第六章 核 酸
第六章 生物化学核酸讲解
生物化学核酸讲解核酸是遗传物质1868年瑞士Miesher.从脓细胞的细胞核中分离出可溶于碱而不溶于稀酸的酸性物质。
间接证据:同一种生物的不同种类的不同生长期的细胞,DNA含量基本恒定。
直接证据:T2噬菌体DNA感染E.coli用35S标记噬菌体蛋白质,感染E.coli,又用32P标记噬菌体核酸,感染E.coliDNA、RNA的分布(DNA在核内,RNA在核外)。
第一节核酸的化学组成核酸是一种线形多聚核苷酸,基本组成单位是核苷酸。
结构层次:核酸核苷酸组成核酸的戊糖有两种::D-核糖和D-2-脱氧核糖,据此,可以将核酸分为两种:核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)P330 表5-1 两类核酸的基本化学组成一、碱基1. 嘌呤碱:腺嘌呤鸟嘌呤2. 嘧啶碱:胞嘧啶尿嘧啶胸腺嘧啶P331 结构式3. 修饰碱基植物中有大量5-甲基胞嘧啶。
E.coli噬菌体中,5-羟甲基胞嘧啶代替C。
稀有碱基:100余种,多数是甲基化的产物。
DNA由A、G、C、T碱基构成。
RNA由A、G、C、U碱基构成。
二、核苷核苷由戊糖和碱基缩合而成,糖环上C1与嘧啶碱的N1或与嘌呤碱的N9连接。
核酸中的核苷均为β-型核苷P332 结构式腺嘌呤核苷胞嘧啶脱氧核苷DNA 的戊糖是:脱氧核糖RNA 的戊糖是:核糖三、核苷酸核苷中戊糖C3、C5羟基被磷酸酯化,生成核苷酸。
1、构成DNA、RNA的核苷酸P333表5-32、细胞内游离核苷酸及其衍生物①核苷5’-多磷酸化合物A TP、GTP、CTP、ppppA、ppppG在能量代谢和物质代谢及调控中起重要作用。
②环核苷酸cAMP(3’,5’-cAMP)cGMP(3’,5’-cGMP)它们作为质膜的激素的第二信使起作用,cAMP调节细胞的糖代谢、脂代谢。
③核苷5’多磷酸3’多磷酸化合物ppGpp pppGpp ppApp④核苷酸衍生物HSCoA、NAD+、NADP+、FAD等辅助因子。
GDP-半乳糖、GDP-葡萄糖等是糖蛋白生物合成的活性糖基供体。
生物化学与分子生物学重点
第一章 核酸的结构与功能1、种类:脱氧核糖核酸(DNA),存在于细胞核和线粒体内。
核糖核酸(RNA),存在于细胞质和细胞核内。
2、核酸的分子组成:基本组成单位是核苷酸,而核苷酸则由碱基、戊糖和磷酸三种成分连接而成。
戊糖:DNA分子的核苷酸的糖是β-D-2-脱氧核糖,RNA中为β-D-核糖。
3、核酸的一级结构核苷酸在多肽链上的排列顺序为核酸的一级结构,4、 DNA的二级结构DNA双螺旋结构是核酸的二级结构。
双螺旋的骨架由糖和磷酸基构成,两股链之间的碱基互补配对,是遗传信息传递者,DNA半保留复制的基础,结构要点: a.DNA是一反向平行的互补双链结构亲水的脱氧核糖基和磷酸基骨架位于双链的外侧,而碱基位于内侧,碱基之间以氢键相结合,其中,腺嘌呤始终与胸腺嘧啶配对,形成两个氢键,鸟嘌呤始终与胞嘧啶配对,形成三个氢键。
b.DNA是右手螺旋结构螺旋直径为2nm。
每旋转一周包含了10个碱基,每个碱基的旋转角度为36度。
螺距为3.4nm,每个碱基平面之间的距离为0.34nm。
c.DNA双螺旋结构稳定的维系横向靠互补碱基的氢键维系,纵向则靠碱基平面间的疏水性堆积力维持,尤以后者为重要。
5、RNA的空间结构与功能mRNA:1. 真核生物mRNA的5'-端有特殊帽结构2. 真核生物mRNA的3'-末端有多聚腺苷酸尾3. mRNA碱基序列决定蛋白质的氨基酸序列tRNA:1、3′末端为—CCA-OH 2、含10~20% 稀有碱基3、其二级结构呈“三叶草形”4. tRNA的反密码子能够识别mRNA密码子rRNA:rRNA的结构为花状,rRNA 与核糖体蛋白结合组成核糖体(ribosome),为蛋白质的合成提供场所。
rRNA单独存在不执行其功能。
tRNA功能是在细胞蛋白质合成过程中作为各种氨基酸的戴本并将其转呈给mRNA。
6、核酸的理化性质在某些理化因素作用下,如加热,DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂,使DNA双螺旋结构松散,变成单链,即为变性。
第六章DNA和RNA的提取
β-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除
(二)基因组DNA的提取- CTAB法
组份
CTAB提取缓冲液的改进配方
Tris-HCl EDTA NaCl (pH8.0) (pH8.0) 100 mM 20 mM 1.4M CTAB 3%(W/ V) PVP40 5%(W/ V) β-巯基乙醇 2%(V/V) 使用前加入
主要方法: (1)浓盐法 利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离。 1)用1M 氯化钠提取,得到的DNP粘液 2) 与含有少量异戊醇的氯仿一起摇荡,使乳化 3) 离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相 中间,而DNA位于上层水相中 4) 用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.
