drug resistance in retreatment cases is higher,and the management of tuberculosis patients should be further strengthened.【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2017(046)004【总页数】6页(P22-27)【关键词】结核;药敏试验;复治病例【作者】郑扬;赵雁林【作者单位】102206北京,中国疾病预防控制中心、国家结核病参比实验室;102206北京,中国疾病预防控制中心、国家结核病参比实验室【正文语种】中文【中图分类】R1结核病是世界范围内主要的传染病杀手,2015年WHO全球结核病报告指出,2014年有960万例罹患结核病,150万例死于该疾病[1]。

对耐药结核分支杆菌的药敏实验及临床分析

对耐药结核分支杆菌的药敏实验及临床分析

对耐药结核分支杆菌的药敏实验及临床分析摘要目的:本文对162例结核杆菌痰培养阳性株进行10种抗结核药物的耐药性检测。

并对耐异烟肼(inh)、利福平(rfp)及hr者等进行了敏感药物的选择。

方法:采用bactec960-tb法及普通改良罗氏培养,对结核菌株鉴定及药物敏感实验。

结果:162株分支杆菌耐药顺位次序为,sm54.9%、rep52.5%、inh36.4%、多耐药率为30.2%;耐rep菌株85例中,利福喷丁(rft)、力排肺疾(dip)和左氧氟沙星(l-oflx)的耐药率分别为96.7%、4.44%、3.33%。

结论:吉林省结核病医院属于高耐药区域,rfp与rft有明显交叉耐药性。

dip、oflx对耐rfp者敏感。

关键词结核结核杆菌耐药性检测为摸清我院结核病人的耐药情况,为制定相应的有效化疗方案提供依据,我们收集2003年8月~2005年10月的162例结核病人的结核菌培养阳性菌株,分别用10种抗结核药物进行了药敏实验,并对耐inh、rfp及hr者的菌株分别与利福喷丁(rft)、左氧氟沙星(l-oflx)和力排肺疾(dip)进行了药物敏感性检测。

现将结果报告如下。

资料与方法收集我院2003年8月~2005年10月的162例结核病人的痰培养阳性菌株,其中男87例,女75例,年龄13~71岁,平均29岁。

有85例检测为耐r菌株,59例检测为耐h菌株,其中对32例耐hr病人进行了临床治疗观察。

方法:①菌株:经bactec-960-tb系统中12b培养基对结核分支杆菌进行初分离,菌型鉴定或应用改良罗氏培养基培养提取并菌型鉴定。

②结核杆菌耐药性测定:应用改良罗氏培养基按《结核病诊断细菌学检验规程》制定的标准,由本院检验科自制。

③疗效判定:依据《肺结核化学疗法》所制定标准。

统计学方法:组间率的差异采用卡方检验。

结果耐药率:共对162例结核病人耐药菌株进行了10种药物的药物敏感实验,其耐药率结果顺位次序分别为链霉素(sm)(89/162)54.9%,rfp(85/162)52.5%,inh(59/162)36.4%,吡嗪酰胺(pza)(38/162)23.5%,乙胺丁醇(emb)(18/162)11.1%,丁胺卡那霉素(km)(16/162)8.0%,对氨基水杨酸钠(pas)(11/162)6.8%,左氧氟沙星(l-oflx)(7/111)6.3%,dip(7/111)6.3%,卷曲霉素(cpm)(5/111)4.5%。

结核分枝杆菌耐药基因分布情况的初步探讨

结核分枝杆菌耐药基因分布情况的初步探讨

结核分枝杆菌耐药基因分布情况的初步探讨结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病,在全球范围内都存在着高度耐药性的问题。

