糖尿病动物模型制作
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精品课件
禁食和血糖的联系 :
禁食12小时以上(一般过夜禁食,不禁水)。 禁食的时间越长,STZ对胰岛β细胞的破坏力 越明显,即药效越高。所以相对禁食时间延 长,可以降低STZ的用量。
注射时,推进速度和血糖的关系 :
推注的速度快,更容易形成高血糖,推注的 速度慢,相对的危险性较低,但也不容易成 模,常规操作中多要求快速注射。当然,STZ 的剂量是决定血糖高低的主要因素。
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药品配制
配置STZ液 :
柠檬酸缓冲液的配制: 柠 檬 酸(FW:210.14) 2.1g加入双蒸水100mL中 配成A液
柠檬酸钠(FW:294.10)2.94g加入双蒸水100mL中配成 B液 链脲佐菌素配制液:用时将A、B液按一定比例混合 (1:1.32也有按1:1的),PH计测定ph值,调节 ph=4.2-4.5,即是所需配置STZ的柠檬酸缓冲液。 注射时用柠檬酸缓冲液以1的浓度溶解STZ,按空腹 体重注射相应的STZ, 在30分钟内注射完毕。★ STZ容易失活, STZ快速称取后仍要求干燥避光,推 荐用干燥铝箔(或锡箔)纸。
精品课件
预期结果
经检测,实验组非空腹血糖 >16.7mmol/L,并表现出多饮 ,多食,多尿,消瘦的“三 多一少”症状,以及胰岛素 抵抗等糖尿病特征。
精品课件
1、常见为血糖过高。补胰岛素法,补一些中效胰岛素。例如给 诺和灵n或NPH(中性鱼精蛋白锌胰岛素),每次2--3个单位,过了35天,大鼠一般死亡率就低了;
2、补糖法,禁食后的鼠,注射的时候已经处于低血糖状态,造 模4小时后腹腔注射百分之20的葡萄糖,可避免因注射时血糖过 低死鼠;
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再次,防止动物自相残杀。 食物缺乏和供水不足的情况下,会互 相撕杀、啃食同类,所以食物和饮水 要供应充足,最好是两路供应; 最后,防止感染。 糖尿病大鼠尿量多,垫料潮湿,需要 勤换垫料,所以糖尿病大鼠较其他大 鼠容易出现感染,特别是泌尿道感染 和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及 采血测血糖等侵入性操作前后,要注 意消毒工作。如每次采血测血糖后可 用四环素(或金霉素眼药膏)局部涂抹 处理伤口预防感染。
•
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与糖尿病有关的因素
肥胖:
糖尿病这的种遗遗一传传个因特重素性:要Ⅱ因型素糖可尿能病比就Ⅰ是型肥糖胖 症。遗尿传病更原为因明可显引。起例肥如胖:,双胞同胎样中也的可 引起糖一尿个患病了。Ⅰ身型体糖中尿心病型,肥另一胖个病有人4的0% 多余脂的肪机会集患中上在此腹病部;,但他如们果是比Ⅱ那型些糖脂 肪集中尿在病,臀则部另与一大个腿就上有的70人%的更机容会易患发上 生糖尿Ⅱ病型糖。尿病。
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死鼠问题的解决
鼠的个体差别和空腹(低血糖)抵抗力的差异而致死亡率的不同, 开始死亡率高可能主要是血糖突然升高,鼠不适应,或发生了 DKA(即酮症酸中毒)。 首先,一定要保证足够的饮水量(饮水量不足容易导致死鼠); 其次,高血糖和低血糖都会造成死鼠,避免死鼠可以通过注射胰 岛素或暂时补糖 两种途径:
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年龄:
年龄肥也是胖糖:尿2病型的糖发尿病因病素的。一有个一半重的要糖因尿素 患可者多能在就55是岁肥以胖后症发病。。遗高传龄原患者因容可易引出起现 生也现肥体活代能胖方的糖中式 引尿,心:起病同型吃糖也样肥高尿与也热病年胖量 ,纪可病的 有大引人食 人的起的物 认人2和 为容多型运 这易余糖动 也超脂量是重尿肪的由有病减于关集。少肥。中身 胖在而引腹起部的,。他肥胖们症比和那糖些尿病脂一肪样集,中在那在些臀 饮部食与和活大动腿习上惯的均已人“更西容化易”的发美生籍2亚型裔糖和尿 拉丁美商人中更为普遍病。。
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制作方法:
联合STZ(链脲佐菌素)和ALX(四氧嘧啶)