质粒DNA的提取
使用处于对数期的新鲜菌体 (老化菌体导致开环质粒增加)
质粒DNA-碱裂解法
碱裂解法原理
染色体DNA比质粒DNA分子大得多,且染色体DNA为线状分 子,而质粒DNA为共价闭合环状分子; 当用碱处理DNA溶液时,线状染色体DNA容易发生变性,共 价闭环的质粒DNA在回到中性pH时即恢复其天然构象; 变性染色体DNA片段与变性蛋白质和细胞碎片结合形成沉 淀,而复性的超螺旋质粒DNA分子则以溶解状态存在液相 中,从而可通过离心将两者分开。
磁珠
磁性微粒挂上不同基团可吸附不同的目的 物,从而达到分离目的。
(三)基因组DNA-其它方法
浓盐法:
利用RNP和DNP在盐溶液中溶解度不同,将二者分离
有机溶剂抽提法:
有机溶剂作为蛋白变性剂,同时抑制核酸酶的降解作用
密度梯度离心法:
利用不同内容物密度不同的原理分离各种内容物
第六章核酸的分离与纯化
三、鉴定、保存与应用
(一)核酸的鉴定
1.浓度鉴定核酸浓度的定量鉴定可通过紫外分光光度法与荧光光度法进行。
(1)紫外分光光度法:紫外分光光度法是基于核酸分子成分中的碱基均具有一定的紫外线吸收特性,最大吸收波长在250nm~270nm之间。这些碱基与戊糖、磷酸形成核苷酸后,其最大吸收波长不变。由核苷酸组成核酸后,其最大吸收波长为260nm,该物理特性为测定溶液中核酸的浓度奠定了基础。在波长260nm的紫外线下,1个OD值的光密度大约相当于50µg/ml的双链DNA,38µg/ml的单链DNA或单链RNA,33µg/ml的单链寡聚核苷酸。如果要精确定量已知序列的单链寡核苷酸分子的浓度,就必须结合其实际分子量与摩尔吸光系数,根据朗伯-比尔定律进行计算。若DNA样品中含有盐,则会使A260的读数偏高,尚需测定A310以扣除背景,并以A260与A310的差值作为定量计算的依据。紫外分光光度法只用于测定浓度大于0.25µg/ml的核酸溶液。
2.纯度鉴定紫外分光光度法还是荧光光度法,均可用于核酸的纯度鉴定。
生物化学课后习题答案集
第二章糖类1、判断对错,如果认为错误,请说明原因。
(1)所有单糖都具有旋光性。
答:错。
二羟酮糖没有手性中心。
(2)凡具有旋光性的物质一定具有变旋性,而具有变旋性的物质也一定具有旋光性。
答:凡具有旋光性的物质一定具有变旋性:错。
手性碳原子的构型在溶液中发生了改变。
大多数的具有旋光性的物质的溶液不会发生变旋现象。
具有变旋性的物质也一定具有旋光性:对。
(3)所有的单糖和寡糖都是还原糖。
答:错。
有些寡糖的两个半缩醛羟基同时脱水缩合成苷。
如:果糖。
(4)自然界中存在的单糖主要为D-型。
答:对。
(5)如果用化学法测出某种来源的支链淀粉有57个非还原端,则这种分子有56个分支。
答:对。
2、略3、乳糖是葡萄糖苷还是半乳糖苷,是α-苷还是β-苷?蔗糖是什么糖苷,是α-苷还是β-苷?两分子的D-吡喃葡萄糖可以形成多少种不同的二糖?答:乳糖的结构是4-O-(β-D-吡喃半乳糖基)D-吡喃葡萄糖[β-1,4]或者半乳糖β(1→4)葡萄糖苷,为β-D-吡喃半乳糖基的半缩醛羟基形成的苷因此是β-苷。
蔗糖的结构是葡萄糖α(1→2)果糖苷或者果糖β(2→1)葡萄糖,是α-D-葡萄糖的半缩醛的羟基和β- D -果糖的半缩醛的羟基缩合形成的苷,因此既是α苷又是β苷。
两分子的D-吡喃葡萄糖可以形成19种不同的二糖。
4种连接方式α→α,α→β,β→α,β→β,每个5种,共20种-1种(α→β,β→α的1位相连)=19。
4、某种α-D-甘露糖和β-D-甘露糖平衡混合物的[α]25 D为+ 14.5°,求该平衡混合物中α-D-甘露糖和β-D-甘露糖的比率(纯α-D-甘露糖的[α]25D为+ 29.3°,纯β-D-甘露糖的[α]25 D为-16.3°);解:设α-D-甘露糖的含量为x,则29.3x- 16.3(1-x)= 14.5X=67.5%该平衡混合物中α-D-甘露糖和β-D-甘露糖的比率:67.5/32.5=2.085、略6、水解仅含D-葡萄糖和D-甘露糖的一种多糖30g,将水解液稀释至平衡100mL。
细胞生物学课后习题答案
细胞生物学第一章细胞概述1 举例说明细胞的形态与功能相适应。
细胞形态结构与功能的相关性与一致性是很多细胞的共同特点。
如红细胞呈扁圆形的结构,有利于O 2 和CO 2 的交换。
高等动物的卵细胞和精细胞不仅在形态、而且在大小方面都是截然不同的。
2 真核细胞的体积一般都是原核细胞的1000 倍,真核细胞如何解决细胞内重要分子的浓度问题?真核细胞为了解决细胞内重要分子的浓度问题,出现了特化的内膜系统,使一些反应局限于特定的膜结合的细胞器,这样,一些重要反应的分子浓度并没有被稀释。
3 组成蛋白质的基本构件只是20 种氨基酸,为什么蛋白质却具有如此广泛的功能?根本原因是蛋白质具有几乎无限的形态结构,因此蛋白质仅仅是一类分子的总称。
换句话说,蛋白质之所以有如此广泛的作用,是因为蛋白质具有各种不同的结构,特别是在蛋白质高级结构中具有不同的结构域,而这种不同的空间构型使得蛋白质能够有选择地同其他分子进行相互作用,这就是蛋白质结构决定功能放入特异性。
正是由于蛋白质具有如此广泛特异性才维持了生命的高度有序性和复杂性。
4 为什么解决生命科学的问题不能不仅靠分子生物学而要靠细胞生物学?第二章细胞生物学研究方法第三章细胞质膜和跨膜运输1 有人说红细胞是研究膜细胞结构的最好材料,你能说说理由吗?①首先是红细胞数量大,取材容易(体内的血库),极少有其他类型的细胞污染。