结核分枝杆菌耐药基因的分布情况对于疾病的流行和治疗具有重要的意义。

本文旨在对结核分枝杆菌耐药基因分布情况进行初步探讨。

结核分枝杆菌耐药基因主要包括耐药突变基因和耐药相关基因。

耐药突变基因是指结核分枝杆菌在长时间的抗结核药物治疗中,发生的基因突变导致对某些抗结核药物产生耐药性。

耐药相关基因是指与耐药性相关的基因,包括编码药物靶点的基因和药品转运蛋白的基因等。

目前,已经发现了多种耐药突变基因和耐药相关基因。

耐药突变基因主要包括rpoB、katG、inhA等。

rpoB基因编码RNA聚合酶的β亚基,在对利福平和利福四环酮产生耐药性的结核分枝杆菌株中,常常发生rpoB基因上的突变。

katG基因编码卡泼他尼的激活酶,而inhA基因编码过氧化物酶某抗结核药物的靶标。

耐药相关基因包括efpA、atpE和embB 等。

efpA基因与抗结核药物的转运相关,atpE基因编码ATP酶,与利福平和丙胺丁醇的耐药性有关,embB基因编码结核分枝杆菌的胺基甲酸酯酶。

在不同地区、不同亚型结核分枝杆菌株中,耐药基因的分布情况存在差异。

根据已有的研究资料显示,不同亚型结核分枝杆菌株中耐药基因的频率存在差异。

在北京株中,rpoB耐药突变基因的频率较高,而在非北京株中,katG和inhA耐药突变基因的频率较高。

耐药基因的分布还与不同的抗结核药物有关。

在对异烟肼和利福平耐药性的结核分枝杆菌株中,常见的耐药基因是katG和inhA。

而在对利福维林和对利福平耐药性的结核分枝杆菌株中,常见的耐药基因是rpoB和embB。

一些研究还发现耐药基因的分布与结核菌株的生物学特性有关。

结核分枝杆菌株的生长速度和致病能力可能与耐药基因的分布有关。

这些研究结果表明,耐药基因的分布情况不仅与种类和亚型有关,也与菌株的生物学特性有关。

结核分枝杆菌耐药基因的分布情况是复杂多样的,受到多种因素的影响。

痰液分离结核分枝杆菌202株耐药性分析

痰液分离结核分枝杆菌202株耐药性分析
链 霉素硫酸 盐 、 乙胺丁醇 、 利福平 、 氨基 水杨酸 的耐药率分别 为 2 . % 、2 3 、 .% 、2 2 、1 4 ; 对 5 7 2 . % 5 9 3 . % 1 . % 全部 耐药菌 株约 占 35 . %。 结论 : 乙胺丁醇可作为结核病治疗 的有效药物之一 , 结核分枝杆 菌对几种抗 结核药 的耐药 率有不 同程度 的提高 , 临床 工作中 , 应增加药敏试验药物 品种 。 [ 关键词 ]结核 分枝杆 菌 ; 抗结核药 ; 结核 ; 微生物敏感性试验 【 中国图书资料分 类法分类号】R3 8 9 1 7 . 1 【 文献标识码]A
82 5
JB n b d ColJ l 0 2, 1 3 N . e g u Me i,uy2 1 Vo. 7, o 7
【 文章 编号]10 -20 2 1 )70 5 - 0020 (0 2 0 -8 20 2
。 验 医学 ・ 检
痰 液 分 离结 核 分 枝 杆 菌 2 2株 耐药 性 分 析 0
Ana y i ft ug r ss a e o 0 t a nso y o a tr u t b r u o i l ss o he dr e it nc f2 2 s r i fM c b ce i m u e c l ss
ZHANG a.n LI F s , ANG u , S o BAO n. , ANG i Xu di W eh o g ,nu dcl oeeHfi n u 2 00 ; j Dp r n o dc cn l yA h i i lg , e h i 3 6 1 m aT o Me a C l eA 2 D p r et l i l aoao ,n u C e o i lHfi n u 30 2; . eat n o Ci c brtr A h i hsH s t , e hi 0 2 m f naL y t pa eA 2 3 Hfi inaDa nscR aet oLd Hfi n u 2 0 8 ,hn ) . e a d i ot egn C . t, e h i 3 0 8 C i eT g i eA a

