微生物实验报告：微生物形态观察

实验一微生物形态观察
一、实验目的
1．巩固显微镜的使用方法，重点练习油镜的使用；
2．认识细菌、放线菌和霉菌的基本形态特征和特殊结构；
3．练习手绘微生物图片。

二、实验原理
1．细菌基本形态
细菌是单细胞生物，一个细胞就是一个个体。

细菌的基本形态有3种：球状，杆状和螺旋状，分别称为球菌、杆菌、螺旋菌。

球菌根据细胞分裂后排列方式的不同分为单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌、链球菌、葡萄球菌等。

杆菌分为单杆菌、双杆菌、链杆菌等，是细菌中种类最多的。

螺旋菌分为弧菌和螺菌。

除此之外，还有一些特殊形态的细菌。

2．细菌特殊结构
细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。

荚膜是某些细菌向细胞壁表面分泌的一层厚度不定的胶状物质，具有抗干燥、抗吞噬和附着作用。

鞭毛是某些细菌表面着生的1至数根由细胞内伸出的细长、波曲的丝状体，具有运动功能，在菌体上的着生位置、数目因菌种而异。

菌毛（又称纤毛）是在细菌体表的比鞭毛更细、更短、直硬，且数量较多的丝状体，与细菌吸附或性结合有关。

芽孢又称内生孢子，是某些细菌生长到一定阶段，在菌体内部产生的圆形、椭圆形或圆柱形休眠体，具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等特性。

3．真菌的结构特征
菌丝是构成真菌营养体的基本单位，是一种管状细丝。

可伸长并产生许多分枝，许多分枝的菌丝相互交织在一起，就叫菌丝体。

根据菌丝中是否存在隔膜可分为无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。

为适应不同的环境条件和更有效地摄取营养满足生长发育地需要，许多真菌的菌丝可以分化成一些特殊的形态，这些特化的形态称为菌丝变态。

比如吸器、假根、子实体。

4．放线菌的结构特征
放线菌的形态比细菌复杂些，但仍属于单细胞生物。

链霉菌是典型的放线菌，其细胞呈丝状分枝，菌丝直径很小，在营养生长阶段，菌丝内无隔，故一般呈多核的细胞状态。

当其孢子落在固体基质表面并发芽后，就不断伸长、分支并以放射状向基质表面和内层扩展，形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝，同时在其上又不断向空间方向分化出颜色较深、直径较粗的分枝菌丝，这就是气生菌丝。

不久，大部分气生菌丝成熟，分化成孢子丝，并通过横隔分裂方式，产生成串的分生孢子。

5．微生物菌落
菌落是在固体培养基上（内）以母细胞为中心的一堆肉眼可见的、有一定形态和构造等特征的子细胞集团。

细菌的菌落有其自己的特征，一般呈现湿润、较光滑、较透明、较粘稠、易调取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位的颜色一致等。

不同形态、生理类型的细菌，在其菌落形态、构造等特征上也有许多明显的反映。

三、实验器材
普通光学显微镜（Nikon YS-100），镜油，镜头纸，擦镜液；
微生物装片15张，分为细菌、霉菌、放线菌、酵母菌等几类；
微生物单菌落划线平板6块，分别为大肠杆菌、酵母、泾阳链霉菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、产黄青霉。

四、实验步骤
1．调节显微镜，观察微生物装片，选择其中6张手绘微生物形态；
2．选择另外6张通过数字摄影系统拍照；
3．观察6块菌落平板特征；
4．整理仪器，清洁桌面。

注：本人所在35号台的显微镜不能进行数字摄影，故照片是在3号台显微镜下观察得到的。

手绘图在两台显微镜观察下各有3张。

五、实验结果
1．数字摄影照片（图1）
分生
接合
分生孢
孢子
（a）(b)
孢
分生
(c) (d)
(e)
2．手绘图照片（图2）(
接合
芽
图1. 微生物显微观察电子照片，摄于3号显微镜。

（a）青霉，10×40倍观察；（b）黑根霉，10×40倍观察；（c）曲霉，10×40倍观察；（d）毛霉，10×40倍观察；（e）接合孢子，10
×40倍观察；（f）酵母菌，10×100倍观察。

各菌种的主要特征标注在图上。

（（
3．菌落特征（表1）
菌落名称
含水
状态
外观状态
透
明度
颜色
边缘
情况
大肠杆菌略湿圆形、光滑、凸起
半
透明
双面乳
白
整齐
酵母菌湿润圆形、光滑、凸起
不
透明
正面：
乳白
整齐
（（
（（
图2. 微生物装片手绘图。

（a）螺菌，放大10×100倍；（b）巨大芽孢杆菌，放大10×100倍；（c）褐色固氮菌，放大10×100倍；（d）枯草杆菌，放大10×100倍；（e）放线菌，放大10×100倍；（f）苏云金杆菌，放大10×100倍。

六、讨论
本次实验最大的收获在于熟悉了油镜的使用和清洁。

过去虽让做过不少使用显微镜的生物实验，但是因为观察的都是比较大的动植物细胞，没有机会练习油镜的使用。

这次观察的都是个体非常小的微生物，真菌还可以在低倍镜下观察，但是细菌、放线菌必须使用油镜观察。

即使这样，八叠菌、金黄色葡萄球菌等形体极小的菌种仍然不能清楚地看到单个菌体，这也是这次没有对它们进行绘图或是摄影的原因。

注意，转换到100×物镜后，禁止使用粗准焦螺旋，细准焦螺旋也要慢慢调节，否则极易打碎装片。

螺菌装片是为了观察鞭毛的，但是因为没有对装片进行过特殊染色，鞭毛非常不容易看到，必须将孔径光阑调到很小，同时降低聚光灯亮度，才能提高视野的对比度。

能够隐约地衬出鞭毛，绘图时一定仔细观察。

如经媒介剂加粗再染色，将更容易观察。

本周的3个实验（遗传、细胞、微生物）内容非常相似，都是通过显微镜观察生物样本，之后进行手绘图片，而且所用的显微镜型号相同。

希望以后可以整合类似资源，对同一项技能没必要3门同时上的课都训练。

可否考虑对此部分上联合绪论课，讲解光学显微镜使用、手绘生物图方法，单独授课时则侧重讲需要重点观察的样本特征。

这样同学们对3门实验尤其是一周中上的最后一门会有更大的兴趣。

最后，感谢原先坐在3号台的同学，摄影结束后与我交换坐位，使我也能够对标本进行正常的数字摄影。

七、参考资料
陈金春、陈国强，微生物学实验指导，清华大学出版社，2005年。