②其次,成熟的哺乳动物的红细胞中没有细胞核和线粒体等膜相细胞器,细胞质膜是它唯一的膜结构,所以在分离后不存在其他膜污染问题。
2 十二烷基磺酸钠(SDS)和TritonX-100 都是去垢剂,哪一种可用于分离分离有生物功能的膜蛋白?SDS 是离子型的去垢剂,不仅可使细胞膜崩溃,并与膜蛋白的疏水部分结合使其分离,而且还破坏膜蛋白内部的非共价键,使蛋白质变性,故不宜用于分离膜蛋白。
TritonX-100 是非离子型的去垢剂,它可以使膜脂溶解,又不会使蛋白质变性。
故用于分离膜蛋白。
生物化学第六章(1)
尿酸生成
生物化学第六章(1)
嘌 呤 核 总苷 酸 的 结分 解 代 谢
生物化学第六章(1)Fra bibliotek 尿酸尿囊素 尿囊酸
尿素 氨[铵]
的不 分同 解生 产物 物嘌 不呤 同核
苷 酸
生物化学第六章(1)
尿酸与疾病
嘌呤核苷酸的分解代谢主要在肝脏、小肠及肾脏 中进行。生理情况下嘌呤合成与分解处于相对 平衡状态,尿酸的生成与排泄也较恒定。正常 人血浆中尿酸含量约0.12-0.36mmol/L,男性平 均0.27mmol/L ,女性平均0.21mmol/L 。当体 内核酸大量分解(白血病、恶性肿瘤等)或食入 高嘌呤食物时,血中尿酸水平升高,超过 0.48mmol/L时,尿酸盐过饱和形成结晶,沉积 于关节、软组织、软骨及肾等处,而导致关节 炎、尿路结石及肾疾患,称为痛风症。
一、嘧啶核苷酸的从头合成
n 首先合成嘧啶环,然后与PRPP 中的磷酸核糖连接起来形成嘧啶 核苷酸。
n 从头合成首先合成UMP,然后由
它转变为其它嘧啶核苷酸。
n 合成的原料有氨基甲酰磷酸和天冬 氨酸
生物化学第六章(1)
嘧啶环元素的来源
生物化学第六章(1)
氨甲酰磷酸合成氨甲酰Asp
生物化学第六章(1)
概述
生物体普遍存在的磷酸单酯酶或 核苷酸酶可催化核苷酸的水解, 而特异性强的磷酸单酯酶只能水 解3’-Nt或5’-Nt。 催化核苷水解的酶有2类,即核 苷磷酸化酶和核苷水解酶
生物化学第六章(1)
局限,只对核 糖Ns发生作用
广泛存在, 反应可逆
核 苷 酸 及 核 苷 分 解
生物化学第六章(1)
二、嘧啶核苷酸的降解 不同生物嘧啶碱的分解过程也不一
第六章 RNA的合成
第六节 真核生物RNA的合成
1.真核RNA聚合酶
真核生物有三种RNA polymerase I, II, III。 是根椐这三种酶对α –鹅膏蕈碱(α-amanitin) 的敏感性不同来区别。
α2ββ„σ这样的整 个酶分子称为 “全酶”( Holoenzyme )。 而σ亚基解离后的 其余部分(α2ββ„) 称为核心酶 (Core enzyme) 。
σ亚基的最主要的功能是识别启动子,特 别是启动子上的R位点。 细胞内哪条链被转录(即转录的方向),转 录的起点的选择都与σ亚基有关。体外转 录实验中,用全酶可得到与体内相同的结 果;而用核心酶时,模板链和起始点的选 择都有很大的随意性。
DNA
5’---ATGAGTA----3’ Non-template (sense strand) 3’---TACTCAT----5’ template (antisense strand) 5’----AUGAGUA----3’
RNA
第二节 RNA的结构和种类
RNA与DNA的差异
DNA
糖 脱氧核糖
TTGACA
TATAAT
3’
5’
5’
3’
AACTGT ATATTA
-35序列
Sextama 框
+1 -10序列 Pribnow框 转录起始点
当σ亚基发现其识别位点时,全酶就与-35序 列结合(初始结合),形成一个封闭的启动子复 合物。整个酶分子向-10序列转移并与之牢 固结合,然后-10序列及起始位点处发生局部 解链,一般为12bp-17bp。这时的全酶和启动 子的复合物称为开放性启动子复合物。
6第六章 微生物的代谢
发酵的类型
1.由EMP途径中丙酮酸出发的发酵
丙酮酸EMP途径的关键产物,由丙酮酸出发,在 不同微生物中可进入不同的发酵途径,如:同型酒 精发酵、同型乳酸发酵、丙酸发酵、混合酸发酵、 丁酸发酵等。
2.通过HMP途径的发酵——异型乳酸发酵 (heterolactic fermentation)凡葡萄糖发酵后产生乳 酸、乙醇(乙酸)和CO2等多种产物的发酵即异型 乳酸发酵;相对的如只产生2分子乳酸的发酵则称 同型乳酸发酵(homolactic fermentation)
第六章 微生物的代谢
Microbial metabolism
概述
新陈代谢(metabolism)简称代谢,是指发生在活细胞 中的各种分解代谢(catabolism)和合成代谢 (anabolism)的总和。
分解代谢又称异化作用,指复杂的有机分子在分解代谢 酶系的催化下产生简单分子、能量和还原力的作用。
TCA循环在微生物生命活动中的意义:
(1)彻底氧化,为微生物生长提供大量的能 量。 (2) 位于一切分解代谢与合成代谢的中枢地 位,为有机物的合成提供大量的原料。 (3)工业生产中可利用这一途径生产柠檬酸、 苹果酸、琥珀酸、谷氨酸等工业原料。
6.1.1.2 递氢和受氢
在生物体中,贮存在葡萄糖等有机物中 的化学能,经上述的多种途径脱氢后, 经过呼吸链等方式递氢,最终与受氢体 (氧、无机物或有机物)结合,以释放 其化学潜能。
1.EMP途径(Embdem-Meyerhof-Parnas pathway)或糖酵解途径(Glycolysis Pathway )
是绝大多数生物所共有的一条主流代谢途径。