结核分枝杆菌耐药分析与基因检测分析

结核分枝杆菌耐药分析与基因检测分析

结核分枝杆菌耐药分析与基因检测分析目的探讨结核分枝杆菌耐药情况及基因检测分析。

方法从2012年3月~2014年3月我院收治的结核病患者中选取62例为研究对象,按随机数字法对患者进行分组,首次诊治患者39例为观察组,首次诊治失败后行第二次治疗患者23例为对照组,对所有患者结核分枝杆菌进行耐药分析及rpsL、rpoB、embB、KatG基因检测。

结果62例患者中共19例出现耐药,耐药率为30.65%,对照组患者1种药物耐药率为26.09%,同观察组10.26%比较,差异有统计学意义(P <0.05),2种药物耐药率为17.39%,同观察组7.69%比较,差异有统计学意义(P<0.05),3种药物耐药率为8.70%,同观察组比较,差异有统计学意义(P <0.05);rpsL、rpoB、embB、KatG基因突变率分别为83.33%,86.11%,88.89%,91.67%,x2检验显示,差异无统计学意义(P>0.05)。

结论结核分枝杆菌耐药的产生同菌株基因具有较大关联,且耐药率同治疗次数有关,在结核病临床治疗中,需根据患者耐药情况,选择联合用药方案,提高治疗效果。

[Abstract] Objective To investigate the analysis in drug resistance of bacteriology tuberculosis and genetic testing. Methods 62 cases of TB patients from March 2012 to March 2014 in our hospital were selected as the objects,and allocated into an observation group and a control group according to the randomly grouping method,first diagnosis and treatment in 39 patients in the observation group,first diagnosis and treatment failure underwent secondary treatment of 23 patients in the control group,all patients were resistant Bacteriology tuberculosis was analyzed and rpsL,rpoB,embB,KatG genetic were tested. Results 62 cases of patients with 19 cases of drug resistance,the drug resistance rate was 1,the control group of patients with 26.09% was compared with the control group(10.26%),(P<0.05),2 drug resistance rate was 17.39% and 7.69%,the differences were significant (P<0.05),3 drug resistance rate was 8.70%,compared with the observation group,the difference was statistically significant (P<0.05);rpoB,embB,rpsL,KatG gene mutation rate was 86.11%,88.89%,91.67%,83.33%,x2 test showed no statistical significance (P>0.05). Conclusion The generation of drug-resistant Bacteriology tuberculosis strains with genes associated with a larger,and the number of drug-related rates with treatment in the clinical treatment of tuberculosis,to be based drug resistance in patients choose combination therapy programs,improve the therapeutic effect.[Key words] Bacteriology tuberculosis;Drug resistance;Gene;Detect重大传染性疾病对于人们健康及社会稳定均具有较大危害,因此,对其进行快速诊断历来为人类生存发展所必须。

乙胺丁醇耐药结核分枝杆菌embB基因分析

乙胺丁醇耐药结核分枝杆菌embB基因分析

收稿日期22基金项目新疆兵团医药卫生专项(G G 3)作者简介张向晖(82),女,硕士生,专业方向为抗感染免疫。

通讯作者袁 俐(62),女,教授,从事抗感染免疫的研究。

2y 83@y 。

第25卷 第6期2007年12月石河子大学学报(自然科学版)Journal of Shihezi University (Natural S cience )V ol.25 N o.6D ec.2007文章编号:100727383(2007)0620668204乙胺丁醇耐药结核分枝杆菌embB 基因分析张向晖1,李奇凤1,杨 坚2,王远志1,吴万贵1,王 仙1,邢建新1,袁 俐1(1石河子大学医学院,新疆石河子832002;2石河子大学医学院第一附属医院,新疆石河子832002)摘要:了解结核分枝杆菌耐乙胺丁醇(E M B )分离株emb B 基因突变情况,研究其应用价值。

通过聚合酶链反应2单链构象多态性(PCR 2SSCP )和PCR 2限制性片段长度多态性(RF LP )技术分析98株新疆部分地区结核分枝杆菌临床分离株embB 基因。

