异丙酚预处理对大鼠两种急性呼吸窘迫综 合征模型的保护运用比较

目录摘要 (3)前言 (6)材料与方法 (8)结果 (13)讨论 (18)结论 (22)参考文献 (23)英文摘要 (26)致谢 (30)略缩词表 (31)论文原创性声明 (32)附：综述 (33)异丙酚预处理对大鼠两种急性呼吸窘迫综合征模型的保护作用比较麻醉学（重症医学）研究生：程玉梅导师：沈锋摘要目的比较异丙酚(propofol)预处理对大鼠盐酸（HCl）吸入性和油酸（OA）静脉注射诱导性急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的保护作用。

方法分别通过气管内滴注HCl（0.1mol/L，2ml/kg）及尾静脉注射OA（0.1 ml/kg）复制大鼠ARDS模型。

将56只成年健康雄性SD大鼠随机分为7组：对照组、HCl组、HCl +异丙酚组[按异丙酚注射时间不同再分为2个亚组：HCl吸入前24小时腹腔注射异丙酚组（HT24b 组）、HCl吸入前12小时腹腔注射异丙酚组（HT12b组）]、OA组、OA+异丙酚组[按异丙酚注射时间不同再分为2个亚组：OA注入前24小时腹腔注射异丙酚组（OT24b 组）、OA注入前12小时腹腔注射异丙酚组（OT12b组）]。

以HCl气道滴注后及OA注射后6小时为实验终点；测定大鼠动脉血氧分压（PaO2）并计算氧合指数，测定支气管肺泡灌洗液( BALF )总蛋白（TP）含量、肺组织湿/干重比（W/D），对BALF行有核细胞计数及分类计数，测定肺组织匀浆髓过氧化物酶（MPO）活性；光镜下观察肺组织病理改变并行肺组织损伤程度评分。

结果HCl组和OA组大鼠造模成功后迅速出现呼吸加快加深、发绀、活动减少，随后症状进行性加重；HT24b 组与OT24b组分别较HCl组和OA组有所减轻；而HT12b组与OT12b组症状较HCl组和OA组无明显改善。

HCl组及OA组光镜下见不同程度的肺泡腔及肺间质水肿、出血，间隔增宽，中性粒细胞渗出，毛细血管充血等病理改变；HC1组主要表现为肺组织结构的毁损，肺泡腔内大量的水肿液、纤维蛋白及中性粒细胞渗出，肺内皮细胞坏死脱落，而肺间质水肿、间质内炎细胞浸润相对较轻；OA组则主要表现为肺泡间隔的水肿、出血，大量炎症细胞聚集在肺间质中，肺泡毛细血管内充血，而肺组织结构的毁损，肺泡腔内水肿、炎细胞浸润相对较轻。

HT24b 组及OT24b组肺组织病理改变较HC1组、OA组明显减轻，而HT12b组、OT12b组与HCl组、OA组比较病理改变严重程度相似。

与对照组比较，HCl组、OA 组大鼠氧合指数均显著降低[（248±37）mmHg vs. (388±23 )mmHg；(292±33) mmHg vs. (388±23) mmHg，均P=0.000]；肺组织损伤程度评分显著升高(10.90±1.38 vs. 1.50±0.14；10.00±1.17 vs. 1.50±0.14，均P=0.000)；BALF中TP含量显著升高[（0.94±0.14 ）mg/ml vs. (0.28±0.09) mg/ml，(0.77±0.08)mg/ml vs. (0.28±0.09 )mg/ml，均P=0.000]；W/D显著增加(5.03±0.60 vs. 3.92±0.28；4.83±0.36 vs.3.92±0.28，均P=0.000);BALF中有核细胞数[(2.393±0.828)×109/L vs.( 0.037±0.028)×109/L；(1.166±0.499)×109/L vs.( 0.037±0.028)×109/L，均P=0.000]、中性粒细胞百分比[(22.30±4.41) % vs.(5.40±0.51)%；（17.70±2.96）% vs.（5.40±0.51）%，均P=0.000]显著增加；肺组织匀浆MPO活性显著增加[(1.55±0.15 ) 单位/克湿片vs.(0.35±0.06)单位/克湿片；(1.48±0.26) 单位/克湿片vs.(0.35±0.06)单位/克湿片，均P=0.000)。

HCl组与OA组比较，BALF中TP含量显著升高（P=0.000），BALF 中有核细胞数（P=0.000)、中性粒细胞百分比（P=0.018)有显著性增高，而大鼠氧合指数(P=0.185)、肺组织损伤程度评分(P=0.077)、W/D（P=0.367）及肺组织匀浆MPO活性 (P=0.471)均无显著性差异。

HT24b组与HCl组比较，大鼠氧合指数显著升高[（292±33）mmHg vs.（ 248±37）mmHg，P=0.003]；肺组织损伤程度评分显著降低(8.20±0.65 vs. 10.90±1.38，P=0.000)；BALF中TP含量显著降低[（0.70±0.07）mg/ml vs. (0.94±0.14 )mg/ml，P=0.000）；W/D显著下降(4.29±0.32vs. 5.03±0.60，P=0.001);BALF中有核细胞数[(0.885±0.383)×109/L vs. (2.393±0.828)×109/L，P=0.000]、中性粒细胞百分比[(18.80±3.91) %vs. (22.30±4.41)%，P=0.000]均显著减少；肺组织匀浆MPO活性显著下降[(1.16±0.17)单位/克湿片vs.(1.55±0.15)单位/克湿片，P=0.000]。