1分子葡萄糖,经10步反应,产生2分子丙酮 酸 苷、酸)2分和子2N分A子DAHT2(P。还原型烟酰胺腺嘌呤二核
核工程导论 第六章_核燃料循环
潘良明重庆大学4.1 4.2 4.3 堆内燃料循环4.4 核燃料循环后端前端铀矿石开采和冶炼 铀转化铀同位素浓缩 核燃料元件制造 核电站乏燃料后处理废物处理黄饼矿石浓缩芯块烧结组装Uranium Ore Processing铀化合物的转化Conversion (UO 2, UO 3, UF 4, UF 6, U 3O 8, U)Uranium EnrichmentFuel Fabrication (AGR, FBR, GCR, LWR, MAGNOX, MOX, PHWR, RBMK, Pellets)勘定储量:推测储量:包括海水中的铀:世界上重要的铀矿资源国家•澳大利亚44%•哈萨克斯坦20%•加拿大18%•南非8%•美国、独联体、刚果、尼日利亚等我国的东北、西北、西南及中南地区都蕴藏有铀加拿大哈萨克斯坦美国价格世界铀资源用于反应堆的产能效率1770000折算为标准煤吨数6000001t 天然铀的产能值(442500包括海水中的铀:44250推测储量:8850勘定储量:用于快中子反应堆天然铀资源按能值折算为标准煤单位:Gt标准煤*: 分离工厂贫铀中997.748Gt地位和作用•不属于核燃料循环•提供铀矿储量信息铀矿种类和价值•已发现•具有实际开采价值只有•一般铀含量•最高的含量•主要在花岗岩中影响铀矿床工业的主要因素•矿石品位•矿床储量•开采条件普查勘探工作程序•区域地质调查、普查和详查、揭露评价、勘探等•地形测量、地质填图、原始资料编录等•我国需要5年以上的时间铀矿地质勘探核工业地质局核工业北京地质研究院核工业航测遥感中心核工业西北地质局二O八大队核工业地质局二一六大队核工业东北地质局二四三大队核工业西北地质局二O三研究所核工业中南地质局二三O研究所核工业东北地质局二四O研究所核工业华东地质局二七O研究所核工业西南地质局二八O研究所核工业华南地质局二九O研究所核工业总公司种类•沥青铀矿•钾钒铀矿铀含量•铀矿石平均含铀品位为:•富矿: 储量测量:•航空测量•γ 铀储量•探明储量:经过地质勘探,计算分析,得到的具体储量•预测储量:铀的矿床、矿田和成矿区域中比较有利的地区,根据这些地区的成矿条件推算出来的铀矿石铀矿放大倍广西富钟县花山区铀矿中国是铀矿资源不甚丰富我国铀矿探明储量居世界第位之后,不能适应发展核电的长远需要矿床规模以中小为主矿石品位偏低•一般在千分之一含量就要开采,成本较高•开发堆浸、地浸技术,可降低成本我国逐步发现了花岗岩型38%、火山岩型22%、砂岩型四大类型的铀矿床•北方铀矿区以火山岩型、砂岩型为主Æ地浸•南方铀矿区以花岗岩型为主Æ堆浸广东湖南江西云南广西浙江新疆河北陕西已探明的铀矿•大小铀矿床•矿床以中小型为主主要分布•江西、广东、湖南、广西,以及新疆、辽宁、云南、河北、内蒙古、浙江、甘肃等省主要的铀矿床•相山铀矿田、郴县铀矿床、下庄铀矿田、产子坪铀矿田、青龙铀矿田、腾冲铀矿床、桃山铀矿床、小丘源铀矿床、黄村铀矿床、连山关铀矿床、蓝田铀矿床、若尔盖铀矿床、芨岭铀矿床、伊犁铀矿床、白杨河铀矿床已经建成和新建的厂矿•衡阳铀矿、郴州铀矿、大浦街铀矿、上饶铀矿、抚州铀矿、乐安铀矿、翁源铀矿、衢州铀矿、澜河铀矿、仁化铀矿、本溪铀矿、蓝田铀矿、伊犁铀矿等地位和作用•从地下矿床中开采出工业品位的铀矿石•或将铀经化学溶浸,生产出液体铀化合物铀的开采•露天开采机械化程度高、生产能力大、生产成本低、劳动条件好•地下开采:井巷掘进用于埋藏较深的矿体井巷工程:决定了矿山基建时间•原地浸出(地浸)in situ leaching,ISL通过地表钻孔将化学反应剂注入矿带,通过化学反应选择性地溶解矿石中的铀,并将浸出液提取出地表具有生产成本低,劳动强度小仅适用于具有一定地质、水文地质条件的矿床(砂岩型)•苏联技术•建于1960年铀含量•铀的矿冶工艺•提炼方式•铀的选矿重力选矿、磁选选矿、放射性选矿•铀的水冶用酸或碱的水溶液•铀的纯化浓缩和纯化使铀和杂质分开Æ达到较高和 产品•重铀酸铵(黄饼)铀矿开采铀含量0.1%~0.2%形态矿石矿浆粉末核纯铀40%~70%陶瓷等75%我国的铀矿开采和矿石提炼能力 中国有几十座矿山、铀水冶厂、铀开采联合企业 中国的铀处理厂在矿山附近。
核酸化学RNA的结构
三、RNA的三级结构及其结构元件
RNA在二级结构基础上,核酸链再次折叠形成更高 级结构——三级结构。
三级结构的元件:有假结构、三链结构、环-环 结合和螺旋-环结合。
环-环结合可看成是特殊的假结构,它比通常的假 结构更复杂。螺旋-环结合可堪称是特殊的三链结构, 当然它也比通常的三链结构要复杂。因此下面仅简单叙 述假结构和三链结构。此外三级结构的维系中,三碱基
是蛋白质合成的直接模板。
mRNA的核苷酸序列决定相应蛋白质的氨基酸序
列。
• 真核生物的mRNA的一级结构
• 如图所示,5’端有帽子结构(cap),依次为5’非编
码区、编码区 、 3’非编码区, 3’端为聚腺苷酸
(polyA)尾巴。
• 真核生物的mRNA的5’端有帽子结构(cap)
• —— 7-甲基鸟苷(图)
• 18S: 43个甲基化核苷
• 23S: 20个甲基化核苷,(还有假尿嘧啶核苷)
• 28S: 74个甲基化核苷,(还有假尿嘧啶核苷)
•
rRNA的功能:
(1)核糖体的骨架
(2)与mRNA和tRNA作用,催化肽键的形成。
(3)促进蛋白质合成的正常进行。
3.真核生物的mRNA的一级结构.