以H37Rv 标准株为对照,52株药物敏感株的emb B 基因SSCP 均泳动正常,RF LP 和测序分析与对照株相同。

46株耐E MB 分离株中,28株(60.9%)emb B 基因SSCP 泳动异常;5株RF LP 分析异常;测序分析5株均为306位密码子突变,为ATG →AT A 。

部分结核分枝杆菌耐EM B 是由于其embB 基因突变所致,PCR 2SSCP 和PCR 2RF LP 技术可能成为测定部分结核分枝杆菌E MB 耐药简便、快速的方法。

关键词:结核分枝杆菌;乙胺丁醇;耐药性;embB ;PCR 2SSCP ;PCR 2RF LP 中图分类号:R378191+1 文献标识码:A 近年来,结核病再次成为全球性的重大公共卫生问题。

我国属于全球结核病高发国家之一,结核病人数居世界第二[1],新疆活动性肺结核患病率是全国平均水平的1.26倍[2]。

武汉地区结核分枝杆菌临床分离株乙胺丁醇耐药分子特征研究

武汉地区结核分枝杆菌临床分离株乙胺丁醇耐药分子特征研究
株, 采用 P C R直接 测序 法分析 e mb B基 因的 突 变特 征 ; 采用 R D 1 0 5基 因缺 失 检 测 法鉴 定 8 5株
分 离株 中“ 北 京基 因型” 菌株 。结果 显 示 2 2例 E MB耐 药株 中, 1 5 ( 6 8 . 2 %) 例在 e m b B基 因检
( 1 . 武汉轻工大学 生 物与制药工程学 院 , 湖北 武汉 4 3 0 0 2 3 ; 2 .武汉市 医疗救治 中心检验科 , 湖北 武汉 4 3 0 0 3 2 ;
3 .武汉轻工大学 校 医院 , 湖北 武汉 4 3 0 0 2 3 ; 4 . 上海交通大学 基础 医学 院病原生物学教研室 , 上海 2 0 0 0 2 5 )
2.De p a r t me n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y ,Wu h a n Me i d i c a l T r e a t me n t Ce n t e r ,W u h a n 4 3 0 0 3 2,C h i n a ;

要: 探 讨 武 汉地 区结核 分枝杆 菌 乙胺 丁 醇耐 药基 因 e m b B的分 子特征 , 为深入研 究结核 分
枝 杆 菌 乙胺 丁醇 ( E MB ) 耐 药分 子机 制 、 快速 检 测 技 术 的 建 立和 个体 化 临床 用 药奠 定 基 础 ; 同
时探 索武汉地 区“ 北京基 因型” 菌株的传播 类型 , 为结核 防控提供 参考。收集 8 5 株 临床分 离
中图分 类号 :R 4 4 6 . 5 文 献标 识码 :A
Mo l e c u l a r c h a r a c t e r i z a t i o n o f e t h a mb u t o l — r e s i s t a n t My c o b a c t e r i a

