苯酚-硫酸法
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
1.制作标准曲线:准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖)20mg于500ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0,各以蒸馏水补至1.0ml,然后加入5%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀,立即放入沸水浴加热15分钟,冷却室温放置20分钟以后于490nm测吸光度,以1.0ml水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得标准曲线。
2.样品含量测定:
吸取2 ml的样品液,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀,立即放入沸水浴加热15分钟,冷却室温放置20分钟以后于490nm测吸光度。
每次测定取双样对照。
以标准曲线计算多糖含量。