mRNA的一级结构mRNA(信使RNA):
d. 从多头粘菌中提取的RNase Phy l 水解A G U 三种核苷酸,但不水解胞苷酸(-C)。 利用上述4种酶可测定RNA的序列。
酶切法RNA测序基本步骤为:
(1)对核酸的5‘-末端进行放射性同位素标记。 (2)选用具有不同核苷酸残基特异性的多种RNA酶,分 别对标记的核酸样品进行随机的、不完全的水解, 产生多组具有特定不同长度的RNA片段。 (3)用聚丙烯腺胺凝胶电泳方法将RNA片段按分子大小 进行分离。
【微生物生物学】第六章考点总结2
【微⽣物⽣物学】第六章考点总结2微⽣物的营养要求:碳源—⽆机碳源,有机碳源;氮源—⽆机氮源,有机氮源;⽆机盐—主要元素,微量元素⽣长因⼦—维⽣素,⽣物素;⽔;能源微⽣物的六类营养要素:碳源,氮源,⽆机盐,⽣长因⼦,能源,⽔营养物质及其⽣理功能:⽔分—功能:(1)溶剂与运输介质(吸收与分泌)(2)参与细胞内⽣化反应(3)维持蛋⽩、核酸等⽣物⼤分⼦稳定的天然构象及细胞正常形态(4)⽐热⼤,控制细胞内温度变化(5)通过⽔合与脱⽔控制多亚基组成的结构,如酶、微管、鞭⽑的组装与分离碳源—有机碳源:糖类(单糖,寡糖,多糖),有机酸,醇,脂类,烃类,芳⾹族化合物⽆机碳源:⼆氧化碳,碳酸氢钠,碳酸钠—功能:构成细胞物质的主要成分(⾻架)能源(分解代谢过程中产⽣)氮源—有机氮:蛋⽩及其降解物(胨、肽、氨基酸),核酸、尿素、嘌呤、嘧啶等⽆机氮:N2,硝酸盐,铵盐—功能:提供微⽣物⽣长、繁殖所需氮素营养;合成细胞含氮化合物,能源(⾃养菌)能源—化学物质:有机、⽆机化合物辐射能:光⽆机盐—⼤量元素: P, S, K, Mg, Ca, Na微量元素(≤ 0.1mg/L): Mn, Cu, Co, Zn, Mo , Fe—功能:(1)维持⽣物⼤分⼦和细胞结构的稳定;(2)酶活性中⼼的组成部分;(3)调节细胞渗透压平衡;(4)控制细胞氧化还原电位;(5)某些⾃养微⽣物的能源⽣长因⼦—种类:维⽣素(B族为主)、⽣物素、烟酰胺、氨基酸、胺类、甾醇、嘌呤、嘧啶—功能:参与新陈代谢,促进微⽣物⽣长光能⽆机营养型:具有光合⾊素,利⽤光能并以⽔或还原态⽆机物为供氢体来同化CO2光合⾊素:主要⾊素:叶绿素,菌绿素辅助⾊素:类胡萝⼘素,藻胆素(捕获光能,强光下保护作⽤)产氧光合作⽤:利⽤光能分解⽔⽽产⽣O2,还原CO2为有机物(藻类、蓝细菌内含叶素)光能CO2+H2O———→[CH2O]+O2↑叶绿素不产氧光合作⽤:吸收光能, 以还原态⽆机硫化物(H2S)为氢或电⼦供体同化CO2(光合细菌:紫⾊细菌,绿⾊细菌等)光能CO2+2H2S——→*CH2O]+H2O+S菌绿素⽣活环境:光照,厌氧,富含有机质,H2,硫化物⾮环式光合磷酸化系统PSII→PSI:P680--P680*--Ph--Q A--Q B--Qpool--Cyt bf-P700--P700*--FeS--Fd--Fp--NAD(P)HQ B—Qpool:⾮环式电⼦流(产⽣质⼦动⼒)Cyt bf—Fd:环式电⼦流(产⽣质⼦动⼒)环式光合磷酸化系统(紫⾊细菌)P870—P870*--Bph--Q A--Q B—Qpool—Cyt bc1---Cyt c2—P870---NAD(P)HQpool---NAD(P)H:反向电⼦流(耗能)光能有机营养型:利⽤光能,以简单有机物(醇、有机酸)为供氢体同化CO2CH3光能│CO2+2CH2-CHOH——→*CH2O]+2CH3COCH3+H2O菌绿素化能⽆机营养型:通过氧化⽆机物取得能量,并以CO2为唯⼀或主要碳源1. 硝化细菌(亚硝化细菌群,硝化细菌群)2.硫(化)细菌(通过氧化还原态的⽆机硫化物(H2S、S、S2O32-、SO32-)获得能量, 同化CO2)3. 铁细菌(氧化Fe2+为Fe3+获取能量并同化CO2)4. 氢细菌(具有氢化酶,从氢的氧化获取能量,同化CO2)**区别于异养型的产氢细菌,具有氢酶,氧化氢获得能量,但不能同化CO2化能有机营养型:⼤多数微⽣物以有机物为碳源和能源腐⽣型,寄⽣型,兼性寄⽣营养类型能源供氢体基本碳源实例光能⽆机光⽆机物⼆氧化碳蓝细菌, 光合细菌光能有机光有机物⼆氧化碳红螺菌科细菌,简单有机物化能⽆机⽆机物⽆机物⼆氧化碳硝化细菌等化能有机有机物有机物有机物⼤多数细菌和真菌影响物质进⼊细胞的因素:1. 营养物质本⾝的性质(分⼦量、溶解性、电负性等);2. 微⽣物所处环境(温度、pH、离⼦强度);3. 微⽣物细胞的透过屏障(细胞壁、细胞膜、荚膜、粘液层等的孔径⼤⼩,松紧程度)微⽣物吸收营养物质的⽅式:1、膜泡运输(吞噬作⽤)—吸附期,膜伸展期,膜泡迅速形成期,附着膜泡形成期,膜泡释放期特点:1. 主要存在于原⽣动物(变形⾍)中;2. 细胞膜内陷包裹营养物,由胞外进⼊胞内;2、被动扩散—由细胞质膜内外营养物的浓度差⽽产⽣的物理扩散作⽤。
生物化学第六章糖类代谢
一、单糖
单糖只含有一个羰基,不能再水解为更简单 的糖。最简单的单糖是甘油醛和二羟丙酮。
D-甘油醛
二羟丙酮
含有醛基的单糖叫醛糖,如甘油醛、葡萄糖、 核糖等;
含有酮基的单糖叫酮糖,如二羟丙酮、果糖、 核酮糖等。
单糖又根据C原子数分为三、四、五、六、 七碳糖,习惯也称为丙、丁、戊、己、庚糖。 例如三碳糖也称为丙糖,六碳糖称为己糖。
图6-4 乳糖的结构
三、多糖
(一)多糖的特征
多糖是由多个单糖通过糖苷键聚合成的高分 子聚合物。单糖数目随机而不固定,所以多 糖没有固定的分子质量和确定的物理常数。 多糖是自然界存在量最大的一类有机物质。 也是人类重要的食物来源和工业原料。