探讨临床结核病耐药性变化趋势的动态检测

探讨临床结核病耐药性变化趋势的动态检测

霉素 ( K M) 、 对 氨基 水杨 酸 ( P A S ) 、丁胺 卡 那 ( A K M) 、丙硫 异烟胺 ( P R O) 、 左 氧 氟沙星 ( L O F ) 、卷 曲霉素 ( C P M) 的耐 药率逐 渐升 高。 结论 总体耐 药率 呈逐 年 上升 的趋 势 ,耐 多药率 显著增 加 ,须 加 强 药物 的规 范使 用 ,防止 更 多的耐 药结 核 产生 。
程度 的脑动 脉粥样硬化及血 流速改变 。
动 脉系 统的动 脉严 重狭 窄 ,在 此基 础上血 压 的急剧 波动 导 致原 来靠 侧 肢循环 维 持的脑 区发生一 过性 缺 血。 ②微栓 子 形成 :栓 子来 源于 动 脉粥样 硬 化不 稳定斑 块 或 附壁血栓 的破 碎脱 落 、瓣膜 性 或非瓣 膜 性 心源性 栓 子及胆 固醇 结 晶等 。微栓 子 阻塞小 动脉 常导 致 其他供 血 区 域脑 组织 缺血 , 当栓 子破 碎 或溶解 移 向远端 时 ,血流 恢 复症状 缓 解 。③锁 骨 下动 脉盗血 综合 征 和某 些血液 系统 疾病 ,如 真性 红 细胞 增 多症 、血小 板增 多 、各种 原 因所致 的严 重 贫血和 高凝 状态 等 。盐 酸法 舒地 尔是 一种 具有 广泛 药理 作用 的新 型药 物 ,它 的分 子结构 为 5 一 异 喹 啉磺酰 胺衍 生物 ,为 R HO 激酶 抑 制物 ,通过 增加 肌球 蛋 白轻 链磷 酸酶 的 活性扩 张血 管 ,降 低 内皮 细胞 的 张力 ,改善 脑组 织微 循 环 ,不产 生和 加重 脑 的盗血 ,同时 可拮抗 炎性 因子 ,保 护神 经抗 凋
两 组治疗后 ,治疗 组总有效率优 于对照组 ( 尸 <O . 0 5 )。见 表1 。
轴突生 长 ,减轻受累 脑细胞组织 的炎性反应 ,具有对 缺血性脑血 管病

世界卫生组织《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录及其临床应用指南》解读

世界卫生组织《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录及其临床应用指南》解读

世界卫生组织《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录及其临床应用指南》解读【摘要】耐药结核病是我国面临的重大公共卫生问题。

分子诊断技术的不断发展促进了耐药结核病患者的早期诊断,但是不同耐药相关基因突变类型结果的解读成为分子耐药诊断领域的首要挑战。

世界卫生组织于2021年出版了《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录及其临床应用指南》,旨在规范结核分枝杆菌分子耐药结果解读,特别是对于基于二代测序技术获得的结核分枝杆菌菌株获得的突变信息进行深入剖析,以期为临床提供更准确的耐药检测报告,也为耐药结核分子诊断技术在我国的推广使用奠定基础。

【关键词】结核分枝杆菌;药物敏感性试验;耐药;高通量测序2019年全球约140万人死于结核病(tuberculosis),约1 000万人发展为活动性结核病,其中约50万活动性结核患者对利福平(rifampin,RIF)耐药,100万患者RIF敏感而异烟肼(isoniazid,INH)耐药。

因此,使用各种检测工具迅速、准确地检测患者对这两种药物耐药性,以尽快制定合适的治疗方案至关重要[1]。

传统药敏试验受限于结核分枝杆菌生长缓慢,往往需要2~3个月才能获得结果,无法满足临床对耐药患者即时诊断的需求,也造成患者治疗的延迟和潜在的耐药结核传播风险。

随着快速诊断工具的发展,尤其对RIF耐药性的分子生物学检测有了显著改善,且仪器设备要求低、操作简便[2]。

2012年,全球只有7%经细菌学确诊的结核病患者进行了RIF耐药性检测,而到2019年有近61%进行了检测。

但同期开始接受耐多药或RIF耐药结核病治疗的人数从77 321例增加到177 099例,增加了近129%。

因此,快速、准确的耐药性检测在制定结核病治疗方案时至关重要[1,3]。

RIF耐药性分子基础主要是RIF耐药决定区(rifampicin resistance-determining region,RRDR)的突变,其为一个81个碱基对片段[4]。