实验动物:SD大鼠/体重:200-280g,雄性 注射方法:腹腔注射法 具体方法:将大鼠进食12小时,过夜禁食后称重,按大鼠总 重量比称取STZ,放一干燥灭菌瓶内,外用锡纸包好,将柠 檬酸缓冲液及装STZ的瓶子置冰浴,一起带到动物房,如果 注射操作技术不熟练,应两组交替注射,分组溶解STZ,10 只或15只鼠/组。 实验组:通过腹腔注射12mg/ml的STZ+柠檬酸钠 +20mg/mlALX+蒸馏水各0.5ml. 空腹1小时后饲以标准饲料 块,自由饮水。 对照组:注射等量柠檬酸钠+蒸馏水。 于给药后3天,一周分别采血测血糖。该模型饲养12周。
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与糖与尿糖病尿病有有关关的的因因素素 遗传因素 • 遗传因素:和:1型糖尿病类似,2型糖
这种尿遗病传也特有性家Ⅱ族型发糖病尿的病特比点Ⅰ。型因糖此尿很可能与 病更基为因明遗显传。有关。这种遗传特性2型糖尿病比 例如1:型双糖胞尿胎病中更的为明一显个。患例Ⅰ如型:糖双尿胞病胎,中的一 另一个个患有了401%型的糖机尿会病患,上另此一病个;有但40如%的果机会患 是Ⅱ上型此糖病尿;病但,如则果另是一2型个糖就尿有病70,%的则机另一个就 会患有上7Ⅱ0%型的糖机尿会病患上。2型糖尿病。
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ห้องสมุดไป่ตู้
诱发原理
STZ直接破坏胰岛β细胞:主要见于注射大剂量STZ后。 STZ注射后可引起β细胞内辅酶I(NAD)的浓度下降,NAD 依赖性能量和蛋白质代谢停止,导致β细胞死亡;
四氧嘧啶进入体内后能迅速被胰岛β细胞摄取,影响细胞膜的通 透性和细胞内ATP的产生,抑制葡萄糖介导的胰岛素分泌。四氧嘧啶 主要通过产生氧自由基破坏β细胞结构,导致细胞的损伤及坏死, 从而阻碍胰岛素的分泌,使血清胰岛素水平降低。
糖尿病动物模型制作
制作: 李明锦 王婷 侯娟 吕志猛 夏 晓娟 王明霞 逄高燕 周东 王 秉思 魏京勋
主讲: 逄高燕
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背景介绍
糖尿病(diabetes)是由遗传因素、免疫功 能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、 精神因素等等各种致病因子作用于机体导致 胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、 蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊 乱综合 典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等 症状,即“三多一少”,糖尿病(血糖)一 旦控制不好会引发并发症,导致肾、眼、足 等部位的衰竭病变,且无法治愈。
禁食和血糖的联系 :
禁食12小时以上(一般过夜禁食,不禁水)。 禁食的时间越长,STZ对胰岛β细胞的破坏力 越明显,即药效越高。所以相对禁食时间延 长,可以降低STZ的用量。
注射时,推进速度和血糖的关系 :
推注的速度快,更容易形成高血糖,推注的 速度慢,相对的危险性较低,但也不容易成 模,常规操作中多要求快速注射。当然,STZ 的剂量是决定血糖高低的主要因素。
精品课件
药品配制
配置STZ液 :
柠檬酸缓冲液的配制: 柠 檬 酸(FW:210.14) 2.1g加入双蒸水100mL中 配成A液
柠檬酸钠(FW:294.10)2.94g加入双蒸水100mL中配成 B液 链脲佐菌素配制液:用时将A、B液按一定比例混合 (1:1.32也有按1:1的),PH计测定ph值,调节 ph=4.2-4.5,即是所需配置STZ的柠檬酸缓冲液。 注射时用柠檬酸缓冲液以1的浓度溶解STZ,按空腹 体重注射相应的STZ, 在30分钟内注射完毕。★ STZ容易失活, STZ快速称取后仍要求干燥避光,推 荐用干燥铝箔(或锡箔)纸。
精品课件
预期结果
经检测,实验组非空腹血糖 >16.7mmol/L,并表现出多饮 ,多食,多尿,消瘦的“三 多一少”症状,以及胰岛素 抵抗等糖尿病特征。
精品课件
1、常见为血糖过高。补胰岛素法,补一些中效胰岛素。例如给 诺和灵n或NPH(中性鱼精蛋白锌胰岛素),每次2--3个单位,过了35天,大鼠一般死亡率就低了;
2、补糖法,禁食后的鼠,注射的时候已经处于低血糖状态,造 模4小时后腹腔注射百分之20的葡萄糖,可避免因注射时血糖过 低死鼠;
精品课件
再次,防止动物自相残杀。 食物缺乏和供水不足的情况下,会互 相撕杀、啃食同类,所以食物和饮水 要供应充足,最好是两路供应; 最后,防止感染。 糖尿病大鼠尿量多,垫料潮湿,需要 勤换垫料,所以糖尿病大鼠较其他大 鼠容易出现感染,特别是泌尿道感染 和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及 采血测血糖等侵入性操作前后,要注 意消毒工作。如每次采血测血糖后可 用四环素(或金霉素眼药膏)局部涂抹 处理伤口预防感染。