多糖一般难溶于水或根本不溶于水,也不 能形成晶体,没有甜味,旋光性不明显, 化学性质比较稳定,除了在一定条件下发 生降解反应外,很难发生氧化、还原、成 苷、成酯等反应,尤其是构成动植物骨架 的多糖如纤维素、几丁质等,化学性质更 为稳定。
麦芽糖是由两分子α–D葡萄糖缩合组成,为α (14)糖苷键连接。麦芽糖保留了半缩 醛羟基,属于还原糖(图6-3)。
生物体内麦芽糖含量极少,几乎测不到(包 括动物和植物),但并非不存在。植物种 子在萌发时贮藏的淀粉水解,麦芽糖含量 略有增多,然后迅速由麦芽糖酶水解为葡 萄糖。
图6-3 麦芽糖的结构
另一种是五肽,一般是五聚甘氨酸,将两条 多糖链上的四肽侧链之间以五肽桥连接 (图6-10)。革兰氏阳性菌与革兰氏阴性 菌的肽聚糖交联方式略有不同。
溶菌酶可作用于肽聚糖的多糖链,使多糖链 断裂导致菌体吸水膨胀破裂而杀死细菌。 青霉素类抗生素可抑制肽聚糖短肽之间的 交联,无法合成完整的细胞壁而发挥抑菌 作用。
(二)麦芽糖的降解
第六章 病毒和类病毒
3.有包膜的RNA病毒,如副流感病毒用出芽方式通过寄主细胞膜,
释放到细胞外并获得细胞源性的包膜和产生刺突。
43
1.吸附:腺病毒吸附在宿主细 胞表面的糖蛋白受体上。 2.穿入:通过吞噬作用进入胞内。 3.脱壳:寄主细胞的蛋白酶 水解腺病毒衣壳。 4.在宿主细胞核内转录早期 mRNA并翻译早期蛋白。 5.在宿主细胞核内复制出病毒的 DNA和晚期mRNA。
含有温和噬菌体的DNA 而又找不到形态上可见的 噬菌体粒子的宿主细菌叫溶源性细菌。 溶源性细菌的基本特性:
①自发裂解 ②诱发裂解 ③免疫性 ④复愈性 ⑤溶源转变
41
(二)植物病毒
植物病毒没有专门的吸 附结构,通过昆虫口器、 摩擦伤口和人为伤口进 入寄主细胞。植物病毒 在入住宿主细胞后脱去 蛋白质外壳。 TMV的衣壳粒以双层 盘的形式组装成衣壳, PH的改变、RNA的嵌入 对衣壳的装配起关键作 用。
13
第二节 毒粒的性质
毒粒是病毒的细胞外颗粒形式,也是病毒的感染性形式。 (一)病毒的大小和形状 大多采用电镜观察;负染色法 不同病毒的毒粒差异很大; 毒粒的形状大致可分球形颗粒(或称拟球形颗粒)、 杆状颗粒和复杂形状颗粒(如蝌蚪状,卵形)等 少数几类。
14
(二)病毒的形态结构
1、典型病毒粒的构造
6
照片为瑞典著名的科技摄影师83岁的伦纳特· 尼尔松利 用高倍电子扫描 显微镜摄制而成。病毒样本源自两年前死 于禽流感的一对中国香港父女。
禽流感一旦在人际传播,数亿人生命将受到 威胁。
7
H1N1亚型猪流感病毒
猪流感是发生在猪等家畜中的 一种常见疫病,此前极少感染 人。
据专家称,猪流感病毒代号为 H1N1亚型猪流感病毒新毒株, 它包含人流感病毒、北美禽流 感病毒和北美、欧洲、亚洲三 类猪流感病毒的基因片段。
细胞生物学第六章-线粒体和叶绿体PPT课件
辅酶Q的氧化和还原形式
2021
■ 氧化还原电位与载体排列顺序
2021
▪ ● 呼吸链电子载体 的排列顺序:
▪ 电子从一个载体传 向另一个载体,直 至最终的受体被还 原为止,在该呼吸 链中的最终的受体 是O2,接收电子后 生成水。
电子传递链中几种电子载体及电子传递
2021
■ 偶联因子1(coupling factor 1)
ATP偶联因子电镜照片(负染)
2021
■ ATP合酶(ATP synthase)的结构和功能
图 ATP合酶的形态 (a) 电镜照片; (b)根据电镜照片绘制的模式图和各部分的大小。
2021
● F1颗粒组成
2021
● 定子(stator)和转子(rotor)
叶绿体内膜中苹果酸延胡索酸穿梭转运蛋白50叶绿体内膜中的其他转运载体表载体功能adpatp交换载体进行细胞质和叶绿体基质间的adpatp交换二羧酸交换载体进行细胞质和叶绿体基质间二羧酸的交换葡萄糖载体将叶绿体基质中的葡萄糖运输到胞质溶胶乙醇酸载体将叶绿体基质中的乙醇酸运输到胞质溶胶磷酸交换载体将细胞质中的无机磷与叶绿体基质中的三碳糖进行交换512类囊体thylakoid类囊体由内膜发展而来的呈扁平小囊是光合作用的光反应场所
2021
F1和γ旋转的实验证明
2021
氧化磷酸化抑制剂
▪ 1.电子传递抑制剂: ▪ 抑制NADH→CoQ的电子传递。阿米妥、鱼藤酮。 ▪ 抑制复合物III。抗霉素A 。 ▪ 抑制复合物IV。如:CO、CN、H2S。 ▪ 电子传递抑制剂可用来研究呼吸链各组分的排列顺序,当
呼吸链某一特定部位被抑制后,底物一侧均为还原状态, 氧一侧均为氧化态,可用分光光度计检测。
第六章 核糖体
(二)蛋白质延长的阻遏
• (三)核糖体-SRP-SRP受体的相互作用 • (四)核糖体-膜连接物的形成及蛋白质移位
蛋白质在粗面内质网内糖基化
第五章 异常情况下核糖体的变化
• 1、多核糖体的解聚: • 多核糖体分散为单体,孤立地分散
在细胞质中或附在粗面内质网膜上。 • 2、粗面内质网的脱落: • 指附着在粗面内质网上的核糖体脱
• (五)从蛋白质合成时各种需要来看核 糖体上可能存在着四个部位:供体部位、 受体部位、多肽链转移酶中心和GTP酶 活性部位。
第二节 核糖体的功能
• 一是使mRNA不断地与tRNA分子结合。 • 二是控制着正在生长中的肽链。
核糖体的功能
一、结构蛋白质的合成
• 结构蛋白质又称内源性蛋白质,是 指用于细胞本身或参与组成细胞自身结 构的蛋白质,亦即细胞内代谢所需要的 蛋白质。主要由细胞质中的游离核糖体 所合成。
第六章 核糖体(P151)
•
核糖体又称为核蛋白体或核糖体酸
蛋白体,是由核糖核酸和蛋白质组成的
葫芦形小体。存在于所有类型的活细胞