2种方法检测结核菌对7种药物耐药性比较

2种方法检测结核菌对7种药物耐药性比较
2种方法检测结核菌对7种药物耐药性比较
摘要】目的探讨应用比例法检测结核分枝杆菌耐药性的可行性及可比性。方法用比例法和绝对浓度法分别检测192株结核分枝杆菌对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、利福平(RFP)、丁胺卡那(AN)、卡那霉素(KM)、氧氟沙星(OFLX)的耐药性。结果SM、RFP、AN、KM绝对浓度法和比例法检出的耐药率无显著性差异,而INH、EMB、OFLX用比例法测试耐药率均明显高于绝对浓度法(P <0.01),两法药敏结果INH、SM、EMB、RFP、AN、KM、OFLX的符合率分别为81.7%、90.8%、83.8%、97.9%、97.5%、95.4%、83.3%。结论比例法和绝对浓度法耐药率的差别主要与选定的药物临界浓度有关。
1.4.1绝对浓度法试验方法同《结核病诊断细菌学检验规程》。首先制备1mg/ml菌悬液,稀释至10ug/ml,用微量吸管接种0.1ml至对照及含药培养基上,37℃培养4周后报告结果。低浓度含药培养基未生长分枝杆菌报告敏感,生长者报告耐药。
1.4.2比例法同上制备1mg/ml菌悬液,稀释至10ug/ml和0.1ug/ml,分别用标准接种环以划线法接种至对照及含药培养基,37℃培养4周后观察结果并计算耐药百分比(耐药百分比=含药培养基上菌落数/对照培养基上菌落数×100%),<1%报告敏感,≥1%为耐药。
【关键词】结核分枝杆菌比例法绝对浓度法耐药性
结核分枝杆菌的耐药性问题是全球关注的热点,而药敏实验方法的不统一影响结果的可比性[1]。WHO于1994年推荐标准化药敏实验方法—比例法[2],但项目中仅包括INH(异烟肼)、SM(链霉素)、RFP(利福平)和EMB(乙胺丁醇)。为了与国际接轨,并为临床提供二线药物的敏感性数据,我们除对上述4种药物外,也对丁胺卡那(AN)等3种抗结核药进行了比例法药敏试验的研究,报告如下:

贵阳市结核分枝杆菌链霉素和乙胺丁醇耐药相关基因突变的检测与分析

贵阳市结核分枝杆菌链霉素和乙胺丁醇耐药相关基因突变的检测与分析

贵阳市结核分枝杆菌链霉素和乙胺丁醇耐药相关基因突变的检测与分析孙荣;欧维正;王燕;蒙俊;秦万;毕雅坤;陈峥宏【摘要】目的了解贵阳市及周边地区结核分枝杆菌链霉素和乙胺丁醇耐药相关基因rpsl、rrs和embB的突变特征.方法对39株结核分枝杆菌临床分离株(乙胺丁醇和链霉素均耐药菌株19株,均敏感菌株20株)的rpsl、rrs和embB基因片段进行PCR扩增和测序,以H37Rv菌株序列为参考,比较耐药菌株和敏感菌株的突变特征.结果 19株耐药菌株中有14株检出rpsl基因突变,突变率为73.7%(14/19),其中12株为AAG43AGG突变,1株为AAG43AAT突变,1株为AAG88AGG突变;20株敏感菌株中有1株发生rpsl基因AAG43AGG突变,突变率为5.0%;耐药菌株和敏感菌株均未检测出rrs基因突变.19株耐药菌株中有16株检出embB基因突变,突变率为84.2%(16/19),突变包括6株ATG306GTG突变,ATG306ATA、ATG306ATT和ATG306ATC突变各1株;GGC406GCC和GGC406AGC突变各3株,1株CAG497CGG突变;20株敏感菌株未检测出突变.结论贵阳地区结核分枝杆菌菌株链霉素和乙胺丁醇耐药相关基因突变具有多样性;优势突变分别为rpsl43和embB306位点突变.【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2016(032)008【总页数】5页(P760-764)【关键词】结核分枝杆菌;链霉素;乙胺丁醇;耐药性;基因突变【作者】孙荣;欧维正;王燕;蒙俊;秦万;毕雅坤;陈峥宏【作者单位】贵州医科大学微生物学教研室,贵阳 550025;贵阳市公共卫生救治中心,贵阳 550003;贵阳市公共卫生救治中心,贵阳 550003;贵阳市公共卫生救治中心,贵阳 550003;贵阳市公共卫生救治中心,贵阳 550003;贵州医科大学微生物学教研室,贵阳 550025;贵州医科大学微生物学教研室,贵阳 550025【正文语种】中文【中图分类】R378结核病是由结核分枝杆菌引起的一种传染性疾病,虽然结核病的发病率呈缓慢下降趋势,但是近年来由于耐药结核分枝杆菌的出现和传播,使得结核病的疫情仍然不容乐观。