OT24b 组与OA组比较，大鼠氧合指数显著升高[（342±30）mmHg vs. (229±29） mmHg，P=0.000]；肺组织损伤程度评分显著降低(7.10±0.37 vs. 10.00±1.17，P=0.000)；BALF中TP含量显著降低[（0.59±0.07）mg/ml vs.( 0.77±0.08) mg/ml，P=0.000]；W/D显著下降(4.13±0.25 vs.4.83±0.36，P=0.002);BALF 中有核细胞数[(0.291±0.139) ×109/L vs.( 1.166±0.499)×109/L，P=0.005)、中性粒细胞百分比[(9.50±1.78) %vs. (17.70±2.96)%，P=0.000)均显著减少；肺组织匀浆MPO活性显著下降[(0.93±0.20)单位/克湿片vs. (1.48±0.26)单位/克湿片，P=0.000]。

OT24b组与HT24b组比较，大鼠氧合指数显著升高（P=0.010）；肺组织损伤程度评分显著降低(P=0.000)；BALF中TP含量显著降低（P=0.021）；BALF中有核细胞数(P=0.049)、中性粒细胞百分比(P=0.021)均显著减少；肺组织匀浆MPO活性显著下降(P=0.024)； W/D差异无显著性(P=0.465)。

HT12b组与OT12b组分别与HCl组、OA组比较，差异无显著性。

结论气管内吸入HCl和尾静脉注射OA所致的ARDS模型在蛋白渗漏、肺病理形态学方面均存在一定差异；提前24小时注射异丙酚可明显改善两种ARDS大鼠模型的氧合、减轻肺水肿、抑制肺组织炎症反应，其对OA静脉注射ARDS的保护作用要优于HCl吸入性ARDS。

关键词盐酸油酸急性呼吸窘迫综合征大鼠异丙酚1. 前言急性呼吸窘迫综合征（Acute Respiratory Distress Syndrome，ARDS）是指由心源性以外的各种肺内外致病因素所导致的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭。

2012年发表在JAMA上的ARDS柏林诊断标准[1]去除了急性肺损伤的诊断，将ARDS 依据氧合指数和所使用的压力分为轻、中、重度（轻度：氧合指数在201~300 mmHg，且呼气末正压(PEEP)或持续气道正压(CPAP)≤5 cm H2O；中度：氧合指数在101~200 mmHg，且PEEP≥5 cm H2O；重度：PaO2/FIO2≤100 mmHg，且PEEP≥10 cmH2O）。

ARDS的主要病理特征为肺毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞损伤造成弥漫性肺间质及肺泡水肿。

由肺内炎症细胞(如嗜中性粒细胞、巨噬细胞)为主导的肺内炎症反应失控导致的肺泡-毛细血管膜损伤是形成肺毛细血管通透性增高肺水肿的病理基础。

ARDS发生后，由于肺泡-毛细血管膜损害导致肺毛细血管通透性增加，水分和蛋白聚集在肺间质和肺泡内，引起肺顺应性降低，肺内分流增加及通气／血流比例失调，低氧血症发生。

按作用部位及方式不同，可以人为将ARDS的病因分为肺内源性因素（如严重肺炎等）和肺外源性因素（如休克）两大类。

研究表明，在疾病早期阶段，由肺内源性因素和肺外源性因素引起的ARDS不仅在肺组织病理特征、肺部影像学改变等存在差异，且对呼吸机、药物治疗等效果方面也存在差异[2]。

HCl吸入性ARDS模型和油酸（oleic acid，OA）静脉注射ARDS模型是目前国内外研究ARDS常用的两种在体动物模型。

但两者引起ARDS的方式有所区别：HCl吸入后可直接导致肺泡上皮细胞和血管内皮细胞屏障受损，血管通透性增加，大量蛋白和液体渗入肺泡，肺泡腔内出血、肺泡水肿；而OA经静脉快速注入体内后，可以在短时间内导致肺微血管内皮细胞受损，微血管通透性增高，肺间质水肿、间质内大量中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil leukocytes,PMN）浸润。

但HCl吸入性ARDS和OA静脉注射诱导的ARDS大鼠模型其病理改变有何差别，至今研究较少。

除机械通气外，ARDS至今尚无肯定有效的药物预防和治疗，目前主要是根据其病理生理改变和临床表现进行针对性或支持性治疗。

目前国内外已试图针对其主要发病环节，进行药物治疗，以减轻肺和全身炎症。

异丙酚是广泛应用于临床麻醉和ICU镇静的静脉麻醉药，研究证实该药通过稳定细胞膜、调节细胞内钙稳态及抗氧化等作用途径而对多种细胞具有保护作用[3]。

国内外研究显示，在内毒素、失血性休克、油酸等引起ARDS动物模型中，异丙酚能减轻肺组织炎症，降低肺毛细血管通透性，并抑制炎症介质及细胞因子的产生[4,5]。