中,游离在细胞质中或附着在粗面内质
网上,特别在快速增殖的细胞中含量更
多。这些颗粒是蛋白质合成的中心场所。
第一节 核糖体的形态结构和性质
• 一、核糖体的形态结构
•
在电镜下,核糖体为直径15-25nm
二、输出蛋白质的合成
•
输出蛋白质又称分泌蛋白质,是指
专门输送到细胞外面,以发挥其作用的
蛋白质。包括某些酶、抗体和蛋白类激
素。
核糖体和蛋白质的生物合成
蛋白质合成的过程
• 一、蛋白质合成的起始作用 • 二、蛋白质合成的延伸作用 • 三、蛋白质的终止作用
医用细胞生物学第六章
P位点(肽酰基位点): 亦称给位, 位于小亚 基, 为延伸中肽酰tRNA的结合位点;
二、核糖体的类型与理化特性
蛋白质 40~50% 核糖体
rRNA 50~ 60% 强负电性 可同阳离子和碱性染料(如甲苯胺蓝)相结合
80S
70S
真核细胞的 细胞质核糖体
原核细胞的 细胞质核糖体
核糖体成分的解组图解
三、核糖体的形成与装配
2. tRNA • 识别mRNA上的密码子,并将特定氨基酸运输
至蛋白质合成部位。
携带氨基酸 识别密码子
3. rRNA • 核糖体中起主要作用的结构成分。
• 具有肽酰转移酶的活性; • 为tRNA提供结合位点 (A位点、P位点等) • • 在蛋白质合成起始时参与同mRNA选择性地结
合以及在肽链的延伸中与mRNA结合;
rRNA具有高度RNA
翻译结束
完整核糖体
四、核糖体与蛋白质的合成
(一)RNA 的作用
mRNA 密码子信息 密
蛋白质合成过程 核糖体 合成场所
切 配
tRNA 氨基酸转运 合
1. mRNA • 蛋白质合成的模板,每3个相邻核苷酸构成一
个密码子(codon),编码一个特定氨基酸。
蛋白质的糖基化
N-连接糖基化
蛋白质的运输
溶酶体
运往其它部位的蛋白
ER驻留蛋白
分泌细胞中细胞器结构 呈极性分布
2. SER 的功能
脂质合成
SER 膜上含多种与脂类合成有关的酶,脂质在 膜的胞质侧合成,借助转位酶翻至内质网腔面。
糖原代谢
SER腔
糖原颗粒
葡萄糖-6磷酸酶
葡萄糖
SER膜 进入血液
mRNA
小亚基-mRNA-Met-tRNAfmet
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细菌质粒DNA
真核细胞中的线粒体DNA、叶绿体DNA
1、 环形DNA的不同构象
P340 图5-8 松驰环、解链环、负超螺旋
(1)、 松弛环形DNA
线形DNA直接环化
(2)、 解链环形DNA
线形DNA拧松后再环化
(3)、 正超螺旋与负超螺旋DNA
线形DNA拧紧或拧松后再环化,成为超螺旋结构。
一、 碱基
1. 嘌呤碱: 腺嘌呤 鸟嘌呤
2. 嘧啶碱: 胞嘧啶 尿嘧啶 胸腺嘧啶
ห้องสมุดไป่ตู้P331 结构式
3. 修饰碱基
植物中有大量5-甲基胞嘧啶。
E.coli噬菌体中,5-羟甲基胞嘧啶代替C。
稀有碱基:100余种,多数是甲基化的产物。
DNA由A、G、C、T碱基构成。
RNA由A、G、C、U碱基构成。
二、 核苷
核苷由戊糖和碱基缩合而成,糖环上C1与嘧啶碱的N1或与嘌呤碱的N9连接。
核酸中的核苷均为β-型核苷
P332 结构式 腺嘌呤核苷 胞嘧啶脱氧核苷
DNA 的戊糖是:脱氧核糖
RNA 的戊糖是:核糖
三、 核苷酸
核苷中戊糖C3、C5羟基被磷酸酯化,生成核苷酸。
b.嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧,磷酸与脱氧核糖在外侧。磷酸与脱氧核糖彼此通过3/、5/-磷酸二酯键相连接,构成DNA分子的骨架。
宽1.2 nm 宽0.6nm
大沟 小沟
深0.85nm 深0.75nm
HLP1 17KD的亚基 20000个单体
P 3KD的亚基 未知
这些DNA结合蛋白,使4.2×106bp的E.coli染色体DNA压缩成为一个手脚架形结构,结构中心是多种DNA结合蛋白,DNA双螺旋分子有许多位点与这些蛋白结合,形成约100个小区,每个小区的DNA都是负超螺旋,一个小区的DNA有两个端点被蛋白质固定,每个小区相对独立。
3、 稳定双螺旋结构的因素
①碱基堆积力(主要因素) 形成疏水环境。
②碱基配对的氢键。GC含量越多,越稳定。
③磷酸基上的负电荷与介质中的阳离子或组蛋白的正离子之间形成离子键,中和了磷酸基上的负电荷间的斥力,有助于DNA稳定。
④碱基处于双螺旋内部的疏水环境中,可免受水溶性活性小分子的攻击。
三、 DNA二级结构的不均一性和多型性
相对湿度75%,DNA钠盐结晶,A—DNA。
Z—DNA。
生物体内DNA均为B—DNA。
Franklin 的工作
2、 Watson-Crick双螺旋结构模型
P335 图5—2
a.两条反平行的多核苷酸链绕同一中心轴相缠绕,形成右手双股螺旋,一条5’→3’,另一条3’→5’
DNA、RNA的分布(DNA在核内,RNA在核外)。
第一节 核酸的化学组成
核酸是一种线形多聚核苷酸,基本组成单位是核苷酸。
结构层次: 核 酸
核苷酸
磷酸 核苷
H2A、H2B、H3、H4各两分子对称聚集成组蛋白八聚体。
146bp长度的DNA双螺旋盘绕在八聚体上形成核小体。
核小体间DNA长度15-100bp(一般60bp)其上结合有H1
图
2H2A、2H2B、2H3、2H4组蛋白八聚体 146bpDNA 核小体
A-DNA也是右手双螺旋,外形粗短。
RNA-RNA、RNA-DNA杂交分子具有这种结构。
3、 Z-DNA
左手螺旋的DNA。
天然B-DNA的局部区域可以形成Z0-DNA。
4、 DNA三股螺旋