用药常识乙胺丁醇

用药常识乙胺丁醇

用药常识乙胺丁醇世界防治结核病日药名:乙胺丁醇别名:Ethambutol分子式:理化特性:性状:常用其盐酸盐,为白色结晶性粉末,无臭或几乎无臭,略有引湿性,在水中极易溶解,在乙醇中略溶,在氯仿中极微溶解,在乙醚中几乎不溶。

水溶液呈右旋性,对热较稳定。

药理作用:对结核杆菌和其他分支杆菌有较强的抑制作用。

口服吸收约80%,血药浓度达蜂时间2~4小时,蛋白结合约40%,在体内仅有10%左右的药物代谢成为非活性物,主要经肾排泄。

与其他抗结核药间无交叉耐药性。

但结核杆菌对本品也可缓慢产生耐药性。

剂型与包装:片剂:每片0.25g。

作用用途:为二线抗结核药,可用于经其他抗结核药治疗无效的病例,常与其他抗结核药联合应用。

以增强疗效并延缓细菌耐药性的产公务员之家,全国公务员共同的天地生。

用法和用量:口服:1次0.24g,1日0.4~0.74g。

也可开始时1日服24mg/kg,分2~3次给予;服药至第8周后减量为1日14mg/kg,分为2次,在长期联合用药方案中,本品可1周2次,每次用40mg/kg。

考前须知:1.主要副作用是球后视神经炎,其发生与剂量大小有关(按正常用法,发生率为0.8%),长期服药易于引起,表现为视敏度降低、辨色力受损、视野缩窄、出现暗点等,停药后可缓慢恢复,也有不能恢复者。