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与糖尿病有关的因素
肥胖:
糖尿病这的种遗遗一传传个因特重素性:要Ⅱ因型素糖可尿能病比就Ⅰ是型肥糖胖 症。遗尿传病更原为因明可显引。起例肥如胖:,双胞同胎样中也的可 引起糖一尿个患病了。Ⅰ身型体糖中尿心病型,肥另一胖个病有人4的0% 多余脂的肪机会集患中上在此腹病部;,但他如们果是比Ⅱ那型些糖脂 肪集中尿在病,臀则部另与一大个腿就上有的70人%的更机容会易患发上 生糖尿Ⅱ病型糖。尿病。
精品课件
死鼠问题的解决
鼠的个体差别和空腹(低血糖)抵抗力的差异而致死亡率的不同, 开始死亡率高可能主要是血糖突然升高,鼠不适应,或发生了 DKA(即酮症酸中毒)。 首先,一定要保证足够的饮水量(饮水量不足容易导致死鼠); 其次,高血糖和低血糖都会造成死鼠,避免死鼠可以通过注射胰 岛素或暂时补糖 两种途径:
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年龄:
年龄肥也是胖糖:尿2病型的糖发尿病因病素的。一有个一半重的要糖因尿素 患可者多能在就55是岁肥以胖后症发病。。遗高传龄原患者因容可易引出起现 生也现肥体活代能胖方的糖中式 引尿,心:起病同型吃糖也样肥高尿与也热病年胖量 ,纪可病的 有大引人食 人的起的物 认人2和 为容多型运 这易余糖动 也超脂量是重尿肪的由有病减于关集。少肥。中身 胖在而引腹起部的,。他肥胖们症比和那糖些尿病脂一肪样集,中在那在些臀 饮部食与和活大动腿习上惯的均已人“更西容化易”的发美生籍2亚型裔糖和尿 拉丁美商人中更为普遍病。。
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制作方法:
联合STZ(链脲佐菌素)和ALX(四氧嘧啶)
实验动物:SD大鼠/体重:200-280g,雄性 注射方法:腹腔注射法 具体方法:将大鼠进食12小时,过夜禁食后称重,按大鼠总 重量比称取STZ,放一干燥灭菌瓶内,外用锡纸包好,将柠 檬酸缓冲液及装STZ的瓶子置冰浴,一起带到动物房,如果 注射操作技术不熟练,应两组交替注射,分组溶解STZ,10 只或15只鼠/组。 实验组:通过腹腔注射12mg/ml的STZ+柠檬酸钠 +20mg/mlALX+蒸馏水各0.5ml. 空腹1小时后饲以标准饲料 块,自由饮水。 对照组:注射等量柠檬酸钠+蒸馏水。 于给药后3天,一周分别采血测血糖。该模型饲养12周。
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与糖与尿糖病尿病有有关关的的因因素素 遗传因素 • 遗传因素:和:1型糖尿病类似,2型糖
这种尿遗病传也特有性家Ⅱ族型发糖病尿的病特比点Ⅰ。型因糖此尿很可能与 病更基为因明遗显传。有关。这种遗传特性2型糖尿病比 例如1:型双糖胞尿胎病中更的为明一显个。患例Ⅰ如型:糖双尿胞病胎,中的一 另一个个患有了401%型的糖机尿会病患,上另此一病个;有但40如%的果机会患 是Ⅱ上型此糖病尿;病但,如则果另是一2型个糖就尿有病70,%的则机另一个就 会患有上7Ⅱ0%型的糖机尿会病患上。2型糖尿病。
精品课件
ห้องสมุดไป่ตู้
诱发原理
STZ直接破坏胰岛β细胞:主要见于注射大剂量STZ后。 STZ注射后可引起β细胞内辅酶I(NAD)的浓度下降,NAD 依赖性能量和蛋白质代谢停止,导致β细胞死亡;
四氧嘧啶进入体内后能迅速被胰岛β细胞摄取,影响细胞膜的通 透性和细胞内ATP的产生,抑制葡萄糖介导的胰岛素分泌。四氧嘧啶 主要通过产生氧自由基破坏β细胞结构,导致细胞的损伤及坏死, 从而阻碍胰岛素的分泌,使血清胰岛素水平降低。
糖尿病动物模型制作
制作: 李明锦 王婷 侯娟 吕志猛 夏 晓娟 王明霞 逄高燕 周东 王 秉思 魏京勋
主讲: 逄高燕
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背景介绍
糖尿病(diabetes)是由遗传因素、免疫功 能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、 精神因素等等各种致病因子作用于机体导致 胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、 蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊 乱综合 典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等 症状,即“三多一少”,糖尿病(血糖)一 旦控制不好会引发并发症,导致肾、眼、足 等部位的衰竭病变,且无法治愈。