在多聚嘧啶和多聚嘌呤组成的DNA螺旋区段,序列中有较长的镜像重复时,可形成局部三股螺旋,称H-DNA。
绳子的两股以右旋方向缠绕,如果在一端使绳子向缠紧的方向旋转,再将绳子两端连接起来,会产生一个左旋的超螺旋,以解除外加的旋转造成的胁变,这样的超螺旋叫正超螺旋。
如果在绳子一端向松缠方向旋转,再将绳子两端连接起来,会产生一个右旋的超螺旋,以解除外加的旋转所造成的胁变,这样的超螺旋称负超螺旋。
对于右手螺旋的DNA分子,如果每圈初级螺旋的碱基对数小于10.4,则其二级结构处于紧缠状态,是正超螺旋。
三级:DNA双链进一步折叠卷曲形成的构象。
一、 DNA的一级结构
DNA的一级结构是4种脱氧核苷酸(dAMP、dGMP、dCMP、dTMP)通过3/、5/-磷酸二酯键连接起来的线形多聚体。3/、5/-磷酸二酯键是DNA、RNA的主链结构 。
P334 图 5-1
书写方法:5/ → 3/:
大肠杆菌染色体是由4.2×106bp组成的双链环状DNA分子,约3000个基因。
大肠杆菌DNA结合蛋白: 每个细胞
H 两个28KD的相同亚基 30000个二聚体
HU 两个各9KD的不同亚基 40000个二体聚体
如果每圈初级螺旋的碱基对数大于10.4,则其二级结构处于松缠状态,是负超螺旋。
2、 环形DNA的拓扑学特性
以260bp组成的线形B-DNA为例,螺旋周数260/10.4=25。
P340 图25-8 松驰环、解链环、负超螺旋
①连环数(L)
DNA双螺旋中,一条链以右手螺旋绕另一条链缠绕的次数,以L表示。
镜像重复:
TAT配对
C+GC酸对
DNA的三链结构常出现在DNA复制、重组、转录的起始或调节位点,第三股链的存在可能使一些调控蛋白或RNA聚合酶等难以与该区段结合,从而阻遏有关遗传信息的表达。
四、 环状DNA
生物体内有些DNA是以双链环状DNA的形式存在,包括:
某些病毒DNA
某些噬菌体DNA
图
用极微量的DNA酶I处理时,只能使少量小区的DNA成为松驰状态,而其它小区仍然保持超螺旋状态。
2、 真核生物染色体
主要由组蛋白和DNA组成。
组蛋白是富含碱性a.a(Lys、Arg)的碱性蛋白质,根据Lys/Arg比值不同,可分为H1、H2A、H2B、H3、H4五种,均为单链蛋白质,分子量11000-21000。
P334表5—4。
b. DNA的碱基组成具有种的特异性,即不同生物的DNA皆有自己独特的碱基组成。
c. DNA碱基组成没有组织和器官的特异性。
d. 年龄、营养状况、环境等因素不影响DNA的碱基组成。
② DNA的Na盐纤维和 DNA晶体的X光衍射分析。
相对湿度92%,DNA钠盐结晶,B—DNA。
(二) DNA二级结构的多型性
P339 表5-6 A-、B-、Z-DNA的比较
1、 B—DNA:典型的Watson-Crick双螺旋DNA
右手双股螺旋
每圈螺旋10.4个碱基对
每对
螺旋扭角36°
螺距:3.32nm
碱基倾角:1°
2、 A-DNA
在相对湿度75%以下所获得的DNA纤维。
c.螺旋平均直径2nm
每圈螺旋含10个核苷酸
碱基堆积距离:0.34nm
螺距:3.4nm
d.两条核苷酸链,依靠彼此碱基间形成的氢链结合在一起。碱基平面垂直于螺旋轴。A=T、G=C
P336 图5—4
碱基互补原则具有极重要的生物学意义,DNA的复制、转录、反转录等的分子基础都是碱基互补。
较短的回文序列,可作为一种特别信号,如限制性核酸内切酶的识别位点。
2、 富含A T的序列
高等生物中,A+T与C+G的含量差不多相等,但在它们的染色体的某一区域,A T含量可能很高。
在很多有重要调节功能(不是蛋白质编码区)的DNA区段都富含A T碱基对。特别是在复制起点和启动的Pribnow框的DNA区中,富含A T对。这对于复制和转录的起始十分重要,因为G C对有三个氢键,而A T对只有两个氢键,此处双键易解开。
二、 DNA的二级结构
1953年,Watson和Crick根据Chargaff 规律和DNA Na盐纤维的X光衍射数据提出了DNA的双螺旋结构模型。
1、 Watson-Crick双螺旋结构建立的根据
①Chargaff 规律 1950年
a. 所有DNA中,A=T,G=C 且A+G=C+T。
①拓扑异构酶酶I(拧紧)
能使双链负超螺旋DNA转变成松驰形环状DNA,每一次作用可使L值增加1,同时,使松驰环状DNA转变成正超螺旋。
②拓扑异构酶酶II(拧松)
能使松驰环状DNA转变成负超螺旋形DNA,每次催化使L减少2,同时能使正超螺旋转变成松驰DNA。
五、 染色体的结构
1、 大肠杆菌染色体
5’-pApCpTpG-3’,或5’…ACTG…3’(在DNA中,3/-OH一般是游离的)
在DNA分子中,不变的骨架成分磷酸二酯键被逐渐省略,真正代表DNA生物学意义的是碱基的排列顺序。
遗传信息贮存在DNA的碱基排列顺序中,生物界生物的多样性即寓于DNA分子4种核苷酸千变万化的精确的排列顺序中。
第六章 核 酸
核酸是遗传物质
1868年瑞士Miesher.从脓细胞的细胞核中分离出可溶于碱而不溶于稀酸的酸性物质。
间接证据:同一种生物的不同种类的不同生长期的细胞,DNA含量基本恒定。
直接证据:T2噬菌体DNA感染E.coli
用35S标记噬菌体蛋白质,感染E.coli,又用32P标记噬菌体核酸,感染E.coli
③核苷5’多磷酸3’多磷酸化合物
ppGpp pppGpp ppApp
④核苷酸衍生物
HSCoA、 NAD+、NADP+、FAD等辅助因子。
GDP-半乳糖、GDP-葡萄糖等是糖蛋白生物合成的活性糖基供体。
第二节 DNA的结构