用药期间应检查视觉。

2.胃肠道反响,如恶心、呕吐、腹泻等。

3。

偶见过敏反响、肝功能损害、下肢麻木、关节炎、粒细胞减少、高尿酸血症、精神病症(幻觉、不安、失眠)等。

4.乙醇中毒者,乳幼儿禁用。

糖公务员之家,全国公务员共同的天地尿病患者必须在控制糖尿病的根底上方可使用本品。

已发生糖尿病性眼底病变者慎用本品,以防眼底病变加重。

肾功能不良者减量慎用。

生产厂家:贮藏:批准文号:。

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Ab s t r a c t 0b j e c t i v e T o s t u d y t h e e t h a mb u t o l ( E MB) r e s i s t a n c e i n My e o b a c t e r i u m t u b e r c u l o s i s i S a s s o c i a t e d wi t h t h e d r u g r e s i s t a n c e o f i s o n i a z i d( I NH) a n d r i f a mp i c i n( R F P ) . Me t h o d s A t o t a l o f 1 0 4 9 c l i n i c a l My c o b a c t e r i u m t u b e r c u l o s i s i s o l a t e s we r e o b t a i n e d f r o m t h e p r o v i n c e s o f B e i j i n g , T i a n j i n , An h u i a n d Hu b e i . Al l i s o l a t e s i n c l u d e d i n t h i s s t u d y we r e s u b j e c t e d t o s u s c e p t i b i l i t y t e s t i n g t o a t l e a s t I NH, R MP , E MB , a mi k a c i n( AMK ) , o l f o x a c i n( O F X) , s t r e p t o my c i n f S M) a n d p a r a — a mi n o s a l i c y l i c a c i d s o d i u m( P AS ) b y p r o p o r t i o n me t h o d . T h e mu t a t i o n a t e mb B 3 0 6
中国抗 生素杂志2 0 1 4 年1 月第3 9 卷第 1 期
6 5
文章编号 :1 0 0 1 — 8 6 8 9 ( 2 0 1 4 ) 0 1 — 0 0 6 5 — 0 6
结核分枝杆 菌临床株 的乙胺 丁醇耐药性特 点及 突变分析
程君 1 凌颖 2 徐 玉辉 李志玲 1 刘毅 孙照 刚 1 ,
( 1首都 医科大学附属北京胸科 医院耐药结核病研 究北京市重 点实验 室,北京 1 0 1 1 4 9 ;
2 首都 医科 大学附属北京胸科 医院流行病 学研 究室,北 京 1 0 1 1 4 9 1
摘要 : 目的 探讨结分枝杆 菌对 乙胺丁醇( E MB ) 的耐药性及其e mb B 3 0 6 位点 的突变特 点。方法 以1 0 4 9 株 结核 分枝 杆
菌 临床 分离株 为研 究对象 ,采用 两浓度绝对浓度 法( 高度和低 度) ,对其 中6 5 株E MB耐药菌 的耐药谱和 耐药程度进行检测 ,分 析
E MB 耐 药性产生及 其e m b B 3 0 6 位 点的突变特 点 。结 果 在6 5 株E MB耐药菌 中 ,有6 1 . 5 4 %的菌株 同时耐受异烟肼( I NH1 和利福 平( RF P ) ,其 中以同时耐 受I NH和R F P 以及 其他4 种抗结 核药物[ 阿 米卡星( AMK) / 氧氟沙  ̄( O F X) / 链霉素 ( S M) 和对 氨基水杨酸 钠 ( P AS ) ] 中的1 ~ 2 种所 占比例最 高。6 5 株E MB耐药菌 q h 4 5 株( 6 9 . 2 3 %) 的菌株 同时高度耐 受R F P,1 9 株( 2 9 . 2 3 %) 的菌株 同时高度耐 受 I N H。 1 6  ̄E MB高度耐药菌均 对I NH高度 耐药 ,其 中1 3 株f 8 1 . 2 5 %1 同时对R F P 高度耐药 。e m b B 3 0 6 位点的突变在E MB 耐药菌株 中存 在较普遍 ;在单一 耐受E MB的菌株 中发生e mb B 3 0 6 位 点突变 的频率 最低 ( 2 0 %) ,而在E MB同时耐受I NH  ̄ [ ] RF P 的菌株 中发
生率较 高 ,以同时耐受E MB、I NH、R F P 以及其它 1 ~ 2 种 抗结核药物 的菌株 中的出现 频率最高( 6 0 . 8 7 %1 。相 L L I NH ̄ [ I R F P 而言 ,
E MB 耐药性产 生需要较长 的时间。结论 结核分枝杆菌 临床 株的E MB 耐 药性 显示 出与I NH ̄ I ] R F P 耐药性存在相 关性 ,原因之 一 是可 能与E MB  ̄ N 对 不容 易产生耐药性有关 ;e mb B 3 0 6 位点的突变在耐多药结核 的判断方面具有 一定 的参考价值 。 关键 词:结核分枝杆菌 ;乙胺 丁醇; 耐药 中图分类号 :R 3 7 8 文献标志码 :A
Ch e n g J u n , Li n g Yi n g , Xu Y u — h u i , L i Z h i - l i n g , Li u Yi , Li Ch u a n - y o u。 a n d S u n Z h a o — g a n g 。
( 1 B e i j i n g Ke y L a b o r a t o r y i n D r u g R e s i s t a n c e T u b e r c u l o s i s R e s e a r c h ,B e i j i n g C h e s t H o s p i t a l Af il f i a t e d t O t h e C a p i t a l Me d i c a l U n i v e r s i t y , B e i j i n g 1 0 1 1 4 9 ; 2 De p a r t me n t o f E p i d e mi o l o g y , B e i j i n g C h e s t H o s p i t a l A il f i a t e d t o t h e C a p i t a l Me d i c a l Un i v e r s i y, t B e i j i n g 1 0 1 1 4 9 )
Cha r a c t e r i s t i c s 0 f e t ha m but o l r e s i s t a nc e a nd e m 3 0 6 m ut a t i o n i n
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